khuếch đại gen bằng phản ứng rt pcr

... Các sản phẩm RTPCR có độ dài khoảng 300 bp Với kết thu nhận sau thực phản ứng RT- PCR, cho toàn quy trình kỹ thuật Hình 2: Kết phản phản ứng RT- PCR ứng PCR thực với ARN tổng đoạn gen HCV số làm ... phẩm đoạn ADN vùng giao gồm: gen 5’ UTR gen C HCV có độ dài 295 bp Nguyên liệu phản ứng RT- PCR Bước 1: 500C 45 phút: chu kỳ Bước 2: 940C 15 phút: chu kỳ Dung môi phản ứng Các bước 3, 4, thực (2x ... kết thực RT- PCR sử dụng vùng gen 5’UTR (untranscribed region), Đối tượng nghiên cứu ARN-HCV tách từ mẫu huyết BN viêm gan cấp tính 2 Phương pháp nghiên cứu Phản ứng RT- PCR sử dụng phản * Phương...

Ngày tải lên: 07/08/2014, 03:20

... đáp ứng yêu cầu thay đổi nhiệt độ nhanh xác Tránh tối đa bốc nước trình phản ứng Tuy nhiên, ứng với phản ứng cụ thể có thiết bị dụng cu khuyếch đại riêng 26 1.5.6 Phản ứng Multiplex PCR Phản ứng ... nhiều biến dạng PCR đời - RT - PCR (reverse transcriptase PCR) kỹ thuật mà RNA dùng làm khuôn mẫu cho khuếch đại PCR sau chuyển đổi thành c-DNA, gọi RNA - PCR hay RT – PCR RT – PCR nhạy phương ... trường phản ứng Ion Mg2+ thành phần thiếu phản ứng PCR, nồng độ Mg2+ tối ưu để thực phản ứng PCR từ 150 ÷200µM Nồng độ chuẩn cho khoảng tương ứng, phải thực điều kiện định Nước sử dụng cho phản ứng...

Ngày tải lên: 14/08/2014, 18:17

... phần phản ứng PCR - DNA mẫu: Đây mẫu DNA sinh học muốn khuếch đại Phản ứng PCR tối ưu xảy DNA thật tinh phản ứng PCR cho kết tốt với DNA thu nhận trực tiếp từ dịch tế bào PCR cho phép khuếch đại ... Đối chứng âm, 2: Sản phẩm PCR khuếch đại gen vrrA 3.3.2 Gen pagA Sử dụng cặp mồi tương ứng cho gen pagA bảng 3.1 tính toán nồng độ thích hợp cho thành phần phản ứng PCR Kết khuếch đại gen pagA ... yếu tố ảnh hưởng mạnh đến phản ứng PCR tùy thuộc vào phản ứng Nồng độ ion Mg2+ tối ưu 150-200 µM Phản ứng PCR đa mồi nhân lên đồng thời nhiều gen đích, thành phần phản ứng gồm: buffer, dNTP, MgCl2,...

Ngày tải lên: 20/06/2016, 23:04

... khuôn mẫu RNA phản ứng khuếch đại gen nhờ kỹ thuật PCR thực với ba mức nhiệt độ phù hợp chu kỳ Toàn phản ứng khuếch đại đoạn DNA từ khuôn mẫu RNA trải qua hai giai đoạn nói gọi RT- PCR Do tự nhiên ... primer cần phải lưu ý đặc biệt đến hàm lượng GC V Kỹ thuật RT- PCR Phản ứng RT- PCR phản ứng khuếch đại đoạn khuôn mẫu RNA theo nguyên lý PCR, bao gồm hai giai đoạn: Giai đoạn thứ Phiên mã ngược ... thông qua phương pháp PCR hai giai đoạn Gen quan tâm khuếch đại phản ứng PCR thứ với cặp oligonucleotide đặc hiệu gen có đưa vào vùng chồng lên (primer A primer B) Trong phản ứng PCR thứ hai, primer...

