NGHIÊN CỨU SẢN XUẤT DỊCH ĐẠM THỦY PHÂN TỪ NỘI TẠNG MỰC.Trong báo cáo này, chúng tôi đã nghiên cứu và đề xuất phương án để xử lý hợp lý nguồn phế liệu thuỷ sản là nội tạng mực nhằm tạo ra dịch đảm thủy phân có hàm lượng acid amin cao.
TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA ĐÀ NẴNG KHOA HÓA BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Đề tài: Nghiên cứu sản xuất dịch đạm thủy phân từ nội tạng mực SVTH: Đoàn Ngọc sinh Lớp: 10SH GVHD: ThS Đoàn Thị Hoài Nam Đà Nẵng- 2015 ĐẶT VẤN ĐỀ Việt Nam nước có điều kiện thuận lợi nuôi trồng đánh bắt thủy hải sản: -Kinh ngạch xuất mực năm 2014 Là 483 triệu la - Q trình sản xuất, chế biến mực xuất thải lượng lớn nội tạng mưc +Thải mơi trường bên ngồi; +Sử dụng phần làm thức ăn gia súc; Mục tiêu: Sử dụng nội tạng mực để sản xuất dịch đạm thủy phân - Giải vấn đề ô nhiễm môi trường; - Sản xuất nguồn dịch giàu đạm sử dụng thức ăn gia súc thủy hải sản VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 1.1 VẬT LIỆU: A: Nội tạng mực B: Enzyme Alcalse C: Vi khuẩn Bacillus subtilis 1.2 PHƯƠNG PHÁP: o Bảo quản -22 C Nội tạng mực Rã đơng, xay, pH=7, pha lỗng Xử lý Tự thủy phân Thủy phân Enzyme Alcalase VK Bacillus subtilis Khảo sát bảo quản + Na2S + Na2S+cô đặc + C6H5NaCO2 Sản phẩm + C6H5NaCO2+cô đặc o Phương pháp phân tích: - Xác định Nitơ acid amin Bằng phương pháp TCVN 3708-1990 - Xác định Nitơ NH3 Bằng phương pháp chưng cất lôi - Xác định tro Bằng phương pháp TCVN 8120-2009 - Xác định nito tổng số: Bằng phương pháp Kjeldahl - Xác định hàm ẩm: Bằng phương pháp sấy khô đến khối lượng không đổi KẾT QUẢ thảo luận 2.1 Kết xác định thông số tối ưu tự thủy phân thủy phân enzyme Alcalase 2.1.1.Xác định tỷ lệ pha loãng so với nguyên liệu Mẫu trắng Mẫu có Enzyme Hình 1: Khả thủy phân nội tạng mực mức pha loãng Sử dụng enzyme Alcalase 1% với tỷ lệ pha loãng mẫu 1:14 để thuỷ phân protein pH cho kết tốt 2.1.2.Xác định thời gian thủy phân tối ưu Mẫu trắng Mẫu có Enzyme Hình 2: Khả năngthủy phân nội tạng mực khoảng thời gian khác Sử dụng enzyme Alcalase với thời gian 2h để thuỷ phân protein nội tạng mực cho kết tốt 2.1.3.Xác định nhiệt độ thủy phân tối ưu Mẫu trắng Mẫu có Enzyme Hình 3: Khả thủy phân mức nhiệt độ khác o Sử dụng enzyme Alcalase nhiệt độ 50 C để thuỷ phân protein pH= cho kết tốt Như vậy: Nội tạng mực có bổ sung enzyme Alcalase thủy phân tốt so với tự thủy phân; Khi dùng enzyme Alcalase o 1% : Ở tỷ lệ pha loãng 1:14; 50 C sau mức độ thủy phân cao (Hàm lượng acid amin thu dịch thủy phân đạt khoảng 12-13g/l) 2.2 Kết xác định thông số tối ưu dùng VK B.subtilis 2.2.1.Khảo sát đường cong sinh trưởng B subtilis (Nhân giống cấp 1) a Đo OD 600nm b Đường kính vịng thủy phân 27 37 47 57 8h 14h 20h Hình 4: Khảo sát đường cong sinh trưởng VK B subtilis Trong môi trường nhân giống cấp (phụ lục 1), vi khuẩn B.subtilis sinh trưởng, phát triển tốt cho khả o sinh tổng hợp enzyme protease mạnh sau 14h nuôi cấy 37 C 10 2.2.2 Khảo sát khả sinh enzyme protease VK B subtilis môi trường nhân giống cấp Tỷ lệ pha