Mục tiêu nghiên cứu của đề tài là xác định được nguyên nhân, đặc điểm sinh học, sinh thái và các yếu tố ảnh hưởng đến sự lan truyền bệnh vàng rụng lá cao su, làm cơ sở khoa học xây dựng các giải pháp phòng chống bệnh hiệu quả cho cây cao su tại Bình Phước.
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT VIỆN KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM NGUYỄN THỊ BÍCH NGỌC NGHIÊN CỨU BỆNH VÀNG RỤNG LÁ CAO SU Corynespora cassiicola (Berk & Curtis) Wei VÀ BIỆN PHÁP QUẢN LÝ TỔNG HỢP TẠI BÌNH PHƢỚC LUẬN ÁN TIẾN SĨ NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI, NĂM 2018 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT VIỆN KHOA HỌC NƠNG NGHIỆP VIỆT NAM NGUYỄN THỊ BÍCH NGỌC NGHIÊN CỨU BỆNH VÀNG RỤNG LÁ CAO SU Corynespora cassiicola (Berk & Curtis) Wei VÀ BIỆN PHÁP QUẢN LÝ TỔNG HỢP TẠI BÌNH PHƢỚC Chuyên ngành: Bảo vệ thực vật Mã số: 62 01 12 NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: TS Ngô Vĩnh Viễn PGS.TS Nguyễn Xuân Hồng HÀ NỘI, NĂM 2018 i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan: Đây cơng trình nghiên cứu tơi số kết cộng tác với cộng khác; Các số liệu kết trình bày luận án trung thực, phần cơng bố tạp chí khoa học chun ngành với đồng ý cho phép đồng tác giả; Phần cịn lại chưa cơng bố cơng trình khác Hà Nội, ngày tháng năm 2018 Nghiên cứu sinh Nguyễn Thị Bích Ngọc ii LỜI CẢM ƠN! Trước tiên, xin bày tỏ kính trọng long biết ơn sâu sắc TS Ngô Vĩnh Viễn PGS.TS Nguyễn Xuân Hồng, hai người Thày hướng dẫn, động viên giúp đỡ trình nghiên cứu viết luận án Những nhận xét đánh giá thày cô, đặc biệt gợi ý hướng giải vấn đề suốt trình nghiên cứu, thực bào học vô quý giá Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban Lãnh đạo Viện Khoa học Nông nghiệp Việt Nam, Ban Đào tạo Sau Đại học tạo điều kiện giúp đỡ thực đề tài năm qua Tôi xin gửi lời cảm ơn tới lãnh đạo Viện Bảo vệ thực vật, Bộ môn Bệnh nơi công tác, bạn bè đồng nghiệp gần xa chia sẻ, động viên giúp đỡ tơi hồn thành cơng trình nghiên cứu Tôi xin gửi lời cảm ơn đến Bộ Khoa học Cơng nghệ, cấp kinh phí cho thực đề tài độc lập cấp Nhà nước” Nghiên cứu giải pháp kỹ thuật để phòng trừ bệnh vàng rụng cao su Đông Nam Bộ” năm 2012-2014 Xin cảm ơn Sở Nông nghiệp PTNT tỉnh Bình Phước, Chi cục Trồng trọt BVTV Bình Phước, hộ nông dân trồng cao su tiểu điền Bình Phước tham gia làm thí nghiệm giúp đỡ để tơi hồn thành luận án Cuối cùng, xin cảm ơn bố mẹ, tình cảm yêu thương chồng con, anh chị em động viên, hỗ trợ tinh thần suốt thời gian học tập hoàn thành luận án Nghiên cứu sinh Nguyễn Thị Bích Ngọc iv MỤC LỤC MỞ ĐẦU Chƣơng CƠ SỞ KHOA HỌC VÀ TỔNG QUAN TÀI LIỆU NGHIÊN CỨU 1.1 Cơ sở khoa học đề tài 1.2 Tổng quan cao su 1.3 Những nghiên cứu nước 1.4 Những nghiên cứu nước 28 Chƣơng NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 42 2.1 Nội dung nghiên cứu 42 2.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu 42 2.3 Vật liệu nghiên cứu 42 2.4 Phương pháp nghiên cứu 44 Chƣơng KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 65 3.1 Xác định nguyên nhân gây bệnh vàng rụng cao su bình phước 65 3.2 Đặc điểm sinh học, sinh thái nấm c Cassiicola gây bệnh vàng rụng cao su 79 3.4 Nghiên cứu biện pháp quản lý bệnh vàng rụng cao su 107 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 140 TÀI LIỆU THAM KHẢO 143 PHỤ LỤC 161 