phương pháp chọn lọc và xây dựng thang alen

ứng dụng kỹ thuật pcr công nghệ sinh học

Ngày tải lên : 21/11/2014, 09:58

... có thang alen chuẩn để so sánh d Phương pháp chọn lọc xây dựng thang alen * Xây dựng thang alen: Trong trình đánh số, đồng thời chọn mẫu mang alen khác tập hợp lại để tạo thang alen Thang alen ... ADN phát phương pháp nhuộm bạc Bassam, 1991 d Phương pháp chọn lọc xây dựng thang số alen alen* Đánhđược củatheo quy ước riêng: Dựa vào alen quan sát mẫu khác điện di, chọn mẫu mang alen khác ... thang alen Thang alen tạo phương pháp trộn mẫu * Chuẩn thang alen: ký hiệu lại alen khảo sát theo quy ước quốc tế Alen locus D7S820 ký hiệu từ đến 14 vào số đoạn lặp alen II Kết Kết tối ưu nhiệt...

62
876
0

PHÁT HIỆN CÁC ĐỘT BIẾN HEMOPHILIA A BẰNG KỸ THUẬT PCR - RFLP VỚI VENT ADN POLYMERASE potx

Ngày tải lên : 20/03/2014, 01:20

... enzyme giới hạn Hind III 37oC 12 [4] - Điện di sản phẩm PCR gel polyacrylamide 6% nhuộm bạc theo phương pháp Sambrook cộng [6] III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU PCR - RFLP với intron 18 gen yếu tố đông máu số ... mẫu máu (29 mẫu bệnh nhân Hemophilia A 25 mẫu người bình thường khoẻ mạnh) tách chiết ADN theo phương pháp cải tiến Sambrook cộng [6] Kết đo OD bước sóng 260nm cho thấy tất mẫu ADN tách chiết đủ ... PCR (ở giếng 2) sau cắt enzyme Bcl I Giếng 6: Sản phẩm PCR (ở giếng 3) sau cắt enzyme Bcl I Mr: Thang ADN chuẩn 100bp hãng New England Biolabs PCR - RFLP với Intron 19 gen yếu tố đông máu số VIII...

5
615
4

ứng dụng kỹ thuật PCR và FISH nghiên cứu biến đổi ADN ở một số thể bệnh lơxêmi và hemophilia a

Ngày tải lên : 02/05/2014, 06:24

... 3.3 phơng pháp nghiên cứu 3.3.1 Xây dựng thẩm định phơng pháp định lợng metformin huyết tơng 3.3.1.1 Xây dựng phơng pháp Có nhiều phơng pháp định lợng metformin huyết tơng, chọn phơng pháp sác ... nghiên cứu bàn luận 4.1 xây dựng Thẩm định phơng pháp phân tích Metformin huyết tơng 4.1.1 Xây dựng phơng pháp phân tích metformin huyết tơng - Xử lý mẫu: chọn phơng pháp tủa protein huyết tơng ... Santé (Pháp) Phơng pháp nghiên cứu: - Tiến hành xây dựng phơng pháp định lợng metformin huyết tơng ngời sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC); - Thẩm định phơng pháp theo tiêu FDA thẩm định phơng pháp phân...

70
510
0

Báo cáo nghiên cứu khoa học " XÁC ĐỊNH TÝP EBV TRONG TỔ CHỨC SINH THIẾT VÒM CỦA BỆNH NHÂN UNG THƯ VÒM MŨI HỌNG BẰNG KỸ THUẬT PCR " potx

Ngày tải lên : 19/06/2014, 09:20

... họng bệnh nhân UTVMH thể không biệt hóa, thể hay gặp Việt Nam (trên 80%)[4] 50 II ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng - Nhóm nghiên cứu: 91 mẫu sinh thiết vòm họng khối paraffin bệnh ... thiết tươi khối paraffin bệnh nhân ung thư vùng đầu, cổ khác UTVMH (có xác chẩn mô bệnh học) Phương pháp nghiên cứu - Tách DNA: + Tổ chức sinh thiết tươi vòm họng bệnh nhân UTVMH thể không biệt ... độc (Tc) EBV, hoạt động xuất sau nhiễm EBV tiên phát Chính vậy, đề tài chọn mẫu bệnh phẩm tổ chức sinh thiết vòm họng không chọn mẫu máu hay huyết bệnh nhân UTVMH (mặc dù mẫu máu hay huyết dễ thu...

