... stx1, stx2, eae, ehxA,
và gen uid của vi khuẩn E. coli được phân lập từ 27 mẫu phân tiêu chảy của bò,
heo, bê và 9 mẫu bề mặt thịt bò bằng kỹthuậtmultiplex – PCR. Quan sát và ghi
nhận trên ... thuậtPCR 14
2.4.1. Khái niệm 14
2.4.2. Nguyên tắc 14
2.4.3. Các thành phần cần thiết của phản ứng PCR 15
2.4.4. Phân tích kết quả PCR 16
2.4.5 Multiplex – PCR 16
2.4.6. Ứng dụng 16
3. NỘI DUNG ...
lực của E. coli.
(4) Chưa phát hiện được gen uid và eae trong 27 mẫu phân tiêu chảy của
bò, bê và heo cai sữa; và 9 mẫu bề mặt thịt.
SUMMARY
iv
2.3. Serotype O157:H7 12
2.4. KỹthuậtPCR 14
2.4.1....
... lập.
Multiplex – PCR là một cải tiến củakỹthuậtPCR mà trong đó có thể nhân lên
đồng thời nhiều đoạn DNA mong muốn bằng cách sử dụng nhiều cặp primer trong một
phản ứng. Multiplex – PCR đầu ... lt-I của E. coli phân lập
được bằng multiplex - PCR
- Việc phát hiện các gen độc lực của E. coli được thực hiện bằng 2 phản ứng
multiplex – PCR với máy luân nhiệt (thermal cycler):
Multiplex ... trường SMAC của mẫu số 1(1TS),
multiplex – PCR phát hiện 9/10 (90%) khuẩn lạc mang gen stx2.
(4) 8 khuẩn lạc riêng lẻ màu trắng trên môi trường SMAC của mẫu số 2 (2TS),
multiplex – PCR phát hiện...
... phát hiện các gen độc lực của E. coli trên các
môi trường phân lập MAC, SMAC, CT - SMAC.
Đề nghị
(1) Có thể ứng dụng kỹthuậtmultiplex – PCR để phát hiện gen độc lực của những
dòng E. coli ... uid của E. coli, đặc biệt là nhóm
STEC.
1.2.2. Yêu cầu
- Phân lập được E. coli từ phân, thịt trên một số loại môi trường chọn lọc (MAC,
SMAC, CT - SMAC).
- Ứng dụng kỹthuậtmultiplex – PCR ... cấy, phân lập, …). Vì vậy, đề tài tiến hành sử dụng kỹthuậtmultiplex – PCR để
phát hiện đồng thời các gen độc: stx1, stx2, eae, ehxA, và uid của E. coli phân lập được
1
Shiga-like toxins in...
... 11
2.2.1. Nguyên tắc 11
2.2.2. Các giai đoạn của phản ứng PCR 12
2.2.3. Các thành phần của phản ứng PCR 14
2.2.4. Phân tích kết quả PCR 15
2.2.5. Những ứng dụng củaPCR 15
2.2.5.1. PCR được sử ... eae, hly, lt-I, sta,
stb, vt2e của vi khuẩn E. coli được phân lập từ 27 mẫu phân tiêu chảy của bò, heo, bê và
9 mẫu bề mặt thịt bò bằng kỹthuậtmultiplex – PCR. Ghi nhận được khuẩn lạc hồng ... ứng PCR 13
Hình 2.2. Chu kỳ nhiệt độ của phản ứng PCR 14
Hình 3.1. Kết quả điện di sản phẩm multiplex - PCR1 26
Hình 3.2. Kết quả điện di sản phẩm multiplex - PCR2 26
SƠ ĐỒ
Sơ đồ 3.1. Phân lập,...
... bộ kit ly trích của Công ty Cổ phần
Công nghệ Việt Á, TP HCM.
2.2.3 Xác định tần số xuất hiện V. cholerae trên mẫu tôm và nhuyễn thể bằng kỹ
thuật multiplexPCR
Kỹ thuật m -PCR được thực hiện ... VIBRIO CHOLERAE TRÊN TÔM VÀ NHUYỄN THỂ,
XÁC ĐỊNH SEROGROUP O1, O139 VÀ BIOTYPE CỦA V. CHOLERAE
BẰNG KỸTHUẬT Multiplex- PCR
Nguyễn Thị Xuân Trang và Nguyễn Ngọc Tuân
Khoa Chăn nuôi Thú y, Đại học ...
(Rivera và cs, 2001). Trình tự của các đoạn mồi và kích cỡ sản phẩm PCR được trình
bày ở Bảng 1.
Bảng 1. Trình tự nucleotid của các đoạn mồi trong các phản ứng m -PCR
Xác định
Mồi
Trình tự...
...
quả của Taq ở nồng độ 1,5 UI do ba hãng Promega, Bio-rad, và ABgene sản xuất. Sự
khác nhau chủ yếu của ba loại Taq này là ở thành phần PCR buffer.
Bảng 3.5 Thành phần chủ yếu của ba loại PCR ... dụng của nó vì
ưu điểm lớn nhất của nó là có thể chuyển thành dạng kit để kiểm tra nhanh trước thời
điểm chuyển phôi.
13
Sau hơn một thập niên phát triển, kỹthuật xác định giới tính bằng PCR ... hiện khô của DNA trong quá trình thu hồi DNA sau ly
trích.
- Áp dụng qui trình PCR xác định giới tính lên phôi bò của ba giống ta Vàng, lai Sind,
sữa Hà Lan.
12
nào phù hợp với đòi hỏi của thương...
