... vector táitổhợp gọi là dòng
tái tổ hợp. Dòng táitổhợp đƣợc phân lập để lƣu trữ DNAtáitổhợp hoặc dùng cho các
thao tác trên gen. Toàn bộ quá trình trên gọi là tạo dòng DNA hay DNA cloning. ... polymerase
Ứng dụng của PCR
PCR có nhiều ứngdụngtrong ngành sinh học. PCR với cặp primer đƣợc thiết kế
riêng sẽ phân lập đƣợc đoạn DNA mong muốn. Từ đây nó đƣợc ứngdụngtrong các
lĩnh ... thấy việc
sử dụngDNAtáitổhợp nhƣ là một công cụ hữu hiệu trong việc nâng cao năng suất
cây trồng và chất lƣợng lƣơng thực, thực phẩm đồng thời vẫn thúc đẩy đƣợc một nền
nông nghiệp bền vững....
... phân tử DNA khác nhau
được cắt bởi cùng một enzyme giới hạn
EcoRI tạo ra các đầu dính bổ sung nhau,
bằng cách đó có thể khâu nối thành phân
tử DNAtáitổhợp in vitro nhờ xử lý với
DNA ligase. ...
tiếp bằng DNA ligase của phage T4 hoặc
tổng hợp thêm các đầu dính vào các đầu
3' một số nucleotide bổ sung bằng cách
sử dụng các enzyme end-transferase, rồi
sau đó các đoạn DNA như thế ... như thế sẽ được
nối với nhau bởi DNA ligase của vi
khuẩn. Cơ sở của phương pháp kết hợp
DNA này được thực hiện lần đầu tiên
giữa DNA của virus SV40 với DNA của
phage l bởi L.Lobban và D.Kaiser...
... DNA (Thu nhận gen)
2. Cắt DNA (Chọn vector)
3. Trộn DNA và nối (Tạo DNAtáitổ hợp)
4. Chuyển DNAtáitổhợp vào tế bào đích
5. Chọn dòng tế bào có DNAtáitổ hợp
6. Tạo dòng tế bào có DNA ... gene
II. Ứngdụng kĩ thuật di truyền
trong nông nghiệp
Kĩ thuật chuyển gen
3. Tạo DNAtáitổ hợp
- Từ gen và vector phù hợp người ta tạo các DNAtáitổ
hợp bằng các enzym công cụ
- VD: sử dụng ... sự tồn tại của DNA
tái tổhợptrong tế bào
Sơ đồ kĩ thuật chuyển gen
Vi khuẩn tái
tổ hợp
Biểu hiện gen
Các nghiên cứu
ứng dụng khác
Vi khuẩn
tái tổ hợp
Các nghiên cứu
ứng dụng khác
Thuốc...
... sử
dụng để tạo ra đoạn DNA tổng hợp thông qua nhiều vòng khuếch đại PCR. Khả năng tạo ra DNA tổng
hợp có nhiều ứngdụng tùy thuộc vào thiết kế của chúng ta. Người ta có thể thiế
t kế một gen tổng ... chất phản ứng hữu ích trong xác
định trình tự DNA.
- Ứngdụng chính
Công ngh. DNAtái t. h.p 16
1.1.7. Trộn các mẫu DNA với một lượng thích hợp của đệm 6
×
gel-loading dye. Đặt mẫu vào trong giếng
bằng ... sâu trong một thời gian ngắn để dùng thì phải đặt trên đá tuyết (ice bath).
II. Các enzyme trùng hợp
1. DNA polymerase (DNA- dependent DNA polymerase)
DNA polymerase được dùng để tổng hợpDNA trong...
...
2.3.3. Ứngdụng công nghệ thông tin trong sản xuất 53
2.3.4. Internet và ứngdụngtrong thương mại 53
2.3.5. Đánh giá chung việc ứngdụng công nghệ thông tin trong
các doanh nghiệpnông lâm nghiệp ... ứngdụng CNTT trong các doanh nghiệpnông lâm
nghiệp trên địa bàn tỉnh Thái Nguyên?
