NGHIÊN cứu tác ĐỘNG GIẢM ĐAU, KHÁNG VIÊM của các CAO PHÂN đoạn dược LIỆU lá ĐẮNG (VERNONIA AMYGDALINA DEL ) TRÊN CHUỘT NHẮT

ĐẠI HỌC LẠC HỒNG – KHOA DƯỢC – BỘ MÔN DƯỢC LÝ/ DƯỢC LÂM SÀNG BÁO CÁO NGHIÊN CỨU KHOA HỌC ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU TÁC ĐỘNG GIẢM ĐAU, KHÁNG VIÊM CỦA CÁC CAO PHÂN ĐOẠN DƯỢC LIỆU LÁ ĐẮNG (VERNONIA AMYGDALINA DEL.) TRÊN CHUỘT NHẮT Sinh viên thực hiện: Đinh Diệu Quyên Hoàng Thúy Hiền Giảng viên hướng dẫn: ThS Đồn Văn Viên ThS Ngơ Văn Cường NỘI DUNG ĐẶT VẤN ĐỀ TỔNG QUAN DƯỢC LIỆU DƯỢC LÝ KẾT LUẬN – KIẾN NGHỊ ĐẶT VẤN ĐỀ “In Australia, the annual cost of chronic pain was estimated in 2007 to be $10,847 per person” - Nicholas Henschke et al (2015), “The Epidemiology and Economic Consequences of Pain”, Mayo Clinic “Diclofenac and etoricoxib together account for approximately one-third of all sales of NSAIDs in the 15 countries included in our analysis” - Patricia McGettigan, David Henry, “Use of Non-Steroidal AntiInflammatory Drugs That Elevate Cardiovascular Risk: An Examination of Sales and Essential Medicines Lists in Low-, Middle-, and High-Income Countries”, Plos Medicine ĐẶT VẤN ĐỀ Nhu cầu Chi phí Hiệu Khai thác hoạt tính kháng viêm, giảm đau từ dược liệu Dược liệu Lá đắng Nguồn:https ://www.thuocdantoc.org/duoc-lieu/cay-mat-gau ĐẶT VẤN ĐỀ MỤC TIÊU ĐỀ TÀI • Chiết cao tồn phần Lá đắng • Chiết cao phân đoạn Lá đắng với dung môi: nhexan, cloroform, EA n-butanol • Khảo sát tác động giảm đau cao phân đoạn thu chuột nhắt trắng theo mơ hình gây đau quặn acid acetic 0,7% • Khảo sát tác động kháng viêm cao phân đoạn thu chuột nhắt trắng theo mô hình gây phù chân chuột carrageenan 1% TỔNG QUAN DƯỢC LIỆU LÁ ĐẮNG Giới thực vật (Plantae) Ngành Ngọc Lan (Magnoliophyta) Lớp Ngọc Lan (Magnoliopsida) Phân lớp Cúc (Asteridae) Bộ Cúc (Asterales) Đặc điểm hình thái Lá đắng  Tác dụng dược lý: hạ đường huyết; điều trị rối loạn lipid huyết; hạ huyết áp; chống oxy hóa; bảo vệ gan; giảm đau, kháng viêm; kháng ký sinh trùng… Họ Cúc (Asteraceae) Chi Vernonia Loài Vernonia amygdalina Del TỔNG QUAN  Thành phần hóa học đắng • Steroid glucosid (saponin): Vernoniosid … • Flavonoid: Luteolin … • Sesquiterpen lacton: Vernolid; Vernodalol; Vernodalin; Vernomygdin… • Acid béo: acid linoleic … • Steroid alcol Tại Việt Nam • Luteolin – – O – glycoside; Cynarin; Vitexin (Hồ Thị Thúy Linh - 2016) • Vernoniacum B; Vernoniosid B1, B2; Vernomyosit C, C1; Vernomyosit E (Phạm Việt Cường cộng - 2019) TỔNG QUAN TỔNG QUAN VỀ ĐAU TỔNG QUAN TỔNG QUAN VỀ ĐAU ĐAU ĐAU Opioid mạnh (Morphin, Methadon…) +/- non – opioid +/- thuốc hỗ trợ Opioid yếu (Codein, Tramadol…) +/- non – opioid +/- thuốc hỗ trợ Non - opioid (Paracetamol, NSAIDs…) +/- thuốc hỗ trợ Nguồn: WHO's cancer pain ladder