... sản 14
I.2.8. Các kỹthuật quan sát 17
I.2.8.1. Những kỹthuật quan sát 17
I.2.8.2. Những kỹthuật mô học đặc biệt 17
I.2.8.3. Kỹthuật hiển vi điện tử 17
I.2.8.4. Các kỹthuật nuôi vi sinh ... Kỹthuật miễn dịch huỳnh quang gián tiếp
III.4. KỸTHUẬT MIỄN DỊCH LIÊN KẾT ENZYM
III.4.1. Nguyênlý
Kỹ thuật miễn dịch liên kết enzym (ELISA-Enzyme- Linked Immunosorbent Assay) là
kỹ thuật ... không cao.
III.3. KỸTHUẬT MIỄN DỊCH HUỲNH QUANG
III.3.1. Nguyênlý
Trong kỹthuật này kháng thể được đánh dấu bằng thuốc nhuộm huỳnh quang. Kỹthuật
dựa trên tính chất của thuốc nhuộm khi...
... 2.1. Nguyênlýkỹthuật IHC (KT: kháng thể; KN: kháng nguyên)
28
Hình 3.7. Kỹthuật miễn dịch huỳnh quang gián tiếp
III.4. KỸTHUẬT MIỄN DỊCH LIÊN KẾT ENZYM
III.4.1. Nguyênlý
Kỹ thuật ... nồng độ đã biết của kháng nguyên.
III.1.4.3. Miễn dịch khuếch tán điện
Miễn dịch khuếch tán điện đơn (kỹ thuật Laurell)
Xuất phát từ nguyênlýcủakỹthuật khuếch tán vòng, kỹthuật này chỉ ... không cao.
III.3. KỸTHUẬT MIỄN DỊCH HUỲNH QUANG
III.3.1. Nguyênlý
Trong kỹthuật này kháng thể được đánh dấu bằng thuốc nhuộm huỳnh quang. Kỹthuật
dựa trên tính chất của thuốc nhuộm khi...
... được.
02/08/2011 1
"People only see what they are prepared to see."
Ralph Waldo Emerson
NGUYÊN LÝ VÀ KỸTHUẬT SIÊU ÂM
DOPPLER
BS. NGUYỄN QUANG TRỌNG
(Last update 05/07/2011)
KHOA CHẨN ĐOÁN HÌNH ... trạng bệnh lý) .
• Nhược điểm: Nó không ghi
được tốc độ tại 1 điểm xác
định mà nó chỉ ghi được tốc độ
trung bình của nhiều điểm
chuyển động mà chùm sóng
âm phát ra gặp trên đường đi
của nó.
02/08/2011 ... GIẢNG
•Hiểu được hiệu ứng Doppler.
• Ứng dụng hiệu ứng Doppler vào trong siêu âm.
•Nắm được các kỹ thuật, thao tác điều chỉnh trên máy
khi thực hiện siêu âm Doppler.
• Phân tích được các phổ và...
... đỏ.
02/08/2011 13
- ∆F: tần số Doppler.
-Fo: tần số của sóng phát đi.
-Fr: tần số của sóng phản hồi.
-v: vận tốc của dòng máu.
-c : tốc độ của sóng âm truyền trong cơ thể (#1540m/s).
- α: góc ... phím máy siêu âm!
02/08/2011 11
• Chuyển động của các tế bào máu làm thay đổi tần số của sóng
phản hồi trở về (reflected-R) đầu dò. Nếu chuyển động của
dòng máu hướng về đầu dò thì tần số sóng ... trạng bệnh lý) .
• Nhược điểm: Nó không ghi
được tốc độ tại 1 điểm xác
định mà nó chỉ ghi được tốc độ
trung bình của nhiều điểm
chuyển động mà chùm sóng
âm phát ra gặp trên đường đi
của nó.
02/08/2011...
... của công nghệ sinh
học cùng với sự phát triển mạnh mẽ củakỹ
thuật sinh học phân tử đã mở ra những triển
vọng nghiên cứu vô cùng to lớn. Áp dụng kỹ
thuật sinh học phân tử đặc biệt là kỹthuật ... (PRRS)
Ở LỢN CON CAI SỮA BẰNG KỸTHUẬT BỆNH LÝ VÀ KỸTHUẬT RT - PCR
Diagnosis of Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome (PRRS) in Weaned
Pigs by RT - PCR and Pathologycal Methods
Nguyễn ... Phương pháp RT -PCR: bao gồm các bước
tách chiết RNA của virus và các bước thực hiện
kỹ thuật RT- PCR. RNA của virus được tách
chiết bằng kit QIAamp để tiến hành phản ứng
RT- PCR. Quy trình...
... polymerase.
II. Nguyên lý
Kỹthuật tổng hợp AND ngoài cơ thể cũng tuân thủ những nguyên tắc cơ bản của sao
chép AND trong cơ thẻ như: Đoạn AND cần nhân mở xoắn thành 2 mạch đơn, cần có cặp
mồi, cần nguyên ... NGHỆ SINH HỌC
Câu hỏi:
Nội dung
I. Khái niệm
Bản chất củakỹthuật PCR( phản ứng chuỗi trùng hợp,phản ứng nhờ chuỗi
polymerase) là kỹthuật tổng hợp nhân tạo nhân AND với tốc độ nhsnh chưa ... giây)
Chu trình PCR
IV: Chu kỳ phản ứng của PCR
Biến tính
- Việc tăng nhiệt độ hoặc kéo dài thời gian biến tính có thể làm tăng tính đặc hiệu
của PCR nhưng làm giảm tuổi thọ của enzyme DNA polymerase....