... cài nhập genvào nhiễm sắc thể vi < /b> khuân < /b> B su b tilỉs 22 1.2.1 .Vector < /b> biêu < /b> E c o li ĩ 22 1.2.2 Vector < /b> biểuBsubtilis cài Iiliập gen < /b> đích vào nhiễm sắc thể vi < /b> kliuẩn B subtiỉis ... promoter PrrnO-RBS gen < /b> spoVG-ỉacZ vector < /b> pDG364 để tạo vector < /b> p U L 44 3.2 Cài nhập biêu < /b> gen < /b> lacZ vi < /b> khuân < /b> B su b tỉlis 48 3.2.1 Cài nliập gen < /b> vào nhiễm sắc thể vi < /b> khuẩnB subtiỉis PY79 ... nghiên cứu sử dụne B s u b tilis tế b o chủ để biểu geil Các nghiên cứu nàv dừng lại vi< /b> c tách dòng gen < /b> B s u b tilis E co li, biểu Ren vỏ b o tử, biểugen < /b> trona vi < /b> khuấnb ng cách sử dụng chất...
... virA, thụ thể liên kết màng, virA kích thích virG VirG b kích thích tương tác với yếu tố kích thích đoạn khởi đầu (promoter) điều khiển khung đọc (operon) virA, virB, virC, virD, virE virG kết ... Agrobacterium làm nguyên liệu chuyển gen < /b> vào nấm, vi< /b> c thiếtkế < /b> Ti plasmid vector < /b> biểu hiện,< /b> vector < /b> kí hiệu pCB_xylB_hph gen < /b> mã hóa xylanase (xylB) gen < /b> kháng hygromycin B (hph) Vector < /b> tái tổ hợp Ti plasmid ... thiếtkế < /b> vector < /b> trung gian mang cấu trúc biểu xylB dựa vector < /b> pAN7.1 – GluA, tạo thành vector < /b> tái tổ hợp kí hiệu pAN_xylB 3.1.1.1 Thiếtkế < /b> vector < /b> tái tổ hợp pAN_xylB mang xylB Muốn gen < /b> hoạt động biểu...
... thành cơng vi< /b> c tạo vector < /b> tách dòng pGEMnovS, vector < /b> biểu pETnovS biến nạp thành công vector < /b> tách dòng vector < /b> biểu vào vi < /b> khuẩn E.coli XL1 Blue, đồng thời giải trình tự gen < /b> novS gồm 861 bp mã hóa ... trường LB lỏng có chế độ lắc LB đặc tử ấm 37 0C, với chủng chuyển gen < /b> sống mơi trường LB có b sung thêm kháng sinh ( 1mg/ml) 2.1.4 Vector < /b> biểuvector < /b> tách dòng Vector < /b> pGEM -3Z dùng làm vector < /b> ... vector < /b> pGEM -3Z 2.1.4.2 Vector < /b> biểu pET -32 a(+) (hình 5) Vector < /b> pET-32 có kích thước 5899bp thiếtkế < /b> cho biểu protein vi < /b> khuẩn E.Coli Vị trí tách dòng dùng cho vi< /b> c sản xuất fusionproteins bao...
... chế gen,< /b> tăng rõ rệt tế b o phải chịu ức chế Legumain biểu tế b o b mặt tế b o tế b o khối u khối u liên kết màng tế b o Nó tìm thấy đặc biệt túi màng liên kết tập trung chân xâm lấn tế b o ... plasmid (pBT) chứa đoạn gen < /b> mã hóa legumain vector < /b> chứa biểu pET-32c(+), quy trình thiếtkế < /b> vector < /b> biểu mang gen < /b> mã hóa legumain tiến hành sau: • B ớc 1: Cắt tinh đoạn gen < /b> mã hóa legumain vector < /b> biểu ... biến nạp sản phẩm gắn kết chọn dòng 3.3 Kết chọn dòng vector < /b> tái tổ hợp pET-32c(+) mang gen < /b> legumain 3.3.1 Kết biến nạp sản phẩm gắn kết pET-32c(+) gen < /b> legumain Sản phẩm lai biến nạp vào tế b o...
