Phân lập và định danh một số chỉ tiêu vi sinh vật thường gặp trong thực phẩm tại viện Pasteur TP. HCM

99 724 0
Phân lập và định danh một số chỉ tiêu vi sinh vật thường gặp trong thực phẩm tại viện Pasteur TP. HCM

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Thông tin tài liệu

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC MỞ TP HCM BÁO CÁO THỰC TẬP TỐT NGHIỆP Tên đề tài: PHÂN LẬP VÀ ĐỊNH DANH MỘT SỐ CHỈ TIÊU VI SINH VẬT THƯỜNG GẶP TRONG THỰC PHẨM TẠI VIỆN PASTEUR TP HCM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC CHUYÊN NGÀNH: VI SINH - SINH HỌC PHÂN TỬ CBHD : ThS Nguyễn Thị Nguyệt SVTH : Hồ Thị Quyên MSSV : 1453010283 Khóa : 2014-2018 Tp Hồ Chí Minh, tháng 01 năm 2018 LỜI CẢM ƠN Trong sống, có lẽ làm tốt việc thiếu quan tâm, giúp đỡ từ người khác điều em xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến ThS Nguyễn Thị Nguyệt, người chị, người thầy tận tình hướng dẫn, bảo giúp đỡ em suốt trình nghiên cứu thực tập tốt nghiệp Em xin chân thành gửi lời cảm ơn đến anh, chị phòng Vi sinh Nước - Thực phẩm tạo điều kiện thuận lợi để em có hội học hỏi, trao dồi thêm kiến thức chuyên môn lẫn kinh nghiệm sống Em xin gửi lời cảm ơn đến quý thầy cô Khoa Công nghệ sinh học Trường Đại học Mở Tp Hồ Chí Minh tận tình truyền đạt kiến thức kinh nghiệm quý báu suốt năm đại học vừa qua chúng em có hành trang vững đủ tự tin rời khỏi ghế nhà trường Cảm ơn bạn bè em thực tập phịng thí nghiệm Vi sinh Nước Thực phẩm, Viện Pasteur Tp Hồ Chí Minh ln bên cạnh giúp đỡ em trải qua lúc khó khăn thực đề tài Cuối con/em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến gia đình, đặc biệt cha mẹ, anh chị, người thân yêu khác ủng hộ, khích lệ tạo cho em động lực vượt qua khó khăn, trở ngại Do thời gian làm đề tài thực tập có hạn, khơng thể tránh khỏi thiếu sót nội dung trình bày Kính mong nhận thơng cảm góp ý từ q thầy để em rút nhiều học quý báu cho Em xin chân thành cảm ơn! Thành phố Hồ Chí Minh, ngày tháng 01 năm 2018 Hồ Thị Quyên i MỤC LỤC  LỜI CẢM ƠN i  DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT .ii  DANH MỤC CÁC BẢNG .iii  DANH MỤC SƠ ĐỒ/BIỂU ĐỒ .iv  DANH MỤC HÌNH ẢNH .v ĐẶT VẤN ĐỀ .1 CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 VIỆN PASTEUR TP HỒ CHÍ MINH 1.1.1 Lịch sử hình thành 1.1.2 Chức năng, nhiệm vụ .4 1.1.3 Thành tựu đạt 1.1.4 Giới thiệu phòng Vi sinh Nước - Thực phẩm 1.2 PHƯƠNG PHÁP CƠ BẢN TRONG PHÂN TÍCH, KIỂM NGHIỆM VSV 2.2.1 Phương pháp phân lập vi sinh vật 2.2.2 Phương pháp định danh vi sinh vật 2.2.3 Phương pháp kiểm nghiệm vi sinh vật 16 1.3 MỘT SỐ VI SINH VẬT THƯỜNG GẶP TRONG THỰC PHẨM 20 1.3.1 Tổng số vi sinh vật hiếu khí 20 1.3.2 Salmonella .21 1.3.4 Escherichia coli .22 1.3.3 Clostridium perfringens 23 1.3.5 Staphylococcus aureus 24 CHƯƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25 2.1 VẬT LIỆU .26 2.1.1 Địa điểm, thời gian nguyên liệu thực tập 26 2.1.2 Trang thiết bị, dụng cụ 26 2.2 PHƯƠNG PHÁP KIỂM NGHIỆM 29 2.2.2 Tổng số vi sinh vật hiếu khí (ISO 4833-1:2013) 29 2.2.1 Salmonella (ISO 6579-1:2017) .31 2.2.4 Escherichia coli giả định (ISO 7251: 2005/TCVN 6848: 2007) 34 2.2.3 Clostridium perfringens (ISO 7937:2004/TCVN 4991:2005) 36 2.2.5 Staphylococcus aureus (ISO 6888-1:1999/TCVN 4830-1:2005) 38 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 40 3.1 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 