Luận văn thạc sĩ nghiên cứu đặc tính điện hóa của fenofibrat và ứng dụng trong phân tích

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - ĐỖ THỊ KIM DUNG NGHIÊN CỨU ĐẶC TÍNH ĐIỆN HĨA CỦA FENOFIBRAT VÀ ỨNG DỤNG TRONG PHÂN TÍCH LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC HÀ NỘI - 2016 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - ĐỖ THỊ KIM DUNG NGHIÊN CỨU ĐẶC TÍNH ĐIỆN HĨA CỦA FENOFIBRAT VÀ ỨNG DỤNG TRONG PHÂN TÍCH Chun ngành: Hóa phân tích Mã số: 60440118 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: TS NGUYỄN THỊ KIM THƢỜNG HÀ NỘI - 2016 LỜI CẢM ƠN Với lòng biết ơn sâu sắc, xin chân thành cảm ơn TS Nguyễn Thị Kim Thường giao đề tài, nhiệt tình hướng dẫn tạo điều kiện thuận lợi giúp thực luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn thầy, mơn Hóa Phân Tích nói riêng khoa Hóa Học nói chung dạy dỗ, bảo động viên suốt thời gian học tập trường Đại Học Khoa Học Tự Nhiên - Đại Học Quốc Gia Hà Nội Tôi xin cảm ơn đề tài mã số GG.15.14 Đại Học Quốc Gia Hà Nội tài trợ kinh phí để tơi thực thành cơng luận văn Cuối cùng, tơi xin cảm ơn gia đình, bạn sinh viên, học viên Bộ mơn Hóa phân tích ln động viên tinh thần, cổ vũ, tận tình giúp đỡ thời gian học tập thực luận văn Hà Nội, ngày tháng 12 năm 2016 Học viên Đỗ Thị Kim Dung MỤC LỤC Trang MỞ ĐẦU CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Giới thiệu chất nghiên cứu fenofibrat 1.1.1 Cấu tạo fenofibrat 1.1.2 Dược lực học động học fenofibrat 1.2 Các phương pháp xác định fenofibrat 1.2.1 Phương pháp sắc kí lỏng hiệu cao 1.2.2 Phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử 1.2.3 Phương pháp von - ampe hòa tan 1.3 Giới thiệu phương pháp von - ampe hòa tan hấp phụ 10 1.3.1 Nguyên tắc phương pháp von - ampe hòa tan hấ p phu ̣ 10 1.3.2 Các kỹ thuật ghi đo tín hiệu hồ tan chất cần phân tích 13 CHƢƠNG 2: NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 2.1 Nội dung nghiên cứu 15 2.1.1 Mục tiêu nghiên cứu 15 2.1.2 Nội dung nghiên cứu 15 2.2 Phương pháp nghiên cứu 15 2.2.1 Tiến trình thí nghiệm theo phương pháp CV 15 2.2.2 Tiến trình thí nghiệm theo phương pháp DP - AdSV 16 2.2.3 Xử lý mẫu 17 2.3 Trang thiết bị hóa chất 18 2.3.1 Các dụng cụ thiết bị sử dụng 18 2.3.2 Hóa chất 19 2.3.3 Chuẩn bị dung dịch hóa chất 20 2.4 Các thông số đánh giá độ tin cậy phương pháp phân tích 21 2.4.1 Giới hạn phát (LOD) giới hạn định lượng (LOQ) 21 2.4.2 Độ chụm (độ lặp lại) phương pháp 22 2.4.3 Độ (độ thu hồi) phương pháp 23 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 24 3.1 Khảo sát đặc tính điện hóa fenofibrat phương pháp von ampe vịng (CV) 24 3.2 Tối ưu hóa điều kiện xác định fenofibrat 26 3.2.1 Khảo sát ảnh hưởng pH 26 3.2.2 Khảo sát ảnh hưởng thời gian hấp phụ 28 3.2.3 Khảo sát ảnh hưởng hấp phụ 30 3.2.4 Khảo sát ảnh hưởng tốc độ quét 31 3.3 Đánh giá phương pháp phân tích 33 3.3.1 Xây dựng đường chuẩn xác định fenofibrat 33 3.3.2 Đánh giá độ lặp lại phương pháp 34 3.4 Áp dụng phân tích số mẫu thuốc thị trường 35 3.5 Xác định fenofibrat mẫu huyết tương 37 3.5.1 Quy trình xử lý mẫu huyết tương 37 3.5.2 Xây dựng đường chuẩn xác định fenofibrat mẫu huyết tương 40 3.5.3 Đánh giá độ lặp lại phương pháp 42 