15
713
3

BÁO CÁO KHOA HỌC: "PHÁT HIỆN CÁC ĐỘT BIẾN HAEMOPHILIA A BẰNG KỸ THUẬT PCR-RFLP SỬ DỤNG DEEP VENT ADN POLYMERASE" pot

Ngày tải lên : 26/07/2014, 15:20

... III thang ADN chuẩn 100bp hãng New England Biolabs (Mỹ) Các hoá chất khác sử dụng cho nghiên cứu hãng Sigma, Merck, Promega… Phương pháp nghiên cứu • Tách chiết ADN từ máu cải tiến theo phương pháp ... trước sinh bệnh Haemophilia, phục vụ chương trình chăm sóc bảo vệ sức khoẻ cộng đồng VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP Vật liệu 19 mẫu máu bệnh nhân Haemophilia A Viện Huyết học Truyền máu Trung ương cung ... với cặp mồi đặc hiệu cho intron 18 19 yếu tố VIII, sử dụng enzyme Deep Vent tối ưu theo theo phương pháp nghiên cứu mô tả Nguyễn Hoài Giang đồng tác giả (6) • Cắt sản phẩm PCR enzyme giới hạn...

16
403
0

Ứng dụng kỹ thuật PCR và FISH nghiên cứu biến đổi ADN ở một số thể bệnh lơ xê mi và hemophilia a

Ngày tải lên : 23/08/2014, 09:21

... nên alen (-) alen mang gen bệnh Do trai nhận nhiễm sắc thể X từ mẹ nên alen (-) mẹ alen mang gen bệnh, alen (+) alen bình thờng - gái nhận alen từ bố alen từ mẹ alen (+) có nguồn gốc từ bố, alen ... ý nghĩa nhân văn cao Có nhiều phơng pháp phát ngời mang gen bệnh: dựa vào phân tích phả hệ, dựa vào kiểu hình (tỉ lệ fviii:c/vwf:ag), dựa vào kiểu gen phơng pháp phát ngời mang gen bệnh dựa phân ... (+)] nữ giới có alen nên có trờng hợp xảy ra: 38 + băng adn alen bị cắt [đồng hợp tử dơng (+/+)], + băng adn alen không bị cắt [đồng hợp tử âm (-/-)], + có băng adn alen bị cắt alen không bị cắt...

91
667
0

Nghiên cứu phương pháp chẩn đoán nấm bệnh Aspergillus Flavus sinh độc tố Aflatoxin bằng kỹ thuật PCR

Ngày tải lên : 31/01/2015, 13:55

... kết phương pháp Multiplex PCR phương pháp dựa vào 4.9 màu sắc chủng nấm môi trường CAM để phát chủng nấm A flavus sinh độc tố Aflatoxin 53 4.10 So sánh kết phương pháp Multiplex PCR phương pháp ... điểm phương pháp định lượng xác hàm lượng Aflatoxin nhiễm mẫu thí nghiệm Tuy nhiên, phương pháp lại có nhược điểm cần phòng thí nghiệm trang bị máy chuyên dụng đắt tiền Gần đây, phương pháp dựa vào ... để phát chủng nấm sinh độc tố Tuy nhiên, phương pháp thời gian [20, 45] 2.4.2 2.93 Phương pháp vật lý hóa học Hiện nay, phòng thí nghiệm sử dụng phương pháp sắc ký để phát nấm Aspergillus sinh...

87
910
5

điều tra hiện trạng canh tác và định danh một số chủng nấm gây bệnh thán thư trên xoài (mangiferae indica l ) tại huyện châu thành a, tỉnh hậu giang bằng kỹ thuật pcr

Ngày tải lên : 20/06/2016, 19:50

... ………… 17 v CHƯƠNG PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP 19 2.1 .Phương tiện 19 2.1.1.Thời gian địa điểm 19 2.1.2 .Phương tiện vật liệu 19 2.2 .Phương pháp ... biện pháp xử lý hoa Theo Nguyễn Bảo Vệ Lê Thanh Phong (2011), nhiều phương pháp xử lý cho xoài hoa áp dụng như: Xông khói: phương pháp áp dụng Philippines Hiệu việc xông khói phụ thuộc vào giống ... Haden 1.5 Phương pháp sinh học phân tử để định danh loài nấm Colletotrichum 1.5.1 Tầm quan trọng phương pháp phát định danh nấm sinh học phân tử Việc định danh loài nấm bệnh phương pháp thông...