40 3.1.1 Kết nhiễm khuẩn đánh giá theo nhóm thực phẩm 40 3.1.2 Kết nhiễm khuẩn đánh giá theo tiêu xét nghiệm .43 3.1.5 Kết nhiễm Escherichia coli giả định nhóm thực phẩm 46 3.1.6 Kết nhiễm Clostridium perfringens nhóm thực phẩm 47 3.1.7 Kết nhiễm Staphylococcus aureus nhóm thực phẩm 49 3.1.8 Kết nhiễm Salmonella nhóm thực phẩm 50 3.2 THẢO LUẬN 52 3.2.1 Tỷ lệ nhiễm khuẩn nhóm thực phẩm 52 3.2.2 Tỷ lệ nhiễm tiêu VSV 53 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 54 4.1 KẾT LUẬN 54 4.2 KIẾN NGHỊ 55 TÀI LIỆU THAM KHẢO 56 PHỤ LỤC 58 DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT VSATTP : Vệ sinh An toàn Thực phẩm VSV : Vi sinh vật CFU : Colony Forming Unit MPN : Most probable number ISO : International Orgazation for Standardization TCVS : Tiêu chuẩn vi sinh QCVN : Quy chuẩn Việt Nam PCA : Plate count agar EP : Nước muối sinh lí (0,9%) HEK : Hektoen Enteric Agar XLD : Xylose Lysine Dexycholate Agar KMTTn : Muller - Kaufman Tetrathionate - Novobiocin Broth RVS : Rappaport Vasillia KIA : Kligler Iron Agar TLS : Lactose Tryptone Lautyl Sulphate Broth EC : Escherichia coli broth TSC : Tryptone Sulfide Cycloserine Agar BP : Baird Parked Agar BHI : Brain heart infusion broth TSVSVHK : Tổng số vi sinh vật hiếu khí Sal : Salmonella spp E coli : Escherichia coli S aureus : Staphylococcus aureus C perfringens : Clostridium perfringens ii DANH MỤC CÁC BẢN Bảng 1.1 So sánh kỹ thuật cấy trang đổ đĩa Bảng 1.2 Khả sử dụng nguồn Cacbon vi sinh vật 12 Bảng 1.3 Hướng dẫn đọc kết API 10S 15 Bảng 1.4 So sánh phương pháp Đếm khuẩn lạc MPN .17Y Bảng 3.1 Chỉ tiêu xét nghiệm quy chuẩn đánh giá cho nhóm thực phẩm .40 Bảng 3.2 Kết đánh giá tỷ lệ nhiễm VSV phân tích theo nhóm thực phẩm 41 Bảng 3.3 Kết đánh giá theo tiêu vi sinh vật 43 Bảng 3.4 Kết kiểm nghiệm TSVSVHK nhóm thực phẩm 44 Bảng 3.5 Kết kiểm nghiệm E coli giả định nhóm thực phẩm .46 Bảng 3.6 Kết kiểm nghiệm C perfringen nhóm thực phẩm 47 Bảng 3.7 Kết kiểm nghiệm S aureus nhóm thực phẩm 49 Bảng 3.8 Kết kiểm nghiệm Salmonella nhóm thực phẩm 50 iii DANH MỤC SƠ ĐỒ/BIỂU ĐỒ Sơ Sơ đồ 1.1 Sơ đồ tổ chức chung viện Pasteur Tp HCM 6Y Sơ đồ 2.1 Định lượng tổng số vi sinh vật hiếu khí 30°C 30 Sơ đồ 2.2 Phát Salmonella đĩa thạch 33 Sơ đồ 2.3 Định lượng Escherichichia coli giả định 35 Sơ đồ 2.4 Định lượng Clostridium perfringens đĩa thạch 37 Sơ đồ 2.5 Định lượng Staphylococcus aureus đĩa thạch 39 Biểu đồ Biểu đồ 3.1 Mức độ nhiễm vi sinh vật theo nhóm thực phẩm 42 Biểu đồ 3.2 Mức độ nhiễm tiêu xét nghiệm 43 Biểu đồ 3.3 Kết kiểm nghiệm TSVSVHK nhóm thực phẩm 45 Biểu đồ 3.4 Kết kiểm nghiệm E coli giả định nhóm thực phẩm 46 Biểu đồ 3.5 Kết kiểm nghiệm C perfringen nhóm thực phẩm 48 Biểu đồ 3.6 Kết kiểm nghiệm S aureus nhóm thực phẩm 49 Biểu đồ 3.7 Kết kiểm nghiệm Salmonella nhóm thực phẩm .51 iv DANH MỤC HÌNH ẢN Hình 1.1 Viện Pasteur Tp HCM ngày Hình 1.2 Phịng Vi sinh Nước - Thực phẩm Hình 1.3 Kết thử nghiệm Indol 10 Hình 1.4 Kết thử nghiệm Coagulase 11 Hình 1.5 Kết thử nghiệm Urease 12 Hình 1.6 Kết thử nghiệm KIA 13 Hình 1.7 Kết thử nghiệm Lysine 14 Hình 1.8 Strip Api- 10S lúc chưa sử dụng 16 Hình 1.9 Máy điếm khuẩn lạc tự động 17 Hình 1.10 Khuẩn lạc vi sinh vật hiếu khí đĩa thạch PCA 20 Hình 1.11 Vi khuẩn Salmonella kính hiển vi điện tử 21 Hình 1.12 Vi khuẩn Escherichia coli kính hiển vi điện tử .22 Hình 1.13 Vi khuẩn Clostridium