3.5.4 Đánh giá độ thu hồi phương pháp 43 KẾT LUẬN 44 TÀI LIỆU THAM KHẢO 45 MỤC CHỮ VIẾT TẮT STT Viết tắt Tiếng Anh Absorptive Stripping Tiếng Việt AdSV ASV Anodic Stripping Voltammetry Von - ampe hòa tan anot CSV Cathodic StrippingVoltammetry Von - ampe hòa tan catot CV Cyclic Voltammetry Von - ampe vòng DPV Differential Pulse Stripping Von - ampe hòa tan xung vi Voltammetry phân HMDE HPLC Voltammetry Hanging Mercury Dropping Electrode Von - ampe hòa tan hấp phụ Điện cực giọt thủy ngân treo High Performance Liquid Phương pháp sắc ký lỏng Chromatography hiệu cao LOD Limit of Detection Giới hạn phát LOQ Limit of Quantitation Giới hạn định lượng 10 MFE Mercury Film Electrode Điện cực màng thủy ngân 11 SMDE 12 SqW 13 SV Stastic Mercury Dropping Electrode Điện cực giọt thủy ngân tĩnh Square - Wave Stripping Von - ampe hịa tan sóng Voltammetry vng StrippingVoltammetry Von - ampe hịa tan DANH MỤC BẢNG SỐ LIỆU Bảng 3.1: Kết khảo sát ảnh hưởng pH đến cường độ dịng đỉnh píc 27 bảng 3.2: Kết khảo sát ảnh hưởng thời gian hấp phụ đến cường độ dịng đình pic 29 Bảng 3.3: Kết khảo sát ảnh hưởng hấp phụ đến cường độ dịng đỉnh píc 30 Bảng 3.4: Kết khảo sát ảnh hưởng tốc độ quét đến cường độ dịng đỉnh píc .32 Bảng 3.5: Ảnh hưởng nồng độ fenofibrat đến cường độ dịng đỉnh píc 33 Bảng 3.6: Độ lặp lại cường độ dòng đỉnh píc fenofibrat 34 Bảng 3.7: Kết phân tích mẫu thuốc SanDor .35 Bảng 3.8: Kết phân tích mẫu thuốc 36 Bảng 3.9: Sự phụ thuộc cường dộ dịng píc vào thành phần dung mơi 39 Bảng 310: Cường độ dịng đỉnh píc fenofibrat mẫu huyết tương 41 Bảng 3.11: Độ lặp lại cường độ dịng đỉnh píc fenofibrat mẫu huyết tương 42 Bảng 3.12: Nồng độ fenofibrat mẫu huyết tương xác định dựa vào đường chuẩn 43 DANH MỤC HÌNH VẼ VÀ ĐỒ THỊ Hình 1.1: Cơng thức cấu tạo fenofibrat Hình 2.1: Thiết bị phân tích điện hóa Metrohm - Autolab 19 Hình 3.1: Đường CV (von – ampe vịng) fenofibrat 24 Hình 3.2: Quá trình khử fenofibrat 25 Hình 3.3: Đường von - ampe vịng fenofibrat quét vòng liên tục 26 Hình 3.4: Ảnh hưởng pH đến cường độ dịng đỉnh píc 27 Hình 3.5: Đường von - ampe hòa tan fenofibrat thay đổi pH 28 Hình 3.6: Đường von - ampe hòa tan fenofibrat thay đổi thời gian hấp phụ 29 Hình 3.7: Ảnh hưởng thời gian hấp phụ đến cường độ dịng đỉnh píc 29 Hình 3.8: Ảnh hưởng hấp phụ đến cường độ dòng đỉnh píc .30 Hình 3.9: Đường von – ampe hòa tan fenofibrat thay đổi hấp phụ 31 Hình 3.10: Đường von – ampe hịa tan fenofibrat thay đổi tốc độ quét 32 Hình 3.11: Ảnh hưởng tốc độ quét đến cường độ dịng đỉnh píc 32 Hình 3.12: Đường chuẩn xác định fenofibrat 33 Hình 3.13: Đường von - ampe hịa tan fenofibrat mẫu thuốc Sandoz 36 Hình 3.14: Đường von – ampe hòa tan mẫu huyết tương nồng độ fenofibrat khác sử dụng chiết pha rắn có thêm chuẩn 38 Hình 3.15: : Đường von - ampe hịa tan fenofibrat phụ thuộc vào thành phần dung môi 39 Hình 3.16: Đường von - ampe hòa tan fenofibrat mẫu huyết tương 40 Hình 3.17: Đường chuẩn fenofibrat mẫu huyết tương 41 MỞ ĐẦU Cholesterol dưỡng chất quan trọng cần thiết cho hoạt động phát triển cách bình thường thể Tuy nhiên lượng chất máu cao gây nhiều ảnh hưởng nghiêm trọng đến sức khỏe như: xơ vữa động mạch, cao huyết áp Nguyên