Một số đặc điểm ngoại hình, tập tính và di truyền của gà nhạn chân xanh TT

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ Chuyên ngành: Chăn nuôi Mã ngành: 62.62.01.05 NGUYỄN HUY TƯỞNG MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM NGOẠI HÌNH, TẬP TÍNH VÀ DI TRUYỀN CỦA GÀ NHẠN CHÂN XANH Cần Thơ- 2021 CƠNG TRÌNH ĐƯỢC HỒN THÀNH TẠI TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ Người hướng dẫn chính: PGS.TS Đỗ Võ Anh Khoa Luận án bảo vệ trước hội đồng chấm luận án tiến sĩ cấp trường Họp tại: Vào lúc ngày tháng năm Phản biện 1: Phản biện 2: Có thể tìm hiểu luận án thư viện: Trung tâm Học liệu, Trường Đại học Cần Thơ Thư viện Quốc gia Việt Nam DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ Nguyễn Huy Tưởng Đỗ Võ Anh Khoa (2019) Tập tính đậu sào gà Nhạn chân xanh giai đoạn 7-16 tuần tuổi Tạp chí KHKT Chăn ni số 246 Nguyễn Huy Tưởng, Nguyễn Thị Diệu Thúy, Nguyễn Thị Cẩm Châu Đỗ Võ Anh Khoa (2019) Đa dạng di truyền gà nhạn chân xanh Tạp chí KHKT Chăn nuôi số 252 Nguyên Huy Tưởng, Nguyễn Tuyết Giang, Huỳnh Thị Phương Loan, Nguyễn Thị Ngọc Linh, Đỗ Võ Anh Khoa (2020) Khối lượng số chiều đo thể gà Nhạn Chân Xanh nuôi thả vườn từ 0-20 tuần tuổi Tạp chí KHKT Chăn ni số 257 CHƯƠNG GIỚI THIỆU 1.1 Tính cấp thiết luận án Việt Nam quốc gia có đa dạng giống gà địa với đặc tính quý sức kháng bệnh tự nhiên tốt, dễ nuôi, giá trị cao,…Gà địa ni phổ biến nhiều phương thức/hình thức/qui mơ khác thiếu cấu chăn nuôi cấu bữa ăn người Việt Gần đây, giống gà địa công ty/cơ sở giống ý nhiều công tác lai tạo giống/dịng gà thả vườn/gà lơng màu Cơng tác bảo tồn phát triển giống gà địa ngành quan tâm đầu tư (gà H’Mơng, Chọi Bình định, Cáy Củm, Lơng Xướt, Tiên n, Tàu Vàng, Liên Minh, Đông Tảo, Đa Cựa,…) Gà Nhạn Chân Xanh thuộc nhóm giống gà Nịi ĐBSCL có ngoại hình đặc biệt màu lơng màu chân Gà Nhạn Chân Xanh nhiều người chăn nuôi quan tâm đặc tính quý gà địa tính chiến đấu giỏi Trước chưa có nghiên cứu gà Nhạn Chân Xanh Gần gà Nhạn Chân Xanh số tỉnh quan tâm đưa vào danh mục bảo tồn (trong có tỉnh Cà Mau) Thực tế, hiểu gà Nhạn Chân Xanh hạn chế, điểm bật đặc điểm ngoại hình, khả sinh trưởng, tập tính, suất sinh sản đa dạng di truyền chưa có nghiên cứu thực cách đồng có hệ thống Ngay khả sinh trưởng suất sinh sản chưa đánh giá cách cụ thể, kích thước số chiều đo chưa xác định nên việc nuôi chúng chưa xác định rõ ràng Vì vậy, việc triển khai nghiên cứu “Một số đặc điểm ngoại hình, tập tính di truyền gà Nhạn Chân Xanh” cần thiết 1.2 Mục tiêu Nhận diện số đặc điểm ngoại hình, tập tính di truyền gà Nhạn Chân Xanh, hỗ trợ cho công tác bảo tồn phát triển nguồn gen gà địa 1.3 Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn Cung cấp thông tin