Tìm hiểu và áp dụng các chất điều hòa sinh trưởng thực vật để kiểm soát hiện tượng rụng trái non xoài mangifera indica l

ĐẠI HỌC QUỐC GIA TP HCM TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN LÊ THỊ TRUNG TÌM HIỂU VÀ ÁP DỤNG CÁC CHẤT ĐIỀU HÒA SINH TRƢỞNG THỰC VẬT ĐỂ KIỂM SỐT HIỆN TƢỢNG RỤNG TRÁI NON XỒI (Mangifera indica L.) Chuyên ngành: Sinh lý thực vật Mã số: 1.05.17 LUẬN ÁN TIẾN SĨ NGÀNH SINH HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: GS.TS Mai Trần Ngọc Tiếng PGS TS Bùi Trang Việt TP HỒ CHÍ MINH - 2003 CỘNG HỊA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu, kết nêu luận án trung thực chƣa đƣợc công bố cơng trình khác Tác giả luận án, Ký tên Lê Thị Trung LỜI CẢM ƠN Xin đƣợc bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến: - GS.TS MAI TRẦN NGỌC TIẾNG, ngƣời truyền đạt nhiều kiến thức q báu suốt thời gian chúng tơi học đại học sau Cô gợi ý đề tài, hƣớng dẫn nghiên cứu cho lời khuyên bổ ích thời gian thực luận án - PGS.TS BÙI TRANG VIỆT, ngƣời tận tình dẫn, bỏ nhiều cơng sức giúp đỡ chúng tơi hồn thành luận án Thầy cho nhiều kinh nghiệm học tập nghiên cứu khoa học Xin chân thành cảm ơn: - GS.TS MAI VĂN QUYỀN, Viện Khoa học Kỹ thuật Nông nghiệp Miền Nam, Chủ tịch Hội đồng - PGS.TS TRẦN VĂN MINH, Viện Sinh học Nhiệt đới Tp HCM, Phản biện - PGS.TS LÊ VĂN HÒA, Trƣờng Đại học Cần Thơ, Phản biện - PGS.TS NGUYỄN MINH CHÂU, Viện Nghiên cứu Cây Ăn Miền Nam, Phản biện - TS NGUYỄN DU SANH, Trƣờng Đại học Khoa học Tự nhiên - ĐHQG Tp HCM, Thƣký Hội đồng - GS.TS MAI TRẦN NGỌC TIẾNG, Trƣờng Đại học Khoa học Tự nhiên ĐHQG Tp HCM, Ủy viên - PGS.TS BÙI CHÍ BỬU, Viện Lúa Đồng sơng Cửu Long, Ủy viên dành nhiều q báu để tham gia Hội đồng, đọc góp ý cho luận án Xin chân thành cảm ơn giảng dạy, đóng góp ý kiến, động viên giúp đỡ của: - PGS.TS Bùi Mạnh Nhị Ban Giám Hiệu Trƣờng Đại học Sƣ Phạm Tp Hồ Chí Minh - Q Thày Cơ đồng nghiệp giảng dạy Khoa Sinh, Trƣờng Đại học Sƣ phạm Tp Hồ Chí Minh - Q Thày Cơ giảng dạy Khoa Sinh, Trƣờng Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Tp Hồ Chí Minh - Bộ mơn Sinh lý thực vật - Di truyền, Khoa Sinh, Trƣờng Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Tp Hồ Chí Minh - PGS.TS Trần Linh Thƣớc Bộ mơn Vi sinh - Sinh học phân tử, Trƣờng Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Tp Hồ Chí Minh TS Bùi Văn Lệ Bộ mơn Cơng nghệ Sinh học, Trƣờng Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Tp Hồ Chí Minh - PGS.TS Hồ Huỳnh Thùy Dƣơng Phòng Quản lý Khoa học - Hợp tác Quốc tế Sau Đại học, Trƣờng Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Tp Hồ Chí Minh - Ơng Phạm Ngọc Trang Phịng Quản Trị-Thiết bị, Trƣờng Đại học Sƣ Phạm Tp Hồ Chí Minh - Phịng Khoa học Cơng nghệ - Sau Đại học, Phòng Kế hoạch - Tài Chánh, Phòng Tổ chức - Hành chánh, Thƣ viện Trƣờng Đại học Sƣ Phạm Tp Hồ Chí Minh - GS.TS Marc Laulier, Trƣờng Đại học Maine, Cộng