... NK1 biểu chúng hai hệ vector < /b> pCDNA3.1 pEGFP-N1 cho kết tốt Đây tiền đề cho lựa chọn thiếtkế < /b> vector < /b> biểu pCDNA3 pEGFP-N1 đề tài pCDNA3 pEGFP-N1 vector < /b> biểu tế b o động vật với đặc điểm trình b y ... xuyên qua màng tế b o thần kinh Trong < /b> tương lai, chất hứa hẹn cho phép điều trị b nh liên quan tới chứng nghiện rượu [13], … 1.5 VECTOR < /b> BIỂUHIỆNGEN < /b> MÃ HÓA CHO THỤ THỂ NEUROKININ-1 Gen < /b> mã hóa cho ... đổi sau dịch mã cách gắn thêm carbonhydrate lipid hóa… nên vi< /b> c biểu hệ thống tế b o nhân sơ thường không cho kết mong muốn Theo nghiên cứu công b , NK1 biểuvector < /b> pCDNA [24], pMAM-neo [24;...
... HindIII 4 Kết biến nạp sản phẩm gắn kết pET-32c(+) gen < /b> legumain Đĩa Petri chứa khuẩn lạc sau biến nạp 5 Kết PCR từ khuẩn lạc chọn dòng vector < /b> pET-32c(+)/legumain 2000bp 1600bp 1500bp Giếng 1: ... 1 Vật liệu - Vector < /b> tái tổ hợp pBT mang gen < /b> mã hóa legumain phòng CNTBĐV - VCNSH cung cấp - trang thiếtb phòng CNTBĐV – VCNSH Các loại hóa chất - Vector < /b> biểu pET-32c(+) phòng CNTBĐV - VCNSH ... mã hóa legumain từ agarose 1000bp Gen < /b> mã hóa legumain(900bp) 750bp Đường chạy 1: Chỉ thị phân tử DNA (Fermentas) Đường chạy 2: gen < /b> legumain 3 Kết xử lý vector < /b> biểu pET-32c(+) với enzyme EcoRI...
... đƣợc bao b c DNA b n vào tế b o Một số ƣu điểm phƣơng pháp b n gen < /b> là: thao tác dễ dàng, b n lần đƣợc nhiều tế b o, nguyên liệu để b n gen < /b> đa dạng (hạt phấn, tế b o nuôi cấy, tế b o mơ biệt hóa ... vector < /b> pBI121 hai loại enzyme thu đƣợc hai b ng có kích thƣớc tƣơng ứng khoảng 11,2 kb (vector)< /b> khoảng 1,8 kb (gen < /b> Gus) Khi thiếtkế < /b> vector < /b> chuyển gen,< /b> gen < /b> mục tiêu đƣợc gắn thay cho vị trí gen < /b> ... nhận biết cặp enzyme NotI/NcoI BamHI/SacI nằm vị trí đầu gen < /b> OPHC2opt (phụ lục 3) - Vector < /b> chuyển gen < /b> pBI121 chứa trình tự nhận biết BamHI/SacI nằm đầu gen < /b> Gus Hai trình tự nhận biết không xuất gen...
... tài “Tách dòng thiếtkế < /b> vector < /b> biểugen < /b> mã hóa cho thụ thể neurokinin – người Vi< /b> t Nam” 1.5 VECTOR < /b> BIỂUHIỆNGEN < /b> MÃ HÓA CHO THỤ THỂ NEUROKININ-1 Gen < /b> mã hóa cho thụ thể liên kết với G protein dung ... n la ̣c mang vector < /b> tái tổ hơ ̣p pGFPN 1- NK1 47 DANH MỤC CÁC CHỮ VI< /b> T TẮT DNA Dedeoxyribonuleic acid pb base pair (cặp bazơ) kb kilobase = 1000 bp dNTP deoxyribonucleoside ... lên cột ly tâm b dịch + B sung 500 µl Wash Buffer, ly tâm b dịch + Thêm 200 µl Wash Buffer, ly tâm b dịch + Ly tâm tiếp loại b hòan tòan Wash Buffer + B sung 50 µl Elution Buffer, ly tâm...
... trình tự cơng b với trình tự promoter HSP 18.2 ngân hàng gen < /b> quốc tế công cụ BLAST, chúng tơi thu kết trình b y B ng B ng Kết so sánh trình tự nucleotide promoter phân lập với trình tự gen/< /b> promoter ... Gel Purification (Bioneer, Hàn Quốc) Sau đó, promoter terminator HSP 18.2 ghép nối vào vector < /b> nhân dòng pBT Vector < /b> nhân dòng pBT-pHSP (18.2) pBT-tHSP (18.2) biến nạp vào chủng vi < /b> khuẩn E coli chủng ... polyadenyl hóa 29 Trong < /b> b o này, chúng tơi trình b y kết nhân dòng promoter terminator HSP 18.2 từ Arabidopsis nhằm tạo nguồn nguyên liệu di truyền để thiếtkế < /b> vector < /b> tăng cường biểu protein tái...