số đặc điểm gà Nhạn Chân Xanh, đồng thời làm phong phú thêm tính đa dạng sinh học đa dạng di truyền giống gà địa, hỗ trợ phục vụ công tác bảo tồn phát triển nguồn gen vật nuôi nông nghiệp bền vững tương lai 1.4 Những đóng góp đề tài - Mơ tả đặc điểm ngoại hình số tập tính gà Nhạn Chân Xanh - Bước đầu xác lập mối quan hệ di truyền gà Nhạn Chân Xanh với số giống gà địa khác Đồng thời, ghi nhận tần số kiểu gen/alen gen MC1R đến tính trạng màu lơng CHƯƠNG PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đề tài thực nội dung: 3.1 Nội dung 1: Đánh giá đặc điểm ngoại hình, tập tính, khả sinh trưởng suất sinh sản gà Nhạn Chân Xanh 3.1.1 Đặc điểm ngoại hình Ngoại hình ghi nhận đặc điểm màu sắc lông, màu chân, màu mắt, màu mỏ kiểu mào ghi nhận lúc gà đạt 20 tuần tuổi, thông qua phương pháp mô tả dựa quan sát trực tiếp chụp ảnh 3.1.2 Tập tính a Tập tính lựa chọn thức ăn Thí nghiệm tiến hành nhằm đánh giá tỷ lệ thực liệu đơn gà tự chọn theo nhu cầu qua giai đoạn tuổi Tổng số 240 gà Nhạn Chân Xanh (120 trống 120 mái) phân chia vào ô chuồng Mỗi ô chuồng nhốt 40 gà trống mái Mỗi có bố trí cốc thức ăn máng nước uống bên ngồi vách chuồng thí nghiệm Tất loại thức ăn thí nghiệm gồm 14 loại nguyên liệu: lúa, gạo, bắp nguyên hạt, bắp mảnh, 1, 3, khô dầu nành, bột cá, đậu xanh nguyên hạt, thức ăn hỗn hợp dạng mảnh (TAHH2) thức ăn hỗn hợp dạng viên (TAHH1), bột cỏ, sỏi nhỏ sỏi lớn cân hàng ngày cho vào cốc riêng Lượng thức ăn thừa ghi nhận loại bỏ hàng ngày, đảm bảo thức ăn Các tiêu theo dõi gồm: lượng thức ăn ăn vào (ghi nhận 14 ngày liên tục) lượng dưỡng chất ăn vào theo thực liệu, theo kích cỡ hạt (kích cỡ 1: ≥ gạo gồm gạo, lúa, thức ăn hỗn hợp dạng viên, bắp nguyên hạt, đậu xanh nguyên hạt, sỏi lớn; kích cỡ 2: < gạo 1, 3, thức ăn hỗn hợp dạng bột, bắp mảnh, khô dầu nành, bột cá, bột cỏ, sỏi nhỏ), tăng khối lượng, hệ số chuyển hóa thức ăn giai đoạn tuổi khác (7-8, 11-12 15-16 tuần tuổi) b Tập tính đậu sào Tổng số 240 gà Nhạn Chân Xanh (120 trống 120 mái) lúc tuần tuổi phân chia vào ô chuồng Mỗi ô nhốt 40 gà trống mái Trong chuồng, sào bố trí với độ cao khác 0,5; 1,0; 1,5 2,0 m theo hình thang Từ tuần tuổi thứ đến kết thúc thí nghiệm tuần tuổi thứ 16 số lượng gà đậu sào độ cao khác ghi nhận cách quan sát trực tiếp thông qua hệ thống camera thời điểm 5:00, 6:00, 10:00, 14:00, 18:00 22:00 Số liệu ghi nhận suốt ngày tuần c Tập tính tắm cát Tổng số 60 gà Nhạn Chân Xanh (30 trống 30 mái) lúc 15 tuần tuổi phân chia vào ô chuồng Mỗi ô nhốt 15 gà trống mái Trong chuồng, máng cát bố trí chuồng Số lượt gà tắm cát thời gian gà tắm cát ghi nhận cách quan sát trực tiếp thông qua hệ thống camera từ sáng đến 17 chiều, lặp lại ngày liên tục 3.1.3 Khả sinh trưởng Nghiên cứu