Hòa Pháp - GS.TS Gérard Tremblin, Trƣờng Đại học Maine, Cộng Hòa Pháp - GS.TS Marie-Thérèse Le Page-Degivry, Trƣờng Đại học Nice-Sophia Antipolis, Cộng Hòa Pháp - TS Annick Manceau, TS Jean-Luc Mouget, đồng nghiệp Trƣờng Đại học Maine, Cộng Hòa Pháp - KS Elisabeth Pradier, Trƣờng Đại học Maine, Cộng Hòa Pháp KTV Christelle Vachoux, Trƣờng Đại học Maine, Cộng Hòa Pháp KS.Ginette Garello, Trƣờng Đại học NiceSophia Antipolis, Cộng Hòa Pháp - NCS Malko Rech, Trƣờng Đại học Maine, Cộng Hòa Pháp - Ông Alex Brayle, Phụ trách khối Pháp ngữ trƣờng Đại học, chi nhánh Tp Hồ Chí Minh tổ chức AUF - Bà Hồ Thị Điệp, Trƣởng Trại Giống Cây trồng Đồng Tiến - Hốc Mơn Ơng Huỳnh Tấn Nhựt, Phó Trƣởng Trại - KS Chung Thái Khang, KS Trƣơng Phƣớc Lộc, Phòng Kỹ thuật Trại Giống Cây trồng Đồng Tiến - Hóc Mơn - Th.S Cung Hồng Phi Phƣợng, Trƣởng Phịng cấy mơ, Cơng ty Giống Cây trồng Tp Hồ Chí Minh - KS Nguyễn Ngữ, Phân Viện Cơng nghệ Sau thu hoạch Tp Hồ Chí Minh - TS Nguyễn Văn Kình, TS Võ Thị Bạch Huệ, Đại học Y Dƣợc Tp Hồ Chí Minh - TS Trƣơng Thị Đẹp, Đại học Y Dƣợc Tp Hồ Chí Minh - TS Nguyễn Du Sanh, TS Võ Thị Bạch Mai, Th.S Phan Ngô Hoang, Th.S Trần Thanh Hƣơng, Trƣờng Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Tp Hồ Chí Minh - Th.S Võ Hùng Nhiệm, Công ty Dịch vụ Phát triển Nông nghiệp - Đồng Tháp - Th.S Võ Thế Truyền, Viện Nghiên cứu Cây Ăn Miền Nam - CN Võ Anh Kiệt, Bộ mơn Sinh lý - Sinh hóa - Vi sinh, Trƣờng Đại học Sƣ phạm Tp Hồ Chí Minh - CN Nguyễn Xuân Dũng, học viên Cao học, Bộ môn Sinh lý thực vật - Di truyền, Trƣờng Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Tp Hồ Chí Minh - Th.S Phạm Thị Nhƣ Oanh, Trƣờng Cao đẳng Sƣ phạm Bến Tre, Th.S Trần Thị Ngọc Diệp, Phân Viện Cơng nghệ Sau thu hoạch Tp Hồ Chí Minh Đóng góp khơng nhỏ thành cơng ngày hơm nay, xin đƣợc bày tỏ lòng biết ơn Ba, Mẹ, Mẹ chồng tôi, Chồng giúp đỡ nhiều tinh thần vật chất để tơi hồn thành luận án i MỤC LỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT ix DANH MỤC CÁC BẢNG x DANH MỤC CÁC HÌNH xiii DANH MỤC CÁC ẢNH xvi MỞ ĐẦU CHƢƠNG I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Định nghĩa trái 1.2 Các đặc tính tổng quát chất điều hòa sinh trƣởng thực vật 1.2.1 Định nghĩa 1.2.2 Các đặc tính tổng quát 1.2.2.1 Cấu trúc hóa học 1.2.2.2 Đặc tính tổng quát 1.3 Sự thành lập tăng trƣởng trái 1.3.1 Sự thụ phấn 1.3.2 Sự thụ tinh thành lập trái 1.3.3 Sự tạo hột phát triển phôi 1.3.4 Hiện tƣợng đa phôi 1.3.5 Đƣờng cong tăng trƣởng trái 10 1.4 Vai trò chất điều hòa sinh trƣởng thực vật tăng trƣởng trái 11 1.4.1 Các chất tăng trƣởng tổng cộng auxin 11 1.4.2 Các giberelin 12 ii 1.4.3 Các citokinin 12 1.4.4 Acid abcisic 13 1.4.5 Etilen 14 1.5 Hiện tƣợng rụng thực vật 14 1.5.1 Định nghĩa 14 1.5.2 Các sinh trắc nghiệm 14 1.5.3 Sự thay đổi cấu trúc tế bào vùng rụng 15 1.5.3.1 Cấu tạo vách tế bào 15 1.5.3.2 Cấu trúc vùng rụng 16 1.5.3.3 Hai kiểu