perfringens kính hiển vi điện tử 23 Hình 1.14 Vi khuẩn Staphylococcus aureus kính hiển vi điện tử 24 Hình 1.15 Nhiễm trùng ngồi da gây S aureus .25Y Hình 2.1 Dãy tủ ấm dùng cho nuôi cấy vi sinh vật 26 Hình 2.2 Dãy tủ lạnh dùng cho bảo quản mơi trường, hóa chất 27 Hình 2.5 Máy dập mẫu 28 Hình 2.3 Buồng đốt que cấy 28 Hình 2.4 Tủ an toàn sinh học cấp 28 v Báo cáo thực tập tốt nghiệp năm học 2017-2018 ĐẶT VẤN ĐỀ Nhu cầu thực phẩm thiết yếu người, đời sống ngày tăng lên vấn đề ăn uống lại khơng cịn đảm bảo tình trạng ngộ độc thực phẩm mắc bệnh có liên quan đến sử dụng thực phẩm Trên giới, theo trung tâm kiểm sốt phịng ngừa dịch bệnh Hoa Kỳ (CDC) ước tính năm có khoảng 48 triệu người mắc bệnh, 128.000 người nhập viện 3.000 người tử vong bệnh liên quan đến thực phẩm năm Hoa Kỳ Một nguyên nhân xác định vi sinh vật gây [16] Ở nước ta, theo ghi nhận Bộ Y tế số vụ ngộ độc thực phẩm năm 2017 giảm số trường hợp tử vong lại tăng gấp đôi Cụ thể, năm nước ghi nhận 139 vụ ngộ độc thực phẩm với 3.869 người mắc, giảm 27 vụ 438 người mắc so với năm 2016 Số người tử vong ngộ độc thực phẩm 24 người, tăng 12 người so với năm 2016 [15] Đáng ý, địa bàn tỉnh phía Nam nước ta tình hình ngộ độc thực phẩm gần diễn biến phức tạp Cụ thể vào ngày 17/03/2017, trung tâm Y tế huyện Châu Thành, tỉnh Tiền Giang tiếp nhận trường hợp nhập viện ngộ độc thực phẩm sau uống sữa phát trường 50 học sinh trường tiểu học Kim Sơn tình trạng đau bụng, nơn mửa sốt cao [13] Vào ngày 01/07/2017, xảy vụ ngộ độc thực phẩm Công Ty TNHH An Giang Samho làm cho 500 công nhân bị buồn nôn, đau bụng, tiêu chảy khó thở phải nhập viện điều trị khẩn cấp, nguyên nhân xác định đặt phải thức ăn sở nấu nướng bên ngồi khơng đảm bảo điều kiện VSATTP [14] Có nhiều nguyên nhân khác dẫn tới ngộ độc thực phẩm phần lớn trường hợp có nguồn gốc từ vi sinh vật, diện vi sinh vật gây bệnh hay độc tố tiết vi sinh vật [5] Đáng ý năm 2017, tiến hành kiểm tra gần 10.000 mẫu thực phẩm chợ, sở giết mổ tỷ lệ vi phạm tiêu vi sinh chiếm tới 26,7% số mẫu kiểm tra tăng cao so với mức SVTH: Hồ Thị Quyên Báo cáo thực tập tốt nghiệp năm học 2017-2018 9,35% năm 2016 [15] Bởi vậy, kiểm sốt vi sinh yêu cầu tất yếu sản phẩm thực phẩm nào, tiêu vi sinh kiểm nghiệm chủ yếu tổng số vi sinh vật hiếu khí, Salmonella, Clostridium perfringens, Escherichia coli, Staphylococcus aureus Tôi tiến hành thực đề tài “Phân lập định danh số tiêu vi sinh vật thường gặp thực phẩm Viện Pasteur Tp Hồ Chí Minh” để đánh giá mức độ nhiễm vi sinh vật số nhóm thực phẩm, thống kê tỷ lệ nhiễm loại vi sinh vật, đồng thời so sánh với nghiên cứu trước để từ có nhìn tình trạng VSATTP nay, cung cấp thêm kiến thức giúp người tiêu dùng có lựa chọn thơng thái để bảo vệ sức khỏe cho thân, gia đình cộng đồng SVTH: Hồ Thị Quyên ... cầu cần cho vi? ??c định danh vi sinh vật Vi? ??c định danh thực dựa vào đặc điểm kiểu hình, đặc biệt phản ứng sinh hóa thực vi sinh vật Có nhiều cách để định danh vi sinh vật như: định danh theo phương... định danh số tiêu vi sinh vật thường gặp thực phẩm Vi? ??n Pasteur Tp Hồ Chí Minh” để đánh giá mức độ ô nhiễm vi sinh vật số nhóm thực phẩm, thống kê tỷ lệ nhiễm loại vi sinh vật, đồng thời so sánh... BẢN TRONG PHÂN TÍCH, KIỂM NGHIỆM VSV 2.2.1 Phương pháp phân lập vi sinh vật 2.2.2 Phương pháp định danh vi sinh vật 2.2.3 Phương pháp kiểm nghiệm vi sinh vật 16 1.3 MỘT

