Ảnh hưởng của vi khuẩn lam cố định nitơ lên sự nảy mầm của giống đậu tương đt 96

TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH KHOA SINH HỌC - ảNH HƯởNG CủA VI KHUẩN LAM Cố ĐịNH NITơ LêN Sự NảY MầM CủA GIốNG ĐậU TƯƠNG ĐT 96 khoá luận tốt nghiệp Ngành : Cử NHÂN KHOA HọC SINH HọC Giáo viên h-ớng dẫn : PGS.TS Nguyễn Đình San Sinh viên thực : Lª Thïy Linh Líp : 48B – Sinh häc M· sè sinh viªn : 0753022611 Lời cảm ơn Để hồn thành đƣợc khố luận tốt nghiệp này, ngồi cố gắng nỗ lực thân nhận đƣợc nhiều giúp đỡ từ thầy cô, bạn bè gia đình Tơi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến PGS TS Nguyễn Đình San, ngƣời thầy mà tơi ln kính trọng, thầy tận tình hƣớng dẫn bảo cho tơi q trình thực đề tài Tôi xin gửi lời cảm ơn đến thầy tổ Sinh lý - hố sinh nói chung thầy phịng thí nghiệm Sinh lý - hố sinh nói riêng góp ý, giúp đỡ tạo điều kiện tốt cho thực đề tài Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến gia đình, bạn bè, anh chị Cao học, ngƣời bên, động viên tơi lúc khó khăn Dù cố gắng hết sức, nhƣng thời gian kinh nghiệm cịn hạn chế, khố luận khơng tránh khỏi thiếu sót, mong đƣợc góp ý thầy cô bạn Xin chân thành cảm ơn! Vinh, tháng năm 2011 Tác giả Lê Thuỳ Linh DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT VKL Vi khuẩn lam VKL CĐN Vi khuẩn lam cố định đạm Lô 100% nƣớc cất ( Đối chứng) Lô 100% dung dịch BG 11 không đạm ( Đối chứng) Lô 1A – 1B 25% dịch vẩn vi khuẩn lam + 75% nƣớc cất Lô 2A – 2B 50% dịch vẩn vi khuẩn lam + 50% nƣớc cất Lô 3A – 3B 75% dịch vẩn vi khuẩn lam + 25% nƣớc cất Lô 4A - 4B 100% dịch vẩn vi khuẩn lam Chủng A Nostoc calcicola Breb.ex Born.et Flah Chủng B Cylindrospermum licheniforme Kuetz.ex Born.et Flah SS( %) So sánh % X Giá trị trung bình DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1: Diện tích, suất, sản lƣợng đậu tƣơng giới 20 Bảng 1.2: Diện tích, suất, sản lƣợng đậu tƣơng Việt Nam 21 Bảng 2.1: Thành phần môi trƣờng BG11: .23 Bảng 3.1 : Sinh khối VKL sau 15, 30 45 ngày 25 Bảng 3.2 : Tốc độ sinh trƣởng tuyệt đối VKL 26 Bảng 3.3 : Tỉ lệ nảy mầm giống đậu tƣơng ĐT 96 27 Bảng 3.4 : Ảnh hƣởng VKL đến chiều dài thân mầm (mm): 29 Bảng 3.5 : Ảnh hƣởng VKL đến đƣờng kính thân mầm (mm) 31 Bảng 3.6 : Ảnh hƣởng dịch vẩn VKL lên cƣờng độ hô hấp 34 hạt nảy mầm giống đậu tƣơng ĐT 96 34 Bảng 3.7 : Ảnh hƣởng dich vẩn VKL CĐN lên hoạt độ catalaza hạt đậu tƣơng ĐT 96 ( đơn vị catalaza) 36 DANH MỤC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 3.1: Sinh khối VKL sau 15, 30 45 ngày 25 Biểu đồ 3.2: Tỉ lệ nảy mầm giống đậu tƣơng ĐT 96 sau 24, 48, 72 27 Biểu đồ 3.3: Chiều dài thân mầm giống đậu tƣơng ĐT 96 29 Biểu đồ 3.4: Đƣờng kính thân mầm đậu tƣơng ĐT 96 32 Biểu đồ 3.5: Cƣờng độ hô hấp hạt nảy mầm giống đậu tƣơng ĐT 96 34 Biểu đồ 3.6: Hoạt độ catalaza hạt nảy mầm giống đậu tƣơng ĐT 96 36 MỤC LỤC MỞ ĐẦU CHƢƠNG I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Vài nét vi khuẩn lam cố định nitơ 1.1.1 Đặc điểm vi khuẩn lam 1.1.2 Các yếu tố ảnh hƣởng tới sinh trƣởng, phát triển, cố định Nitơ VKL 10 1.1.3 Ứng dụng VKL sản xuất 11 1.2 Vài nét đậu tƣơng .14 1.2.1 Đặc điểm phân loại học, hình thái đậu tƣơng 14 1.2.1.1 Đặc điểm phân loại học 14 1.2.1.2 Đặc điểm hình thái đậu tƣơng .14 1.2.2 Nguồn gốc đậu tƣơng .15 1.2.3 Các giai đoạn sinh trƣởng đậu tƣơng 16 1.2.4 Các đặc điểm sinh thái đậu tƣơng 17 1.2.5 Giá trị đậu tƣơng 18 1.2.6 Tình hình sản xuất đậu tƣơng 19 1.2.6.1 Tình hình sản