- Các giải pháp nào góp phần tăng cường phát triển ứngdụng công
nghệ thông tin trong các doanh nghiệpnông ... nhất trong việc đầu tư và ứngdụng
công nghệ thông tin trong các doanh nghiệpnông lâm
nghiệp tỉnh Thái Nguyên năm 2006
55
Bảng 2.12: Một số ứngdụng công nghệ thông tin có nhu cầu lớn
trong...
... cho kỹ thuật DNAtáitổhợp sau này.
Nối sai
Nối sai
DNA sẽ được
xen vào
DNA được cắt
vớiEcoRI
Các đầu dính
Tái tổhợpDNA
+ DNA ligase
DNA
tái tổ hợp
Hình 10.3 Hai phân tử DNA khác nhau ... được duy trì
và tái sử dụng với hiệu quả kinh tế cao.
IV. Ứngdụng của công nghệ DNAtáitổhợp
1. Công nghệ DNAtáitổhợp với việc nghiên cứu bộ gene
Việc tách dòng táitổhợp cho phép nhận ... Các vector thông dụngtrong kỹ thuật di truyền
2.1. DNAtáitổhợp là gì?
DNAtáitổhợp (recombinant DNA) là phân tử DNA được tạo ra trong
ống nghiệm bằng cách kết hợp các DNA từ các nguồn...
... bền ở chỗ nối của protein
tái tổhợp và đuôi ái lực. Nhiều phương pháp phân cắt đã được gợi ý. Sử dụng các protease đặc hiệu là
thích hợp hơn cả, bởi vì có thể ứngdụngtrong các điều kiện “nhẹ ... sử dụng dạng táitổhợp của protease 3C
từ rhinovirus của người. Protease này có kích thước nhỏ (20 kDa) và có một tính
đặc hiệu rất hạn chế. Nó
được biểu hiện như là một protein táitổhợp ... eukaryote trong vi khuẩn là chọn một vector biểu hiện
mang promoter mạnh (strong promoter) của prokaryote. Promoter là trình tự DNA hướng dẫn RNA
polymerase liên kết với DNA và khởi đầu sự tổng hợp...
... DNA) dùngtrong kỹ thuật táitổhợp DNA.
2. Các vector được dùng để tạo dòng các đoạn DNA
in vitro
5’-PO
4
.
.
Trong thực tế, các đoạn DNA được gắn với nhau để tạo ra phân tử
DNA táitổ ... mapping).
2. Sinh tổng hợp cDNA từ mRNA
Đoạn DNA được tổng hợp dựa trên khuôn mẫu mRNA được gọi là
cDNA (complementary DNA) . ba
như sau:
- .
- - 2 (Mg
2+
.
- .
mRNA-cDNA (khi tổng hợp sợi th E. ... bức tranh tổng quát về các quá trình cơ
bản của công nghệ DNAtáitổ hợp.
II. Phân lập đoạn DNA/ gen
Một số phương pháp phân lập gen để thực hiện kỹ thuật táitổhợp
DNA đã được sử dụng là:...
... mapping).
2. Sinh tổng hợp cDNA từ mRNA
Đoạn DNA được tổng hợp dựa trên khuôn mẫu mRNA được gọi là
cDNA (complementary DNA) . ba
như sau:
- .
- - 2 (Mg
2+
.
- .
mRNA-cDNA (khi tổng hợp sợi th E. ... bức tranh tổng quát về các quá trình cơ
bản của công nghệ DNAtáitổ hợp.
II. Phân lập đoạn DNA/ gen
Một số phương pháp phân lập gen để thực hiện kỹ thuật táitổhợp
DNA đã được sử dụng là: ... khuẩn
thích hợp hơn cho mục đích này và có thể thu được hiệu suất 10
9
thể biến
nạp/µg plasmid.
IV. Chọn dòng mang DNAtáitổhợp
Trong thí nghiệm tạo vector táitổ hợp, hỗn hợp vector và...