Nghiên cứu này khảo sát sơ bộ thành phần hóa học, xác định độc tính cấp và tác dụng giảm đau, kháng viêm của cao chiết từ quả Chuối hột rừng chín thu hái từ Tây Nguyên. Cao đặc thu được bằng cách ngấm kiệt quả Chuối hột rừng với cồn 60 %. Các nhóm hoạt chất được định tính bằng phương pháp Ciuley. Mời các bạn cùng tham khảo!
Tạp chí Khoa học & Cơng nghệ Số 13 63 Kh ng gi a cao chi t xu t t qu Chuối h t r ng (Musa acuminata Colla Musaceae) chu t nh t tr ng Võ Th Thu Hà*, Nguy n Tr Hư Y V T Sang K c - i h c Nguy n T t Thành * vttha@ntt.edu.vn Tóm t t Ở Vi t Nam, dân gian Chuối h t r ng (Musa acuminata M c s d u tr m t số b ớp, tiêu ch y, d ng Nghiên c u kh thành ph n hóa h c tính c p tác d ng gi viêm c a cao chi t t qu Chuối h t r ng chín thu hái t Tây Nguyên c thu c b ng cách ng m ki t qu Chuối h t r ng với c n 60 % Các nhóm ho t ch c nh tính b T nghi c tính c p, cho chu t uống cao với li u tố Quan sát ghi nh n s i hành vi t ng quát, tác d ng ph tỷ l t vong 72 gi ti p t c theo dõi 14 ngày u tr Tác ng gi ư c kh o sát t ng gi i biên n b ng b ng axit acetic % T ng c kh o sát theo mơ hình gây phù chân chu t b ng carrageenan % P nh tính phytochemical c a chi t xu t cho th y s hi n di n c a nhi u h p ch t ho t tính sinh h c triterpenoid t do, flavonoid, tannin, proanthocyanosid, saponin, axit hữ K t qu cho th y li u dung n p tố ( ) có th gây t vong 26 g/kg (cao c n Chuối h t r ng/khối chu t) Cao chi t chuối h t r ng li u 1,3 g/kg 2,6 g/kg có ng kháng viêm gi ng gi K t qu giúp nghiên c ng ch ph m t nhiên hỗ tr u tr b ư ớp ® 2021 Journal of Science and Technology - NTTU tv Ở Vi t Nam, chuối h t r ng (Musa acuminata Colla Musaceae) m c r i rác ven r ng, suối, khe núi phân bố t B c vào Nam, c bi t Tây Nguyên Tây B c [1] c li u có nhi u tác d ng chữa b nh t c s d ng theo kinh nghi m dân gian H u h t b ph u có tác d ng dùng an thai, vỏ qu chữa tiêu ch y, lõi thân c m máu, tr ki t lỵ, cao huy t áp, búp hoa tr ho [1 - 3] Trên th giới có cơng trình nghiên c u v tác d c lí c a loài chuối h t Những nghiên c u cho th y b ph n c a chuối h t r u có ho t tính sinh h c, có th ch Nh n 17.11.2020 c t 25.03.2021 Cơng bố 09.04.2021 T khóa Chuối h t r ng, c tính c p, kháng viêm, gi carrageenan xu c ph m th c ph m ch [ N 2000, tác gi Abad c ng s c ho t ch t 6-methyoxy-alpha-methyl-2-naphthaleneacetic ng phân c a naproxen t thân r c a loài Musa acuminata K t qu nghiên c u in vitro cho th y h p ch c chi t t thiên nhiên th hi n ng kháng viêm [5] Trong m t nghiên c u c a Lee KH c ng s ng minh d ch chi t t hoa chuối h t r ng cịn có kh kháng viêm [6] T i Vi t Nam, tác gi Tr n Hùng c ng s ng minh tác d ng l i ti u c a chuối h t ch ph m phối h p với kim ti n th [ N Tr n Đại học Nguyễn Tất Thành Tạp chí Khoa học & Cơng nghệ Số 13 64 V S ng s t số nghiên c u v loài Musa balbisiana ng minh tác d ng h ng huy t c a qu