sáu khâu chính của quy trình xét nghiệm bằng kỹ thuật pcr

ứng dụng kỹ thuật pcr công nghệ sinh học

Ngày tải lên : 21/11/2014, 09:58

... (nested PCR)    Kỹ thuật sử dụng cặp mồi thay cặp mồi kỹ thuật PCR cổ điển, cặp mồi thứ hai nằm cặp mồi thứ Kỹ thuật gọi kỹ thuật PCR bước Kỹ thuật có nhiều đoạn sản phẩm DNA kỹ thuật PCR cổ ... loại mẫu có quy trình tách chiết thích hợp riêng Đảm bảo chất lượng số lượng ADN từ lượng mẫu nhỏ Sáu khâu quy trình xét nghiệm kỹ thuật PCR Nhân ADN đặc hiệu: Đây khâu quan trọng quy trình Các ... nhỏ lại, cho vào phong bì lớn với đơn xin xét nghiệm lệ phí xét nghiệm, gửi dịch vụ chuyển phát nhanh (EMS)  Sáu khâu quy trình xét nghiệm kỹ thuật PCR Lấy mẫu: ADN tách chiết từ mẫu khác nhau,...

62
876
0

PHÁT HIỆN CÁC ĐỘT BIẾN HEMOPHILIA A BẰNG KỸ THUẬT PCR - RFLP VỚI VENT ADN POLYMERASE potx

Ngày tải lên : 20/03/2014, 01:20

... tiến hành phản ứng PCR Đầu tiên, tiến hành phản ứng PCR với Taq ADN polymerase cặp mồi 18F 18R theo thông số tối ưu Kogan cộng Tiếp theo để sử dụng Vent ADN polymerase kỹ thuật PCR - RFLP phát đột ... Biolabs IV BÀN LUẬN PCR - RFLP với intron 18 gen yếu tố đông máu số VIII Việc khuyếch đại intron 18 kỹ thuật PCR với Taq ADN polymerase cặp mồi 18F 18R tiến hành theo điều kiện PCR Kogan cộng (30 ... Spring Harbor Laboratory Press, USA Hình thành qui trình phát đột biến intron 18 19 gen mã hoá cho yếu tố VIII, bệnh Hemophilia A kỹ thuật PCR - RFLP với Vent ADN polymerase 16/29 (55%) số bệnh...

5
615
4

ứng dụng kỹ thuật PCR và FISH nghiên cứu biến đổi ADN ở một số thể bệnh lơxêmi và hemophilia a

Ngày tải lên : 02/05/2014, 06:24

... mạnh dựa liệu lâm sàng cận lâm sàng sau: + Chức gan (xét nghiệm ASAT, ALAT, bilirubin máu) + Chức thận (xét nghiệm ure, creatinin máu) + Các xét nghiệm huyết học (số lợng hồng cầu, số lợng bạch cầu, ... cho sở kiểm nghiệm phơng pháp định lợng metformin từ huyết tơng ngời có độ ổn định độ xác cao; quy trình đánh giá sinh khả dụng tơng đơng sinh học metformin - Góp thêm kiến thức, kinh nghiệm thử ... Các dụng cụ thí nghiệm khác: Máy lọc, pipet tự động, pipet thuỷ tinh xác, dụng cụ thủy tinh thí nghiệm 10 3.2.2 Hoá chất thí nghiệm: - Metformin (Chất đối chiếu quốc gia, Viện kiểm nghiệm thuốc...

70
510
0

Báo cáo nghiên cứu khoa học " XÁC ĐỊNH TÝP EBV TRONG TỔ CHỨC SINH THIẾT VÒM CỦA BỆNH NHÂN UNG THƯ VÒM MŨI HỌNG BẰNG KỸ THUẬT PCR " potx

Ngày tải lên : 19/06/2014, 09:20

... Kantakamalakul W Thái Lan, Peh S C Malaysia [12] sử dụng kỹ thuật PCR lồng (nested - PCR) thay PCR đơn Độ nhạy PCR lồng cao sản phẩm PCR tiếp tục khuếch đại lại lần nữa, kết đạt mức cao 96,5% ... Tiến hành PCR cho DNA thu sau chiết tách PCR tiến hành theo nguyên lý KaryMullis (1986) với cặp mồi đặc hiệu cho gien EBNA - 2A EBNA - 2B, trình tự mồi: Kích Gien EBV thước sản Vị Trí Trình tự ... số tác giả nước khác tác giả khác sau PCR sử dụng thêm kỹ thuật đặc biệt để phân tích Ví dụ, tác giả Uraiwan Kositanont [14] 56 Choon - Kook - Sam [5] sau PCR, sản phẩm khuếch đại thay đọc trực...

