Hợp chất M12 được phân lập dưới dạng chất dầu không màu có độ quay cực [ ]D20
3,4o (c 0,44; CHCl3). Phổ khối phân giải cao HR-ESI-MS cho pic ion giả phân tử [M+Na]+ m/z 275,0895 cho phép xác định công thức phân tử của GM12 là C13H16O5
( m/z 1,8 ppm). Phổ IR cho các đỉnh hấp thụ đặc trưng của các nhóm chức ở max 3378 (OH), 1754 ( -lactone bão hòa), 1634 (phenyl). Vòng -lactone còn được khẳng định nhờ đỉnh hấp thụ ở max 207 nm (log 4,25; MeOH) trên phổ UV và tín hiệu của các nhóm carbonyl ở C 180,1 (C-2); nhóm oxymethin ở C 84,3 (C5) trên phổ 13C-NMR. Từ các dữ kiện phổ 1H-NMR, 13C-NMR xác nhận sự có mặt của 1 vòng phenyl ở H = 7,44 (H-10+H-14); 7,36 (H-11+H-13); 7,28 (H-12) và C = 129,1 (C-11+C-13); 128,5 (C-12); 128,4 (C-10+C-14) (Bảng 4.2.).
Bảng 4.2. Dữ kiện phổ 13C-, 1H-NMR (125/500 MHz, CD3OD) của GM12
Vị trí C ppm H ppm, mult, (J, Hz) 1 - - là m ộ t h ợ p ch ấ t styryl - la Hình 4.16. Cấu trú
ctone m ớ i có tên g ọ i là 8 - hydroxygoniofupy
c không gian qua nhiễu xạtia X của hợp c
rone A.
2 180,1 - 3 29,5 2,59 m 4 25,3 2,30 dddd (4,5; 7,0; 9,5; 12,5 Hz) 2,04 dddd (8,5; 9,5; 9,5; 12,5 Hz) 5 84,3 4,71 ddd (7,0; 7,0; 8,5 Hz) 6 73,9 3,93 dd (2,3; 6,8 Hz) 7 74,6 3,66 dd (2,0; 8,0 Hz) 8 75,2 4,74 d (8,0 Hz) 9 144,0 - 10-14 128,4 7,44 m 11-13 129,1 7,36 m 12 128,5 7,28 m
Trên phổ 13C-NMR của GM12 cho tín hiệu của 3 nhóm methin gắn với oxy ở C
75,2 (C-8); 74,6(C-7); 73,9 (C-6) cho thấy sự có mặt của 3 nhóm hydroxyl bậc hai trong phân tử. Trên phổ COSY, các chuỗi tương tác được quan sát thấy như được biểu thị bằng liên kết đậm trên Hình 4.17. Cấu trúc phẳng của GM12 được xác định dựa vào các tương tác trên phổ HMBC: Tương tác giữa C-10 và C-14 ( C 128,4) với H-8 ( H
4,74) cho thấy vòng phenyl liên kết với carbon C-8; tương tác giữa nhóm carbonyl C-2 ( C 180,1) với proton CH2-3 ( H 2,59) và CH2-4 ( H 2,30; 2,04) chứng tỏ C-2 liên kết với CH2-3; tương tác giữa proton H-5 ( H 4,71) với C-4 ( C 25,3); C-3 ( C 29,5), carbonyl C-2 cho thấy sự tồn tại vòng -lactone trong phân tử. Cấu trúc của GM12 gần giống với cấu trúc của cardiobutanolide (GM4, (36)), một hợp chất styryl-lactone được phân lập từ loài Goniothalamus cardiopetalus vào năm 2003 [42]. Sự khác biệt ở đây là hợp chất GM12 không có nhóm OH ở vị trí C-4.
Cấu hình tương đối của GM12 được xác định nhờ các hằng số tương tác 3JH-H và tương tác trên phổ NOESY. Hằng số tương tác giữa proton H-7 và H-8 (JH7-H8 = 8,0 Hz), giữa H-6 và H-7 (JH6-H7 = 2,0 Hz) tương tự với các hằng số tương tác tương ứng của cardiobutanolide (36) đã được công bố [42] cho thấy mối tương quan H7/H-8
erythro và H-6/H-7 theo. Hằng số tương tác giữa H-5 và H-6 (JH5-H6 = 7,0 Hz) cho thấy hai proton này ở vị trí trans. Trên phổ NOESY của GM12 cho thấy tương tác giữa H-
5 với H-6 và H-4a ( H 2,30); H-6 với H-4b ( H 2,04); H-7 với H-4b cho phép xác định cấu trúc như trên Hình 4.17.
Hình 4.17. Một số tương tác chính trên phổ COSY, HMBC và NOESY của GM12
Cấu hình tuyệt đối của GM12 được xác định 5S, 6S, 7R, 8R dựa vào việc so sánh với cấu hình của cardiobutanolide (36) [42]. Hợp chất GM12 có tên gọi là 4deoxycardiobutanolide đã được tổng hợp toàn phần vào năm 2010 [79] và đây là lần đầu tiên hợp chất này được phân lập từ thiên nhiên.