OH
O
12 H
Hợp chất GM11 được phân lập dưới dạng tinh thể không màu có đnc. 210,3- 211,0 oC và độ quay cực [ ]D20 38,5o (c 0,32; EtOH). Phổ khối phân giải cao HR- ESIMS cho pic ion [M+Na]+m/z = 273,0724 cho phép xác định công thức phân tử của
H O OH O H 1 3 5 7 8 9 15
Nhóm hydroxyl trong phân tử được đặc trưng bằng dải hấp thụ rộng trong vùng 3444 cm 1 trên phổ IR. Phổ UV cho đỉnh hấp thụ ở max 206 nm (log 4,01; MeOH) và phổ IR cho đỉnh hấp thụ ở max 1728 cm 1 cho thấy sự tồn tại của vòng -lactone bão hòa trong phân tử. Điều này được khẳng định nhờ tín hiệu nhóm carbonyl C-3 ( C
168,7) trên phổ 13C-NMR (Bảng 4.1.).
Bảng 4.1. Dữ kiện phổ 13C-, 1H-NMR (125/500 MHz, Acetone-d6) của GM11
Vị trí C ppm H ppm, mult. (J, Hz) Vị trí C ppm H ppm, mult. (J, Hz) 1 81,5 4,72 dd (2,0; 4,0 Hz) 9 72,5 4,66 dd (4,5; 9,0 Hz) 2 - - 10 143,9 -
GM11 là C 13 H 14 O 5 ( m/z ,2 ppm) 3 tương ứ ng v ớ i đ ộ b ấ t bão hòa là 7 ( Hình 4.9. ) .
Hình 4.9. Phổkhối phân giải cao HR-ESI-MS của GM11
3 168,7 - 11,15 128,0 7,46 d (7,5 Hz) 4 40,4 2,82 dd (2,5; 18,5 Hz) 2,74 dd (3,0; 18,5 Hz) 12,14 128,9 7,33 dd (7,5; 7,5 Hz) 5 77,9 4,17 ddd (2,5; 2,5; 4,0 Hz) 13 128,2 7,26 m 6 - - 8-OH - 4,91 d (4,0 Hz) 7 86,0 4,34 dd (2,5; 9,0 Hz) 9-OH - 4,70 d (4,5 Hz) 8 74,3 4,51 dd (2,0; 4,0 Hz)
Phân tích phổ 1H-NMR của GM11 cho thấy trong phân tử chứa 1 nhóm phenyl, 7 proton trong vùng H 4,17-4,92 và 2 proton ở trường cao (Hình 4.10.).
Phân tích phổ DEPT cùng với phổ HSQC cho thấy trong phân tử GM11 có 1 nhóm methylen sp3 cạnh nhóm carbonyl ở C 40,4 (C-4) và 5 nhóm methin liên kết với oxy ở C 86,0 (C-7); 81,5 (C-1); 77,9 (C-5); 74,3 (C-8); 72,5 (C-9) (Hình 4.11.).
Hình 4.10. Phổ 1H-NMR giãn rộng của GM11
C=O Ph
Hình 4.11. Phổ 13C-NMR và DEPT của GM11
Dựa vào các tín hiệu 1H-1H trên phổ COSY (Hình 4.12.) xác định được 3 hệ tương tác spin-spin gồm 1 vòng phenyl, H-4 H-5 và H-9 H-7 H-1 H-8 OH-8
Hình 4.13. Một số tương tác chính trên phổ COSY, HMBC và NOESY của GM11
Phân tích phổ HMBC (Hình 4.14.) cho thấy tương tác giữa proton H-9 ( H 4,66) với carbon C-10 ( C 143,9) và C-11, C-15 ( C 128,0) chứng tỏ vòng phenyl liên kết với carbon C-9 qua C-10; tương tác giữa OH-8 với C-1 ( C 81,5) và C-5 ( C 77,9) cho thấy C-5 liên kết với C-8. Tương tác giữa tương tác giữa H-4 ( H 2,82; 2,75) và C-5 ( C
( Hình 4.13. ).
77,9), C-8 ( C 74,3) cùng với tương tác giữa H-5 với nhóm carbonyl C-3 ( C 168,7) chứng tỏ C-4 liên kết với C-3. Trên phổ HMBC của GM11 còn cho thấy tương tác giữa H-1 ( H 4,73) và C-3 chứng tỏ sự tồn tại của vòng lactone trong phân tử. Bên cạnh đó, tương tác giữa H-5 với C-7 và độ chuyển dịch hóa học của C-5, C-7 ở trường thấp
C 86,0 (C-7); 77,9 (C-5) đặc trưng cho nhóm oxy-methin, cho thấy tồn tại cầu oxy giữa C-5 và C-7 tạo thành vòng furan. Vị trí của nhóm OH tại carbon C-9 được xác định nhờ tương tác giữa proton OH-9 với C9, C-7, C-10 được quan sát thấy trên phổ HMBC (Hình 4.13.).
Như vậy cấu trúc phẳng của GM11 đã được xác định. Cấu trúc của GM11 gần giống với cấu trúc của goniofupyrone A, một hợp chất styryl-lactone mới được phân lập từ cây Goniothalamus amuyon vào năm 2005 [35].
Sự khác biệt duy nhất giữa GM11 và goniofupyrone A là hợp chất GM11 có thêm nhóm OH ở vị trí C-8. Dựa vào hằng số tương tác giữa H-7 với H-9 (JH7-H9 =
9 ,0 Hz ) cho th ấ y hai proton này ở d ạ ng anti .
Hình 4.14. Phổ HMBC của GM11
Hình 4.15. Phổ NOESY giãn rộng của GM11
Cấu hình tương đối của carbon C-8 được xác định nhờ tương tác NOE (Hình 4.15.) giữa H-8 và H-4a ( H = 2,82) cho thấy OH-8 ở vị trí đối diện với nhóm carbonyl trong vòng -lactone (Hình 4.13.). Cấu trúc của GM11 được khẳng định nhờ phương pháp X-ray (Hình 4.16.). Trên cơ sở cấu trúc của GM11 đã được khẳng định, cấu hình tuyệt đối của GM11 được xác định là 1R, 5S, 7R, 8S, 9R. Đây