rụng 17 1.5.3.4 Hệ thống mạch vùng rụng 17 1.5.4 Các yếu tố môi trƣờng liên quan rụng 17 1.5.5 Các thay đổi sinh lý rụng 18 1.5.5.1 Trạng thái lão suy tế bào vùng rụng 18 1.5.5.2 Hiện tƣợng tƣơng quan vùng rụng với quan khác 18 1.5.5.3 Sự tƣơng quan quan dinh dƣỡng sinh sản 19 1.5.5.4 Cân carbohydrat / nitrogen 19 1.5.5.5 Sự hô hấp 19 1.5.5.6 Hoạt động đƣờng sinh học phân tử 19 1.5.6 Sự biến đối enzym vùng rụng 20 1.5.6.1 Sự gia tăng hoạt tính pectinaz 20 1.5.6.2 Sự gia tăng hoạt tính cellulaz 20 1.5.6.3 Sự giảm hoạt tính pectin metil esteraz (PME) 20 1.6 Vai trò chất điều hòa sinh trƣởng thực vật rụng 20 1.6.1 Vai trò auxin 20 iii 1.6.2 Vai trò citokinin 23 1.6.3 Vai trò giberelin 23 1.6.4 Vai trò acid abcisic 23 1.6.5 Vai trò etilen 24 1.7 Cây xoài nghiên cứu liên quan 24 1.7.1 Cây xoài 24 1.7.2 Các nghiên cứu liên quan 26 CHƢƠNG : VẬT LIỆU – PHƢƠNG PHÁP 28 VẬT LIỆU 28 PHƢƠNG PHÁP 30 2.1 Theo dõi tăng trƣởng trái tƣợng rụng thiên nhiên 30 2.1.1 Theo dõi tăng trƣởng trái 30 2.1.2 Theo dõi rụng trái theo thời gian giai đoạn tăng trƣởng phát hoa 30 2.1.3 Theo dõi tƣợng rụng theo thời gian giai đoạn phát hoa đạt kích thƣớc tối đa 31 2.1.4 Theo dõi rụng theo tuổi trái 31 2.2 Sinh trắc nghiệm khúc cắt vùng rụng trái xoài để theo dõi tốc độ rụng xác định thời rụng t50 34 2.3 Quan sát hình thái giải phẫu 34 2.3.1 Các biến đổi hình thái phơi vùng rụng 34 2.3.2 Các biến đổi hình thái vùng rụng theo thời gian 36 2.3.2.1 Cấu trúc vùng rụng 36 2.3.2.2 Các biến đổi cấu trúc trình rụng 36 2.3.3 Các biến đổi cấu trúc vùng rụng dƣới tác dụng iv chất điều hòa sinh trƣởng thực vật 36 2.4 Khảo sát ảnh hƣởng thay đối nhiệt độ trình rụng 36 2.5 Khảo sát số biến đối sinh lý hóa học xảy vùng rụng trái xoài giai đoạn tăng trƣởng khác phát hoa 37 2.5.1 Cƣờng độ quang hợp hô hấp 38 2.5.1 Sự khí etilen vùng rụng 39 2.5.2 Hàm lƣợng RNA protein tổng số 39 2.5.3.1 Ly trích đo RNA 39 2.5.3.2 Ly trích đo protein 40 2.5.4 Kiểm chứng tính ngun vẹn DNA q trình rụng 40 2.5.5 Đo hàm lƣợng đƣờng tống số 42 2.5.6 Đo hàm lƣợng tinh bột 43 2.5.7 Biến đối hàm lƣợng diệp lục tố xảy vùng rụng 43 2.6 Đo hàm lƣợng chất điều hòa sinh trƣởng thực vật 44 2.6.1 Ly trích phân đoạn 44 2.6.2 Sắc ký lớp mỏng 45 2.6.3.Cách xác định vị trí chất điều hịa sinh trƣởng thực vật sắc ký 46 2.6.4 Đo hàm lƣợng chất điều hòa sinh trƣởng thực vật sinh trắc nghiệm 46 2.6.5 Đo citokinin HPLC 48 2.6.6 Đo acid abcisic kỹ thuật miễn dịch phóng xạ 48 2.7 Sự thay đổi hoạt tính enzym liên quan rụng 51 2.7.1 Ly trích enzym cellulaz 51 7.2.2 Sinh trắc nghiệm 51 2.8 Ảnh hƣởng chất trích chất điều hịa sinh trƣởng thực vật tinh khiết rụng khúc cắt vùng rụng đậu (Dolichos sp.) 51 149 94 Jason D.S., Heather F.Q., Ariel O and Debra M (2001), "The catalytic site of the pectin biosynthetic enzym α - 1,4 - galacturonosyltransferase is located in the lumen of the Golgi", Plant Physiol., 