tiến hành 60 gà Nhạn Chân Xanh (30 trống 30 mái) Trong giai đoạn 0-4 ngày tuổi, gà Nhạn Chân Xanh nuôi nhốt tập trung với mật độ 10 con/m2 cho ăn tự thức ăn hỗn hợp có 19% đạm thô 3.050 Kcal/kg lượng trao đổi Sau gà thả vườn trồng dừa, chuối, bưởi kết hợp với rào lưới bao xung quanh, diện tích thả nuôi m2/con Giai đoạn từ 4-10 tuần tuổi, gà cho ăn thức ăn hỗn hợp chứa 18% đạm thô 3.150 Kcal/kg lượng trao đổi Giai đoạn 10-20 tuần tuổi, gà cho ăn lúa Trong q trình thí nghiệm, gà tiêm phịng theo hướng dẫn Chi cục Chăn nuôi Thú y Vĩnh Long Các tiêu ghi nhận: (1) Khối lượng: cân khối lượng cá thể vào buổi sáng trước cho gà ăn, thời điểm ngày tuổi, 4, 8, 12, 16 20 tuần tuổi (g/con) cân điện tử có độ xác 0,01 g (gà 12 tuần tuổi) cân đồng hồ kg kg (gà 12 tuần tuổi); (2) Kích thước chiều đo thể: dài mỏ, dài thân, dài cổ, dài lườn, dài cánh, sâu ngực, dài đùi, cao chân, vòng chân đo thước dây thước kẹp Panme theo phương pháp mô tả Bùi Hữu Đoàn ctv (2011) thời điểm ngày, 4, 8, 12, 16 20 tuần tuổi 3.1.4 Năng suất sinh sản Quần thể gà từ thí nghiệm tập tính ăn phân chia thành gia đình Mỗi nhóm gia đình gồm trống mái ni chuồng, có lắp đặt camera quan sát Trứng thu nhận hàng ngày, đánh dấu bút lơng, sau tiến hành cân khối lượng xác định số hình dáng ngày Sau 3-5 ngày đem ấp để xác định tỷ lệ trứng có phơi tỷ lệ nở Các tiêu tính theo Bùi Hữu Đồn ctv (2011) 3.2 Nội dung 2: Đánh giá đa dạng di truyền gà Nhạn Chân Xanh 3.2.1 Đa hình locus microsatellite quần thể gà Nhạn Chân Xanh Nghiên cứu thực quần thể gà địa khu vực phía Nam gồm gà Nhạn Chân Xanh (n=50), gà Tre (n=10) gà Ác (n=10) Gà thu thập từ địa phương Cà Mau, Vĩnh Long Trà Vinh Nghiên cứu sử dụng 14 cặp mồi theo đề nghị FAO (2011) để phân tích đa hình di truyền giống gà Tách chiết ADN từ lông: mẫu lông tách chiết proteinase K, sử dụng nồng độ muối cao để loại bỏ protein Thành phần cho phản ứng PCR: (10l) chứa thành phần gồm 1X PCR buffer, 2,5 mM Mg2+, 0,25 mM dNTP, 0,25 pM mồi xuôi, 0,25 pM mồi ngược, 0,5 U Taq polymerase, 100 ng ADN Phản ứng PCR (35 chu kỳ) tiến hành với chu trình nhiệt sau: 95oC thời gian phút, 94oC thời gian 30 giây, TaoC thời gian 45 giây (nhiệt độ bắt cặp cặp mồi sau tối ưu hóa), 72oC thời gian phút, hoàn tất tổng hợp 72oC thời gian 10 phút Các sản phẩm khuếch đại điện gel polyacrylamide 10% Các band ADN khác kích thước phân tử so sánh phương pháp ước lượng so với thang chuẩn 3.2.2 Đa dạng di truyền vùng D-loop gà Nhạn Chân Xanh Sẽ chọn mẫu tiêu biểu từ quần thể gà Nhạn Chân Xanh (n=18), gà Tre (n=10) gà Ác (n=10) thu thập để tiến hành phân tích D-loop Sử dụng ADN tách chiết mục 3.2.1 để thực bước Thành phần phản ứng PCR: sử dụng cặp mồi đặc hiệu có trình tự: F: 5’-AGGACTACGGCTTGAAAAGC-3’; R: 