nhân dòng và biểu hiện adn polymerase

... thống từ việc nhân bản, nhân dòng biểu gen mã hóa protein VP28 tái tổ hợp E coli Bacillus subtilis Đề tài xá định trình tự số đặ trưng gen VP28 từ mẫu WSSV phân lập Việt Nam - Nghiên cứu biểu thành ... tiến hành đề tài “Nghiên cứu nhân dòng biểu bề mặt bào tử Bacillus subtilis gen mã hóa kháng nguyên VP28 virus gây bệnh đốm trắng tôm” để tạ bào tử Bacillus subtilis biểu kháng nguyên VP28 virus ... tr ng 3.1.2 Xác định trình tự nghiên cứu tính đa hình gen mã hóa VP28 Đ ạn gen nhân PCR mẫu nghiên ứu đượ nhân dòng vào ve t r p E T tạ dạng ve t r tái tổ hợp p E -VP28 au gen vp28 tr ng ve t r...

Ngày tải lên: 10/06/2015, 16:53

... ADN thu bảo quản 4oC thời gian vài ngày bảo quản lâu dài 20oC dùng cho nghiên cứu 2.2.3 Duy trì, bảo quản mẫu sinh phẩm trình phân lập nhân dòng Trong q trình phân lập nhân dòng, vector đưa vào ... đoạn ADN sợi đôi linker từ đoạn oligonucleotit Đoạn Klenow đoạn lớn ADN polymerase I, E.coli Nó có hoạt tính 5’-3’ ADN polymerase 3’-5’ exonuclease thiếu hoạt tính 5’-3’ exonuclease ADN polymerase ... rộng đa dạng hóa vùng nhân dòng đa điểm Các phiên vector dựa trình tự nguyên gốc plasmit phage có vùng nhân dòng đa điểm (multiple cloning site-MCS) hạn chế Các vị trí nhân dòng đa điểm nơi mà...

Ngày tải lên: 23/10/2015, 11:28

... 57 2.3.4 Nhân dòng, biểu VP28 E coli B subtilis 60 2.3.5 Phát hiện, định lƣợng tinh VP28 64 2.3.6 Thử nghiệm khả phòng WSSV bào tử B subtilis tái tổ hợp 68 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO ... ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TƢ̣ NHIÊN Phạm Kiên Cƣờng NHÂN DÕNG VÀ BIỂU HIỆN TRÊN BỀ MẶT BÀO TỬ Bacillus subtilis GEN MÃ HÓA KHÁNG NGUYÊN VP28 CỦA VIRUS GÂY BỆNH ... 72 3.1 NHÂN DÕNG, XÁC ĐỊNH TRÌNH TỰ VÀ MỘT SỐ ĐẶC TRƢNG CỦA GEN vp28 TỪ CÁC MẪU WSSV THU NHẬN Ở VIỆT NAM .72 3.1.1 Nhân bản đoa ̣n gen mã hóa VP28 bằ ng PCR 72 3.1.2 Nhân dòng...

Ngày tải lên: 17/11/2015, 07:37

... ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN Phạm Kiên Cường NHÂN DÕNG VÀ BIỂU HIỆN TRÊN BỀ MẶT BÀO TỬ Bacillus subtilis GEN MÃ HÓA KHÁNG NGUYÊN VP28 CỦA VIRUS GÂY BỆNH ... chiết, định lƣợng DNA Error! Bookmark not defined 2.3.4 Nhân dòng, biểu VP28 E coli B subtilisError! Bookmark not defined 2.3.5 Phát hiện, định lƣợng tinh VP28 Error! Bookmark not defined 2.3.6 ... KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Error! Bookmark not defined 3.1 NHÂN DÕNG, XÁC ĐỊNH TRÌNH TỰ VÀ MỘT SỐ ĐẶC TRƢNG CỦA GEN vp28 TỪ CÁC MẪU WSSV THU NHẬN Ở VIỆT NAMError! Bookmark not defined 3.1.1 Nhân bản...