127, pp 360 - 371 95 Kalra S K and Tandon D K (1993), Fruit growth and Development Fruit Crops, Malhotra Publishing House, New Delhi Vol 3, Advanced in Horticulture, pp 1101 1124 96 Karp G (1998), Biologie cellulaire et moléculaire concepts et expériences, DeBoeck Université, pp 434 - 438 97 Kazokas W., Burns C, Jacqueline K (1998), "Cellulase activity and gene expression in citrus fruit abscission zones during and after ethylene treatment", J Amer Soc Hort Sci., 123, pp 781 - 786 98 Key J L and Shannon J C (1964), "Enhancement by auxin of ribonucleic acid synthesis in excised soybean hypocotyl tissue", Plant Physiol., 39, pp 360 - 364 99 Krishnamurthy K V (1994), "The Angiosperm embryo: Correlative controls in development, differentiation, and maturation" In: Growth patterns in vascular plants, Edited by Muhammad Iqbal, pp 373 - 386 100 Nguyen Thi Ngoc Lang (1970), Essai de déterminaison des causes de dormance d'une variete locale de riz Nàng Phệt muộn, Doctorat de 3e cycle, Université de Saigon, Faculté des sciences 101 Le Page - Degivry M Th., Barthe P and G Garello (1990), "Involvement of Endogenous Abscisic Acid in Onset and Release of Helianthus annuus Embryo Dormancy", Plant Physiol., 92, pp 1164 - 1168 102 Le Page - Degivry M T., Duval D., Bulard C and Delaage M (1984), "A radioimmunoassay for abscisic acid", Journal of Immunological Methods, 67, pp 119 -128 150 103 Leopold A C (1972), "Ethylene as a plant hormone", In Hormonal regulation in plant growth and development, Edited by Kaldeway H and Wardar Y., Verglag Chemie, Weiheim , pp 245 - 262 104 Leopold A C and Poovaiah B W (1974), "The regulation of abscission", In: Experimental plant physiology, Edited by Pietro A.S., Saint Louis 105 Leung J and Giraudat J (1998), "Abscisic acid signal transduction", Annu Rev., Plant Physiol Plant Mol Bio., 49, pp 199 - 222 106 Lewis L N and Bakhshi J C (1968), "Protein synthesis in abscission: The distinctiveness of abscision zone and its response to gibberellic acid and indoleacetic acid", Plant Physiol., 43, pp 359 - 364 107 Ley B., Kefford N.D and Zwar J A (1963), "Kinetin activity from plant extracts", Aust J Bio Sci., 16, pp 395 - 415 108 Loveys B R and Van Dijk H M (1988), "Improved extraction of abscisic acid from plant tissue", Aust J Plant Physiol., 15, pp 421 - 427 109 Luttge U., Kluge M., and Bauer G (1996), Botanique, Lavoisier Technique & Documentation, pp 494 - 495 110 Lurssen K., Naumann K and Schroder R (1979), "1 - Aminocyclopropane -1- Carboxylic acid - an intermediate of the ethylene biosynthesis in higher plants", Z Pflanzenphysiol., 92, pp 285 - 294 111 Mac Gaw B A and Horgan R (1985), "Cytokinin metabolism and the control of cytokinin activity", Biol Plant (Praha), 27, pp 180 - 187 112 Mac Millan J (1985), "Gibberellin metabolism: objectives and methodology", Biol Plant (Praha), 27 (2 - 