chỉ tiêu vi sinh

Phương pháp phân tích tiêu vi sinh 01 Định lượng Coliform Kỹ thuật đếm khuẩn lạc ( định hình ) - Sữa trùng Kỹ thuật đếm số có xác xuất lớn ( định lượng ) - Sữa trùng Siro dâu tằm 05 1.1 Sữa trùng Phương pháp Ưu điểm Kỹ thuật đếm khuẩn lạc Có phép xác định số tế bào sống Nhược điểm Định lượng chọn lọc vi sinh Kỹ thuật đếm số có xác suất lớn Phát nhanh Định lượng vsv thấp thể tích mẫu lớn Khơng định lượng Kỹ thuật đếm khuẩn lạc Nguyên tắc: • Cấy phần mẫu thử vào ống nghiệm chứa môi trường tăng sinh chọn lọc ủ o o 24h 30 C 37 C • Khi ống thu cho thấy có màu đục sinh khí cấy tiếp vào ống o o đựng môi trường khẳng định ủ 30 C 37 C 24h 48h • Sau kiểm tra ống thu cho thấy đục hình thành khí khẳng định có mặt coliform 05 Kỹ thuật đếm khuẩn lạc Môi trường tăng sinh chọn lọc Canh thang tryptoza sulfat Môi trường nồng độ kép Môi trường nồng độ đơn 40g 20g Lactoza 10g 5g Dikali hydro phosphat 5.5g 2.75g Kali dihydro phosphat 5.5g 2.75g Natri clorua 10g 5g Natri lauryl sulfat 0.2 g 0.1 g Nước 1000ml 1000ml Dịch thủy phân protein sữa protein động vật enzym 05 Kỹ thuật đếm khuẩn lạc Môi trường tăng sinh chọn lọc Canh thang mật lactoza lục sáng (lactose bile brilliant green broth) 05 Dịch thủy phân casein enzym 10 g Lactoza (C12H22O11.H2O) 10 g Mật bị khơ 20 g Lục sáng 0,0133 g Nước 000 ml Kỹ thuật đếm khuẩn lạc Chuẩn bị chuỗi pha loãng mẫu Cấy mẫu vào mơi trường 05 Pha lỗng mẫu theo dãy thập phân 1.2 Siro Nguyên tắc: Cấy vào ba ống nghiệm chứa môi trường tăng sinh chọn lọc lỏng nồng độ kép lượng mẫu thử xác định Cấy vào ba ống nghiệm chứa môi trường tăng sinh chọn lọc lỏng nồng độ đơn lượng mẫu thử xác định Sau đó, điều kiện, cấy ống chứa môi trường với dịch pha loãng thập phân phần mẫu thử huyền phù ban đầu o o Ủ ấm 30  C 37  C ống chứa môi trường tăng sinh chọn lọc nồng độ kép 24 h ống chứa môi trường nồng độ đơn 24 h 48 h sau kiểm tra sinh khí mờ đục làm cản trở việc phát sinh khí ống Từ ống chứa môi trường tăng sinh chọn lọc nồng độ kép ống chứa môi trường tăng sinh chọn lọc nồng độ đơn có sinh khí mờ đục làm cản trở việc sinh khí, dịch cấy để cấy vào loạt ống chứa môi trường khẳng định o o Ủ ấm ống 4.2.4 30  C 37  C 24 h 48 h, sau kiểm tra loạt ống sinh khí Tính số có xác suất lớn coliform có mililit gam mẫu (tức số MPN) từ số ống có sinh khí loạt ống thử Dùng bảng để xác định số có xác suất lớn Kỹ thuật đếm số có xác suất lớn Mơi trường tăng sinh chọn lọc Môi trường tăng sinh chọn lọc: Canh thang tryptoza lauryl sulfat   Môi trường nồng độ kép Môi trường nồng độ đơn Dịch thủy phân protein sữa protein động vật 40 g 20 g Lactoza (C12H22O11.H2O) 10 g 5g Dikali hydro phosphat (K 2HPO4) 5,5 g 2,75 g Kali dihydro phosphat (KH2PO4) 5,5 g 2,75 g Natri clorua 10 g 5g Natri lauryl sulfat 0,2 g 0,1 g Nước 000 ml 000 ml enzym 05 Kỹ thuật đếm số có xác suất lớn Mơi trường tăng sinh chọn lọc Dịch thủy phân casein enzym 10 g Lactoza (C12H22O11.H2O) 10 g Mật bị khơ 20 g Lục sáng 0,0133 g Nước 000 ml 05 Kỹ thuật đếm số có xác suất lớn 05 Kỹ thuật đếm số có xác suất lớn 05 Chuẩn bị ống nghiệm có chứa mơi trường thích hợp cho tặng trưởng đối tượng vsv cần định lượng Cấy thể tích xác định dung dịch mẫu có nồng độ pha lỗng bậc 10 liên tiếp Kỹ thuật đếm số có xác suất lớn Đem ống nghiệm ủ điều kiện thích hợp 05 Quan sát biểu chứng minh phát triển vsv cần kiểm định Kỹ thuật đếm số có xác suất lớn Ghi nhận số lượng ống nghiệm dương tính độ pha lỗng 05 Kỹ thuật đếm số có xác suất lớn 05 ... môi trường tăng sinh chọn lọc nồng độ kép 24 h ống chứa môi trường nồng độ đơn 24 h 48 h sau kiểm tra sinh khí mờ đục làm cản trở vi? ??c phát sinh khí ống Từ ống chứa môi trường tăng sinh chọn lọc... môi trường tăng sinh chọn lọc nồng độ kép ống chứa môi trường tăng sinh chọn lọc nồng độ đơn có sinh khí mờ đục làm cản trở vi? ??c sinh khí, dịch cấy để cấy vào loạt ống chứa môi trường khẳng định... tắc: Cấy vào ba ống nghiệm chứa môi trường tăng sinh chọn lọc lỏng nồng độ kép lượng mẫu thử xác định Cấy vào ba ống nghiệm chứa môi trường tăng sinh chọn lọc lỏng nồng độ đơn lượng mẫu thử xác