Đang tải... (xem toàn văn)
Bài viết trình bày về Vi khuẩn Lactobacillus thể hiện khả năng kháng nấm Aspergillus flavus sinh aflatoxin được phân lập từ hạt đậu phộng. Dịch nuôi cấy chủng vi khuẩn này sau 16 giờ cũng thể hiện khả năng kháng nấm Aspergillus flavus sinh aflatoxin từ khi khảo sát bằng phương cấy đối kháng trên đĩa thạch. Mời các bạn cùng tham khảo!
c điểm Mơ tả hình thái tế bào Các chủng Lactobacillus spp L5 L3 L1 L2N Que ngắn Que ngắn Que ngắn Que ngắn L10L Que ngắn KC1A C1 Que ngắn Que dài Nhuộm gram + + + + + + + Nhuộm bào tử - - - - - - - 323 Các chủng Lactobacillus spp Đặc điểm Mô tả hình thái tế bào L5 L3 L1 L2N Que ngắn Que ngắn Que ngắn Que ngắn L10L Que ngắn KC1A Que ngắn C1 Que dài Khả di động - - - - - - - Thử nghiệm Catalase - - - - - - - Khả sinh acid lactic (thuốc thử Uffelmann) + + + + + + + Lên men đường glucose, fructose, galactose, mannose, sucrose, lactose, maltose + + + + + + + Các thử nghiệm cho thấy, chủng L5, L3, L1, L2N, L10L, KC1A, C1 giữ đặc điểm chi Lactobacillus dựa Khóa phân loại Bergey Hình 1: Khuẩn lạc chủng L10L môi trường MRS agar tế bào C1 nhuộm gram 3.2 Khảo sát khả lên men lactic Hàm lượng acid tổng chủng vi khuẩn L5, L3, L1, L2N, L10L, KC1A, C1 xác định sau ni cấy mơi trường MRS Broth vịng 16 Trong chủng L2N sinh acid nhiều 1.656% chủng C1 có mật độ sinh khối cao ODhc600 nm = 9.036 Hình 2: Nồng độ acid tổng sinh khối sau lên men 16 môi trường MRS 324 3.3 Khảo sát khả đối kháng trực tiếp Aspergillus flavus CĐP1 Để khẳng định chủng vi khuẩn có khả kháng nấm, chúng tơi tiến hành thí nghiệm khảo sát khả đối kháng trực tiếp vi khuẩn Lactobacillus spp (L5, L3, L1, L2N, L10L, KC1A, C1) với chủng nấm sử dụng đối chứng dương Daconil Kết cho thấy chủng vi khuẩn có khả kháng nấm từ 25,3% - 47,5%, đối chứng Daconil thuốc trừ nấm thương mại kháng 19,3% cấy đồng thời nấm vi khuẩn Khi cấy khuẩn sau cấy nấm ngày để nấm phát triển trước thơng thường khả đối kháng giảm trường hợp Daconil chủng L10L, KC1A, L1, chủng L5 cho khả đối kháng không đổi, chủng L2N, L3, C1 lại cho khả đối kháng tăng Các chủng L1, L3, L5, L2N, L10L có khả kháng nấm Aspergillus sp CĐP1 xấp xỉ cao KC1A C1 Bảng 3: Tỷ lệ ức chế nấm (%) chủng Lactobacillus spp với CĐP1 Cấy khuẩn đồng thời cấy nấm Cấy khuẩn sau ngày cấy nấm L3 37,5 43,75 L5 40 39,2 L1 43,75 37,5 L2N 37,5 43,75 L10L 47,5 37,5 KC1A 28,75 16,25 C1 25,3 30,1 Daconil 19,3 15,24 Chủng lactic Đối chứng âm L5 Đối chứng dương (Daconil Hình 3: Thí nghiệm đối kháng Aspergillus flavus CĐP1 Lactobacillus sp L5 sau ngày đồng nuôi cấy 3.4 Kết bảo quản đậu phộng vi khuẩn lactic Các chủng L3 L5 chọn để tiếp tục khảo sát khả kháng nấm hạt đậu phộng Bảng cho thấy hai chủng L3 L5 kháng nấm Asp flavus CĐP2 khác Chủng L5 kháng nấm không xử lý nhiệt, pH kháng nấm tốt pH acid sau nuôi cấy Ngược lại, chủng L3 phải xử lý nhiệt trung hòa pH lại có khả kháng nấm tốt trường hợp khác 325 Bảng 4: Số ngày chưa mọc tơ nấm từ cấy nấm Chủng Không xử lý pH6 100 oC-15 phút pH6, 100 oC-15 phút ĐC- (H2O) Daconil L3 2 4.3 6.3 L5 4.7 6.3 1 6.3 KẾT LUẬN Tất chủng vi khuẩn Lactobacillus spp (L5, L3, L1, L2N, L10L, KC1A, C1) có khả kháng nấm cấy đồng thời cấy khuẩn sau nấm 24 Bản chất hợp chất kháng nấm chủng khác nhau, cịn phụ thuộc vào xử lý nhiệt hịa sau ni cấy Kết cho thấy nên khảo sát khả kháng nấm invivo mở rộng cho chủng đối kháng invitro, sau kết hợp chủng có khả kháng nấm khác để sản xuất chế phẩm xử lý hạt giống TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] ARNOLD J P, M.D (1987) ‚A New Test For Lactic Acid In The Gastric Contents And A Method of Estimating Approximately The Quantity Present‛ The Journal of the American Medical Association (JAMA) Vol XXIX, No.08 pp 371 [2] CAST (1989) Mycotoxins: Economic and health risks Task Force Report No.116 Ames, Iowa, United States: Council for Agricultural Science and Technology (CAST) [3] Kim Jeong Dong (2005) Antifungal Activity of Lactic Acid Bacteria Isolated from Kimchi Against Aspergillus fumigatu Inha University, Incheon: Institute of Industrial Biotechnology [4] Laitila A, Alakomi H-L, Raaska L, Mattila-Sandholm T and Haikara A (2002) Antifungal activities of two Lactobacillus plantarum strains against Fusarium moulds in vitro and in malting of barley Findland : VTT Biotechnology [5] Muñoz R, Arena M.E,Silva J,González S.N (2010) Inhibition of mycotoxin-producing Aspergillus nomius vsc 23 by lactic acid bacteria and Saccharomyces cerevisiae Argentina: Facultad de Bioquímica 326 ... sau lên men 16 môi trường MRS 324 3.3 Khảo sát khả đối kháng trực tiếp Aspergillus flavus CĐP1 Để khẳng định chủng vi khuẩn có khả kháng nấm, chúng tơi tiến hành thí nghiệm khảo sát khả đối kháng. .. có khả kháng nấm cấy đồng thời cấy khuẩn sau nấm 24 Bản chất hợp chất kháng nấm chủng khác nhau, cịn phụ thuộc vào xử lý nhiệt hịa sau ni cấy Kết cho thấy nên khảo sát khả kháng nấm invivo mở... 47,5%, đối chứng Daconil thuốc trừ nấm thương mại kháng 19,3% cấy đồng thời nấm vi khuẩn Khi cấy khuẩn sau cấy nấm ngày để nấm phát triển trước thơng thường khả đối kháng giảm trường hợp Daconil chủng