chuối h t [8] Tuy nhiên, ph n lớn nghiên c ước ch y c th c hi n chuối h t nhà nghiên c u v tác d ng c lí c a chuối h t r ng v n r t h n ch nghiên c u ti n hành kh ng gi kháng viêm c a cao chi t qu chuối h t r ng mơ hình th c nghi m nh m cung c p thêm ngu n li u khoa h c v tác d c lí c c li y ti m P 2.1 Thú v t th nghi m Chu t nh t tr ng thành, ch ng Swiss albino, n ng t (22 25) g, khỏe m nh, không d t t Vi n V c xin Sinh ph m y t Nha Trang cung c p Chu c chia nuôi h p nh a tr ng (8 10) con, cho quen vớ ng nh t ngày ước ti n hành th nghi m c li u nghiên c u ch ối chi u c li u nghiên c u qu chuối h t r c thu hái t nh k L k, c bóc vỏ, ép mỏ n n khơ hồn toàn Chuố c xay thành b t Chi t ng m ki t b t chuối với dung môi c n 60 % r i c c b p cách th y nhi 70 C B ng Các ph n Nhóm hợp chất Ch t béo Carotenoid Tinh d u Triterpenoid Alkaloid Coumarin Anthraquinon Flavonoid Anthocyanosid Proanthocyanidin Tanin Saponin Axit hữ H p ch t polyuronic t chuối h t r ng Acuminata Colla Ch ối chi u mơ hình gi -I f VIL® Pf z ng 200 mg Có tác d ng gi sốt, kháng viêm Là thuố ối ch ng dùng gi i biên - Morphin (Morphin sulfat c a Công ty C ph c ph T ư ng 30 mg Morphin thuốc gi m ng ch y u lên h th ư c dùng làm ch ối ch ng th nghi m gi Ch ối chi u mơ hình kháng viêm f V ® N ng 50 mg, diclofenac thuốc kháng viêm không steroid, c dùng làm ch ối ch ng th nghi m kháng viêm 2.3 Kh thành ph n hóa th c v t nh tính nhóm h p ch t b c li u cao chi t qu chuối h t r ng b ng ph n ng hóa h cd i [9] nh nhóm h p ch t Thuốc thử, cách thực Nhỏ dung d ch lên gi y H2SO4 c Bố ới c n Liebermann-Burchard Thuốc th chung c a alkaloid Phát quang ki m NaOH 10 % M H c HCl NaOH HCl/to Dung d ch FeCl3 Dung d ch gelatin-muối Ph n ng t o b t Na2CO3 Pha loãng với c n Đại học Nguyễn Tất Thành Hình Qu Ph n ứng dương tính V t m X c ng ỏ nâu – tím, lớp có màu xanh l c K tt a Phát quang m Lớp ki m có màu h ng tới ỏ Dung d ch có màu h ng tớ ỏ Dung d ch có màu h ỏ tớ ỏ Dung d ch có màu xanh Dung d ch có màu h ỏ tớ ỏ X T a tr ng (tanin) T o b t b n 15 phút S ib t T a tr ng - vàng nâu Tạp chí Khoa học & Cơng nghệ Số 13 2.4 Kh c tính c ng uống Ch n chu t ng u nhiên, lô Cho chu t uống ướ ng nh nh t 12 gi Cho chu t uố c li u với li u tố qua ng uống (n c nh t qua kim uống, với th tích uống 0,5 mL/10 g khối ng chu t) Theo dõi ghi nh n t t c c ng, bi u hi n, số ng ch t c a chu t 72 gi u ti p t n 14 ngày M i th c a ch t số sống sau 14 ngày quan sát [10] 2.5 Kh ng gi Chu c cố nh vớ t Nhúng ng p ước nóng b p cách th t nhi nh (55 ± 0,5) C Ti m th i gi kho ng th i gian tính t ướ n chu t gi t m ỏi m ước T ước ti n hành thí nghi m, chu t có ti m th i gi ư nghi m Chu t tiêu chu n chia ng u nhiên vào lô, lô g m Chu c cho uống li u nh t với th tích 0,1 mL/10 g khối ng chu t [11] - Lô ch ng uố ước c t - L ối ch ng uống morphin li u mg/kg - Lô th nghi m uống