3), pp 164 - 171 113 Mazliak P (1998), Physiologie végétale Tome I: Nutrition et métabolisme, Hermann (Paris), pp 53 - 62 151 114 Mazliak P (1998), Physiologie végétale Tome II: Croissance et développement, Hermann (Paris), pp 60 - 62, pp 391 - 425 115 Meiner H (1984), Class experiments in plant physiology, George Allen & Unwin (Publishers) Ltd London, Boston, Sydney, pp 51 - 52, pp 124 - 130 116 Moore D J (1968), "Cell wall dissolution and enzyme secretion during leaf abscission", Plant Physiol., 43, pp 1545 - 1559 117 Morimoto R (1999), "Heat - shock reponse", In: Encyclopedia of Molecular Biology, Edited by Creighton T E., John Wiley & Sons Inc., vol.2, pp 1089 118 Morton J (1987), Mango Fruits of warm climates, Julia F Morton, Miami, pp 221 239 119 Muhammad I (1994), Growth patterns in vascular plants, Dioscorides Press, pp 360 - 417 120 Murashige T and Skoog F (1962), "A revised method for rapid growth and bioassays with tobacco tissue culture", Physiol Plant, 15, pp 473 - 497 121 Nigel J., Smith H., Williams J.T., Plucknett D.L and Talbot J P (1992), "Tropical forests and their crops, Cornell University, pp 78 - 95 122 Nitsch J P (1953), "The Physiology of fruit growth", Annual review of Plant Physiology, Daniel I Arnon, Editor Univesity of California, pp 199 - 236 123 Nooden L D and Leopold A C (1988), Senescence and Aging in plants, Academic Press Inc., pp 30 - 37, pp 89 - 92, pp 156 - 160 124 Norstog K (1979), "Embryo culture at a tool in the study of comparative and developmental morphology", Editions Columbus, Ohio State Univ Press In Plant cell and tissue culture - Principles and applications, Edited by Sharp W.R et al, pp 179 202 152 125 Pilet P E (1961), Les phytohormones de croissance, Masson, Paris 126 Pirrung M C and Braumann J I (1987), "Involvement of cyanide in the regulation of ethylene biosynthesis", Plant Physiol Biochem., 25, pp 55 - 61 127 Pratt H K and Goeschl J D (1969), Physiological roles of ethylene in plants, pp 303 - 346 128 Ray S and Choudhuri M A (1981), "Mobilization of metabolites from leaves to grains as the cause of monocarpic senescence in rice", Plant Physiol, 68, pp 1345 1348 129 Robert D., Dumas C, Bajon C (1998), La reproduction Biologie végétale, Volume 3, Dion Editeurs Paris, pp 350 - 354 130 Rodgers J P (1981), "Cotton fruit development and abscission: variation in the levels of auxin", Trop Agr., 58, pp 63 - 72 131 Rogers S O and Bendich A J (1994), Extraction of total cellular DNA from plants, algae and fungi, Plant Molecular Biology Manual D l , pp - 132 Rubinstein B and Leopold A C (1963), "Analysis of the auxin control of bean leaf abscission", Plant physiol, 38, pp 262 - 267 133 Salisbury F B and Ross C W (1992), Plant Physiology, Plant Development, Wadaworth Publishing Company, Beimont, California, pp 405 - 407 134 Scott P C and Leopold A C (1966), "Abscission