Trong enzyme học, người ta không định lượng enzyme một cách trực tiếp mà thường xác định gián tiếp thông qua xác định mức độ hoạt động (hoạt độ) của enzyme. Bởi vì, khi có mặt enzyme thì sự hoạt động của nó được biểu hiện ra ở chỗ nó làm thay đổi các tính chất vật lý, hoá lý cũng như tính chất hoá học của hỗn hợp phản ứng. Theo dõi những biến đổi đó có thể biết được chính xác mức độ hoạt động của enzyme thông qua xác định lượng cơ chất bị mất đi hay lượng sản phẩm được tạo thành trong phản ứng (Vương Bảo Thy và cộng sự, 2011).
Về nguyên tắc, có thể chia ra 3 nhóm phương pháp sau:
1) Đo lượng cơ chất bị mất đi hay lượng sản phẩm được tạo thành trong một thời gian nhất định ứng với một nồng độ enzyme xác định.
2) Đo thời gian cần thiết để thu được một lượng biến thiên nhất định của cơ chất hay sản phẩm ứng với một nồng độ enzyme nhất định.
3) Chọn nồng độ enzyme cần thiết như thế nào để trong một thời gian nhất định thu được sự biến thiên nhất định về cơ chất hay sản phẩm.
Bảng 2.1: Ba nhóm phương pháp xác định hoạt tính enzyme lipase
Nhóm Các thông số cố định Các thông số thay đổi 1 Thời gian
Nồng độ enzyme
Biến thiên của S hay P
2 Lượng cơ chất mất đi (hay lượng sản phẩm tạo thành)
Nồng độ enzyme
Thời gian
3 Thời gian
Lượng S mất đi (hay P tạo thành)
Nồng độ enzyme
Có thể tìm thấy trên các bài báo, tạp chí khoa học nhiều phương pháp để đo hoạt tính thuỷ phân của enzyme lipase. Những phương pháp này có thể được phân loại như sau:
Phương pháp chuẩn độ (Titrimetry)
Phương pháp quang phổ (Spectroscopy (photometry, fluorimetry)) Phương pháp sắc ký (Chromatography)
Phương pháp sức căng bề mặt (Interfacial tensionmetry) Phương pháp đục kế (Turbidimetry)
Phương pháp đo độ dẫn điện (Conductimetry)
Phương pháp hoá học miễn dịch (Immuno-chemistry) Phương pháp hiển vi (Microscopy)
(Arpigny và Jaeger, 1999)