loãng 10 15 Đường kính vịng thủy 0 phân (mm) Hình vịng thủy phân 11 o Ở 37 C 14h, mơi trường nhân giống cấp có V Cấp 1: V nội tạng mực = 14:1 xuất vòng thủy phân 4mm 2.2.3 Kết khả thủy phân nội tạng mực VK B.subtilis Tỷ lệ pha lỗng 10 15 20 Đường kính vịng thủy phân 2 (mm) Hình vịng thủy phân Hàm lượng acid amin dịch thủy phân (g/l) Thủy phân nội tạng mực với thành phần V H2O: V Cấp 1: V Nội tạng mực = 14:1:1 cho dịch thủy phân có độ đạm cao (5g/l) 12 2.3 Kết so sánh dịch đạm thủy phân thu dùng enzyme Alcalse, vi khuẩn B.subtilis tự thủy phân Thông số Tự thủy phân Thủy phân Thủy phân B Enzyme Alcalase subtilis Độ ẩm (%) 83.5 83.5 83.5 Hàm lượng Nito tổng (g/l) 22.2 33 19.05 Hàm lượng N-acid amin 12.5 Hàm lượng N-NH3 (g/l) 0.7 0.4 Tro (%) 5.85 5.2 (g/l) 13 2.4 Kết so sánh chất bảo quản khảo sát chất bảo quản Na2S Khảo sát chất bảo quản NaC6H5CO2 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 0.06 0.07 0.08 0.09 0.1 Tăng [Na2S] từ 0.01 lên 0.04 % [NaC6H5CO2] từ 0.06 lên 0.08% bổ sung vào dịch đạm thủy phân hàm lượng NNH3của dịch thủy phân điều giảm Hàm lượng NNH3 tạo thành bổ sung NaC6H5CO2 nồng độ 0.08% thấp 14 2.5 Kết đánh giá chất lượng bảo quản dùng NaC 6H5CO2+cô đặc cô đặc cô đặc cô đặc+NaC6H5CO2 Như dùng NaC6H5CO2 nồng độ 0.08% kết hợp đặc để phịng thối cho dịch đạm thủy phân sẻ cho hiệu cao 15 KẾT LUẬN Thủy phân enzyme Alcalse 1%sẻ cho hiệu suất thủy phân đạt kết tốt so với tự thủy phân thủy phân vi khuẩn Bacillus subtilis Thông số tối ưu dùng Enzyme Alcalse 1% pH=7, t 0=50oC, thời gian thủy phân Bổ sung chất bảo quản NaC6H5CO2 nồng độ 0.08% kết hợp cô đặc để phòng thối cho dịch thủy phân sẻ cho kết tốt 16 KIẾN NGHỊ • Cần nghiên cứu thêm chất bảo quản phù hợp dùng thuỷ phân phế liệu mực nhằm thay C6H5NaCO2 dùng đề tài với tỷ lệ cao • - Nghiên cứu sử dụng dịch đạm thủy phân chế biến thức ăn ni tơm TÀI LIỆU THAM KHẢO • Nguyễn Thị Mỹ Hương, sản xuất sản phẩm thủy phân protein từ đầu cá ngừ vây vàng protease thương mại • Nguyễn Thị Xuân Hiền, Nghiên cứu khả chịu nhiệt bào tử enzym protease Bacillus subtilis, khóa luận tốt nghiệp, Đại học Bách Khoa Đà Nẵng • Julio Humberto Co ´rdova-Murueta, Fernando Luis Garcı´a-Carren˜o, Nutritive value of squid and hydrolyzed protein supplement in shrimp feed • http://baocongthuong.com.vn/nhieu-trien-vong-cho-xuat-khau-muc-bach-tuoc.html CÁM ƠN THẦY CÔ VÀ CÁC BẠN ĐÃ LẮNG NGHE! 19 ... vịng thủy phân 2 (mm) Hình vịng thủy phân Hàm lượng acid amin dịch thủy phân (g/l) ? ?Thủy phân nội tạng mực với thành phần V H2O: V Cấp 1: V Nội tạng mực = 14:1:1 cho dịch thủy phân có độ đạm cao... dụng nội tạng mực để sản xuất dịch đạm thủy phân - Giải vấn đề ô nhiễm môi trường; - Sản xuất nguồn dịch giàu đạm sử dụng thức ăn gia súc thủy hải sản VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 1.1 VẬT LIỆU: A: Nội. .. kính vịng thủy 0 phân (mm) Hình vịng thủy phân 11 o Ở 37 C 14h, mơi trường nhân giống cấp có V Cấp 1: V nội tạng mực = 14:1 xuất vòng thủy phân 4mm 2.2.3 Kết khả thủy phân nội tạng mực VK B.subtilis