cao chuối h t r ng li u 1,3 g/kg - Lô th nghi m uống cao chuối h t r ng li u 2,6 g/kg m th i gi i th m (30, 60, 90 120) phút sau dùng thuố L t sau l u chu t khơng ph n ng sau 10 giây nh c chu tránh bỏ n liên ti p ghi nh n ti m th 2.6 Kh ng gi i biên Chia chu t ng u nhiên vào lô, lô g m Chu c cho uống li u nh t với th tích 0,1 mL/10g khối ng chu t [11] - Lô ch ng uố ước c t - L ối ch ng uống ibuprofen li u 40 mg/kg - Lô th nghi m uống cao chuối h t r ng li u 1,3 g/kg - Lô th nghi m uống cao chuối h t r ng li u 2,6 g/kg Sau dùng thuốc 60 phút, t t c chu c gây ng cách tiêm phúc mô dung d ch axit acetic % (0,1 mL/10g) Mỗi chu t vào bocal th y m số l n chu t (bi u hi n 65 ưỡn i, hóp b ng duỗi nh t m t chân sau) kho ng th i gian (5 10, 10 15, 15 20, 20 25, 25 30, 30 35 35 40) phút, tính t th m tiêm dung d ch axit acetic 2.7 Kh ng kháng viêm Nghiên c u ng kháng viêm c c li u theo mơ hình gây phù chân chu t b ng carragenan Winter c ng s xu t c i ti n [11] T ước gây viêm, dùng m u khuỷu chân chu tích chân chu ng b phù Plethymometer Chu c gây viêm b ưới da gan bàn chân trái 0,025 mL dung d ch carrageenan % pha dung d ch sinh lí tích chân chu t sau gây viêm gi Những chu t có th m kho ng (50 100) % so vớ ư vào th nghi m chia ng u nhiên vào 04 lô Lô ch ng uố ước c t L ối ch ng uống diclofenac li u mg/kg Lô th nghi m uống cao qu chuối h t r ng li u 1,3 g/kg Lô th nghi m uống cao qu chuối h t r ng li u 2,6 g/kg Chu c cho uống với th tích 0,1 mL/10 g khối ng chu c cho uống l n/ ngày t lúc sau n ngày ti T th tích chân chu t ngày vào m t gi nh nh T d a vào kh c ch s t lô th nghi m với lô ch ối ch phù chân chu t (X %) t l ph chênh l ch th tích chân chu ướ c tính b ng cơng th c sau T X%phù chân chu t V0 - Th tích bàn chân chu carragenan Vs - Th tích bàn chân chu carragenan 2.8 Phân tích thống kê ố deviation – ữ ư ước tiêm c sau tiêm ố ±S S é K – Đại học Nguyễn Tất Thành Tạp chí Khoa học & Cơng nghệ Số 13 66 W M IBM SPSS Statistics 20 ố -W < với ph n m m ý K t qu th o lu n 3.1 Kh o sát K ố thành ph n hóa th c v t f f axit ữ N d ng m ki t với dung môi c n 60 % t xu c g t c nhóm h p ch t tannin, triterpenoid t do, proanthocyanosid, flavonoid, saponin, axit hữu t n t i b c li u cao chi t (tr h p ch t polyuronic c tìm th y cao chi t) axit ữ B ng K t qu kh thành ph n hóa h c b c li u cao chi t Musa acuminata Colla c li u B Nhóm h p ch t Thuốc th Cách th c hi n Ph n ng Ch t béo Nhỏ dd lên gi y V t m Carotenoid H2SO4 Tinh d u Triterpenoid t Alkaloid Coumarin Anthraglycosid Flavonoid Anthocyanosid X l c ng LiebermannBurchard Thuốc th chung alkaloid Phát quang ki m Phát quang m Dung d ch ki m có màu h ng tớ ỏ Dung d ch có màu h ng tớ ỏ M H ỏ HCl HCl/t° Tannin Dung d ch FeCl3 H p ch t polyuronic K tt a KOH 10 % Proanthocyanosid Axit hữ ỏ nâu – tím, lớp có màu xanh l c KOH Saponin K t qu nh tính K t qu d ch