Ngày tải lên: 09/09/2016, 10:01

Ngày tải lên: 26/02/2014, 10:20

... erythraea [67] 1.5 TẠO DÒNG VÀ BIỂU HIỆN GEN TRONG E coli Theo Baneyx (1999), E coli vật chủ sử dụng rộng rãi để biểu sản phẩm protein ngoại lai từ sinh vật khác [17] Hiện việc tạo dòng biểu gen E coli ... IgG1 tăng lên, có tác dụng chống lại có mặt TRX-GRA2 [52] 1.6 TẠO DÒNG VÀ BIỂU HIỆN GEN TRONG NẤM MEN Trong việc tạo dòng biểu gen vào đối tượng khác vật chủ yếu tố định đến thành công hiệu suất ... chống nhiễm khuẩn người, Zhinan cs (2006) thành cơng việc tạo dòng biểu gene vào E coli, sử dụng vector biểu pET32-smhBD4, phân tích biểu gen hBD4 thành protein hBD4 đạt 1,9 g/l protein đạt 2,68...

Ngày tải lên: 29/10/2012, 15:17

... erythraea [67] 1.5 TẠO DÒNG VÀ BIỂU HIỆN GEN TRONG E coli Theo Baneyx (1999), E coli vật chủ sử dụng rộng rãi để biểu sản phẩm protein ngoại lai từ sinh vật khác [17] Hiện việc tạo dòng biểu gen E coli ... IgG1 tăng lên, có tác dụng chống lại có mặt TRX-GRA2 [52] 1.6 TẠO DÒNG VÀ BIỂU HIỆN GEN TRONG NẤM MEN Trong việc tạo dòng biểu gen vào đối tượng khác vật chủ yếu tố định đến thành công hiệu suất ... chống nhiễm khuẩn người, Zhinan cs (2006) thành cơng việc tạo dòng biểu gene vào E coli, sử dụng vector biểu pET32-smhBD4, phân tích biểu gen hBD4 thành protein hBD4 đạt 1,9 g/l protein đạt 2,68...

Ngày tải lên: 24/04/2013, 15:41

... 2.2.1.1 Tách dòng (subclone) gen cecropin từ vector nhân dòng sang vector biểu Các gen cecH, cecN cecT chuyển trực tiếp từ vector nhân dòng sang vector biểu chuyển thơng qua vector nhân dòng trung ... pCR2.1-cecT: vector pCR2.1 mang gen cecropin B tổng hợp nhân tạo - Vector nhân dòng: pBluescript II KS(+) (kí hiệu pBS) hãng Stratagene - Vector biểu hiện: Vector pGEX-4T-1 hãng GE Healthcare, vector ... bước chính: (1) tiến hành tách dòng (subclone) chuyển gen cecropin B tổng hợp nhân tạo gen cecropin phân lập từ lồi trùng Việt Nam vào vector biểu (2) nghiên cứu để biểu loại cecropin hệ thống vi...

Ngày tải lên: 10/02/2014, 20:48

Ngày tải lên: 26/02/2014, 10:20

... http://www.lrc-tnu.edu.vn/ 27 1.3 VECTOR BIỂU HIỆN 1.3.1 Khái niệm Vector biểu gen vector tách dòng mang promoter mạnh, cho phép biểu đồng thời gen thị gen tách dòng tạo nên protein lai Một vector biểu gen gồm thành ... lƣới golgi - Nhân: nhân tiên mao trùng có chứa ADN, hình bầu dục hình trứng Nhân thƣờng nằm vị trí trung tâm gần vị trí trung tâm thể Ngồi nhân, phía cuối thân kinetoplast chứa AND (KADN) Từ kinetoplast ... phát ADN tiên mao trùng phản ứng PCR (Polymerase Chain Reaction) PCR phƣơng pháp đại nhất, đƣợc đƣa vào ứng dụng để chẩn đoán bệnh tiên mao trùng năm gần đầy Nguyên lý: dựa vào phản ứng chuỗi Polymerase...