86
506
0

PHÁT HIỆN đột BIẾN GEN f VIII gây BỆNH HEMOPHILLIA a BẰNG kỹ THUẬT PCR

Ngày tải lên : 01/07/2016, 11:12

... chất 2.3 Phương pháp kỹ thuật nghiên cứu Đối với bệnh nhân thể nặng, xác định tượng đảo đoạn phương pháp Inversion PCR Không có đột biến đảo đoạn Intron 22, xác định đảo đoạn Itron phương pháp Multiplex ... nhân chưa phối hợp phương pháp khác để chẩn đoán vị trí đột biến vùng itron, chưa xác định đột biến lặp đoạn DNA phương pháp MLPA… Tuy nhiên so với tác giả sử dụng phương pháp giải trình tự gen ... CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu .2 2.2 Trang thiết bị, dụng cụ nghiên cứu hóa chất 2.3 Phương pháp kỹ thuật nghiên cứu...

21
450
0

Kỹ thuật PCR:

Ngày tải lên : 18/08/2012, 23:37

... ADN vào plasmid Ngày người ta lựa chọn phương pháp Sanger để giải trình tự ADN cho nghiên cứu phân loại xác định typ vi sinh vật thay cho phương pháp hóa học Một số lợi phương pháp chỗ: Phương pháp ... thuật phương pháp khác Việc tạo mảnh ADN sai khác nucleotid trình bày theo phương pháp: phương pháp hóa học (Maxam & Gilbert, 1997) phương pháp enzym kết thúc phản ứng chuỗi (Sanger, 1997) Ngày phương ... giải cao Mới phương pháp giải trình tự dựa kỹ thuật PCR gọi chu kỳ giải trình tự trực tiếp ADN thay phương pháp cũ dùng enzym sequenase Về nguyên tắc phương pháp giống Ưu phương pháp là: lượng...

25
1.8K
18

Kỹ thuật PCR

Ngày tải lên : 15/09/2012, 15:49

... ADN vào plasmid Ngày người ta lựa chọn phương pháp Sanger để giải trình tự ADN cho nghiên cứu phân loại xác định typ vi sinh vật thay cho phương pháp hóa học Một số lợi phương pháp chỗ: Phương pháp ... thuật phương pháp khác Việc tạo mảnh ADN sai khác nucleotid trình bày theo phương pháp: phương pháp hóa học (Maxam & Gilbert, 1997) phương pháp enzym kết thúc phản ứng chuỗi (Sanger, 1997) Ngày phương ... giải cao Mới phương pháp giải trình tự dựa kỹ thuật PCR gọi chu kỳ giải trình tự trực tiếp ADN thay phương pháp cũ dùng enzym sequenase Về nguyên tắc phương pháp giống Ưu phương pháp là: lượng...

25
1.6K
6

Ứng dụng kỹ thuật PCR - RFLP xác định các kiểu gen thụ thể prolactin trên giống heo Yorkshire

Ngày tải lên : 29/10/2012, 14:13

... nằm khoảng 1,8 – 3.4.2.4 Ứng dụng phƣơng pháp PCR – RFLP khảo sát đa hình gen PRLR 3.4.2.4.1 Xây dựng qui trình khuyếch đại PCR cắt enzyme giới hạn Xây dựng qui trình phản ứng PCR o Xác định nhiệt ... nm*62,9 - OD280 nm*36 2.3.4.2 Định tính DNA phƣơng pháp điện di Phƣơng pháp điện di phƣơng pháp cho phép xác định kích thƣớc đoạn DNA DNA đƣợc cho vào gel agarose đặt điện trƣờng Do DNA tích điện ... gen xem marker gen Việc lập đồ gen việc chọn lọc marker hình thái nhƣ tốn nhiều thời gian, chí hàng chục năm trời Số lƣợng marker thu đƣợc theo kiểu chọn lọc có qui mô hình thái Do ngƣời ta sử...