xuất đậu tƣơng giới 19 1.2.6.2 Hiện trạng sản xuất đậu tƣơng Việt Nam .21 CHƢƠNG II: ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG, PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 2.1 Đối tƣợng 22 2.1.1 Chủng vi khuẩn lam 22 2.1.2 Giống đậu tƣơng đậu tƣơng ĐT 96 22 2.2 Nội dung nghiên cứu 22 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 22 2.3.1 Nuôi cấy vi khuẩn lam 22 2.3.2 Bố trí thí nghiệm .24 2.3.3 Xử lý hạt giống 24 2.4 Phƣơng pháp xử lý số liệu 24 CHƢƠNG III: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 25 3.1 Kết theo dõi sinh khối tảo lam sau 15 ngày, 30 ngày 45 ngày: 25 3.2 Ảnh hƣởng VKL lên tỉ lệ nảy mầm giống đậu tƣơng ĐT 96 26 3.4 Ảnh hƣởng dịch vẩn VKL lên tăng trƣởng đƣờng kính thân mầm giống đậu tƣơng ĐT 96 31 3.5 Ảnh hƣởng dịch vẩn VKL đến cƣờng độ hô hấp hạt nảy mầm giống đậu tƣơng ĐT 96 33 3.6 Ảnh hƣởng dịch vẩn VKL lên hoạt độ catalaza hạt nảy mầm giống đậu tƣơng ĐT96 35 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ .38 A- Kết luận: 38 B- Đề nghị 39 MỞ ĐẦU Trong tự nhiên, vi khuẩn lam (Cyanobacteria) sinh vật nhỏ bé, quang tự dƣỡng Trong chúng có số lồi có khả cố định đạm, chuyển nitơ tự sang dạng nitơ sử dụng đƣợc nhƣ amonium (NH4) Ngoài ra, trình tạo NH4, vi khuẩn lam cố định Đạm cịn tạo chất có hoạt tính sinh học cao kích thích sinh trƣởng phát triển suất thực vật bậc cao Nhờ có khả vi khuẩn lam đƣợc ứng dụng nhƣ loại phân bón sinh học hữu hiệu Hiện giới nhƣ Việt Nam loại vi khuẩn lam để làm giàu đạm cho đất ngày đƣợc đầu tƣ nghiên cứu, sử dụng Những nghiên cứu, ứng dụng vi khuẩn lam lên trình nảy mầm, sinh trƣởng phát triển suất số nhƣ lúa, ngô, lạc… cho kết khả quan Điều cho thấy, khả ứng dụng vi khuẩn lam vào thực tiễn sản xuất lớn Ngày nay, ô nhiễm môi trƣờng trở thành vấn đề nan giải ngƣời, có nguyên nhân lạm dụng mức phân bón hố học thời gian dài khơng có khoa học Do việc nghiên cứu, ứng dụng loại phân bón có nguồn gốc sinh học, thân thiện với môi trƣờng nhƣ vi khuẩn lam cố định đạm có ý nghĩa Nƣớc ta nƣớc nơng nghiệp, có điều kiện thích hợp cho nhiều loại trồng phát triển, đặc biệt lƣơng thực, hoa màu Trong đó, đậu tƣơng loại trồng chính, có giá trị kinh tế cao, nguồn thực phẩm giàu dƣỡng chất cho ngƣời nguyên liệu cho số ngành cơng nghiệp chế biến thực phẩm Vì vậy, việc nâng cao chất lƣợng nhƣ sản lƣợng đậu tƣơng có ý nghĩa lớn Trong giai đoạn phát triển đậu tƣơng, giai đoạn nảy mầm giai đoạn có vai trị móng cho phát triển sau sản xuất thời kỳ mọc mầm có tính định đến số lƣợng đơn vị diện tích ảnh hƣởng trực tiếp đến suất Để đánh giá rõ nét vai trị vi khuẩn lam lên q trình nảy mầm trồng tiếp tục nghiên cứu đề tài : “Ảnh hƣởng vi khuẩn lam cố định Nitơ lên nảy mầm giống đậu tƣơng ĐT 96” Mục tiêu đề tài nghiên cứu vai trị tích cực vi khuẩn lam cố định nitơ lên đậu tƣơng giai đoạn nảy mầm để sử dụng chúng nhƣ biện pháp sinh học nâng cao hiệu suất nảy mầm, sức sống, chịu đựng mầm Để đạt đƣợc mục tiêu nhiệm vụ đề tài là: - Nuôi chủng vi khuẩn lam cố định Đạm để thu sinh khối làm thí nghiệm - Chuẩn bị giống đậu tƣơng để tác động lên nảy mầm hạt - Nghiên cứu thời gian nuôi vi khuẩn lam cố định đạm để làm thí nghiệm - Tìm hàm lƣợng vi khuẩn lam tƣơi dịch vẩn thích hợp có tác dụng tối ƣu lên nảy mầm CHƢƠNG I TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Vài nét vi khuẩn lam cố định nitơ 1.1.1 Đặc điểm vi khuẩn lam ( VKL ) VKL (Cyanobacteria) trƣớc gọi tảo lam (Cyanophyta) thể nguyên thuỷ, tế bào chúng chƣa có cấu trúc nhân điểm hình giống nhƣ vi khuẩn, nhƣng khác vi khuẩn chỗ chúng có sắc tố quang hợp nên tự dƣỡng đƣợc Cùng với vi khuẩn sinh giới, ngƣời ta xếp chúng vào nhóm thể chƣa có cấu trúc nhân điển hình (Procaryota) Xét cấu trúc hình thái, thể tảo lam thƣờng gặp mức độ sau: đơn bào, tập đoàn (kiểu palmelloid), dạng sợi dị sợi Tế bào thể đơn bào thƣờng có dạng hình cầu, hình trụ hình elip có khơng có màng nhầy Ở thể tập đoàn tế bào sau phân chia lại tập hợp lại để thành dạng [7], [19] VKL chứa sắc tố: diệp lục a, B- caroten phycobiliprotein (gồm phycocyanin, allophycocyanin phycoerythrin) Sản phẩm quang hợp glycogen, chất dự trữ: tinh bột tảo lam (cyanophycin), hạt volutin (polyphosphat), hạt carboxysome [7] Chất nguyên sinh VKL đậm đặc loài thực vật khác, chúng chứa không bào, thƣờng chứa không bào khí Không bào khí thƣờng gặp lồi có đời sống trơi nổi, thƣờng xuất nhiều cƣờng độ ánh sáng tăng lên, trƣờng hợp chúng có vai trò tán xạ ánh sáng để tế bào khỏi bị đốt nóng [7] Ở VKL cịn có tế bào dị hình, tế bào với màng tế bào dày, có màu vàng hay khơng màu, khơng chứa hạt dự trữ Tế bào dị hình có nhiều cách phân chia khác nhau, đƣợc coi tế bào sinh sản, quan liên kết, điều chỉnh hình thành bào tử cố định Nitơ tự Tế bào dị hình có nhiều tảo lam đa bào ví dụ Nostocales Stgonematales [7], [19] Một số tảo lam có khả cố định Đạm khí quyển, lồi hầu hết có tế bào dị hình thích ứng với lối sống mặt đất.[20] Tảo lam phân bố khắp nơi Trái Đất Đại phận tảo lam sống nƣớc hình thành phù du thực vật thuỷ vực Một số phân bố nƣớc mặt giàu chất hữu cơ, nƣớc lợ Ngồi mơi trƣờng nƣớc tảo lam thấy đá, vỏ cây, đất chứa chất hữu Tảo lam cộng sinh với nấm hình thành địa y.[20] 1.1.2 Các yếu tố ảnh hƣởng tới sinh trƣởng, phát triển, cố định Nitơ VKL * Các yếu tố vật lý - Nhiệt độ: VKL thuộc loại ƣa nhiệt, nhiều loài có khả chịu giá lạnh, mặt khác chúng có khả phát triển nhiệt độ cao, chí hồ nƣớc nóng (có thể tới 87oC) Nhiệt độ tối ƣu tối ƣu cho sinh trƣởng VKL vào khoảng 30-35 0C, nhiên có số lồi có khả phát triển bình thƣờng 40 oC Sự dao động nhiệt độ ảnh hƣởng tới sinh khối, thành phần khu hệ khả sinh sản VKL.[19],[20] - Ánh sáng: Ánh sáng nhân tố quan trọng hàng đầu sinh trƣởng VKL Theo nhiều tác giả VKL đặc biệt mẫn cảm với cƣờng độ chiếu sáng, đƣợc coi loài ƣa sáng Sự sinh trƣởng VKL bị ức chế dƣới ánh sáng cƣờng độ cao Tuy nhiên có số loài nhƣ Anabaena cylidrica sinh trƣởng cố định đạm tăng cƣờng độ chiếu sáng 16000 lux 13-14 chiếu sáng.[19] - Độ ẩm nƣớc: Đây yếu tố ảnh hƣởng trực tiếp gián tiếp đến thành phần loài mật độ VKL đất Độ ẩm nƣớc quy định nhiệt độ đất, độ hoà tan nồng độ muối, hàm lƣợng CO2, O2 đất, điều kiện có tính chất định đến hoạt động sống VKL * Các nhân tố hoá học : - Độ pH môi trƣờng: PH yếu tố quan trọng xác định thành phần VKL đất VKL đƣợc tìm thấy đất, nƣớc có độ pH thấp 4,4 pH từ trung tính đến kiềm thích hợp cho tăng trƣởng VKL, tăng trƣởng pH thấp 6,5 PH tối ƣu cho sinh trƣởng VKL 6,5 - 7,0 Tuy nhiên số lồi sinh trƣởng phát triển bình thƣờng mơi trƣờng pH = 5,0 – 6,0 chí 3,5- 6,5 [8], [12] - Phot : Nhu cầu P sinh trƣởng tối ƣu VKL khác lồi khơng có yếu tố bên ngồi giới hạn (Kuhl 1974, Rohode 1984) Theo 10 hành thí nghiệm tác dụng VKL lên nảy mầm đậu tƣơng theo dõi lệ nảy mầm giống đậu tƣơng ĐT 96 Kết theo dõi ảnh hƣởng dịch vẩn hai chủng VKL CĐN lên tỉ lệ nảy mầm giống đậu tƣơng