Ngày tải lên: 01/07/2014, 23:45

... Hơn nữa, theo đánh giá nhà kinh tế thị trường HCV tăng từ 2.2 USD năm 2005 lên 4.4 USD vào năm 2010 8.8 USD vào năm 2015 Từ thấy nhu cầu Interferon, vốn xem loại thuốc sử dụng rộng rãi điều trị ... so với giá nhập dựa quyền loại thuốc hết hạn hết hạn, Trung tâm bước đầu nghiên cứu việc tạo dòng biểu Interferon alpha 2b người hệ thống nấm men Pichia pastoris ... ứng dụng bật IFN dùng IFN α 2b điều trị viêm gan siêu vi C viêm gan siêu vi B Hiện nay, 3% dân số giới bị nhiễm virus gây viêm gan siêu vi C tỷ người bị nhiễm virus gây viêm...

Ngày tải lên: 05/07/2014, 00:21

... dựa vào khuôn ADN với cặp mồi VP19-2f/VP19-2r, kết cho thấy có mẫu tơm bị nhiễm WSSV cho sản phẩm khuếch đại gen VP19 Chọn mẫu ADN có kết dương tính làm khn để thu nhận đoạn gen VP19 Pfu ADN polymerase ... HindIII Đoạn ADN sau tinh chế qua gel agarose để dùng cho phản ứng nối nhằm tạo plasmid pZ-VP19 Tạo dòng gen VP19 vào vector biểu pEZZ 18 Sản phẩm nối gen VP19 plasmid pEZZ 18 biến nạp vào E coli ... vp19 WSSV gây bệnh tơm sú Việt Nam có độ đồng cao mức ADN mức protein với gen vp19 khác công bố Gen vp19 tái tạo dòng vào vector biểu pEZZ 18 để biểu VP19 tế bào chủ E coli HB101 dạng protein dung...

Ngày tải lên: 26/07/2014, 14:21

... 2.3.4 Phương pháp tách dòng xác định trình tự gen Phương pháp tách dòng gen Đoạn gen pelC sau nhân lên PCR tách dòng vào vector pJET1.2/blunt hãng Fermentas Nguyên lý tách dòng vector pJET 1.2/blunt ... thu phần có đầy đủ yếu tố để biểu enzyme, nhiên khơng phải dòng tế bào có khả biểu phản ứng lai số vector tự đóng vòng nên pelC khơng gắn vào Để chọn dòng có khả biểu PelC, chúng tơi cấy chuyển ... TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM ĐỖ THỊ THU HẰNG TÁCH DÒNG VÀ BIỂU HIỆN GEN PECTINASE TỪ VI KHUẨN CHỊU LẠNH PSEUDOALTEROMONAS HALOPLANKTIS ANT/505 TRONG E COLI VÀ NGHIÊN CỨU TÍNH CHẤT CỦA CHÚNG Chuyên ngành:...

Ngày tải lên: 22/10/2014, 10:28

Ngày tải lên: 31/10/2014, 23:49

... tách dòng biểu chitinase có nguồn gốc từ nấm mốc nhằm ứng dụng phòng trừ vi sinh vật gây hại nông nghiệp 1.3 BIỂU HIỆN CHITINASE TRONG PICHIA PASTORIS 1.3.1 Đặc điểm hệ biểu P pastoris Hiện có ... Việt Nam 17 1.3 BIỂU HIỆN CHITINASE TRONG PICHIA PASTORIS 18 1.3.1 Đặc điểm hệ biểu P pastoris 18 1.3.2 Vector biểu pPICZA 20 CHƢƠNG II: VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN ... học, nhiên q trình chọn lọc, nhân dòng nuôi cấy tế bào phức tạp nhiều so với cách sử dụng vi sinh vật Hệ biểu nấm men giải pháp hữu hiệu khắc phục giới hạn Nấm men hệ biểu đƣợc sử dụng rộng rãi...

Ngày tải lên: 07/11/2014, 18:59

... pháp: - Gen LipA đưa vào EcoRV pBR322 tạo plasmid pBRLipA, tạo dòng E.Coli 5K Gen kháng Ampicillin, nhạy cảm tetracycline phân lập, lựa chọn - Gen LipA tách từ pBRLipA chèn vào Ye [pACT1-T] tạo ... YE[pACT1-LipA-T], sau đó biến nạp vào E coli 5K S cerevisiae - Các gen LipA chèn vào pRB473 [pSPO2-T]-SmaI, tạo plasmid tái tổ hợp pRB473 [pSPO2-Lipa-T] biến nạp vào chủng B Subtilis khác Kết ... hóa mồi gây khó khăn cho việc thực PCR - Đối với gen Oli-lipase, không dễ dàng tạo dòng vào vector tạo dòng PCR có tính độc với tế bào chủ E.coli Bài báo Cặp mồi sử dụng Bài báo - Cặp mồi...