chi t nh D ch D ch D ch tính chi t chi t chi t chung CHCl3 c n ước ới c n Bố Cao chi t Xanh ỏ X (Polyphenol) Dung d ch T a tr ng (Tannin) Gelatin muối L c m nh B tb n dung d ước Na2CO3 S ib t Pha loãng với c n 90 % T a tr ng – vàng nâu K t qu nh tính d ch chi t K t qu nh tính D ch D ch D ch chi t chi t chi t chung CHCl3 c n ước - - - - - - - - - - - - + + + + - - - - - - - - - - - - - - - - - - - + + + - - + + + + - - - - - - + - - + + + + + + ± ± ± ± ± ± + + + + + + + + + + + + + + + + - + + + - - Chú thích (-) - Khơng có, (±) - Nghi ng , (+) - Có Có th có ph n Đại học Nguyễn Tất Thành c hi n Khơng có m t c a nhóm ho t ch t d ch chi t Tạp chí Khoa học & Cơng nghệ Số 13 3.2 Kh S ố 67 c tính c p ố L ố L ố khối ng S Ở ố T ướ ố S ỗ Hình (b) chu T B ng T l t vong c a chu t 72 gi li u khác Li u (g/kg) 24 26 Phân su t t vong (%) 0 Số 6 6 6 0 1 1 0 ng v t/lô Số ng v t ch t/lô Phân su t t vong (%) 30 38 48 60 16,67 16,67 16,67 16,67 16,67 16,67 16,67 16,67 S L = K = T ỏ Q T ư ố i th (a) chu t c sinh lí sau 14 ngày Hình i th (a) chu t (b) chu c dùng cao li u ng uống sau 14 ngày theo dõi 3.3 Kh ng gi K t qu kh ng gi cao chi t qu chuối h t rừng Chu t t c dùng thuốc với th tích 0,1 mL/10g khối N ước nóng b p cách th t giữ nh nhi (55 ± 0,5) C S d ng h b ghi nh n ti m th i c a chu t Ti m th c ghi nh n t i th ước dùng thuốc (30, 60, 90 120) phút sau dùng thuốc K t qu c ghi nh H ư Đại học Nguyễn Tất Thành Tạp chí Khoa học & Cơng nghệ Số 13 68 Hình Ti m th i gi Sau uống thuốc th nghi ối ch ng dùng morphin li u ng uống có ti m th i gi t ý ống kê so với lô ch ng suốt th i gian th nghi m (p < N y morphin li ng uống th hi ng gi t Các lô th nghi m s d ng cao qu chuối h t r ng li u không th hi ng gi m th i gi t ý ống kê so với lơ ch ng (p > 0,05) Hình Số l n c a lô ch Chu t lơ ch ng có số l nb nh t kho ng th i gian t (5 10) phút sau tiêm axit acetic, sau kho ng th ốl au Đại học Nguyễn Tất Thành ữa lô vào kho ng th i gian 3.4 Kh o sát tác ng gi i biên K t qu kh ng gi i biên cao chi t qu chuối h t rừng Sau dùng thuốc 60 phút, t t c chu b ng tiêm phúc mô dung d ch axit acetic % pha ước c t Mỗi chu t bocal th m số l n chu t kho ng th i gian liên t c sau tiêm axit acetic (5 10, 10 15, 15 20, 20 25, 25 30, 30 35 35 40) phút K t qu ư H ối ch ng, lô th nghi m qu n gi L ối ch ng dùng ibuprofen li u 40 ng uống có số l n gi m có ý ống kê so với lô ch ng t phút th kéo Tạp chí Khoa học & Cơng nghệ Số 13 69 dài suốt th i gian th nghi < N v y ibuprofen li ng uống có hi u qu làm gi i biên Lơ th nghi m s d ng cao qu chuối h t r ng li u 1,3 g/kg 2,6 g/kg có số l n gi m có ý ống kê so với lơ ch ng (p < 0,05) (Hình 5) So vớ ối ch ng dùng ibuprofen li u 40 mg/kg, số l n n c a lô khác bi ý thống kê V y cao qu chuối h t r ng li u 1,3 g/kg Hình phù chân chu t c a lô ch 2,6 g/kg th hi ng gi i biên tác ư ofen li u 40 mg/kg