... tinhchế có độ phân tách cao để đạt đến độ tinh cần thiết Đây quy trình tinhchế protein đầy đủ, điều khơng có nghĩa protein cần tinhchế theo quy trình ba bƣớc Ví dụ, giai đoạn bắt giữ tinhchế ... nhập giai đoạn trung gian giai đoạn cuối lại với Trong số trƣờng hợp, nguồn mẫu ban đầu tinh cần tinhchế qua bƣớc cuối Ngƣợc lại, số protein dùng làm thuốc cần bốn, năm bƣớc tinhchế để đạt ... Để tăng cƣờng biểu hiện, hệ thống cảm ứng muối có nhân tố phiên mã T7 RNA polymerase, protein đƣợc biểu vƣợt mức với lƣợng lớn [31] 1.3 TINHCHẾ PROTEIN TÁI TỔ HỢP Protein đƣợc tinh dựa đặc tính...
... sĩ sinh học Kết - Biện luận 3.5 Tinhchế FGF-2 3.5.1 Tinhchế sắc ký trao đổi cation Nhiều nghiên cứu cho thấy FGF-2 bền pH trung tính, chúng tơi tiến hành tinhchế FGF-2 pH Mặt khác, FGF-2 có ... kháng FGF-2 sản phẩm tinhchế sắc ký lực với Heparin 1, thang protein phân tử lượng thấp; 2, mẫu trước qua cột; 3, mẫu không bám vào cột Heparin; 4, mẫu tinhchế thu phân đoạn dung ly 60% dung ... sau tinhchế Heparin có độ tinh 97,10% với hiệu suất thu hồi sản phẩm 76,73% (bảng 3.5) - 74 - Luận văn thạc sĩ sinh học Kết - Biện luận Bảng 3.5 Hiệu suất tinhchế FGF-2 cột Heparin Mẫu tinh...
... tế bào chất E coli - Khảo sát tối ƣu hóa quy trình tinhchế FGF-2 sắc ký trao đổi cation sắc ký lực heparin - Tiến hành quy trình lên men tinhchế quy mơ lớn - Xây dựng quy trình xác định hoạt ... coli BL21(DE3) mang vector pET-fgf2 có khả biểu rhFGF-2 tế bào chất - Đã tiến hành lên men thu nhận đƣợc 0,23g protein rhFGF-2 từ 1L dịch lên men - Đã tinhchế đƣợc protein rhFGF-2 từ dịch lên men ... lên men - Đã tinhchế đƣợc protein rhFGF-2 từ dịch lên men sắc ký trao đổi ion sắc kí lực với độ tinh đạt 97,1% hiệu suất thu hồi đạt 46,08% ĐỀ NGHỊ Với kết nêu trên, chúng tơi có số đề nghị nhƣ...
... tinhchế có độ phân tách cao để đạt đến độ tinh cần thiết Đây quy trình tinhchế protein đầy đủ, điều khơng có nghĩa protein cần tinhchế theo quy trình ba bƣớc Ví dụ, giai đoạn bắt giữ tinhchế ... quan tài liệu đoạn trung gian giai đoạn cuối lại với Trong số trƣờng hợp, nguồn mẫu ban đầu tinh cần tinhchế qua bƣớc cuối Ngƣợc lại, số protein dùng làm thuốc cần bốn, năm bƣớc tinhchế để đạt ... gian ức chế thời điểm cảm ứng biểu cực đại protein mục tiêu nồng độ polymerase phải tăng lên đủ lớn để vƣợt qua đƣợc ức chế lysozyme [3, 24, 31] c Cơ chế cảm ứng biểu IPTG Ở hệ thống biểu đƣợc...
... x Z 2.2.5 Tinhchế FGF-2 2.2.5.1 Tinhchế sắc ký trao đổi cation - 48 - Luận văn thạc sĩ sinh học Vật liệu – Phương pháp Do pH=7 pH giúp ổn định hoạt tính FGF-2 nên tiến hành tinhchế protein ... cation đƣợc sử dụng để tinhchế Trong luận văn này, cột trao đổi cation Hitrap SP FF 5ml (GE Healthcare) đƣợc sử dụng để thu nhận FGF-2 bƣớc Các bước thực hiện: - Rửa hệ thống tinh tế AKTA FPLC nƣớc ... 100% 2.2.5.2 Tinhchế sắc ký lực heparin FGF-2 có tƣơng tác đặc hiệu với heparin Do vậy, khóa luận này, sử dụng cột tinhchế Hitrap Heparin HP 5ml (GE Healthcare) để thu nhận FGF-2 dạng tinh - Rửa...
... tinhchế có độ phân tách cao để đạt đến độ tinh cần thiết Đây quy trình tinhchế protein đầy đủ, điều khơng có nghĩa protein cần tinhchế theo quy trình ba bƣớc Ví dụ, giai đoạn bắt giữ tinhchế ... Lên men cảm ứng biểu FGF-2 .47 2.2.4.3 Đánh giá hiệu lên men .47 2.2.5 Tinhchế FGF-2 48 2.2.5.1 Tinhchế sắc ký trao đổi cation 48 2.2.5.2 Tinhchế sắc ký lực ... quan tài liệu đoạn trung gian giai đoạn cuối lại với Trong số trƣờng hợp, nguồn mẫu ban đầu tinh cần tinhchế qua bƣớc cuối Ngƣợc lại, số protein dùng làm thuốc cần bốn, năm bƣớc tinhchế để đạt...