as a mobilization phenomenon", Plant physiol, 41, pp 826 - 830 135 Smith H B (1999), "Of abscission and other breakthroughs", Plant cell, vol.11, pp 141 - 144 136 Smith P K., Krohn R.I., Hermanson G.T., Mallia A.K., Gartner F.H., Provenzano M.D., Fujimoto E.K., Goeke N M., et al (1985), 153 "Measurement of protein using bicinchoninic acid", Anal Biochem., 150, pp 76 - 85 137 Speziale B J., Schreiner S.P., Giammatteo P.A and Schindler J E (1984), "Comparison of N,N - Dimethylformamide, Dimethyl sulfoxide, and Acetone for extraction of Phytoplankton Chlorophyll", Can J Fish Aquat Sci, 41, pp 1519- 1522 138 Subhadrabandhu S (1999), "A report on the Sixth International Mango symposium", J Appl Hort., July - December 1(2), pp 149 - 150 139 Taiz L and Zeiger E (1991), Plant physiology, The Benjamin/Cummings Publishing Company Inc., pp 318 - 362 140 Tamas I A., Ozbun J L., Wallace D.H., Powell L.E, Engels C.J (1979), "Effect of fruits on dormancy and abscisic acid concentration in the axillary buds of Phaseolus vulgaris L.", Plant Physiol., 64, pp 615 - 619 141 Tamas I A., Engels C.J., Kaplan S.L., Ozbun J.L and Wallace D H (1981), "Role of indoleacetic acid and abscisic acid in the correlative control by fruits of axillary bud development and leaf senescence", Plant Physiol, 68, pp 476-489 142 Taylor L P and Hepler P K (1997), "Pollen germination and tube growth", Annu Rev., Plant Physiol Plant Mol Bio., 48, pp 461 -491 143 Uheda E and Nakamura S (2000), "Abscission of Azolla branches induced by ethylene and sodium azide", Plant and Cell Physiology, vol.41, 12, pp 1365 - 1372 144 Vallade J (1999), Structure et développement de la plante Morphogenèse et biologie de la reproduction des Angiospermes, Donod, pp 128 - 210 154 145 Walker D (1990), The use of the oxygen electrode and fluorescence probes in simple measurements of photosynthesis, Robert Hill Institute, The University of Sheffield, U.K., pp - 11 146 Wetmore R H and Jacobs W P (1953), "Studies on abscission The inhibiting effect of auxin", Am J Bot., 40, pp 272 - 276 147 Wheeler C T and Boulter D (1967), "Nucleic acid of developing seeds of Vicia faba L" J Exp Botany, 18, pp 229 - 240 148 Yokota T., Murofushi N and Takahashi N (1980), "Extraction, Purification and Identification" In: Hormonal regulation of development I - Molecular aspects of plant hormones, Encyclopedia of plant physiology, Edited by J Mac Millan, New series, vol.9, Springer New York, pp 113 - 201 PHỤ LỤC Phụ lục 2.1: MÔI TRƢỜNG NUÔI CẤY (MS với thành phần đa lƣợng giảm 1/2) (Murashige Skoog 1962) [120] - Đa lƣợng 25 ml/ l - Vi lƣợng ml/ l - Fe EDTA ml/ l - loại vitamin (4V) ml/ l - Myo inositol 100 mg/ l - Sorbitol g/ l - Acid ascorbic 10 mg/ l - agar 4,5 g/1 - pH 5,7 Đa lƣợng nồng độ sau - NH4NO3 1650 mg/ l - KNO3 1900 mg/ l - CaCl2,2H2O 440 mg/ l - MgSO4,7 H2O 370 mg/ l - KH2PO4 