ĐT 96 thời điểm 24 giờ, 48 72 đƣợc thể bảng 3.3: Bảng 3.3 : Tỉ lệ nảy mầm giống đậu tương ĐT 96 Thời gian 24 48 72 Đại lƣợng X SS(%) X SS(%) X SS(%) 35,33 100,00 75,27 100,00 90,05 100,00 34,04 96,35 72,95 96,92 86,29 95,82 1A 37,21 105,32 79,51 105,63 90,64 100,66 2A 42,96 121,60 82,52 109,63 94,75 105,22 3A 47,64 134,84 90,31 119,98 98,56 109,45 4A 35,14 99,46 75,35 100,11 90,67 100,69 1B 37,19 105,26 77,62 103,12 91,84 101,99 2B 42,57 120,49 81,76 108,62 92,67 102,91 3B 46,85 132,61 87,26 115,93 97,35 108,11 4B 35,04 99,18 75,46 100,25 90,52 100,52 Lơ thí nghiệm Đối chứng Chủng A Chủng B SS % 160 140 Lô Lô 120 100 Lô 1A Lô 2A 80 Lô 3A Lô 4A 60 Lô 1B 40 Lô 2B 20 Lô 3B Lô 4B 24 Giờ 48 Giờ 72 Giờ Thời gian Biểu đồ 3.2: Tỉ lệ nảy mầm giống đậu tương ĐT 96 sau 24, 48, 72 27 Từ kết bảng 3.3 biểu đồ, ta nhận thấy dịch vẩn VKL chủng A B có kết tốt lên tỉ lệ nảy mầm đậu tƣơng Sau 24 giờ, đa số lô xử lý băng dịch vẩn VKL tỉ lệ nảy mầm cao so với đối chứng nƣớc cất Trong đó, lơ 3A 3B đạt tỉ lệ nảy mầm cao (134,84 % 132,61 %), lơ 3A tăng cao lơ 3B (2,23%) Cịn lơ 2( 100% BG 11 khơng đạm) có tỉ lệ nảy mầm thấp (96,35%) Sau 48 giờ, lô đối chứng ( 100% BG 11 khơng đạm) có tỉ lệ nảy mầm thấp (96,92%) Cịn lơ xử lý dịch vẩn VKL tỉ lệ nảy mầm cao so với đối chứng nƣớc cất, tỉ lệ nảy mầm tăng mạnh lô 3A (119,98 %) 3B (115,93 %) so với lô đối chúng nƣớc cất Lô 3A tăng cao 3B Sau 72 giờ, tốc độ nảy mầm giai đoạn giảm so với thời điểm 48 Tƣơng tự nhƣ 24giờ, 48 giờ, số hạt mảy mầm lô 3A 3B đạt cao vƣợt 9,45%, 8,11% so với lơ đối chứng nƣớc cất Ở lơ thí nghiệm có xử lý dịch vẩn VKL khác tỉ lệ nảy mầm cao so với đối chứng Tuy nhiên, thời điểm khác biệt thí nghiệm so với đối chứng khơng lớn so với 24 48 Lô đối chứng ( 100% BG 11 khơng đạm) có tỉ lệ nảy mầm thấp đạt 95,82% Nhƣ khẳng định: - Mơi trƣờng 100% BG11 khơng có hoạt tính khích thích nảy mầm giống đậu tƣơng ĐT96, ức chế làm giảm lực nảy mần hạt - Dịch vẩn VKL có tác dụng kích thích lên nảy mầm giống đậu tƣơng ĐT96 rõ rệt so với đối chứng nƣớc cất - Từ kết cho thấy, tỉ lệ dịch vẩn VKL thích hợp có tác dụng tốt lên nảy mầm đậu tƣơng chủng A (Nostoc calcicola) (1,091g/100ml) chủng B (Cylindrospermum lichenifor) (1,146g/100ml) Trong chủng A có tác dụng tốt đến tỉ lệ nảy mầm chủng B 28 3.3 Ảnh hƣởng dịch vẩn VKL lên chiều dài thân mầm giống đậu tƣơng ĐT 96 Chỉ tiêu chiều dài thân mầm phản ánh sức sống tốc độ sinh trƣởng mầm Kết thu đƣợc thể qua bảng 3.4: Bảng 3.4: Ảnh hưởng VKL đến chiều dài thân mầm (mm): Thời gian 24 48 72 Đại lƣợng X SS(%) X SS(%) X SS(%) Lơ thí nghiệm Đối chứng Chủng A Chủng B 6,591 100,00 8,573 100,00 11,078 100,00 6,408 8,465 98,74 10,443 94,26 1A 8,158 123,79 10,074 117,5 11,35 112,14 2A 9,028 136,97 11,086 129,31 12,453 123,06 3A 9,355 141,94 11,389 132,84 4A 8,197 124,38 10,026 116,94 11,501 113,65 1B 8,384 127,21 2B 8,73 132,46 10,592 123,55 3B 9,08 137,76 10,896 127,09 13,293 125,13 4B 8,191 124,27 97,23 9,624 9,92 14,1 127,27 112,25 11,176 114,56 115,71 12,66 11,63 119,17 109,47 SS (%) 160 Lô Lô Lô 1A Lô 2A Lô 3A Lô 4A Lô 1B Lô 2B Lô 3B Lô 4B 140 120 100 80 60 40 20 24 Giờ 48 Giờ 72 Giờ Thời gian Biểu đồ 3.3: Chiều dài thân mầm giống đậu tương ĐT 96 29 Trong thời điểm xét tiêu chiều dài thân mầm lơ đối chứng có thân mầm thấp so với lô đối chứng nƣớc cất với mức chênh lệch lần lƣợt thời điểm 24 giờ, 48 72 2,77%; 1,26%; 5,74% Điều chứng tỏ BG11 có tác dụng kiềm chế sinh