... trị chấp nhận đƣợc Các nghiên cứu chất có chất tƣơng tự nhƣ nattokinase, lumbrokinase hạn chế II PHƢƠNG PHÁP - Các phƣơng pháp vi sinh vật - Các phƣơng pháp sinh học phân tử - Các phƣơng pháp hóa ... dạng hòa tan nên tinh dễ dàng Năm 2007, Reza et al sử dụng vector pGEX để biểu SK E coli với suất biểu đạt 50% protein tổng số Nhóm nghiên cứu sử dụng dòng tế bào E coli BL21 để biểu E coli BL21 ... dụng vector pQE30 để biểu SK E coli cho hoạt tính tƣơng đƣơng với SK tự nhiên [10] Đồng thời Pupo et al biểu nội bào sk từ S equisimilis sử dụng vector biểu pTrp Hiệu suất biểu đạt 15% protein...
... protein IFN-γ 56 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 63 TÀI LIỆU THAM KHẢO 64 DANH MỤC CÁC BẢNG PHỤ LỤC 74 DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT Các kí hiệu, chữ viết tắt Amp ... lọc gel lần 60 Hình 3.18: SDS-PAGE (A) western blot (B) giai đoạntinhchế 60 Hình 3.19:Phổ đồ kiểm tra độ mẫu tinhchế IFN-γ HPLC 61 PHẦN I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới ... làm tăng số lượng chuỗi polypeptide trình diện làm tăng khả phân giải chuỗi polypeptide lạ Ngoài việc tăng số lượng chuỗi polypeptide cắt immunoproteasome góp phần tạo đoạnpolypeptide có khả liên...
... chèn vào tế bào E.coli bất chấp chủng vi khuẩn có mang gen lacIq- hay lacIq+ Vector biểu chứa trình tự mã hóa thể 6xHis dung hợp với đầu N protein cần biểu hiện, đặc tính hỗ trợ việc tinhchế ... Một vài hệ thống vector biểu protein 1.5.1 Hệ thống pGEX biểu protein dung hợp với GST Tất vector pGEX có đặc điểm chung chứa lac promoter (Plac) điều khiển biểu vượt mức gen nằm hạ lưu theo chế ... muốn biểu vector mà người ta có chủng E.coli khác [1] 1.4.2 Các chủng E.coli dùng sản xuất protein tái tổ hợp Trên thị trường có nhiều chủng E.coli có chức biểu tốt, nêu vài chủng tiêu biểu Bảng...
... Sản phẩm cắt kiểm tra gel 0,8% agarose Tinh phân đoạn DNA Phân đoạn DNA tinh kit tinh hãng Promega Mẫu DNA chạy điện di gel 0,8% agarose để thu phân đoạn cần tinh Bổ sung lần thể tích dung dịch ... thành từ chế nội sinh ngoại sinh đồng thời hai chế nội sinh ngoại sinh Điều chứng tỏ hoạt tính prothrombinase phụ thuộc vào hoạt hóa yếu tố tham gia vào trình Bảng 1.1 Các yếu tố đơng máu Các yếu ... chất ức chế (các chất có chất lysine) liên kết với plasminogen vị trí chất ức chế tạo thành phức plasminogen-chất ức chế phức khơng thể liên kết với fibrin khơng có khả phân hủy fibrin Các chất...
... cắt xuất đoạn gen Kích thƣớc đoạn gen khoảng 650bp, đoạn gen mã hóa GP5 Tuy nhiên, để thu đƣợc đoạn gen cần tiến hành tinh từ gel agarose (Hình 3.3 (B)) Trên hình 3.3(B) kết sau tiến hành tinh GP5 ... mặt dƣới thùy đỉnh Các triệu chứng thƣờng gặp lợn mắc bệnh bao gồm rối loạn sinh sản, gây chết (đối với lợn con) biểu rối loạn hô hấp lợn lứa tuổi * Các biện pháp phòng bệnh Hiện chƣa có thuốc ... Vector biểu pET 32a(+) chủng biểu BL21 - Vector biểu pET 32a(+) Hệ thống vector hiểu pET cho phép dòng hóa biểu protein tái tổ hợp dạng dung hợp với homooligohistidine (6xHis) tế bào E coli Sự biểu...
... vào chủng biểu Để gen đích seb534 biểu thành sản phẩm protein phải đƣa gen đích vào vector biểu mang cấu trúc cần thiết cho trình phiên mã dịch mã Các trình tự quan trọng trợ giúp cho trình biểu ... 2.2.5 Phương pháp tinh sản phẩm từ gel agarose Nguyên lí : Đây phƣơng pháp sử dụng để tinhđoạn DNA quan tâm từ điện di gel agarose Sau đƣợc nhân phƣơng pháp PCR, đoạn gen seb đƣợc tinh để làm nguyên ... lý enzym hạn chế gen seb vector biểu pET22b(+) Nguyên lý: Enzym hạn chế - Restriction enzym endonuclease nội bào có khả nhận biết cắt đoạn DNA vị trí với trình tự nucleotide định Các enzym phá...