15
713
3

BÁO CÁO KHOA HỌC: "PHÁT HIỆN CÁC ĐỘT BIẾN HAEMOPHILIA A BẰNG KỸ THUẬT PCR-RFLP SỬ DỤNG DEEP VENT ADN POLYMERASE" pot

Ngày tải lên : 26/07/2014, 15:20

... kỹ thuật PCR- RFLP phát đột biến intron 18 19 gen mã hoá cho yếu tố đông máu số VIII Kỹ thuật ứng dụng để phát phụ nữ mang gen bệnh chuẩn đoán sớm trước sinh bệnh Haemophilia, phục vụ chương trình ... phẩm PCR (ở giếng 5) sau cắt enzyme Hind III Mr: Thang ADN chuẩn 100bp KẾT LUẬN • Hình thành qui trình phát đột biến intron 18 19 gen mã hoá cho yếu tố VIII, bệnh Haemophilia A kỹ thuật PCR- RFLP ... cho yếu tố VIII lớn (khoảng 180 kb) bao gồm 26 exon (1) Kỹ thuật PCR dùng Taq ADN polymerase, sau phát điểm đột biến enzyme giới hạn (PCR- RFLP) nghiên cứu trước sử dụng có hiệu để phát đột biến...

16
403
0

Ứng dụng kỹ thuật PCR và FISH nghiên cứu biến đổi ADN ở một số thể bệnh lơ xê mi và hemophilia a

Ngày tải lên : 23/08/2014, 09:21

... tạo đợc đội ngũ cán kỹ thuật thực đợc qui trình kỹ thuật xét nghiệm PCR, FISH làm sở cho việc ứng dụng phơng pháp sinh học phân tử chẩn đoán bệnh - ứng dụng dụng kỹ thuật PCR - RFLPs xác định ... 41 - Quy trình kỹ thuật RT -PCR nested PCR + Nguyên lý : Mỗi phản ứng PCR gồm bớc chính: làm dãn mạch cDNA, gắn kết cặp mồi vào cDNA, tổng hợp đoạn cDNA Thời gian cho phản ứng PCR theo quy trình ... ứng RT -PCR sợi DNA làm khuôn mẫu cho phản ứng nested PCR tiếp theo, với cặp mồi thứ theo quy trình sau: 42 - Quy trình kỹ thuật Nested -pcr gen bcr-abl Hóa chất Thể tích (àl) Nồng độ cuối PCR Mastermix...

91
667
0

Nghiên cứu phương pháp chẩn đoán nấm bệnh Aspergillus Flavus sinh độc tố Aflatoxin bằng kỹ thuật PCR

Ngày tải lên : 31/01/2015, 13:55

... Aflatoxin nhiễm mẫu thí nghiệm Tuy nhiên, phương pháp lại có nhược điểm cần phòng thí nghiệm trang bị máy chuyên dụng đắt tiền Gần đây, phương pháp dựa vào kỹ thuật PCR kỹ thuật kháng thể đơn dòng ... apa-2 công bố trình tự nucleotide chức gen Trình tự nucleotide gen sở để sinh tổng hợp cặp mồi đặc hiệu cho phản ứng PCR sử dụng sợi khuôn ADN tổng số tách chiết từ sợi nấm mẫu xét nghiệm 2.38 ... Aílatoxin kỹ thuật PCR" với mục tiêu sau: - Thu thập phân lập chủng nấm A flavus số nông sản (lạc, ngô, đậu tương, gạo) - Nghiên cứu phương pháp chẩn đoán nấm bệnh A flavus sinh độc tố Aflatoxin kỹ thuật...

87
910
5

điều tra hiện trạng canh tác và định danh một số chủng nấm gây bệnh thán thư trên xoài (mangiferae indica l ) tại huyện châu thành a, tỉnh hậu giang bằng kỹ thuật pcr

Ngày tải lên : 20/06/2016, 19:50

... sinh học phân tử 15 1.5.2 Xác định nấm bệnh kỹ thuật PCR 16 1.5.3 Một số công trình định danh nấm Colletotrichum kỹ thuật PCR … ……………………………………………………… ………… 17 v CHƯƠNG PHƯƠNG TIỆN ... (Mangiferae indica L.) TẠI HUYỆN CHÂU THÀNH A, TỈNH HẬU GIANG BẰNG KỸ THUẬT PCR Do sinh viên Nguyễn Trọng Tuấn (MSSV: 3113513) thực đệ nạp Kính trình Hội Đồng chấm Luận Văn Tốt Nghiệp Cần Thơ, ngày……tháng……năm ... 3.2.3 Loại hình canh tác 31 3.2.4 Kỹ thuật canh tác 32 3.3 Phân lập định danh nấm Colletotrichum gây bệnh thán thư xoài kỹ thuật PCR 41 3.3.1 Kết phân lập chủng...