mơ hình th nghi m 3.5 Kh ng kháng viêm c a cao chi t qu chuối h t r ng Chu t c cho uống với li u 0,1 mL/10 g khối ng uống l n ngày ngày ti p theo Theo d tích chân chu t ngày vào m t gi nh nh K t qu ư H ối ch ng, lô th nghi m L ối ch ng s d ng diclofenac li u mg/kg b ng ng uống cho k t qu ý ống kê so với lơ ch u ch ng tỏ có th s d ng thuố ng diclofenac với li u PO u tr T ng kháng viêm c a cao qu chuối h t r ng li u 1,3 g/kg vào ngày th a trình th nghi m, khác bi ý ống kê so với lô ch ng K t qu kh o sát lô th nghi m cao qu chuối h t r ng li u 2,6 g/kg cho th ng kháng viêm khác bi ý ống kê so với lô ch ng t ngày th nh n ngày th sáu trình th nghi m Kh mm hi n rõ vào ngày th nh t sau gây viêm (gi m 23 % so với m th m gi sau tiêm) So với lô dùng thuốc diclofenac li u mg/kg, lơ th nghi m li u 2,6 g/kg có tác d ng gi m phù chân chu t m nh t ngày th hai, có tác d ng g ư ngày th ba, th ng gi m phù y ối th m mô hình trình th nghi m Tuy nhiên s khác bi t ý ống kê K t lu n K t qu kh thành ph n hóa th c v nh c cao chi t qu chuối h t r ng s hi n di n c a nhóm h p ch t triterpenoid t do, flavonoid, tannin, proanthocyanosid, saponin, axit hữu N u cho th y cao chi t chuối h t r ng li u 1,3 g/kg 2,6 g/kg th hi ng kháng viêm gi ng gi c nghi m K t qu c tài có th ướng cho nghiên c d ng ch ph m t nhiên hỗ tr u tr b ư ớp Lời cảm ơn Nghiên c c tài tr b i Quỹ Phát tri n Khoa h c Công ngh - i h c Nguy n T T tài mã số 2020.01.073 H -NCKH Đại học Nguyễn Tất Thành Tạp chí Khoa học & Cơng nghệ Số 13 70 Tài li u tham kh o V V Từ n Cây thuốc Việt Nam, T p I, NXB Y h c, Hà N i, tr 473 Di Stasi L.C., Oliveira G.P., Carvalhaes M.A., Queiroz M., Jr., et al (2002), "Medicinal plants popularly used in the Brazilian Tropical Atlantic Forest", Fitoterapia, Fitoterapia, 73 (1) pp 69-91 Muthee J.K., Gakuya D.W., Mbaria J.M.,Kareru P.G., et al (2011), "Ethnobotanical study of anthelmintic and other medicinal plants traditionally used in Loitoktok district of Kenya", J Ethnopharmacol, Journal of Ethnopharmacology, 135 (1) pp 15-21 Nimisha Sarah Mathew, Pradeep Singh Negi “T f w M w” Journal of Ethnopharmacology, 196, pp 124-140 Abad T., McNaughton-Smith, G., Fletcher, W Q., Echeverri, F., Diaz-Penate, R (2000), "Isolation of (S)-(+)naproxene from Musa acuminata Inhibitory effect of naproxene and its 7-methoxy isomer on constitutive COX1 and inducible COX-2", Planta Med 66(5), pp 471-473 Lee KH, Syahida A, Abdullah N, Zuhainis SW (2011), "Evaluation of anti-inflammatory, antioxidant and antinociceptive activities of six Malaysian medicinal plants", Journal of Medicinal Plants Research 5(23), pp 555-563 Mỹ L T H N K Q ỳ "T ố " T p chí Y học Tp H Chí Minh, 6, tr 84 -87 T V S ỗQ ố V N T T ý "S ố Musa balbisiana ", T íD ọ , 5, tr 8-10 Cuilei, J 1984 Methodology for Analysis of Flowering Vegetables Drugs, Bucharest Faculty