... CHỮ CÁI VI< /b> T TẮT aa amino acid - axit amin BAP 6- benzyl amino purine Bp Base pair Bt Bacillus thuringiensis BVTV B o vệ thực vật cs Cộng DDT Dichloro-diphenyl-trichloroethane DNA Deoxyribonucleic ... GMO Genetically modified organism - Sinh vật biến đổi gen < /b> GMP Genetically modified plant - Thực vật biến đổi gen < /b> gus - Glucuronidase gene ( Gen < /b> mã hóa enzyme - Glucuronidase) IBA Indole - butyric ... MANG GEN < /b> OPHC2opt 40 3.1.1 Đổi mã gen < /b> OPHC2 tối ƣu biểu thực vật (OPHC2opt) 40 3.1.2 Thiếtkế < /b> mồi đặc hiệu cho gen < /b> OPHC2opt 43 3.1.3 Kết tổng hợp mồi gen < /b> OPHC2opt 43 3.2 THIẾTKẾ VECTOR...
... tự gen < /b> 2.2.4 Thiếtkế < /b> vector < /b> siêu biểugen < /b> ZmNF-YB2 ZmNAC1 Sau giải trình tự biết trình tự xác gen < /b> ZmNF-YB2 ZmNAC1 vector < /b> tách dòng pGEM-T Easy tiến hành b ớc sau: - Khuếch đại đoạn gen < /b> ZmNF-YB2 ... nói riêng (trong < /b> có ngơ) chuyển gen < /b> trực tiếp súng b n gen < /b> chuyển gen < /b> thông qua vi < /b> khuẩn A tumefaciens [6] 1.2.1.1 Chuyển gen < /b> vào ngô súng b n gen < /b> Phương pháp chuyển gen < /b> súng b n gen < /b> áp dụng ... kế < /b> vector < /b> mang gen < /b> tổng hợp insulin để chuyển vào lúa mỳ, thiếtkế < /b> vector < /b> chuyển gen < /b> cry1ac vào cải b p Từ năm 2002, nghiên cứu b ớc đầu biến nạp gen < /b> ngô thực Vi< /b> n Di truyền Nông nghiệp Đặc biệt,...
... nghiên cứu biểugen < /b> Bsubtilisbiểugen < /b> vỏ b o tử [14], biểugen < /b> tế b o sinh dưỡng, có sử dụng chất cảm ứng IPTG [7] chưa có nghiên cứu công b vi< /b> c biểugen < /b> tế b o sinh dưỡng Bsubtilis mà không ... Sơ lƣợc vi < /b> khuẩnBsubtilis 1.1 Lịch sử, đặc điểm phân loại theo hệ thống Bergey, đặc điểm hình thái phân bvi < /b> khuẩnBsubtilis Vào năm 1835, vi < /b> khuẩnBsubtilis (tên ban đầu Vibrio subtilis) ... 3.3 Vector < /b> biểuBsubtilisHiện < /b> có nhiều loại vector < /b> thương mại dành cho E coli vector < /b> dành cho biểugen < /b> Bsubtilis có cơng ty sản xuất (cơng ty Mobitec) Có hai lí làm giảm khả sử dụng B subilis:...
... chủng loài BsubtilisBsubtilis subsp inaquosorum Nhƣ vậy, có ba phân loài (subspecies) Bsubtilis subsp inaquosorum, Bsubtilis subsp spizizenii Bsubtilis subsp subtilis [69, 10, 56] Bsubtilis ... Sơ lƣợc vi < /b> khuẩnBsubtilis 1.1 Lịch sử, đặc điểm phân loại theo hệ thống Bergey, đặc điểm hình thái phân bvi < /b> khuẩnBsubtilis Vào năm 1835, vi < /b> khuẩnBsubtilis (tên ban đầu Vibrio subtilis) ... thể vi < /b> sinh vật này, gen < /b> ngoại lai cần phải có đầy đủ yếu tố cần thiết cho vi< /b> c biểugen < /b> Ở Vi< /b> t Nam, thời điểm có cơng trình nghiên cứu biểugen < /b> Bsubtilis nhƣ biểugen < /b> vỏ b o tử [14], biểu gen...