5’CATCTTGGCATCTTCAGTGCC-3’ dựa trình tự gen mã số L16750 (Ericksson et al., 2008) để khuếch đại Phản ứng PCR thực với tổng thể 25µl có chứa 1x PCR Buffer, 1,5 mM MgCl2, 1,25 mM dNTPs, mồi pM, Taq-polymerase 1U (Fermentas) 100 ng ADN khuôn Chu kỳ nhiệt phản ứng PCR gồm, biến tính ban đầu 94oC phút, sau 35 chu kỳ biến tính 94oC 45 giây, ủ 56oC 45 giây tổng hợp 72oC 90 giây kéo dài tổng hợp 72oC phút Giải trình tự ADN ABI (3100 Genetic Analyzer, Applied Biosystems) 3.2.3 Đặc điểm cDNA tần số kiểu gen/alen gen MC1R (i) Đặc điểm cDNA gen MC1R-Melenocortin Receptor Cặp mồi đặc hiệu F: 5’-CCAGTGAGGGCAACCAGA-3’ R: 5’-CTCCGGAAGGCATAGATCAG-3’ Mẫu máu từ 10 cá thể gà Nhạn Chân Xanh hệ không trùng huyết thống thu thập để ly trích ARN (Sử dụng Hybrid-RTM Blood RNA kit từ GeneAll, Korea) Mẫu ARN sau tinh tổng hợp thành cDNA cách sử dụng High Capacity ARN to cDNA kit (Applied Biosystems) Sản phẩm PCR sau tinh gửi đến Viện/Cơng ty để giải mã trình tự cDNA Dựa vào kết giải mã trình tự chuỗi, đặc điểm cDNA protein mô thông qua phần mềm (ii) Tần số kiểu gen alen gen MC1R Tần số kiểu gen alen c.T69C đánh giá phương pháp PCR/ADN-RFLP quần thể gà Nhạn Chân Xanh (n=30), Nòi ô (n=30) gà Tre (n=30) Cặp primer chu trình nhiệt sử dụng tham khảo từ Hoque et al (2013) khuếch đại đoạn 1050 bp chứa vùng mã hóa 945 bp Thành phần cho phản ứng PCR: (10l) chứa thành phần gồm 1X PCR buffer, 2,5 mM Mg2+, 0,25 mM dNTP, 0,25 pM mồi xuôi, 0,25 pM mồi ngược, 0,5 U Taq polymerase, 100 ng ADN Chu trình nhiệt cho phản ứng PCR: Phản ứng PCR (35 chu kỳ) tiến hành với chu trình nhiệt sau: 95oC thời gian phút, 94oC thời gian 30 giây, 61oC thời gian 45 giây (nhiệt độ bắt cặp cặp mồi sau tối ưu hóa), 72oC thời gian phút, hoàn tất tổng hợp 72oC thời gian 10 phút Đánh giá kiểu gen: Để đánh giá khác biệt kiểu gen quần thể thí nghiệm, kỹ thuật đa hình chiều dài đoạn cắt giới hạn (Restriction Fragment Length Polymorphisms, PCR-RFLP) sử dụng Theo đó, sản phẩm PCR dùng làm nguyên liệu cho phản ứng sử dụng enzyme cắt hạn chế BsrDI Các đoạn ADN nhận diện gel agarose 3% giải trình tự 3.3 Xử lý số liệu Số liệu thô xử lý sơ Microsoft Excel 2013, sau tiến hành phân tích thống kê mơ tả phân tích phương sai (ANOVA) theo mơ hình tuyến tính tổng quát (GLM) phần mềm Minitab 16.1.0 Số lượng alen tần suất alen xác định phần mềm Genepop V4.2; độ dị hợp tử mong đợi (He), dị hợp tử quan sát (Ho), giá trị thống kê F xử lý phần mềm Fstat V2.9.3.2 Hàm lượng thơng tin đa hình (PIC) tính dựa theo Botstein et al., (1980) Khoảng cách di truyền phân tích phần mềm Biodiversity Pro V2 Kết đọc trình tự, so sánh trình tự gen phân tích phần mềm BioEdit Các tham số đa dạng di truyền số lượng đa hình đặc trưng, số