52
1.4K
3

Bản chất của kỹ thuật PCR

Ngày tải lên : 29/10/2012, 14:41

... thoái hóa làm giảm đặc trưng phản ứng khuếch đại PCR Vấn đề giải phương pháp touchdown PCR Vấn đề thiết kế mồi xác đề cập cần phụ thuộc vào sản xuất sản lượng: - hàm lượng GC nên khoảng 40-60% - Tính ... việc đoạn mồi không gắn hoàn toàn vào DNA mẫu, hay gắn cách tùy tiện Thời gian: 1-2 phút (3) Cuối cùng, DNA polymerase gắn tiếp vào sợi trống Nó bắt đầu bám vào hoạt động dọc theo sợi DNA Bước ... thuộc vào hoạt tính ´→5´ exonuclease Tùy thuộc mục đích thí nghiệm mà cần lựa chọn loại DNA polymerase có hay hoạt tính Buffers _Hiệu suất, tính xác enzyme DNA polymerase phụ thuộc nhiều vào hệ...

6
1.6K
21

Chuyên đề: Sinh học phân tử - kỹ thuật PCR

Ngày tải lên : 29/10/2012, 15:17

... tâm, so với phương pháp tạo dòng kỹ thuật tái tổ hợp ADN phải tuần lâu - Đơn giản tốn : Nó thực ống nghiệm plastic nhỏ gồm thành phần tối thiểu sử dụng đồng thời Trong đó, phương pháp tạo dòng ... dụng PCR để phát đột biến điểm? Phương pháp PCR alen đặc hiệu khai thác đặc tính là, để tổng hợp ADN hiệu nhờ ADN polymerase mồi phải ghép đôi xác đầu 3’ PCR alen đặc hiệu phát đột biến gen β ... ngược hay gọi tắt RT – PCR phát minh sử dụng phương pháp nhân ARN phân tích sau chuyển thành ADN nhờ phiên mã ngược RT – PCR dùng để tách dòng, xây dựng thư viện cADN tổng hợp mẫu Kỹ thuật gồm...

25
1.8K
30

XÂY DỰNG QUI TRÌNH CHẨN ĐOÁN BẮP CÓ CHUYỂN CÁC GENE KHÁNG SÂU (CryIA [b]) VÀ GENE TĂNG CƯỜNG CHUYỂN HÓA ĐƯỜNG (Invertase) BẰNG KỸ THUẬT PCR

Ngày tải lên : 30/10/2012, 16:45

... với số mẫu lớn nhiều lô sản phẩm bắp nhập vào Việt Nam để có thêm sở đánh giá trạng sản phẩm bắp chuyển gen - Sử dụng phương pháp chẩn đoán gen xây dựng để xác đònh có mặt gen lạ nhiều đối tượng ... dưới, khô rửa lại ethanol 70% Sau rửa xong, cho 100µl TE 1X vào để làm hòa tan DNA Sau giữ lạnh -20oC để sử dụng cho phản ứng PCR Phương pháp khuyếch đại DNA (Kỹ thuật PCR) Sản phẩm DNA sau ly trích ... DNA gel agarose - Cho 0,5gr agarose vào 50ml dung dòch TAE 0,5X (nồng độ 2%) - Đun sôi hỗn hợp khoảng 1,5 phút lò Viba - Để nguội nhiệt độ phòng - Đổ gel vào bể điện di (đặt lược tạo giếng trước...

5
686
4

Kết quả ban đầu trong việc sử dụng kỹ thuật pcr nhằm đánh giá hiện trạng các sản phẩm bắp chuyển gene tại việt nam

Ngày tải lên : 30/10/2012, 16:45

... dưới, khô rửa lại ethanol 70% Sau rửa xong, cho 100µl TE 1X vào để làm hòa tan DNA Sau giữ lạnh -20oC để sử dụng cho phản ứng PCR Phương pháp khuyếch đại DNA (Kỹ thuật PCR) Sản phẩm DNA sau ly trích ... khoảng 0,3 – 0,4gr/hạt) - Mỗi mẫu đem ly trích để lấy DNA - Mỗi mẫu lặp lại hai lần phân tích Phương pháp tiến hành chẩn đoán bắp chuyển gen Tách chiết DNA DNA ly trích theo quy trình: - Bước 1: ... DNA gel agarose - Cho 0,5gr agarose vào 50ml dung dòch TAE 0,5X (nồng độ 2%) - Đun sôi hỗn hợp khoảng 1,5 phút lò Viba - Để nguội nhiệt độ phòng - Đổ gel vào bể điện di (đặt lược tạo giếng trước...