Ngày tải lên: 11/11/2014, 08:52

... 3.3.TẠO DÒNG GEN MÃ HÓA ENZYME TREHALOSE SYNTHASE VÀO VECTOR pET- 22b 43 3.3.1 Chèn gen TreS vào pJet1.2 blunt 43 3.3.2 Chèn gen TreS vào pET-22b 44 3.4.BIỂU HIỆN TRÊN ... nghiên cứu, biến đổi chuyển vào thể sinh vật khác Kỹ thuật tạo dòng bao gồm bước bản: chọn xử lý vector DNA cần tạo dòng; tạo vector tái tổ hợp, chuyển vector tái tổ hợp vào tế bào chủ cuối chọn ... chèn Do đó, sau đưa DNA vào tế bào tiến hành nuôi cấy phân lập dòng thu để phát dòng mang DNA tái tổ hợp Nhìn chung có số phương pháp sau: Sử dụng kỹ thuật bổ sung alpha: dựa vào diện β-galactosidase...

Ngày tải lên: 20/11/2014, 17:41

... VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT **************** VŨ VĂN LỢI TÁCH DÒNG VÀ BIỂU HIỆN LIGNIN PEROXIDASE ISOZYME H8 CỦA PHANEROCHAETE ... biểu lignin peroxidase giới Việt Nam Isozyme lignin peroxidase mã hóa tổ hợp gen biểu sản phẩm trao đổi chất bậc hai q trình ni cấy Ngồi ra, vài hệ biểu đồng hình (homologous expression) hệ biểu ... chủ yếu tập trung vào hướng tuyển chọn, tối ưu môi trường nuôi cấy chủng sinh LiP đặc tính enzyme 1.6 Vector biểu pPIC9 hệ biểu nấm men P pastoris 1.6.1 Vector biểu pPIC9 Vector biểu pPIC9 thiết...

Ngày tải lên: 21/11/2014, 21:53

... Tách dòng (subclone) gen cecropin từ vector nhân dòng sang vector biểu Ngơ Thị Hà 41 K18 Sinh học Luận văn thạc sĩ khoa học 2009-2011 Các gen cecH, cecN cecT chuyển trực tiếp từ vector nhân dòng ... CHƢƠNG - KẾT QUẢ 3.1 Tách dòng (subclone) chuyển gen cecropin vào vector biểu 3.1.1 Chuyển gen cecH cecN sang vector pBS Để có vị trí tương ứng vector tách dòng vector biểu hiện, cecH cecN phải chuyển ... vector biểu hiện) Rất nhiều nghiên cứu AMPs nói chung cecropin nói riêng cho thấy khả biểu protein tái tổ hợp E coli BL21 (DE3) cao [36, 53, 65] 1.3.2 Lựa chọn hệ thống vector biểu Để biểu lượng...

Ngày tải lên: 31/03/2015, 16:15

... thấy dòng E coli BL21(DE3)/pET-hob kiểm tra có biểu protein tái tổ hợp tốt Khi phân tích mức độ biểu protein mẫu phần mềm Quantity One (Hình 5B) cho thấy dòng BL21(DE3)/pET-hob giếng có tỉ lệ biểu ... Quá trình phim thực kit ECL (Amersham Bioscience, Anh) Cảm ứng biểu phân tích SDSPAGE Tạo dòng vector mang biểu gene hob E coli Các dòng BL21(DE3)/pET-hob cấy hoạt hóa mơi trường LB có chứa kháng ... 6) Chúng tơi tiến hành chọn dòng E coli BL21(DE3)/pET-hob có mức độ biểu leptin tái tổ hợp mức cao để tiến hành phân tích biểu protein phương pháp SDSPAGE xác nhận biểu Western blot (WB) Kết phân...

Ngày tải lên: 10/09/2015, 13:10