Ngày tải lên: 19/08/2013, 08:58

... có phản ứng dơng tính với xét nghiệm để tiến hành xét nghiệm ADN dịch khớp nớc tiểu *Kỹ thuật PCR xác định ADN CT bệnh phẩm dịch khớp nớc tiểu bệnh nhân nghiên cứu (10) - Tách ADN kit Quiagen ... reactive arthritis in man specially after sexually acquired genitourinary infection To determine the connection between Chlamydia trachomatis with reactive arthritis, in this study we examined antigen ... AAGCTTTTCTTAACAATGCAAATGAGATAG - Chu kỳ khuyếch đại: 3phút 95 oC, 35 chu kỳ: 95 oC/ 1phút, 52 oC/ 1phút, 72 oC/ 1phút, cuối 72 oC/ 10 phút oC - Điện di sản phẩm PCR gen agarose 2%, kích thớc sản phẩm 96bp...

Ngày tải lên: 25/03/2014, 03:22

Ngày tải lên: 19/08/2013, 08:58

Ngày tải lên: 12/03/2015, 14:42

... cho genotype lại (Hình 3.6) HCV genotype HCV genotype HCV genotype2 HCV genotype Chứng âm Hình 3.6 Kết khảo sát khả khuếch đại mồi mẫu dò vùng 5’NC HCV Hình 3.6 cho thấy phản ứng có kiểu gen ... thích có bước sóng xác định lên tube phản ứng RT- PCR + Có camera hay cảm biến quang ghi nhận ánh sáng huỳnh quang phát từ tube phản ứng RT- PCR tube phản ứng chiếu tia sáng kích thích 1.4.2 Kỹ ... kỳ nhiệt kết khuếch đại ống phản ứng hiển thị lúc với phản ứng khuếch đại xảy để người làm thí nghiệm thấy 21 Phương Thị Hà Luận văn Thạc sĩ khoa học 1.4.1.1 Lịch sử phát kỹ thuật PCR Vào buổi...

Ngày tải lên: 21/06/2015, 07:17

... cho genotype lại (Hình 3.6) HCV genotype HCV genotype HCV genotype2 HCV genotype Chứng âm Hình 3.6 Kết khảo sát khả khuếch đại mồi mẫu dò vùng 5’NC HCV Hình 3.6 cho thấy phản ứng có kiểu gen ... thích có bước sóng xác định lên tube phản ứng RT- PCR + Có camera hay cảm biến quang ghi nhận ánh sáng huỳnh quang phát từ tube phản ứng RT- PCR tube phản ứng chiếu tia sáng kích thích 1.4.2 Kỹ ... kỳ nhiệt kết khuếch đại ống phản ứng hiển thị lúc với phản ứng khuếch đại xảy để người làm thí nghiệm thấy 20 Phương Thị Hà Luận văn Thạc sĩ khoa học 1.4.1.1 Lịch sử phát kỹ thuật PCR Vào buổi...

Ngày tải lên: 18/06/2016, 10:33

... thuật RT- PCR Phản ứng RT- PCR đƣợc thực theo sơ đồ 3.2 với mẫu thu hoạch đƣợc sau hai lần gây nhiễm Mẫu (Dịch tế bào) Xử lý mẫu Ly trích RNA virus Kỹ thuật RT- PCR bƣớc Điện di sản phẩm RT- PCR Nhuộm ... Biorad) Sơ đồ 3.2 Sơ đồ thực phản ứng RT- PCR Để thực phản ứng phiên mã ngƣợc khuếch đại đoạn cDNA sau phiên mã ngƣợc với độ nhạy độ đặc hiệu cao, thực kỹ thuật RT- PCR bƣớc nhằm hạn chế lây nhiễm ... Nồng độ ion Mg++ nhân tố ảnh hƣởng mạnh đến phản ứng PCR Nồng độ tối ƣu phải đƣợc xác định cho phản ứng qua nhiều thử nghiệm 2.2.4 Phƣơng pháp RT- PCR RT- PCR (reverse transcriptase polymerase chain...