vii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT ANRPC Hiệp hội nước sản xuất cao su thiên nhiên BP Bình Phước BVTV Bảo vệ thực vật C cassiicola Corynespora cassiicola CSB Chỉ số bệnh CSTN Cao su tự nhiên CTAB Cetyltrimethyl ammonium bromide CV (%) Hệ số biến động DNA Deoxyribonucleic acid DRC Dry rubber content Dvt Dịng vơ tính ĐN Đồng Nai HQPT Hiệu phòng trừ ITS Internally transcribed spacers KTCB Kiến thiết LSD Sai khác có ý nghĩa nhỏ PCR Phản ứng chuỗi trùng hợp (polymerase chain reaction) PDA Potato dextrose agar PSA Potato glucose agar QLTH Quản lý tổng hợp TE Tris acetate EDTA TLB Tỉ lệ bệnh VRL Vàng rụng VNCCSVN Viện Nghiên cứu Cao su Việt Nam WA Water agar v DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Diện tích cao su Bình Phước phân theo huyện, thị 37 Bảng 1.2 Diện tích nhiễm bệnh vàng rụng cao su Bình Phước 38 Bảng 1.3 Diện tích nhiễm bệnh vàng rụng giống RRIV (Bình Phước, 2010) 39 Bảng 3.1 Kết phân lập nấm C cassiicola từ dạng triệu chứng bệnh khác (Viện BVTV, 2012) 67 Bảng 3.2 Một số triệu chứng đốm lá, vàng rụng cao su 68 Bảng 3.3 Kết lây bệnh nhân tạo b ng nguồn nấm C cassiicola phân lập cao su (Bình Phước, 2012) 70 Bảng 3.4 Hình thái, kích thước bào từ mẫu phân lập nấm C cassiicola (Viện BVTV, 2012) 71 Bảng 3.5 Danh sách mẫu nấm C cassiicola hại cao su phân tích trình tự (Năm 2012) 73 Bảng 3.6 Giải trình tự tìm kiếm chuỗi gần gũi Ngân Hàng Gen (GenBank) 75 Bảng 3.7 So sánh trình tự vùng ITS mẫu nấm C cassiicola 77 Bảng 3.8 Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến phát triển nấm C cassiicola (Viện BVTV – 2012) 79 Bảng 3.9 Ảnh hưởng nhiệt độ đến phát triển nấm C cassiicola môi trường PDA (Viện BVTV – năm 2012) 81 Bảng 3.10 Ảnh hưởng độ pH đến phát triển nấm C cassiicola môi trường PDA (Viện BVTV – 2012) 83 Bảng 3.11 Ảnh hưởng chế độ chiếu sáng đến phát triển nấm C cassiicola môi trường PDA (Viện BVTV – 2012) 84 Bảng 3.12 Ảnh hưởng chế độ chiếu sáng đến hình thành bào tử nấm C cassicola môi trường dinh dưỡng (Viện BVTV – 2012) 85 Bảng 3.13 Khả nảy mầm bào tử nấm C cassiicola phân lập từ giống cao su khác (Viện BVTV, 2013) 86 vi Bảng 3.14 Khả xâm nhiễm gây bệnh nấm C cassiicola cao su độ tuổi khác (Viện BVTV, 2013) 87 Bảng 3.15 Khả tồn nấm C cassiicola tàn dư bệnh (Viện Bảo vệ thực vật, 2012-2013) 89 Bảng 3.16 Hậu bào tử hình thành từ mẫu phân lập nấm Corynespora cassiicola cao su ký chủ khác (Viện BVTV, 2015) 90 Bảng 3.17 Danh sách ký chủ nhiễm nấm C cassiicola (Bình Phước, 2012 – 2016) 93 Bảng 3.18 Đặc điểm hình thái nấm Corynespora cassiicola số ký chủ Việt nam (Viện BVTV, năm 2012-2015) 94 Bảng 3.19 Khả gây bệnh nguồn nấm C cassiicola phân lập từ ký chủ khác (Viện BVTV, 2013) 97 Bảng 3.20 Diễn biến bệnh vàng rụng cao su Bình Phước năm 2012, 2013 101 Bảng 3.21 Mức độ nhiễm bệnh vàng rụng số giống cao su trồng Bình Phước (năm 2012) 103 Bảng 3.22 Ảnh hưởng tuổi đến bệnh vàng rụng cao su 104 Bảng 3.23 Ảnh hưởng điều kiện đất trồng đến bệnh vàng rụng cao su (Bình Phước, năm 2012) 106 Bảng 3.24 Kết điều tra bệnh vàng rụng số dòng/ giống cao su vườn ươm công ty Cao su Lộc Ninh – Bình Phước ( 8/2012) .107 Bảng 3.25 Hiệu biện pháp thu dọn tàn dư đến mức độ bệnh vàng rụng cao su Bình Phước (năm 2013 - 2014) .109 Bảng 3.26 Ảnh hưởng phân bón đến mức độ bị bệnh vàng rụng cao su Bình Phước (Đồng Xồi – Bình Phước, 2013) 111 Bảng 3.27 