trƣởng thân mầm giống đậu tƣơng Dịch vẩn VKL có tác động tốt đến tỉ lệ tốc độ nảy mầm hạt mà ảnh hƣởng tốt đến tăng trƣởng thân mầm giống đậu tƣợng ĐT96, điều thể lô xử lý với dịch vẩn VKL cho kết cao đối chứng nƣớc cất Chủng A : Thời điểm 24 tăng 23,79% đến 41,94%, thời điểm 48 vƣợt 16,94% đến 32,84%, thời điểm 72 vƣợt từ 12,14% đến 27,27% so với đối chứng Trong thời điểm lơ 3A ln có kết tốt nhất, đạt 141,94%; 132,84%; 127,27% tƣơng ứng thời điểm 24 giờ, 48 72 Chủng B : Thời điểm 24 tăng từ tăng 24,27% đến 37,76% thời điểm 48 đạt từ tăng từ 12,25% đến 27,09%, thời điểm 72 tăng 9,47% đến 14,56% so với lô đối chứng Trong thời điểm lô 3B có kết tốt nhất, đạt 137,76%; 127,09%; 125,13% tƣơng ứng thời điểm 24 giờ, 48 giờ, 72 Xét độ dài thân mầm đậu tƣơng xử lý với hai chủng VKL nồng độ thời gian xử lý : - Tại thời điểm 24 giờ, lơ có mặt chủng A có khả kích thích sinh trƣởng chiều dài thân mầm cao lô 3A đạt 9,355 mm, vƣợt đối chứng 41,94% Trong lơ có mặt chủng B chiều dài thân mầm lớn lô 3B đạt 9,08 mm, vƣợt đối chứng 37,76% - Tại thời điểm xử lý 42 giờ, kết tốt chủng A lô 3A đạt 11,389 mm vƣợt 32,84% so với đối chứng Đối với chủng B kết tốt lô 3B đạt 10,896 mm vƣợt 27,09 % so với đối chứng - Tại thời điểm 72 giờ, tƣơng tự kết tốt chủng A lô 3A đạt 14,1 mm vƣợt 27,27% Ở chủng B kết tốt lô 3B đạt 13,293 mm tăng 25,13% so với đối chứng 30 Nhƣ nhận thấy thời gian xử lý, chủng A có khả kích thích chiều dài thân mầm tốt chủng B lô (75% dịch vẩn VKL + 25% nƣớc cất) hai chủng cho kết tốt 3.4 Ảnh hƣởng dịch vẩn VKL lên tăng trƣởng đƣờng kính thân mầm giống đậu tƣơng ĐT 96 Cùng với chiều dài thân mầm, tiêu đƣờng kính mầm phản ánh sức sống, tốc độ sinh trƣởng mầm Kết thu đƣợc đƣợc thể qua bảng 3.5: Bảng 3.5 : Ảnh hưởng VKL đến đường kính thân mầm (mm) Thời gian 24 48 72 Đại lƣợng X SS(%) X SS(%) X SS(%) Lô thí nghiệm Đối chứng Chủng A Chủng B 1,278 100,00 1,438 100,00 1,511 100,00 1,203 94,13 1,344 1A 1,434 112,24 1,51 2A 1,501 117,45 1,638 113,91 1,664 110,14 3A 1,561 122,14 4A 1,369 107,13 1.482 1B 1,350 105,63 1,492 103,76 1,567 103,73 2B 1,418 110,97 1,625 113,00 1,657 109,68 3B 1,495 117,00 1,672 116,27 1,689 111,80 4B 1,337 1,69 104,58 1,472 31 93,5 1,445 95,67 105,01 1,586 104,96 117,52 1,708 113,03 103,13 1,582 102,36 1,551 104,71 102,62 SS% 140 Lô 120 Lô 100 Lô 1A Lô 2A 80 Lô 3A 60 Lô 4A Lô 1B 40 Lô 2B 20 Lô 3B Lô 4B 24 Giờ 48 Giờ 72 Giờ Thời gian Biểu đồ 3.4 : Đường kính thân mầm đậu tương ĐT 96 Từ bảng biểu đồ, nhận thấy lơ thí nghiệm đƣợc xử lý VKL cho kết tốt lô đối chứng Chủng A : Thời điểm 24 đạt từ tăng 7,13% đến 22,14%, thời điểm 48 tăng từ 3,13% đến 17,52%, thời điểm 72 tăng 4,71% đến 13,03% so với lô đối chứng Trong thời điểm lơ 3A ln có kết tốt nhất, đạt 122,14%; 117,52%; 113,03% tƣơng ứng thời điểm 24 giờ, 48 giờ, 72 Chủng B : Thời điểm 24 tăng 4,58% đến 17% so với lô đối chứng Thời điểm 48 vƣợt 2,36% đến 16,27%, thời điểm 72 vƣợt 2,62% đến 11,8% so với lô đối chứng Trong thời điểm lơ 3B ln có kết tốt nhất, đạt 117%; 116,27%; 111,8% tƣơng ứng thời điểm 24 giờ, 48 72 Trong thời điểm lơ đối chứng 2( 100% BG11) ln có kết thấp so với lơ thí nghiệm khác Ở thời điểm 24 giờ, 48 giờ, 72 đạt tƣơng ứng 94,13%; 93,5%; 95,67% so với lô đối chứng Xét đƣờng kính thân mầm đậu tƣơng xử lý với hai chủng VKL nồng độ thời gian xử lý : Tại thời điểm 24 giờ, chủng A có khả kích thích sinh trƣởng đƣờng kính thân mầm cao 3A vƣợt đối chứng 22,14% Trong