... EcoRI, BamHI, NcoI, MscI, BseRI, BspMI, NdeI, XbaI, cho phép gắn gen < /b> quan tâm vào vector < /b> biểu sản phẩm mong muốn Tất cho vị trí cắt vector,< /b> đảm b o vi< /b> c gắn gen < /b> đặc hiệu gen < /b> gắn không b mắt b ớc ... plasmid pBB1 bao gồm gen < /b> trao đổi chất acid ferulic từ Pseudomonas 25 fluorescens BF13 Plasmid tái tổ hợp pBB1 tạo vi< /b> c tạo dòng đoạn 5098 bp chứa gen < /b> ech fcs từ chủng P fluorescens BF13 đột biến gen < /b> ... fluorescens BF13 công b Genbank với mã số AJ536325 B ng 3.3: Trình tự mồi khuếch đại gen < /b> ech, fcs Chiều dài đoạn gen < /b> Tên Trình tự mồi (chiều 5’→3’) mồi Ban đầu Sau PCR 831 bp 860 bp 1770 bp 1798 bp aGAATTCAGGAGGgcatcgccATGAGCAACTACGA...
... Gắn gen < /b> xbxs vào vector < /b> pET 32a(+) + Cắt kiểm trapET32-xbx enzyme hạn chế XhoI + XbaI + Biến nạp pET32xbx vào E coli BL21 chọn lọc dòng biến nạp mang gen < /b> xbxs - Biểugen < /b> xbxs tế b o E coli BL21 ... ngiên cứu biểu xylanase vi < /b> khuẩn E coli BL21 Và để thực điều chúng tơi tiến hành cơng vi< /b> c sau: - Thiếtkế < /b> vector < /b> biểu pET32xbx + Khuếch đại gen < /b> xbxsbằng PCR + Cắt sản phẩm PCR, pET 32a(+) b ngNcoI ... vector < /b> biểu pET32a(+) mang gen < /b> xbx 23 3.1.1.Khuếch đại gen < /b> xbx kĩ thuật PCR 23 3.1.2 Cắt sản phẩm PCR gen < /b> xbxvà pET32a(+ )b ng NcoI+XhoI 24 3.1.3 Nối ghép gen < /b> xbx vào vector < /b> biểu pET...
... chuyển gen < /b> senp2 từ vector < /b> sang vector < /b> biểu n pET2 2b( +) m vector < /b> có nhiều ưu điểm m cho vi < /b> việc biểugen < /b> ngoại lai gen < /b> lacI mã hóa cho protein ức chế biểu hiệnn gen < /b> ngo ngoại lai, promoter T7 ... nh gen < /b> senp2 nốii gép thành công vào vector < /b> pET2 2b( +) Như Nh vậy, tiếnn hành bbước biểu n SENP2 chủng ch E coli BL21 Trần Thị Thanh Tuyền 33 Lớp 1102 K18 3.3 Biểu pET2 2b( +)-senp2 BL21 Trong < /b> biểu ... thiếtkế < /b> Để biểugen < /b> senp2 E coli, tiến hành nội dung nghiên cứu sau: - Kiểm tra kích thước gen < /b> senp2 pUC57 enzyme hạn chế - Thiếtkế < /b> vector < /b> biểu pET2 2b( +) mang gene senp2 - Biểu SENP2 E coli BL...
... từ thực vật, vi < /b> khuẩn virus Một số kết cấu gen < /b> biểu đƣợc kết nối với thành chuỗi vector,< /b> vài gen < /b> số gen < /b> kháng kháng sinh, giúp cho vi< /b> c chọn lọc tế b o tái tổ hợp Sau đó, kết cấu gen < /b> đƣợc chuyển ... acid EtOH Cồn (Ethanol) Kb Kilo base (1kb = 1000bp) kDa KiloDalton LB Luria Broth PCR Phản ứng chuỗi Polymerase phiên mã ngược Pcb Vector < /b> pCB301 – Kan pJET Vector < /b> pJET 1.2/blunt Rif Rifamycin RT- ... tumefaciens nhận biết b m vào thành tế b o chủ chuyển T - DNA vào tế b o thực vật Quá trình đƣợc trợ giúp đặc biệt gen < /b> Vir RB, LB [8] Cũng hợp chất này, với vai trò cảm ứng, giúp cho gen < /b> vùng Vir hoạt...