Ngày đăng: 30/04/2018, 17:08

Từ khóa liên quan

Mục lục

  • LỜI CẢM ƠN

  • DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT

  • DANH MỤC CÁC BẢNG

  • DANH MỤC SƠ ĐỒ/BIỂU ĐỒ

  • DANH MỤC HÌNH ẢNH

  • ĐẶT VẤN ĐỀ

  • CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU

    • 1.1. VIỆN PASTEUR TP. HỒ CHÍ MINH

      • 1.1.1. Lịch sử hình thành

      • 1.1.2. Chức năng, nhiệm vụ

      • 1.1.3. Thành tựu đạt được

      • 1.1.4. Giới thiệu phòng Vi sinh Nước - Thực phẩm

      • 1.2. PHƯƠNG PHÁP CƠ BẢN TRONG PHÂN TÍCH, KIỂM NGHIỆM VSV

        • 2.2.1. Phương pháp phân lập vi sinh vật

        • 2.2.2. Phương pháp định danh vi sinh vật

        • 2.2.3. Phương pháp kiểm nghiệm vi sinh vật

        • 1.3. MỘT SỐ VI SINH VẬT THƯỜNG GẶP TRONG THỰC PHẨM

          • 1.3.1. Tổng số vi sinh vật hiếu khí

          • 1.3.2. Salmonella

          • 1.3.4. Escherichia coli

          • 1.3.3. Clostridium perfringens

          • 1.3.5. Staphylococcus aureus

          • CHƯƠNG 2. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

            • 2.1. VẬT LIỆU

              • 2.1.1. Địa điểm, thời gian và nguyên liệu thực tập

              • 2.1.2. Trang thiết bị, dụng cụ

Tài liệu cùng người dùng

  • Đang cập nhật ...

Tài liệu liên quan