lơ thí nghiệm xử lý chủng B chiều dài thân mầm lớn lô 3B vƣợt lô đối chứng 17% 32 Tại thời điểm xử lý 42 giờ, kết tốt chủng A lô 3A vƣợt 17,52% so với đối chứng Đối với chủng B kết tốt lô 3B vƣợt 16,27 % so với lô đối chứng Tại thời điểm 72 giờ, tƣơng tự kết tốt chủng A lô 3A vƣợt 13,03% Ở chủng B kết tốt lô 3B tăng 11,8% so với đối chứng Nhƣ vậy, chủng VKL có tác dụng tốt đến đƣờng kính thân mầm Lơ 3A, 3B (75% dịch vẩn VKL + 25% nƣớc cất) chủng cho kết tốt Trong chủng A cho kết tốt chủng B tác dụng lên thân mầm 3.5 Ảnh hƣởng dịch vẩn VKL đến cƣờng độ hô hấp hạt nảy mầm giống đậu tƣơng ĐT 96 Các chất kích thích nảy mầm có tác dụng thúc đẩy hoạt động enzim hô hấp, làm tăng tốc độ phân giải ngun liệu hơ hấp, tích luỹ nhiều lƣợng chất làm nguyên liệu cho trình tổng hợp chất Việc xác định cƣờng độ hô hấp hạt đậu tƣơng thông số để đánh giá tác động chất co hoạt tính sinh học cao lên sinh lý nảy mầm hạt đậu tƣơng Trong thí nghiệm này, dịch vẩn VKL đóng vai trị nhƣ nhân tố có hoạt tính sinh học cao đƣợc chúng tơi bố trí đối tƣợng giống đậu tƣơng ĐT96 Kết thu đƣợc trình bày bảng 3.6: 33 Bảng 3.6: Ảnh hưởng dịch vẩn VKL lên cường độ hô hấp hạt nảy mầm giống đậu tương ĐT 96 Thời gian 24 48 72 Đại lƣợng X SS(%) X SS(%) X SS(%) Lơ thí nghiệm Đối chứng Chủng A ChủngB 0,306 100,00 0,371 100,00 0,331 100,00 0,297 97,06 0,358 96,63 0,312 94,26 1A 0,331 108,17 0,383 103,37 0,342 103,32 2A 0,354 115,69 0,402 108,50 0,358 108,16 3A 0,372 121,57 0,431 116,33 0,379 114,49 4A 0,301 1B 0,347 113,40 0,382 103,10 0,354 106,95 2B 0,353 115,36 0,396 106,88 0,363 109,67 3B 0,369 120,59 0,423 114,17 0,373 112,67 4B 0,302 98,37 98,69 0,371 100,13 0,333 100,60 0,370 99,95 0,334 100,91 SS(%) 140 120 Lô Lô 100 Lô 1A 80 Lô 2A Lô 3A 60 Lô 4A Lô 1B 40 Lô 2B 20 Lô 3B Lô 4B 24 Giờ 48 Giờ 72 Giờ Thời gian Biểu đồ 3.5: Cường độ hô hấp hạt nảy mầm giống đậu tương ĐT 96 34 Tại thời điểm 24 giờ: Lô xử lý với dịch vẩn VKL có cƣờng độ hơ hấp đạt cao lơ 3A 3B tăng tƣơng ứng 21,57% 20,59% Lô đối chứng cho kết thấp lơ thí nghiệm khác Tại thời điểm 48 giờ: Đây thời điểm cƣờng độ hô hấp tănh mạnh thời điểm khác Ở chủng A tăng từ 0,13% đến 16,33%, chủng B tăng từ 3,1% đến 14,7% so với lơ đối chứng Trong lơ 3A tăng cao đạt 116,33%, lô 3B đạt 114,7% so với lô đối chứng nƣớc cất Tại thời điểm 72 : Cƣờng độ hô hấp giảm so với thời điểm 48 giờ, kết phù hợp với kết tốc độ nảy mầm hạt đậu tƣơng Ở lô xử lý với dịch vẩn VKL có cƣờng độ hơ hấp cao lơ đối chứng, tăng 0,6% đến 11,48% chủng A tăng 0,9% đến 10,57% chủng B Lô 3A, 3B tăng mạnh lơ thí nghiệm khác, đạt tƣơng ứng 111,48% 110,57% Lơ ln có kết thấp thời điểm 24 giờ, 48 giờ, 72 so với lơ thí nghiệm khác thấp lô đối chứng với nƣớc cất Cƣờng độ hô hấp hạt chịu tác động BG11 thấp so với đối chứng lần lƣợt 97,06% thời điểm 24 giờ, 96,63% thời điểm 48 giờ, 94,26% thời điểm 72 Nhƣ vậy, lô đƣợc xử lý dịch vẩn VKL khác có cƣờng độ hơ hấp khác nhƣng tăng đối chứng Trong đó, lơ 3A 3B có cƣờng độ hơ hấp cao nhất, chủng A có tác dụng kích thích lên cƣờng độ hơ hấp tốt chủng B Lô ( BG 11 khơng đạm) ln có kết thấp hẳn so với đối chứng nƣớc cất, chứng tỏ BG11 khơng có tác dụng kích thích hơ hấp hạt đậu tƣơng 3.6 Ảnh hƣởng dịch vẩn VKL lên hoạt độ catalaza hạt nảy mầm giống đậu tƣơng ĐT96 Hoạt động hô hấp sinh nhiều Peroxythydro (H2O2), đay chất gây độc cho Catalaza loại enzim có khả xúc tác cho phản ứng phân giải Peroxythydro (H2O2) thành H2O O2 