86
506
0

PHÁT HIỆN đột BIẾN GEN f VIII gây BỆNH HEMOPHILLIA a BẰNG kỹ THUẬT PCR

Ngày tải lên : 01/07/2016, 11:12

... Quy trình lấy máu đảm bảo vô trùng tuyệt đối 2.3.2 Quy trình tách chiết DNA từ máu ngoại vi 2.3.3 Xác định đột biến gen F8 2.3.3.1 Xác định đột biến đảo đoạn Itron 22 kỹ thuật Inversion PCR Kỹ ... tin cậy cao, dễ thực 2.3.3.2 Phát đột biến đảo đoạn Itron kỹ thuật multiplex PCR Kỹ thuật multiplex PCR: Thiết kế hai phản ứng multiplex PCR phát bệnh nhân bị đột biến: phản ứng có chứa cặp mồi ... exon kỹ thuật PCR 2.3.3.4 Phát đột biến điểm kỹ thuật giải trình tự gen 4 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1 Đặc điểm chung đối tượng nghiên cứu Biểu đồ 3.1: Tỷ lệ bệnh nhân chia theo thể bệnh Nhận xét: ...

21
450
0

Kỹ thuật PCR:

Ngày tải lên : 18/08/2012, 23:37

... nucleotid + Một số kỹ thuật PCR khác: Một số kỹ thuật phát triển sở kỹ thuật PCR có ý nghĩa quan trọng cho định danh định typ vi sinh vật nested PCR (PCR lồng), revert transtriptase PCR (sao chép ... Dùng kỹ thuật PCR cho ribotyping: Kỹ thuật PCR ribotyping ứng dụng cặp mồi đặc hiệu để nhân vùng gene ARN (thuộc ribosom hay ARN vận chuyển) Tuy nhiên, thực tế kỹ thuật yêu cầu kinh nghiệm, kỹ thuật ... ARN thời điểm định mẫu Kỹ thuật PCR chiều ứng dụng phương pháp giải trình tự ADN trực tiếp từ sản phẩm PCR. phẩm PCR + Sử dụng kỹ thuật PCR cho xác định typ vi sinh vật: Như trình bày trên, dùng...

25
1.8K
18

Kỹ thuật PCR

Ngày tải lên : 15/09/2012, 15:49

... nucleotid + Một số kỹ thuật PCR khác: Một số kỹ thuật phát triển sở kỹ thuật PCR có ý nghĩa quan trọng cho định danh định typ vi sinh vật nested PCR (PCR lồng), revert transtriptase PCR (sao chép ... Dùng kỹ thuật PCR cho ribotyping: Kỹ thuật PCR ribotyping ứng dụng cặp mồi đặc hiệu để nhân vùng gene ARN (thuộc ribosom hay ARN vận chuyển) Tuy nhiên, thực tế kỹ thuật yêu cầu kinh nghiệm, kỹ thuật ... ARN thời điểm định mẫu Kỹ thuật PCR chiều ứng dụng phương pháp giải trình tự ADN trực tiếp từ sản phẩm PCR. phẩm PCR + Sử dụng kỹ thuật PCR cho xác định typ vi sinh vật: Như trình bày trên, dùng...

25
1.6K
6

Ứng dụng kỹ thuật PCR - RFLP xác định các kiểu gen thụ thể prolactin trên giống heo Yorkshire

Ngày tải lên : 29/10/2012, 14:13

... thích hợp việc phân tích đa hình DNA kỹ thuật RFLP ngƣời ta đƣa kỹ thuật PCR – RFLP PCR – RFLP kỹ thuật dựa sở khuyếch đại có chọn lọc đoạn DNA kỹ thuật PCR trƣớc Sau tiến hành phân cắt đoạn ... 2.3.2.6 Các vấn đề thƣờng gặp PCR phƣơng pháp khắc phục .16 2.3.2.7 Ứng dụng PCR 18 2.4 Giới thiệu kỹ thuật RFLP kỹ thuật PCR – RFLP .18 2.4.1 Kỹ thuật RFLP ( restricton fragment ... pháp PCR – RFLP khảo sát đa hình gen PRLR 3.4.2.4.1 Xây dựng qui trình khuyếch đại PCR cắt enzyme giới hạn Xây dựng qui trình phản ứng PCR o Xác định nhiệt độ thời gian phản ứng PCR 25 Phản ứng PCR...