170 mg/ l Vi lƣợng nồng độ sau - H3BO3 6,2 mg/ l - MnSO4, 4H2O 22,3 mg/ l - ZnSO4,4H2O 8,6 mg/ l - KI 0,83 mg/1 - Na2MoO4,2H2O 0,25 mg/1 - CuSO4,5H2O 0,025 mg/1 - CoCl2,6H2O 0,025 mg/1 (tạo môi trƣờng dạng bán lỏng) Dung dịch FeEDTA (nồngđộ sau cùng) - FeSO4,7H2O 27,8 mg/1 - Na2 EDTA 37,3 mg/1 mg/l - Thiamin HCl 0,1 mg/1 - Acid nicotinic 0,5 mg/1 - Pyridoxin HCl 0,5 mg/1 Vitamin - Glycin Phụ lục 2.2: DUNG DỊCH CỐ ĐỊNH MẪU FAA - lần thể tích cồn 70° 40 ml - lần thể tích formaldehyd 37% 5ml - lần thể tích acid acetic 5ml Dung dịch giữ lâu đƣợc nhiệt độ 10°C Ngâm mẫu 24 giờ, sau giữ mẫu cồn 70° Phụ lục 2.3: DUNG DỊCH TRÍCH VÀ ĐIỆN DI DNA (Ausubel 1999) [41] Dung dịch trích CTAB - 2%(w/v) CTAB - l00mM Tris HCl pH8 - 20 mM EDTA pH - l,4M NaCl - 1% PVP 40 Dung dịch CTAB/NaCl - 10% CTAB - 0,7 M NaCl Hòa tan 4,lg NaCl 80 ml nƣớc cất Cho chậm l0g CTAB vào, quậy nóng 65°C Thể tích sau 100 ml Dung dịch CTAB tủa - l%(w/v) CTAB - 50 mM Tris HC1 pH - 10 mM EDTA pH Dung dịch đệm TE nồng độ muối cao - 10 mM Tris HC1 pH - 0,1 mM EDTA pH8 - 1M NaCl Dung dịch đệm TE - l0 mM Tris HC1 pH - mM EDTA pH Dung dịch điện di l0xTBE - TrisHCl 108 g - Acid boric 55 g - EDTA 7,4 g pH 8,3 Phụ lục 2.4: DUNG DỊCH LI TRÍCH CELLULAZ (Meidner 1984) [115] 20 mM Tris HC1 pH 8,1 (để có l00ml dịch trích cần 0,0121 g) mM EDTA 1M b ( NaC14°C " ( " 0,0336 g) g) (nồng độ muối phải cao để tách đƣợc cellulaz khỏi vách celluloz) Dung dich CMC (Carboxymetil celluloz) l0g CMC mM đệm Phosphat pH 6,1 khuấy tan 1000 ml nƣớc cất Có thể khuấy ấm Khử trùng để dùng lâu Đệm phosphat (A) + (B) pH6,l 42 ml dung dịch A:0,1 M Na2HPO4 H2O 17,8g/1000 ml nƣớc cất pH 8,86 50 ml dung dịch B:0,1 M NaH2PO4 H2O 15,6g/1000 ml nƣớc cất pH 4,6 Agar sinh trắc nghiệm 20g/l agar 10g/l CMC Phụ lục 3.1: TRUNG TÂM KTTV QUỐC GIA CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM ĐÀI KTTVKV Nam Độc lập – Tự – Hạnh phúc 08 Mạc Đĩnh Chi, Quận I, TP HCM - ♦  ♦ Tel: 8291403 Fax: 8296091 CÁC YẾU TỐ KHÍ TƢỢNG TẠI TP HCM Từ tháng 1/1999 đến tháng VI/ 1999 Nhiệt độ (oC) Tháng I II III IV V VI Độ ẩm (%) Tuần Bốc Nắng Mƣa Ttb Tx Tn Utb Un (mm) (giờ) (mm) 26.3 32.5 20.1 70 36 36.9 50.4 1.1 26.9 34.2 21.9 79 51 27.7 56.5 72.5 28.0 35.1 23.3 72 42 43.8 56.2 3.6 26.7 33.1 20.5 72 38 37.3 51.5 24.0 27.2 34.1 21.7 70 40 40.3 79.8 26.5 28.0 35.7 23.0 76 38 39.7 63.1 4.5 28.1 35.2 24.3 76 49 35.2 56.3 4.1 28.9 35.2 25.5 74 45 43.3 93.7 0.0 29.4 35.9 25.2 70 39 53.0 90.9 72.2 28.5 35.1 23.7 78 51 30.6 49.5 48.7 29.1 35.8 25.0 77 53 31.4 56.4 24.9 28.2 34.7 23.8 81 52 25.5 50.5 116.0 28.4 34.9 24.2 78 49 29.4 51.6 55.0 28.5 34.9 24.4 78 48 30.0 62.6 64.1 28.4 35.0 24.1 79 52 31.5 63.6 55.8 27.3 34.5 23.0 83 56 23.0 26.8 63.2 27.8 34.8 24.7 79 50 30.8 51.4 29.5 28.4 35.6 24.1 77 46 33.7 72.1 107.8 Phụ lục 3.2: TRUNG TÂM KTTV QUỐC GIA CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM ĐÀI KTTVKV