... http://www.lrc.tnu.edu.vn 32 đoạn gen Kích thƣớc đoạn gen khoảng 650bp, đoạn gen mã hóa gp5 Tuy nhiên, để thu đƣợc đoạn gen cần tiến hành tinh từ gel agarose (Hình 3.2 B) Trên hình 3.2 B kết sau tiến hành tinh gp5 ... cột cách cho 12 ml dung dịch NiCl2 chạy vòng qua cột khoảng 30 phút Để ổn định cột cho 50 ml đệm bám cột chạy qua cột, sau giữ cột EtOH 20% - Tinhchế protein tái tổ hợp Khi tiến hành tinhchế ... vừa tách chiết có mang đoạn gen mã hóa GP5 hay khơng Ngồi ra, đƣợc sử dụng để xử lý đoạn gen mã hóa GP5 vector biểu tạo đầu dính, thuận lợi cho việc gắn gen vào vector biểu Enzyme cắt endonuclease...
... Trung ương, Chính phủ ) Giọng thơ tâm tình ngào tha thiết nghệ thuật biểu giàu tính dân tộc cùa Tố Hữu góp phần quan trọng vào thành cơng cùa thơ Việt Bắc làm cho nhanh chóng đến với người đọc...
... lý mẫu protein IL-2 trƣớc tinhchế 32 2.2.9 Tinhchế protein hệ sắc ký đảo pha RP-HPLC .33 2.2.10 Xác định độ tinh khiết sản phẩm IL-2 tái tổ hợp sau tinh 33 2.2.11 Phƣơng pháp ... trƣớc, sau dần dần, chất có độ phân cực cao bắt nối sau Đoạnpolypeptide vào pha tĩnh cột sắc ký đảo pha Polypeptide hấp thụ vào bề mặt chất giá Polypeptide khỏi pha tĩnh nồng độ chất cạnh tranh đạt ... Hình 3.4: Sơ đồ biểu thị kết khảo sát ảnh hƣởng nhân tố riêng rẽ (nhiệt độ biểu hiện, thời gian biểu hiện, nồng độ chất cảm ứng IPTG) dòng tế bào tái tổ hợp E coli Bl21 mang vector biểu pET22b-IL-2...
... nói riêng đậm đà tính dân tộc nội dung hình thức biểu hiện. Tính dân tộc thơ Tố Hữu thể xuyên thấm Việt Bắc: Về nội dung (phản ánh thể đời sống tinh thần, đời sống tâm hồn, tâm tư, tình cảm, nguyện ... có đoạn hùng tráng khúc anh hùng ca (Những đường Việt Bắc ta Đèn pha bật sáng ngày mai lên) -Kết cấu: Kết cấu theo lối đối đáp giao duyên nam nữ ca dao dân ca kết cấu mang đậm tính dân tộc ,và ... Trung ương ,Chính phủ ) Kết bài: Giọng thơ tâm tình ngào nghệ thuật tiêu biểu giàu tính dân tộc Tố Hữu góp phần quan trọng vào thành cơng thơ Việt Bắc làm cho nhanh chóng đến với người đọc sống...
... tố cảm xúc thân thiện vui vẻ Để giới thiệu sản phẩm/dịch vụ thân thiện cần thiết, quảng cáo nên có chút sáng tạo, chút vui vẻ, cởi mở thân thiện muốn làm quen với người bạn Các nhân vật TVC gà ... màu vàng Màu vàng: màu nắng mặt trời ấm áp Nó liền với cảm giác thụ hưởng hạnh phúc Nó màu thơng thái mạnh mẽ Màu vàng mang lại cảm giác ấm áp, làm tăng thích thú khả hoạt động trí óc Màu vàng ... quầy bán hàng di động thiết kế đặc biệt theo chuẩn Beeline quốc tế Các cửa hàng thức Beeline khai trương vào năm sau thành phố lớn Các điểm bán hàng lưu động Beeline với thiết kế bắt mắt đặt đường...
... tố cảm xúc thân thiện vui vẻ Để giới thiệu sản phẩm/dịch vụ thân thiện cần thiết, quảng cáo nên có chút sáng tạo, chút vui vẻ, cởi mở thân thiện muốn làm quen với người bạn Các nhân vật TVC gà ... màu vàng Màu vàng: màu nắng mặt trời ấm áp Nó liền với cảm giác thụ hưởng hạnh phúc Nó màu thơng thái mạnh mẽ Màu vàng mang lại cảm giác ấm áp, làm tăng thích thú khả hoạt động trí óc Màu vàng ... quầy bán hàng di động thiết kế đặc biệt theo chuẩn Beeline quốc tế Các cửa hàng thức Beeline khai trương vào năm sau thành phố lớn Các điểm bán hàng lưu động Beeline với thiết kế bắt mắt đặt đường...