chu trình oxi hố mơ thực vật hữu q trình hơ hấp, mà hoạt dộ catalaza phản ánh khả trao đổi chất lƣợng thể thực vật nhanh hay chậm, thể có khả sinh trƣởng tốt hay khơng 35 Kết thí nghiệm ảnh hƣởng dịch vẩn VKL lên hoạt độ catalaza giống đậu tƣơng ĐT 96 trình bày bảng 3.7 Bảng 3.7 : Ảnh hưởng dich vẩn VKL CĐN lên hoạt độ catalaza hạt đậu tương ĐT 96 ( đơn vị catalaza) Thời gian 24 48 72 Đại lƣợng X SS(%) X SS(%) X SS(%) Lơ thí nghiệm Đối chứng Chủng A Chủng B 0,0212 100,00 0,0293 100,00 0,0315 100,00 0,0180 96,89 0,0281 95,79 0,0304 96,33 1A 0,0218 102,89 0,0304 103,95 0,0344 109,22 2A 0,0241 113,64 0,0317 108,09 0,0365 115,88 3A 0,0250 118,09 0,0332 113,29 0,0372 117,90 4A 0,0211 1B 0,0219 102,91 0,0303 103,49 0,0339 107,51 2B 0,0243 114,55 0,0313 107,04 0,0356 113,01 3B 0,0249 117,27 0,0328 111,84 0,0368 116,68 4B 0,0210 99,55 99,09 0,0292 0,0289 99,67 0,0314 98,55 0,0310 99,57 98,35 SS(% ) 140 Lô 120 Lô 100 Lô 1A Lô 2A 80 Lô 3A Lô 4A 60 Lô 1B Lô 2B Lô 3B 40 20 Lô 4B 24 Giờ 48 Giờ 72 Giờ Thời gian Biểu đồ 3.6: Hoạt độ catalaza hạt nảy mầm giống đậu tương ĐT 96 36 Qua bảng biểu đồ nhận thấy: Chủng A : sau 24 hoạt độ catalaza đạt từ 99,55% lô 4A đến 118,09% lô 3A, tăng từ 2,73% đến 18,09% so với lô đối chứng Sau 48 đạt từ 99,67% đến 113,29%, tăng 3,95% đến 13,29% so với lô đối chứng Sau 72 đạt từ 99,57% đến 117,9%, tăng 9,02% đến 17,9% so với lô đối chứng Trong thời điểm lô 3A ln có giá trị lớn nhất, lơ 4A có giá trị thấp nhât Chủng B: Sau 24 hoạt độ catalaza đạt từ 99,09% lô 4B đến 117,27% lô 3B, tăng từ 2,91% đến 17,27% so với lô đối chứng nƣớc cất Sau 48 đạt từ 98,55% đến 111,84%, tăng 3,49% đến 11,84% so với lô đối chứng Sau 72 tăng 7,51% đến 16,68% so với lô đối chứng Trong thời điểm lơ 3B ln có giá trị lớn nhất, lơ 4B có giá trị thấp Nhận thấy lơ thời điểm ln có kết thấp nƣớc cất thấp lơ thí nghiệm Ở thời điểm 24 giờ, 48 giờ, 72 đạt tƣơng ứng 96,89%, 95,79%; 96,33% so với lô đối chứng Hai chủng VKL có tác dụng tốt lên hoạt độ catalaza giống đậu tƣơng ĐT 96 Trong lơ xử lý lơ 3A 3B (75% dịch vẩn VKL + 25% nƣớc cất) cho kết cao nồng độ khác chủng thời điểm Trong chủng A có tác dụng tốt chủng B 37 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ A- Kết luận: Từ kết thu đƣợc đến số kết luận sau: - Trong thời gian ni VKL từ đến 45 ngày, khoảng thời gian 15 đến 30 ngày tốc độ tăng sinh khối tảo nhanh đạt 0,0734 (g/100ml/1ngày) 0,0771 (g/100ml/1ngày) tƣơng ứng chủng Nostoc calcicola Cylindrospermum licheniforme Tại thời điểm 30 ngày, hàm lƣợng VKL đạt 1,455 g/100ml dịch vẩn (đối với chủng Nostoc calcicola Breb.ex Born.et Flah), 1,528 g/100ml dịch vẩn (đối với chủng Cylindrospermum licheniforme Kuetz.ex Born.et Flah) - Dịch vẩn hai chủng VKL Nostoc calcicola Breb.ex Born.et Flah Cylindrospermum licheniforme Kuetz.ex Born.et Flah có tác dụng tốt đến nảy mầm phát triển mầm Dịch vẩn chủng VKL làm tăng tỉ lệ nảy mầm, chiều dài thân mầm, đƣờng kính thân mầm, cƣờng độ hơ hấp hoạt độ catalaza Sự tăng tiêu lơ thí nghiệm xử lý dịch vẩn VKL, so với đối chứng nƣớc cất, thời điểm 24 cao 48 giờ, 72 - Với hàm lƣợng VKL thích hợp 1,091g VKL tƣơi /100 ml chủng Nostoc calcicola Breb.ex Born.et Flah (trong lô 3A) 1,146g VKL tƣơi/100ml chủng Cylidrospermum licheniforme Kuetz.ex Born.et Flah (trong lơ 3B) kết thí nghiệm thu đƣợc tốt tỉ lệ nảy mầm, tăng trƣởng chiều dài đƣờng kính thân mầm, cƣờng độ hô hấp hoạt độ catalaza Sau 48 giờ, tỉ lệ nảy mầm