of Pharmacy, University of Romania 10 ỗ T í ủ ố , NX Y H N tr 15-189 11 ỗ T T ố ố ê ê ứ ụ í , NXB Y H N tr 17-426 Đại học Nguyễn Tất Thành Tạp chí Khoa học & Công nghệ Số 13 71 Investigation of the analgesic and anti-inflammatory effectes of extract from fruit of Musa acuminata Colla., Musaceae on white mice Vo Thi Thu Ha*, Nguyen Tran Hung Yen, Võ The Sang Pharmacy Faculty of Nguyen Tat Thanh University vttha@ntt.edu.vn Abstract In Vietnam, in folklore, forest wild bananas (Musa acuminata Colla., Musaceae) are used traditionally for the management of many diseases such as arthritis, diarrhea, allergies The objective of this study was to determine chemical composition, acute toxicity, analgesic and anti-inflammatory effects of extract from wild bananas collected in Tay Nguyen The extract was obtained by thoroughly soaking wild banana fruit with 60% ethanol alcohol The groups of active ingredients were quantified by the Ciuley method In the acute toxicity test, gave the mice extract to drink with the maximum possible dose The authors observed and recorded general behavioral changes, death rate of the mouse for 72 hours and up to for 14 days post-treatment The central analgesic effect were investigated on the mouse tail dipping model and the peripheral analgesic effect - on the model of causing cramping abdominal pain by acetic acid % The anti-inflammatory effects were investigated on the mouse paw edema model with 1% carrageenan Qualitative phytochemical analysis of the extract revealed the presence of many bioactive compounds such as free triterpenoids, flavonoids, tannins, proanthocyanosides, saponins, organic acids, polyuronics The results showed that the maximum tolerated dose ( ) that could cause death was 26 g/kg (Musa acuminata Colla extract/mouse body weight) The Musa acuminata Colla extract at doses of 1.3 g/kg and 2.6 g/kg mouse body weight had anti-inflammatory and peripheral analgesic effects but no central analgesic effect The results will be useful for further research on natural preparations used in supporting of the treatment of chronic diseases as osteoarthritis Keywords Musa acuminata Colla, acute toxicity, analgesic, anti – inflammatory, carrageenan Đại học Nguyễn Tất Thành ... kháng viêm c a cao qu chuối h t r ng li u 1,3 g/kg vào ngày th a trình th nghi m, khác bi ý ống kê so với lô ch ng K t qu kh o sát lô th nghi m cao qu chuối h t r ng li u 2,6 g/kg cho th ng kháng. .. thống kê V y cao qu chuối h t r ng li u 1,3 g/kg Hình phù chân chu t c a lô ch 2,6 g/kg th hi ng gi i biên tác ư ofen li u 40 mg/kg mơ hình th nghi m 3.5 Kh ng kháng viêm c a cao chi t qu chuối h... mơ hình kháng viêm f V ® N ng 50 mg, diclofenac thuốc kháng viêm không steroid, c dùng làm ch ối ch ng th nghi m kháng viêm 2.3 Kh thành ph n hóa th c v t nh tính nhóm h p ch t b c li u cao chi