Nam Độc lập – Tự – Hạnh phúc 08 Mạc Đĩnh Chi, Quận I, TP HCM - ♦  ♦ -Tel: 8291403 Fax: 8296091 CÁC YẾU TỐ KHÍ TƢỢNG TẠI TP HCM Tháng 1/1999 Bốc Nhiệt độ (oC) Độ ẩm (%) Nắng Mƣa Ngày Ttb Tx Tn Utb Un (mm) (giờ) (mm) 27.6 32.2 24.4 76 58 3.3 5.8 1.1 27.1 32.5 23.9 68 52 4.0 4.9 0.0 26.8 31.9 22.4 68 53 3.9 6.2 0.0 25.6 30.1 21.5 67 59 4.2 4.8 0.0 24.8 29.7 20.1 68 59 3.7 4.2 0.0 25.2 31.0 20.1 62 36 4.9 7.0 0.0 25.7 29.7 22.7 65 48 3.5 1.0 0.0 26.2 30.5 24.1 74 64 2.9 3.3 0.0 26.4 31.2 22.7 74 54 3.3 6.1 0.0 10 27.4 32.2 23.3 77 60 3.2 6.9 0.0 11 26.3 30.1 24.3 86 71 1.7 0.9 24.5 12 26.8 31.4 23.2 80 62 2.2 4.8 4.0 13 26.3 30.5 23.1 80 62 2.9 2.3 0.7 14 27.2 32.2 24.4 82 63 2.4 4.0 2.8 15 26.3 30.1 24.3 87 79 1.6 2.3 33.7 16 26.3 32.1 21.9 79 57 2.6 9.2 2.5 17 27.3 33.3 22.8 72 51 4.2 9.3 0.0 18 27.7 33.3 23.9 72 63 3.7 7.9 0.0 19 28.1 33.6 24.8 76 54 2.9 6.1 2.8 20 27.3 34.2 23.5 77 55 3.5 9.7 1.5 21 27.6 33.6 24.2 77 54 3.8 7.1 0.0 22 27.8 31.2 24.8 71 57 3.3 1.8 0.0 23 28.9 34.4 25.0 71 47 4.3 8.3 0.1 24 29.2 34.9 25.6 66 47 5.2 9.9 0.0 25 29.2 35.1 25.3 67 43 4.7 8.2 0.0 26 28.7 34.5 26.0 65 48 4.7 6.5 0.1 27 27.5 31.6 25.4 77 60 3.4 0.3 2.0 28 26.8 29.5 24.8 82 72 2.0 0.0 29 27.4 30.3 25.5 80 69 2.8 1.4 30 28.0 34.1 24.3 67 44 4.8 4.2 0.0 31 27.0 33.7 23.3 71 42 4.8 9.9 0.0 CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM C.TY GIỐNG CÂY TRỒNG TP HCM TRẠI GIỐNG CÂY TRỒNG ĐỒNG TIẾN Độc lập – Tự – Hạnh phúc HỐC MƠN GIẤY XÁC NHẬN THÍ NGHIỆM Trại Giống Cây Trồng Đồng Tiến - Hốc Môn xác nhận: Chị LÊ THỊ TRUNG, Nghiên cứu sinh thuộc Trƣờng Đại học Khoa học Tự nhiên Đại học Quốc Gia TP HCM, thực thí nghiệm vƣờn Xồi Cát Hòa Lộc thuộc Trại Giống Cây Trồng Đồng Tiến - Hốc Môn, khoảng thời gian từ năm 1999 đến năm 2002, với nội dung dƣới đây: Theo dõi tăng trƣởng trái rụng trái Xử lí chất điều hịa sinh trƣởng thực vật để kiểm soát tƣợng rụng trái Kết làm tăng lƣợng trái đậu so với chuẩn xử lí dung dịch As, Bs, C50, D10, C10 D10 B5, cụ thể nhƣ sau: A5 làm tăng đƣợc 33,31% trái so với chuẩn B5 C50 23,42% D10 34,99% C40 D10 B5 25,42% 6,01% 24,90% Giấy xác nhận cấp cho chị Trung để bổ sung vào hồ sơ bảo vệ luận án TP Hồ Chí Minh, ngày 20 tháng năm 2002 Ngƣời nghiệm thu KS TRƢƠNG PHƢỚC LỘC ... (Mangifera indica L. ) nhằm: - Tìm hiểu tƣợng rụng trái xồi non dƣới ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng thực vật; - Áp dụng chất điều hòa sinh trƣởng thực vật để kiểm soát rụng trái non xồi Cát Hịa L? ??c... Ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng thực vật dạng tinh khiết rụng khúc cắt vùng rụng trái xoài 54 2.10 Áp dụng chất điều hịa sinh trƣởng thực vật để kiểm sốt rụng trái non xoài ... (Mangifera indica L. ) ngày tuổi 101 Bảng 3.18: Tỉ l? ?? đậu trái (%) sau ngày xử l? ? chất điều hòa sinh trƣởng thực vật trái ngày tuổi khác để kiểm soát rụng trái non xồi Cát Hịa L? ??c (Mangifera