lượng haplotype, kiểu haplotype, số đa dạng haplotype, số đa dạng nucleotide ước tính phần mềm DnaSP v.5 Xây dựng phả hệ di truyền phần mềm Mega-X Tần số kiểu gen alen tính tốn dựa vào kết PCR RFLP với Chi square test CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Đặc điểm ngoại hình, tập tính, khả sinh trưởng suất sinh sản gà Nhạn Chân Xanh 4.1.1 Đặc điểm ngoại hình gà Nhạn Chân Xanh Lúc nở, gà có lớp lơng tơ màu trắng ngà, vùng lưng có màu trắng sáng vùng đầu, chân màu xanh nhạt, mỏ màu trắng hồng Sau tuần, lơng cánh, lơng mọc có màu trắng tuyền Khi trưởng thành, lơng tồn thân có màu trắng tuyền óng mượt chân màu xanh vỏ đậu Đây màu đặc trưng nhóm gà Nhạn Chân Xanh Màu sắc lơng Đặc điểm ngoại hình đặc biệt gà Nhạn Chân Xanh màu lông trắng tồn thân chân có màu xanh đặc trưng Theo ghi nhận Trần Thị Kinh Anh ctv (2008), màu lông trắng xuất mái nhiều trống Chọi (6,67% vs 6,59%) Bảng 4.1: Một số đặc điểm ngoại hình gà Nhạn Chân Xanh (20 tuần tuổi) Mái Trống Tổng cộng Chỉ tiêu Số Tỷ lệ Số Tỷ lệ Số Tỷ lệ lượng (%) lượng (%) lượng (%) 30 100 30 100 60 100 Màu chân xanh 30 100 30 100 60 100 Màu lông trắng Màu mắt Vàng 16 53,33 12 40,00 28 46,67 Cam 14 46,67 18 60,00 32 53,33 Màu mỏ Trắng 26,67 20,00 14 23,33 Vàng 22 73,33 24 80,00 46 76,67 Kiểu mào Lá 13 43,33 11 36,67 24 40,00 Dâu 17 56,67 19 63,33 36 60,00 Màu sắc mắt Kết cho thấy, màu sắc mắt gà Nhạn Chân Xanh không đa dạng, tập trung màu màu vàng màu cam Mắt có màu cam chiếm đa số (53,33%), màu vàng chiếm (46,67%) Sự khác biệt kích thước quần thể nghiên cứu cịn Mới nở Tuần Tuần 12 Tuần 16 Mái tuần 20 Trống tuần 20 Khối lượng thể, mức tăng khối lượng trung bình hàng ngày hệ số chuyển hóa thức ăn (FCR) gà Nhạn Chân Xanh từ đến 16 tuần tuổi trình bày Bảng 4.3 Bảng 4.3: Khối lượng, tăng khối lượng hệ số chuyển hóa thức ăn (FCR) theo giới tính theo giai đoạn tuổi Khối lượng đầu kỳ (g/con) Khối lượng cuối kỳ (g/con) ADG (g/con/ngày) 860,75 775,27 1043,55 926,74 13,06 10,82 6,23 8,40 420,98c 777,73b 1255,31a 557,71c 969,61b 1428,11a 9,77 13,71 12,34 7,26 5,92 8,77 439,07d 815,29c 1327,89a 402,89d 740,17c 1182,74b 593,40d 1019,78c 1517,46a 522,02d 919,43c 1338,76b 11,02 14,61 13,54 8,51 12,80 11,14 5,01 5,80 7,88 9,51 6,04 9,66 14,60 17,88 25,29 19,56 23,95 33,87 1,06 1,30 1,84 0,65 0,80 1,13 0,001 0,000 0,134 0,001 0,000 0,297 0,162 0,136 0,979 0,036 0,077 0,204 FCR Giới tính Trống Mái Tuần tuổi 07-8 11-12 15-16 Giới tính*tuần tuổi Trống 07-8 11-12 15-16 Mái 07-8 11-12 15-16 SEM Giới tính Tuần tuổi Giới tính*tuần tuổi P Giới tính Tuần tuổi Giới tính*tuần tuổi ADG: tăng khối lượng, FCR: hệ số chuyển hóa thức ăn; Các giá trị trung bình mang chữ a, b, c, d cột khác biệt có ý nghĩa thống kê mức p