52
1.4K
3

Bản chất của kỹ thuật PCR

Ngày tải lên : 29/10/2012, 14:41

... base xác phù hợp với mẫu Có chương trình hỗ trợ việc thiết kế mồi (xem External links) Quy trình Quy trình PCR gồm 20 đến 30 chu kỳ Mỗi chu kỳ gồm bước (Hình 2) (1)Nhiệt độ tăng lên 94-96°C để ... phản ứng PCR Tuy nhiên, thành phần nên hiệu chỉnh 1) sản phẩm PCR lớn 5kb; 2) có khả hoạt tính enzyme bị giảm sút thiếu sót khâu bảo quản; 3) tiến hành hiệu chỉnh nhiều cách sản phẩm PCR thấp ... đầu trình tổng hợp sợi DNA Sự lựa chọn chiều dài đoạn mồi nhiệt độ biến tính (Tmmelting) phụ thuộc vào số … Nhiệt độ biến tính mồi – đừng nhầm lẫn với nhiệt độ biến tính DNA chu kỳ trình PCR...

6
1.6K
21

Chuyên đề: Sinh học phân tử - kỹ thuật PCR

Ngày tải lên : 29/10/2012, 15:17

... biệt 21 - Real – Time PCR đánh giá tích lũy sản phẩm định lượng qPCR (quantitative PCR – PCR định lượng) Ngoài số kỹ thuật PCR khác nữa… VIII RT – PCR Như biết, PCR kỹ thuật nhân bội ADN mạch ... sau giai đoạn nung nóng chu kỳ Quy trình PCR gốc Mullis hiệu cao nhiều thời gian, cần lượng lớn ADN polymerase, phải liên tục lưu ý suốt trình PCR Sau đó, quy trình gốc phát triển cách dùng ADNpolymerase ... dùng cho kỹ thuật PCR phải ghép đôi xác với trình tự đích Điều đặc biệt có ý nghĩa cố tạo đột biến biến đổi có chủ ý đoạn trình tự ADN nhân bội, muốn tìm trình tự gen tương đồng với trình tự...

25
1.8K
30

XÂY DỰNG QUI TRÌNH CHẨN ĐOÁN BẮP CÓ CHUYỂN CÁC GENE KHÁNG SÂU (CryIA [b]) VÀ GENE TĂNG CƯỜNG CHUYỂN HÓA ĐƯỜNG (Invertase) BẰNG KỸ THUẬT PCR

Ngày tải lên : 30/10/2012, 16:45

... band điện di Thử nghiệm, phân tích hoàn thiện quy trình nhiệt việc tìm gen Invertase Quá trình hoàn thiện quy trình nhiệt cho phản ứng PCR cặp primer Gic trình bày qua bảng Bảng Thử nghiệm chế độ ... tìm chế độ nhiệt thích hợp Thử nghiệm, phân tích hoàn thiện quy trình nhiệt cho phản ứng PCR để tìm gen thông dụng bắp nhập Thử nghiệm, phân tích hoàn thiện quy trình nhiệt việc tìm gen CryIA(b) ... thiện quy trình ly trích DNA mẫu bắp chuyển gen Tách chiết DNA bước quan trọng để có phép phân tích PCR thành công Theo quy trình tách chiết nêu, nhận thấy thu nhận DNA đảm bảo cho phản ứng PCR...

5
686
4

Kết quả ban đầu trong việc sử dụng kỹ thuật pcr nhằm đánh giá hiện trạng các sản phẩm bắp chuyển gene tại việt nam

Ngày tải lên : 30/10/2012, 16:45

... DNA Sau giữ lạnh -20oC để sử dụng cho phản ứng PCR Phương pháp khuyếch đại DNA (Kỹ thuật PCR) Sản phẩm DNA sau ly trích trộn chung với hỗn hợp gồm có PCR buffer, MgCl2, dNTP/s, Taq DNA polymerase ... lần phân tích Phương pháp tiến hành chẩn đoán bắp chuyển gen Tách chiết DNA DNA ly trích theo quy trình: - Bước 1: cân 0,5gr bột bắp lấy hạt - Bước 2: nghiền mẫu hạt với ml dòch trích DNA (trong ... (forward primer) primer ngược (reverse primer) Hỗn hợp dùng để thực chương trình khuyếch đại DNA máy điều nhiệt (máy PCR) Điện di DNA gel agarose - Cho 0,5gr agarose vào 50ml dung dòch TAE 0,5X...