Ngày tải lên: 23/04/2013, 15:11

... thuật RT- PCR Phản ứng RT- PCR đƣợc thực theo sơ đồ 3.2 với mẫu thu hoạch đƣợc sau hai lần gây nhiễm Mẫu (Dịch tế bào) Xử lý mẫu Ly trích RNA virus Kỹ thuật RT- PCR bƣớc Điện di sản phẩm RT- PCR Nhuộm ... Biorad) Sơ đồ 3.2 Sơ đồ thực phản ứng RT- PCR Để thực phản ứng phiên mã ngƣợc khuếch đại đoạn cDNA sau phiên mã ngƣợc với độ nhạy độ đặc hiệu cao, thực kỹ thuật RT- PCR bƣớc nhằm hạn chế lây nhiễm ... Nồng độ ion Mg++ nhân tố ảnh hƣởng mạnh đến phản ứng PCR Nồng độ tối ƣu phải đƣợc xác định cho phản ứng qua nhiều thử nghiệm 2.2.4 Phƣơng pháp RT- PCR RT- PCR (reverse transcriptase polymerase chain...

Ngày tải lên: 03/09/2013, 09:59

... thuật RT- PCR Phản ứng RT- PCR đƣợc thực theo sơ đồ 3.2 với mẫu thu hoạch đƣợc sau hai lần gây nhiễm Mẫu (Dịch tế bào) Xử lý mẫu Ly trích RNA virus Kỹ thuật RT- PCR bƣớc Điện di sản phẩm RT- PCR Nhuộm ... Biorad) Sơ đồ 3.2 Sơ đồ thực phản ứng RT- PCR Để thực phản ứng phiên mã ngƣợc khuếch đại đoạn cDNA sau phiên mã ngƣợc với độ nhạy độ đặc hiệu cao, thực kỹ thuật RT- PCR bƣớc nhằm hạn chế lây nhiễm ... Nồng độ ion Mg++ nhân tố ảnh hƣởng mạnh đến phản ứng PCR Nồng độ tối ƣu phải đƣợc xác định cho phản ứng qua nhiều thử nghiệm 2.2.4 Phƣơng pháp RT- PCR RT- PCR (reverse transcriptase polymerase chain...

Ngày tải lên: 10/03/2014, 14:20

... đầu khuyếch đại thành hàng triệu vòng vài Do tính đơn giản kỹ thuật nên máy PCR chế tạo để thực công việc cách tự động Khi ADN khuếch đại, chúng phân tích theo hướng khác Kỹ thuật PCR có nhiều ... việc phát biến dị di truyền mức ADN hiệu nhiều so với phương pháp cổ điển Khuếch đại ADN kỹ thuật PCR Quá trình thực PCR đòi hỏi thành phần sau: (1) Hai đoạn mồi (primer), đoạn mồi đoạn ADN có ... thuật PCR trình gọi trình kéo dài primer (primer extension) (3) Một lượng lớn nucleotìde tự (4) ADN từ thể sinh vật cần nghiên cứu, kỹ thuật PCR nhạy nên lượng ADN cần thiết nhỏ Đầu tiên ADN genome...

Ngày tải lên: 12/03/2014, 06:20

... thuyết 896bp (~ 900bp) 2.5 Phản ứng PCR đặc hiệu Các mẫu DN A tách chiết pha loãng nồng độ 20ng/µl để làm khuôn cho phản ứng PCR đặc hiệu xác định tồn gen ver genome Phản ứng PCR tiến hành thể tích ... mồi khuyếch đại gen trì băng không đặc hiệu biến Sau thiết lập điều kiện thích hợp cho phản ứng mồi đặc hiệu, tiến hành phản ứng PCR với tất mẫu ADN tổng số mẫu nấm phân lập đối chứng sử dụng ... tích phản ứng PCR đặc hiệu Từ 15 mẫu ADN tổng số thu isolate A flavus chọn mẫu ADN tổng số để làm khuôn cho thí nghiệm tối ưu hoá điều kiện phản ứng PCR đặc hiệu với cặp mồi VER Điều kiện cho phản...

Ngày tải lên: 03/04/2014, 13:20

... trỳc rt cao gia cỏc chng, c bit vựng gen ca exon ti u 3, ú cú nhng chng EBV phõn lp Vit Nam [4, 7] Trong nghiờn cu ny s dng phn ng PCR, k thut dũng húa v gii trỡnh t xỏc nh s tn ti on gen LMP-1 ... c h gen ca virut Phng phỏp nghiờn cu * Phn ng PCR: 40C 35 Nhit bo qun tm thi sn phm * Dũng húa v gii trỡnh trỡnh t: Sn phm on gen LMP-1 ca EBV, sau tinh sch, dũng hoỏ vo plasmid vector pCR2 .1 ... chiu bng chng trỡnh GENEDOC 2.6.002 (http:// www.nrbsc.org/gfx/genedoc/) KếT QU nghiên cứu V BàN LUN Kt qu thc hin PCR, dũng hoỏ sn phm v tỏch dũng Bng cp mi LMP1F-LMP1R, sn phm PCR thu c cú kớch...