5
488
1

Ứng dụng kỹ thuật PCR - RFLP xác định các kiểu gen thụ thể prolactin trên giống heo Yorkshire

Ngày tải lên : 31/10/2012, 09:07

... 2.3 Các phƣơng pháp chẩn đoán bệnh 2.3.1 Phƣơng pháp chẩn đoán bên 2.3.2 Phƣơng pháp sinh học 2.3.3 Phƣơng pháp quang phổ 2.3.4 Phƣơng pháp so sánh độ đục ... nucleotide gen Hai phƣơng pháp xác định trình tự phƣơng pháp hóa học Maxam Gilbert (1977) phƣơng pháp enzyme học Sanger cộng (1977) - Nguyên tắc phƣơng pháp hóa học dựa vào phản ứng hóa học thủy ... cụ máy móc đại thực đƣợc Những phƣơng pháp chẩn đoán bệnh virus thƣờng dùng là: 2.3.1 Phƣơng pháp chẩn đoán bên * Dựa vào trạng thái dấu vết bệnh Phƣơng pháp đơn giản nhanh chóng nhƣng lúc xác,...

49
989
3

Ứng dụng kỹ thuật PCR và lây nhiễm nhân tạo kiểm chứng gen kháng bệnh bạc lá ở các dòng đẳng gen

Ngày tải lên : 02/11/2012, 10:09

... cộng sự, xác định phổ kháng nhiễm gen chủng vi khuẩn Miền Bắc Việt Nam, dựa vào phát có mặt gen dòng đẳng gen phương pháp lây nhiễm nhân tạo Phan Thị Hương, Nguyễn Thị Vân Anh, Bùi Văn Công, ... phần chủng bệnh bạc và gen nào kháng được các chủng đó giúp nhà chọn tạo giống có định hướng tại, tương lai chương trình chọn tạo giống lúa kháng bệnh Phan Thị Hương, Nguyễn Thị Vân Anh, ... HỘI NGHỊ SINH VIÊN NGHIÊN CỨU KHOA HỌC NĂM 2010 NỘI DUNG CHÍNH Đặt vấn đề Vật liệu phương pháp nghiên cứu Kết thảo luận Kết luận đề nghị Phan Thị Hương, Nguyễn Thị Vân Anh, Bùi Văn...

32
1K
2

Xác định giới tính cây đủ đủ bằng kỹ thuật PCR với các cặp Primer được thiết kế dựa vào vùng DNA

Ngày tải lên : 05/11/2012, 14:01

... loại giới tính (Magdalita, 2002) Ngƣời trồng dựa vào kinh nghiệm để lựa chọn lƣỡng tính: chọn hạt đen chìm nƣớc, chọn rễ có rễ chùm, bạnh vè, chọn có thùy lẻ nhƣng cho kết không chắn Qua thực ... phƣơng pháp PCR việc xác định giới tính đu đủ (Magdalita, 2002) Xuất phát từ vấn đề trên, tiến hành đề tài: “Xác định giới tính đu đủ (Carica papaya L.) phương pháp PCR với primer thiết kế dựa vào ... nhiễm sắc thể giới tính” nhằm giúp nhà chọn giống chọn lọc cá thể bố mẹ phục vụ cho việc lai tạo giống 1.2 Mục đích Nhận biết giới tính đu đủ giai đoạn phƣơng pháp PCR 1.3 Đối tƣợng nghiên cứu Vùng...

48
585
4

xác định các kiểu gen thụ thể prolactin trên một số giống heo công nghiệp bằng kỹ thuật PCR -RFLP

Ngày tải lên : 06/11/2012, 09:49

... đánh dấu vào đồng vị phóng xạ vào chủng E.coli riêng biệt, phân tích kết cho thấy chủng E.coli có S35 bên tế bào, chứng tỏ protein vỏ phage T2 không đƣợc đƣa vào tế bào, không tham gia vào sinh ... nhà sinh học chọn giống nhảy vào Việc ứng dụng kỹ thuật sinh học phân tử đại nhƣ: RAPD, AFLP, RFLP,… cho phép tạo giống tốt Điều tạo giống chất lƣợng Công nghệ sinh học bắt đầu vào giải vấn đề ... nâu đậm, nhƣng heo lai, màu đỏ thƣờng nhạt màu vàng, vàng nhạt xuất đốm đen Cũng có nhiều trƣờng hợp heo lai Duroc có phần thân sau lông có ánh vàng nhiều đốm đen tròn, bầu dục mông Heo Duroc...

59
1.3K
7