5
488
1

Ứng dụng kỹ thuật PCR - RFLP xác định các kiểu gen thụ thể prolactin trên giống heo Yorkshire

Ngày tải lên : 31/10/2012, 09:07

... PLRV) Đà Lạt kỹ thuật ELISA, RT -PCR giải trình tự” 1.2 Mục đích - Phát loại virus (PVX, PVY, PLRV) khoai tây thành phố Đà Lạt kỹ thuật ELISA - Phát virus PLRV kỹ thuật RT -PCR - Giải trình tự đoạn ... hai giai đoạn Kỹ thuật RT -PCR cho phép nghiên cứu mRNA tồn với hàm lƣợng thấp, RNA virus, phát phƣơng pháp khác nhƣ Northern blot Một kỹ thuật phát triển - kỹ thuật in situ RT -PCR cho phép khuếch ... Các kỹ thuật RT -PCR, giải trình tự chƣa đƣợc áp dụng phổ biến công tác chẩn đoán virus PLRV 2.4.2 Nghiên cứu nƣớc virus PVX, PVY, PLRV - Nie Singh (2002) dùng kỹ thuật RT -PCR việc xác định trình...

49
989
3

Ứng dụng kỹ thuật PCR và lây nhiễm nhân tạo kiểm chứng gen kháng bệnh bạc lá ở các dòng đẳng gen

Ngày tải lên : 02/11/2012, 10:09

...  Các gen kháng bệnh bạc lá nhà khoa học định vị nhiễm sắc thể primer kèm Như cần dùng kỹ thuật PCR phát gen có mặt dòng đẳng gen  Mặt khác theo kết nghiên cứu PGS.TS Phan Hữu Tôn cộng sự, ... hậu nguy hiểm có kết luận không xác Chính vì vậy chúng em tiến hành đề tài “Ứng dụng kỹ thuật PCR lây nhiễm nhân tạo kiểm chứng gen kháng bệnh bạc dòng đẳng gen” Phan Thị Hương, Nguyễn ... phút Sau đó, sản phẩm PCR cắt enzyme DraI Trong 15μl phản ứng gồm có 10μl sản phẩm PCR, 0,3μl enzyme DraI 10unit/ μl, 1,5μl buffer B, 3,2μl nước Hỗn hợp ủ 37ºC tiếng + Sản phẩm PCR điện di gel agarose...

32
1K
2

Xác định giới tính cây đủ đủ bằng kỹ thuật PCR với các cặp Primer được thiết kế dựa vào vùng DNA

Ngày tải lên : 05/11/2012, 14:01

... di để kiểm tra kết 3.3.3 Thực phản ứng PCR Quy trình nhiệt phản ứng PCR Thử nghiệm quy trình nhiệt để tìm quy trình nhiệt thích hợp cho phản ứng PCR Quy trình nhiệt 1: Tách(denaturation) đoạn ... đủ theo quy trình ly trích 29 Hình 4.3 Sản phẩm PCR với cặp primer T1 theo quy trình nhiệt 30 Hình 4.4 Sản phẩm PCR với cặp primer T1 theo quy trình nhiệt 31 Hình 4.5 Sản phẩm PCR với ... 29 4.2 Kết PCR với cặp primer T1 30 4.2.1 Quy trình nhiệt 30 4.2.2 Quy trình nhiệt 31 4.2.3 Quy trình nhiệt 31 4.2.4 Quy trình nhiệt ...

48
585
4

xác định các kiểu gen thụ thể prolactin trên một số giống heo công nghiệp bằng kỹ thuật PCR -RFLP

Ngày tải lên : 06/11/2012, 09:49

... nhận biết trình tự cắt từ – nucleotide Có hai kiểu cắt enzyme cắt theo đầu dính cắt theo đầu bằng:  Kiểu cắt đầu bằng:  Kiểu cắt đầu dính: 16 2.6.2.9 Ứng dụng kỹ thuật PCR Kỹ thuật PCR có nhiều ... việc phân tích đa hình DNA kỹ thuật RFLP ngƣời ta đƣa kỹ thuật PCR – RFLP PCR – RFLP kỹ thuật dựa sở khuyếch đại có chọn lọc đoạn DNA kỹ thuật PCR trƣớc Sau tiến hành phân cắt đoạn DNA enzyme thích ... 13 2.6.2.7 Các vấn đề thƣờng gặp PCR phƣơng pháp khắc phục 14 2.6.2.8 Các enzyme cắt giới hạn .15 2.6.2.9 Ứng dung kỹ thuật PCR 15 2.7 Kỹ thuật PCR- RFLP 16 2.7.1 Nguyên...

59
1.3K
7