for adults TỔNG QUAN TỔNG QUAN VỀ KHÁNG VIÊM Kích thích viêm Kích thích sinh lý COX (enzym cấu trúc) TX-A2 (tiểu cầu) PG-I2 (niêm mạc dày…) COX (enzym cảm ứng) NSAIDs PG-E2 (thận…) Proteases Các yếu tố gây viêm khác Viêm PGs 10 KẾT QUẢ - BÀN LUẬN A Độ p h ù ch ân ch u ộ t (% ) THỬ NGHIỆM ĐÁNH GIÁ TÁC ĐỘNG KHÁNG VIÊM CỦA CAO TOÀN PHẦN LÁ ĐẮNG 90 80 (*), p < 0,05; (**), p < 0,01, so với lô chứng âm 70 60 50 40 30 * ** 20 ** 10 0Ngày Chứng âm * * Ibu 7,5 * * Cao TP 1000 * * ** Đồ thị biểu diễn phần trăm độ sưng phù chân chuột sau tiêm carrageenan (ngày 0) 30 phút sau uống cao toàn phần Lá đắng ngày (trong ngày) ** 37 KẾT QUẢ - BÀN LUẬN B KHẢO SÁT TÁC ĐỘNG KHÁNG VIÊM CỦA CAO PHÂN ĐOẠN LÁ ĐẮNG 100 Độ sưng phù (%) 80 60 40 20 0Ngày Chứng âm Ibu 7,5 n-hex 30 Đồ thị biểu diễn phần trăm độ sưng phù chân chuột sau tiêm carrageenan (ngày 0) 30 phút sau uống cao phân đoạn n-hexan Lá đắng ngày (trong ngày) 38 KẾT QUẢ - BÀN LUẬN B KHẢO SÁT TÁC ĐỘNG KHÁNG VIÊM CỦA CAO PHÂN ĐOẠN LÁ ĐẮNG 100 Độ sưng phù (%) 80 60 40 20 0 Ngày Chứng âm Ibu 7,5 CF 30 Đồ thị biểu diễn phần trăm độ sưng phù chân chuột sau tiêm carrageenan (ngày 0) 30 phút sau uống cao phân đoạn cloroform Lá đắng ngày (trong ngày) 39 KẾT QUẢ - BÀN LUẬN B KHẢO SÁT TÁC ĐỘNG KHÁNG VIÊM CỦA CAO PHÂN ĐOẠN LÁ ĐẮNG 100 Độ sưng phù (%) 80 60 40 20 0 Ngày Chứng âm Ibu 7,5 n-bu 80 Đồ thị biểu diễn phần trăm độ sưng phù chân chuột sau tiêm carrageenan (ngày 0) 30 phút sau uống cao phân đoạn n-butanol Lá đắng ngày (trong ngày) 40 KẾT QUẢ - BÀN LUẬN B KHẢO SÁT TÁC ĐỘNG KHÁNG VIÊM CỦA CAO PHÂN ĐOẠN LÁ ĐẮNG Độ sưng phù (%) 100 80 60 40 20 0 Ngày Chứng âm Ibu 7,5 Nước 800 Đồ thị biểu diễn phần trăm độ sưng phù chân chuột sau tiêm carrageenan (ngày 0) 30 phút sau uống cao phân đoạn nước Lá đắng ngày (trong ngày) 41 KẾT QUẢ - BÀN LUẬN B KHẢO SÁT TÁC ĐỘNG KHÁNG VIÊM CỦA CAO PHÂN ĐOẠN LÁ ĐẮNG 100 Độ sưng phù (%) 80 60 40 20 0 Ngày Chứng âm Ibu 7,5 EA 30 Đồ thị biểu diễn phần trăm độ sưng phù chân chuột sau tiêm carrageenan (ngày 0) 30 phút sau uống cao phân đoạn ethyl acetat Lá đắng ngày (trong ngày) 42 Độ phù chân chuột (%) KẾT QUẢ - BÀN LUẬN B KHẢO SÁT TÁC ĐỘNG KHÁNG VIÊM CỦA CAO PHÂN ĐOẠN LÁ ĐẮNG 100 Chứng âm 80 Ibu 7,5 n-hex 30 CF 30 EA 30 n-bu 80 Nước 800 (*), p < 0,05; (**), p < 0,01, so với lô chứng âm 60 40 * ** ** 20 ** ** * * ** * * ** 0Ngày Đồ thị biểu diễn phần trăm độ sưng phù chân chuột sau tiêm carrageenan (ngày 0) 30 phút sau uống cao phân đoạn Lá đắng ngày (trong ngày) ** 43 Độ ph ù ch ân ch u ộ t (% ) KẾT QUẢ - BÀN LUẬN B KHẢO SÁT TÁC ĐỘNG KHÁNG VIÊM CỦA CAO PHÂN ĐOẠN LÁ ĐẮNG 90 80 (*), p < 0,05; (**), p < 0,01, so với lô chứng âm 70 60 50 40 30 * * 20 ** 10 0Ngày * ** Chứng âm ** Ibu 7,5 * * ** * Cao TP 1000 ** EA 30 Đồ thị biểu diễn phần