Ngày tải lên: 07/08/2014, 02:24

... dòng emitơ tranzisto giảm nhiêu Nh khuếch đại vi sai phản ứng với tín hiệu vào ngợc pha Vì khuếch đại vi sai lý tởng phản ứng với tín hiệu vào ngợc pha, không phản ứng với tín hiệu vào đồng pha nên ... dòng I0 5.1.5 Tính khuếch đại khuếch đại vi sai 129 Xét đặc tính khuếch đại khuếch đại vi sai với số phơng án đa tín hiệu vào lấy tín hiệu nh sau: a Vào đối xứng - Ra không đối xứng: U ra1 U U U ... dùng khuếch đại thuật toán tạo hàm đơn giản hơn, xác giá thành rẻ mạch khuếch đại rời rạc (đợc lắp linh kiện rời ) Ta hiểu khuếch đại thuật toán nh khuếch đại lý tởng : có hệ số khuếch đại điện...

Ngày tải lên: 20/08/2012, 11:37

... Bài 23 Có công thức viết phản ứng Công thức 1: Muối + Muối Muối (Phản ứng trao đổi) Muối pứ: Tan tan Sản phẩm phải có: Chất kết tủa Chất bay Chất ... BaSO4↓ +2 NaHCO3 e Ba(HCO3)2 + Na2CO→ BaCO3↓+2 NaHCO3 p dụng 2: Viết phản ứng có dạng: BaCl2 + ? KCl + ? p dụng 2: Viết phản ứng có dạng: BaCl2 ? KCl + ? Giải: BaCl2 + K2SO4→ 2KCl + BaSO4↓ BaCl2 ... Áp dụng 3: (HVQY-2001) Viết cân phản ứng a ddAlCl3+ ddKAlO2 b ddAlCl3 + ddNa2S c ddAlCl3 + dd NaHCO3 Công thức 2: Khi gặp Các muối Al3+, Fe3+, Zn2+ Muối A Phản ứng với muối: CO32-; HCO3- ; SO32-;...

Ngày tải lên: 19/09/2012, 13:49

... chung để cân phản ứng oxi hóa khử Tại gọi phản ứng cho điện tử phản ứng oxi hóa? Tại gọi phản ứng nhận điện tử phản ứng khử? Tại nói nhận diện chất oxi hóa, chất khử góp phần cân phản ứng oxi hóa ... hợp hệ số phản ứng ion vừa cân xong với phản ứng lúc đầu để bổ sung hệ số thích hợp vào phản ứng lúc đầu (Chuyển phản ứng dạng ion trở lại thành dạng phân tử) + Cân ngun tố lại, có, phản ứng trao ... III.3 CÂN BẰNG THEO PHƯƠNG PHÁP ĐẠI SỐ Thực bước sau: + Viết phương trình phản ứng xảy với đầy đủ tác chất, sản phẩm (nếu đầu u cầu bổ sung phản ứng cân bằng) + Đặt hệ số chữ a, b, c, d, ứng trước...

Ngày tải lên: 05/10/2012, 09:17

... cực đại điện áp ngược lập lại: URRM • Giá trị cực đại điện áp ngược không lập lại: URSM Dòng điện - nhiệt độ làm việc • Giá trị trung bình cực đại dòng điện thuận: IF(AV)M • Giá trị cực đại dòng ... mở Các thông số Điện áp: • Giá trị cực đại điện áp colector – emitor UCE0M IB = • Giá trị cực đại điện áp emitor – bazơ UEB0M IC =0 Dòng điện: Giá trị cực đại dòng điện IC, IB, IE (Điện tử công ... mUI(1): Công suất biểu kiến thành phần bậc Q(1): Công suất phản kháng thành phần bậc S = P + Q(1) + D D = mU ∞ I (2n ) ∑ n=2 D: Công suất phản kháng biến dạng P λ= υ= P +Q + D I (1) I THDI = (1)...

Ngày tải lên: 15/10/2012, 15:43