vƣợt 19,98% 15,93%; chiều dài thân mầm vƣợt 32,84%, 27,09%; đƣờng kính thân mầm tăng 17,52%, 16,27%; cƣờng độ hô hấp tăng 16,33%, 14,17%; hoạt độ catalaza tăng 15,00%, 14,84% so với đối chứng tƣơng ứng hai chủng Nostoc calcicola Breb.ex Born.et Flah Cylidrospermum licheniforme Kuetz.ex Born.et Flah làm thí nghiệm - Trong hai chủng VKL lấy làm thí nghiệm chủng Nostoc calcicola Breb.ex Born.et Flah có tác dụng tốt so với chủng Cylindrospermum licheniforme Kuetz.ex Born.et Flah tất tiêu sinh lý 38 B- Đề nghị Do điều kiện, thời gian hạn chế nên theo dõi đƣợc ảnh hƣởng VKL lên giống đậu tƣơng ĐT 96 giai đoạn nảy mầm Do đó, cần tiếp tục theo dõi ảnh hƣởng chúng lên tiêu sinh lý giai đoạn sinh trƣởng phát triển, nhƣ so sánh suất chất lƣợng hạt đậu 39 TÀI LIỆU THAM KHẢO Nguyễn Đức Cƣờng, Kỹ thuật trồng đậu tương, 2006, Nxb Khoa tự nhiên công nghệ Ngô Thế Dân, Trần Văn Lài 22và cộng sự, Cây đậu tương, 1997, Nxb Nông nghiệp Nguyễn Đức Diện, Nguyễn Đình San, Thăm dị khả cố định đạm số loài VKL (Cyanobacteria) phân lập từ đất trồng lúa tỉnh Đak lak, TCKH XXXV Đại học Vinh số 4A- 2006 Lê Song Dự, Cơ cấu mùa vụ đậu tương đồng trung du bắc bộ, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội Nguyễn Danh Đông, Cây đậu tương đất Thanh Hoá, 1982, Nxb Thanh Hoá Nguyễn Thị Kiều Đơng, Nguyễn Đình San, Ảnh hưởng chủng VKL lên nảy mầm, tănng truởng rễ mần thân mầm giống lúa Khải Phong, TCKH XXXVI Đại học Vinh số 1A (2007) 111-115 Võ Hành, Tảo học – phân loại, sinh thái, 2007, Nxb Khoa học kỹ thuật Hồ Sỹ Hạnh, Võ Hành, số tiêu nơng hố thổ nhưỡng đất trồng 1số huyện tỉnh Dak Lak liên quan tới đời sống VKL (Cyanobacteria), TBKH – ĐHV số 30/2002 (72-76) Đào Hữu Hồ, Chu Văn Mẫn, Giáo trình thống kê sinh học, 1999, Nxb Giáo dục 10 Nguyễn Đăng Khôi, Các đậu ăn hạt Việt Nam, TCSH 19(2) 5-10 (6/ 1997) 11 Trần Thị Phƣơng Liên, Lê Thị Thu Hiền, Nguyến Huy Hoàng, Hàm lượng protein, lipit thành phần hạt số giống đậu tương có khả chịu nóng chịu hạn , TCSH 21(2) 17-20 (6/1999) 12 Nguyễn Thị Loan, Dƣơng Đức Tiến, Ảnh hưởng vơi, phân bón Mo đến tăng trưởng VKL, TCSH 19(2) 56-60 (6/1997) 13 Chu Văn Mẫn, Ứng dụng tin học sinh học, Nxb Đại học quốc gia Hà Nội 40 14 Đồn Thị Thanh Nhàn cộng sự, Giáo trình công nghiệp, 1996, Nxb Nông nghiệp Hà Nội 15 Nguyễn Đình San, Thực hành sinh lý thực vật, 2002, Trƣờng ĐH Vinh 16 Vũ Ngọc Thắng, Bài giảng công nghiệp, 2006, Trƣờng ĐH Nông nghiệp Hà Nội 17 Nguyễn Xuân Thành, Dƣơng Đức Tiến, Nguyễn Nhƣ Thành, Vi sinh vật học nông nghiệp, Nxb Đại học sƣ phạm Hà Nội, 2004 18 Phạm Văn Thiều, 2002, Cây đậu tương, kỹ thuật trồng chế biến sản phẩm, Nxb Nông nghiệp Hà Nội 19 Dƣơng Đức Tiến, Vi khuẩn lam cố định Nitơ ruộng lúa, 1994, Nxb Nông nghiệp 20 Dƣơng Đức Tiến, Võ Văn Chi, Phân loại Thực vật bậc thấp, Nxb Đại học trung học chuyên nghiệp Hà Nội 1978 41 ... nghiệm tác động lên nảy mầm giống đậu tƣơng ĐT9 6 3.2 Ảnh hƣởng VKL lên tỉ lệ nảy mầm giống đậu tƣơng ĐT 96: Chu kỳ sống đậu tƣơng đƣợc bắt đầu mọc mầm, thời kỳ quan trọng, có ảnh hƣởng lớn đến... hƣởng vi khuẩn lam cố định Nitơ lên nảy mầm giống đậu tƣơng ĐT 96? ?? Mục tiêu đề tài nghiên cứu vai trị tích cực vi khuẩn lam cố định nitơ lên đậu tƣơng giai đoạn nảy mầm để sử dụng chúng nhƣ biện... nghiệm tác dụng VKL lên nảy mầm đậu tƣơng theo dõi lệ nảy mầm giống đậu tƣơng ĐT 96 Kết theo dõi ảnh hƣởng dịch vẩn hai chủng VKL CĐN lên tỉ lệ nảy mầm giống đậu tƣơng ĐT 96 thời điểm 24 giờ, 48