Khả đối kháng vi khuẩn, xạ khuẩn với nấm Corynespora cassiicola điều kiện in vitro (Viện BVTV, 2015) 114 Bảng 3.28 Khả đối kháng chủng nấm đối kháng với nấm C cassiicola (Viện BVTV, 2013-2014) 116 Bảng 3.29 Hiệu hạn chế nguốn nấm C cassiicola tồn cao su rụng chế phẩm nấm Trichoderma (Viện BVTV, 2013) 118 vii Bảng 3.30 Hiệu hạn chế nguồn nấm C cassiicola tồn cao su rụng chế phẩm Trichoderma (Bình Phước, 2014) 119 Bảng 3.31 Hiệu lực số loại thuốc BVTV đến khả ức chế nấm C cassiicola điều kiện in vitro (Viện BVTV, 2012) 122 Bảng 3.32 Hiệu lực phòng trừ bệnh vàng rụng cao su số thuốc hoá BVTV điều kiện vườn ươm (Đồng Xồi-Bình Phước, 2012) .124 Bảng 3.33 Hiệu lực phòng trừ bệnh vàng rụng cao su số thuốc hoá BVTV vườn cao su kinh doanh (Đồng Xồi-Bình Phước, 2013) 125 Bảng 3.34 Ảnh hưởng thời điểm xử lý thuốc bệnh vàng rụng cao su Bình Phước (Quảng Hưng, Đồng Phú, 2013) 127 Bảng 3.35 Ảnh hưởng công cụ phun thuốc đến bệnh vàng rụng cao su (Bình Phước, 2013) 128 Bảng 3.36 Kết phân tích nấm C cassiicola lớp rụng mơ hình PTTH Bình Phước (Viện BVTV, 2013) 130 Bảng 3.37 Hiệu phịng trừ mơ hình PTTH bệnh vàng rụng cao su Bình Phước (2013) 131 Bảng 3.38 Thành phần bệnh hại cao su mơ hình QLTH bệnh vàng rụng Bình Phước (2013) 132 Bảng 3.39 Năng suất mủ cao su mơ hình quản lý tổng hợp bệnh vàng rụng cao su Bình Phước (2013 - 2014) .133 Bảng 3.40 Hiệu kinh tế mơ hình quản lý tổng hợp bệnh VRL so với sản xuất ngồi mơ hình Bình Phước (2013) 134 vi DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Chu kỳ bệnh nấm C cassiicola 14 Hình 1.2 Đặc điểm hình thái nấm C cassiicola 14 Hình 1.3 Hậu bào tử tạo điều kiện in vitro in vivo 19 Hình 3.1 Triệu chứng bệnh vàng rụng vườn ươm 69 Hình 3.2 Triệu chứng bệnh vàng rụng cao su vườn khai thác 69 Hình 3.3 Triệu chứng bệnh hại khác 69 Hình 3.4 Đặc điểm hình thái nấm C cassiicola môi trường nhân tạo PDA 72 Hình 3.5 PCR nhân vùng ITS b ng cặp mồi ITS4 ITS5 10 mẫu Corynespora phân lập cao su 75 Hình 3.6 Phân tích phả hệ dựa trình tự toàn vùng ITS mẫu nấm 78 Hình 3.7 Sự sinh trưởng nấm C cassiicola môi trường nuôi cấy khác 80 Hình 3.8 Sự sinh trưởng nấm điều kiện nhiệt độ khác 82 Hình 3.9 Bào tử nấm C cassiicola nảy mầm sau 12 h mơi trường PDA86 Hình 3.10 Bào tử nảy mầm xâm nhiễm vào mô cao su 88 Hình 3.11 Nấm C cassiicola phân lập từ mẫu rụng tháng 89 Hình 3.12 Hậu bào tử tạo từ mẫu phân lập cao su 92 Hình 3.13 Triệu chứng bệnh nấm C cassiicola gây ký chủ (A) Ớt; (B) Xoài; (C) Đu đủ; (D) Sắn; (E) Hồ tiêu; (F) Dây sữa bò; (G) Quả cà chua nhiễm nấm; (H) cao su thực sinh nhiễm bệnh vàng rụng vườn 94 Hình 3.14 Hình thái tản nấm C cassiicola ký chủ môi trường dinh dưỡng PDA 96 Hình 3.15 Bào tử nấm C cassiicola số ký chủ 96 ... rụng cao su bình phước 65 3.2 Đặc điểm sinh học, sinh thái nấm c Cassiicola gây bệnh vàng rụng cao su 79 3.4 Nghiên cứu biện pháp quản lý bệnh vàng rụng cao su 107 KẾT LUẬN VÀ... VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT VIỆN KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM NGUYỄN THỊ BÍCH NGỌC NGHIÊN CỨU BỆNH VÀNG RỤNG LÁ CAO SU Corynespora cassiicola (Berk & Curtis) Wei VÀ BIỆN PHÁP QUẢN LÝ TỔNG... cassiicola - Bệnh vàng rụng cao su 4.2 Phạm vi nghiên cứu Nghiên cứu xác định nguyên nhân gây bệnh vàng rụng cao su Bình Phước, đặc điểm sinh học, tính gây bệnh, phổ ký chủ nấm C cassiicola Nghiên