trăm độ giảm sưng phù chân chuột sau tiêm carrageenan (ngày 0) 30 phút sau uống cao toàn phần cao ethyl acetat ngày (trong ngày) 44 KẾT QUẢ - BÀN LUẬN Kết định tính cao Nhóm hợp chất Cao TP Cao n-hexan Cao cloroform Cao EA Cao n-butanol Cao nước Chất béo - - - Tinh dầu - - - Triterpenoid tự - - + Alkaloid + - - - + + Coumarin - - - - - - Anthranoid + - + + + + Flavonoid + - - + + + Anthocyanosid - - - - Proanthocyanidin - - +/- +/- Polyphenol + + + + Tanin - - - - Saponin + ++ + + Các chất khử + + + + Acid hữu - - - - 45 KẾT QUẢ - BÀN LUẬN Nguồn: A L Valverde cộng (2001), “Analgesic & anti-inflammatory actives of vernonioside B2 from Vernonia condensata”, Phytotherapy Research 46 KẾT QUẢ - BÀN LUẬN Nguồn: Megumi Funakoshi-Tago cộng (2011), “Anti-inflammatory activity of structurally related flavonoids, Apigenin, Luteolin and Fisetin”, International Immunopharmacology 47 KẾT LUẬN – KIẾN NGHỊ  Kết luận – Dược liệu • Thử tinh khiết: độ ẩm 11,32% độ tro 15,06% • Chiết xuất: kg dược liệu thu 4,2 kg cao lỏng toàn phần phương pháp ngấm kiệt với 70 lít cồn 70% • Phân tách: 4,2 kg cao toàn phần thành 73,96 g cao n-hexan; 45,70 g cao cloroform; 44,11 g cao ethyl acetat; 109,43 g cao n-butanol 1008,5 cao nước cịn lại • Sơ thành phần hóa học: Lá đắng chứa hợp chất: triterpenoid, alkaloid, polyphenol, flavonoid, saponin, anthranoid chất khử 48 KẾT LUẬN – KIẾN NGHỊ  Kết luận – Dược lý • Khảo sát tác động giảm đau: cao n-butanol liều 40 mg/kg cao nước liều 400 mg/kg cho tác động giảm đau tương đương paracetamol • Khảo sát tác động kháng viêm: cao ethyl acetat liều 30 mg/kg cho tác động kháng viêm tương đương ibuprofen 49 KẾT LUẬN – KIẾN NGHỊ  Kiến nghị • Khảo sát tác động, kháng viêm cao phân đoạn ethyl acetat Lá đắng mức liều thấp • Thử nghiệm giảm đau cao n-butanol cao nước mơ hình khác mơ hình phiến nóng, mơ hình gây đau formalin,… • Phân lập xác định cấu trúc saponin cao ethyl acetat n-butanol • Nghiên cứu hoạt tính dược lý khác cao toàn phần cao phân đoạn Lá đắng hạ huyết áp, giảm đường huyết, hạ lipid máu, kháng khuẩn… 50 CHÂN THÀNH CẢM ƠN QUÝ THẦY CÔ ĐÃ QUAN TÂM THEO DÕI ... Lơ cao TP (n=8): cao tồn phần liều 1000 mg/kg (po) 33 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU B KHẢO SÁT TÁC ĐỘNG KHÁNG VIÊM CỦA CAO PHÂN ĐOẠN LÁ ĐẮNG  ƯỚC TÍNH LIỀU CAO PHÂN ĐOẠN CHO CHUỘT UỐNG Cao TP (cao. .. sát tác động giảm đau cao phân đoạn thu chuột nhắt trắng theo mơ hình gây đau quặn acid acetic 0,7% • Khảo sát tác động kháng viêm cao phân đoạn thu chuột nhắt trắng theo mơ hình gây phù chân chuột. .. kháng viêm, giảm đau từ dược liệu Dược liệu Lá đắng Nguồn:https ://www.thuocdantoc.org/duoc-lieu/cay-mat-gau ĐẶT VẤN ĐỀ MỤC TIÊU ĐỀ TÀI • Chiết cao tồn phần Lá đắng • Chiết cao phân đoạn Lá đắng