nhân gây tăng cholesterol có liên quan đến chế độ ăn, thói quen sinh hoạt, luyện tập, có xu hướng ngày tăng xã hội phát triển Hiện nay, có nhiều loại thuốc uống làm giảm cholesterol máu, chủ yếu tập trung hai nhóm fibrat statin Một hoạt chất sử dụng phổ biến cho bệnh nhân điều trị cholesterol cao fenofibrat Fenofibrat có nhiều ưu điểm vượt trội so với dẫn chất nhóm, tần suất cường độ tác dụng phụ thấp, phối hợp với thuốc thuộc nhóm statin điều trị chứng tăng cholesterol máu Hiện nay, lợi ích kinh tế có khơng tổ chức, cá nhân cho đời nhiều loại thuốc giả, thuốc chất lượng làm nguy hại cho sức khỏe kinh tế người bệnh Vì vậy, vấn đề kiểm định lại hàm lượng thuốc theo tiêu chuẩn vấn đề quan trọng thực cần thiết Việc kiểm định chất lượng thuốc dạng bào chế dược động học thuốc cần phải có phương pháp phân tích lượng thuốc nhỏ mẫu sinh học để tìm hiểu khả tồn khả hấp thu thuốc thể để từ đưa liều lượng phù hợp với người bệnh Có nhiều phương pháp sử dụng để xác định chất có hoạt tính sinh học nói chung fenofibrat nói riêng phương pháp sắc ký, phương pháp quang phổ UV-Vis, phương pháp cực phổ von - ampe hòa tan hấp phụ Trong dược điển Việt Nam, fenofibrat nghiên cứu xác định phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) Tuy nhiên, chi phí cho phân tích HPLC cao, quy trình xử lý mẫu phức tạp, thiết bị đắt tiền Do vậy, với mong muốn nghiên cứu phương pháp kiểm tra song hành với phương pháp dược điển nên lựa chọn phương pháp von - ampe hòa tan hấp phụ Đây phương pháp có độ nhạy độ chọn lọc cao, quy trình phân tích đơn giản, chi phí phân tích cho mẫu cần kiểm nghiệm khơng cao Chính vậy, phạm vi luận văn, chúng tơi chọn phương pháp von - ampe hịa tan hấp phụ để nghiên cứu đặc tính điện hóa quy trình xác định fenofibrat mẫu dược phẩm mẫu huyết tương 3.5 Xác định fenofibrat mẫu huyết tƣơng 3.5.1 Quy trình xử lý mẫu huyết tƣơng Để lựa chọn phương pháp xử lí mẫu huyết tương thích hợp nhất, hiệu suất thu hồi cao ổn định chúng tơi tiến hành xử lí mẫu theo quy trình khác chiết pha rắn tạo kết tủa 3.5.1.1 Phương pháp chiết pha rắn: Lấy 1,00 mL huyết tương thêm fenofibrat chuẩn, thêm 4,00 mL dung dịch axetonnitrin 1,00 mL dung dịch đệm B - R vào ống nghiệm có nắp xốy Sau đem lắc votex phút đem quay ly tâm 4000 vòng/phút 15 phút Dịch thu đem lọc qua màng lọc 0,45 µm Hút 2,50 mL dung dịch sau lọc đem chiết pha rắn cột C18 Quy trình chiết pha rắn: Hoạt hóa cột 2,00 mL metanol, rửa cột 2,00mL nước cất lần Nạp chất vào cột chiết sau rửa tạp 2,00 mL hỗn hợp metanol: nước ( v/v = 5/95) Rửa giải 2,00 mL hỗn hợp nước : methanol ( v/v = 5/95) Dung dịch thu sau chiết thêm 10,00 mL đệm B - R pH = 8,5 định mức 25,00 mL đem đo với điều kiện tối ưu Kết thu hình 3.14 37 Mẫu huyết tương trắng -20.0n I (A) 2.10-5 M -40.0n 6.10-5 M -60.0n -80.0n -800m -900m -1.00 -1.10 -1.20 -1.30 -1.40 U (V) Hình 3.14: Đường von – ampe hịa tan mẫu huyết tương nồng độ fenofibrat khác sử dụng chiết pha rắn có thêm chuẩn Qua kết cho thấy, sử dụng kĩ thuật chiết pha rắn để xử lý đường von - ampe hịa tan mẫu trắng có xuất píc hịa tan Đối với mẫu huyết tương có chứa fenofibrat 2x10-5 mol.L-1 6x10-5 mol.L-1 bơm thêm vào xuất píc Epic1 = - 1,18V, Epic2 = - 1,24V, chân píc sát nên khó định lượng Vì vậy, quy trình sử dụng phương pháp chiết pha rắn không phù hợp 3.5.1.2 Phương pháp kết tủa Thực quy trình xử lí mẫu 2.2.3.2 * Khảo sát ảnh hưởng axetonitrin Lấy mL huyết tương có chứa chất chuẩn, thêm 4,00 mL hỗn hợp axetonitrin nước theo tỉ lệ khác Sau thực quy trình 2.2.3.2 thu kết hình 3.15 bảng 3.9 38 Bảng 3.9: Sự phụ thuộc cường dộ dịng píc vào thành phần dung môi STT Thành phần dung môi I(nA) mL ACN 99,8% 6,62 mL ACN/H2O (80:20 v/v) 5,69 mL ACN/H2O (70:30 v/v) 5,12 4 mL ACN/H2O (60:40 v/v) 4,34 mL ACN/H2O (50:50 v/v) 3,42 Hình 3.15: Đường von - ampe hịa tan fenofibrat phụ thuộc vào thành phần dung môi Dựa vào kết khảo sát, ta thấy việc thay đổi tỷ lệ thành phần dung môi ảnh hưởng đến cường độ dịng píc Khi pha lỗng tín hiệu píc giảm, điều giải thích khơng đủ acetonnitrin khơng kết tủa tách loại hết protein tạp chất khỏi huyết tương Do vậy, để kết tủa protein chọn thành phần dung môi cho vào dung dịch huyết tương 4,00 mL ACN 99,8% 39 3.5.2 Xây dựng đƣờng chuẩn xác định fenofibrat mẫu huyết tƣơng Để xây dựng đường chuẩn chất phân tích mẫu huyết tương, tiến hành thêm chuẩn fenofibrat vào mẫu huyết tương (lấy từ người khỏe mạnh không uống thuốc fenofibrat) Sau lấy 1,00 mL mẫu huyết tương, thêm 4,00 mL acetonitrin 99,8 % cho vào mẫu, sau thực quy trình 2.2.3.2 Lấy 2,50 mL dung dịch sau xử lý, thêm 10,00 mL dung dịch đệm pH = 8,5 tiến hành ghi đo tín hiệu theo phương pháp von - ampe hòa tan hấp phụ với điều kiện thích hợp hấp phụ - 0,5 V; thời gian hấp phụ 60 s; tốc độ quét 10 mV/s Đường von - ampe hịa tan biểu diễn hình 3.16 kết đo cường độ dịng bảng 3.10 Hình 3.16 Đường von - ampe hòa tan fenofibrat mẫu huyết tương 40 Bảng 3.10: Cường độ dòng đỉnh píc fenofibrat mẫu huyết tương Mẫu C fenofibrat mẫu (x10-5) 2 4 10 15 (mol.L-1) C fenofibrat dung dịch đo 0,644 2,41 12 16 20 6,67 8,42 10,8 30 (x10-7) (mol.L-1) I(nA) 4,13 16,9 Hình 3.17 Đường chuẩn xác định fenofibrat mẫu huyết tương Sử dụng chuẩn student (2 phía) với mức độ tin cậy P = 95%, số bậc tự f = n-2 nên tra bảng ta có t (0,95;3) = 3,18 Tính ∆a = t (0,95 ; 3).Sa = 3,18.0,24 = 0,76 ∆b = t (0,95 ; 3).Sb = 3,18.0,04 = 0,13 Y = (0,17 ± 0,76) + (1,05 ± 0,13)X Với Y cường độ dịng píc (nA); X nồng độ fenofibrat (x10-7 mol.L-1) 41 Giới hạn phát giới hạn định lượng phương pháp xác định fenofibrat mẫu huyết tương: LOD = 3,25x 10-6 mol.L-1 LOQ = 1,08x10-5 mol.L-1 Từ kết thu với trình xử lý mẫu cường độ dịng píc tăng tuyến tính với nồng độ fenofibrat mẫu huyết tương Như vậy, sử dụng quy trình để áp dụng vào phân tích mẫu thực tế 3.5.3 Đánh giá độ lặp lại phƣơng pháp Để đánh giá độ lặp lại phương pháp, tiến hành đo mức nồng độ khác Mỗi mức nồng độ, tiến hành xử lý mẫu lần Kết thu bảng 3.11 Từ bảng 3.11 nhận thấy rằng, xử lý mẫu lặp lại lần mức nồng độ khác fenofibrat độ lệch chuẩn tương đối phương pháp tương đối tốt (RSD < 3%) Chứng tỏ phương pháp có độ chụm tốt đáng tin cậy Bảng 3.11: Độ lặp lại cường độ dịng đỉnh píc fenofibrat mẫu huyết tương N Cường độ dịng píc fenofibrat 8.10-7 mol.L-1 1,6.10-6 mol.L-1 4,13 8,36 4,28 8,00 3,90 8,14 4,35 8,58 3,97 8,72 4,43 8,15 4,18 8,33 2,28 1,50 Cường độ dịng píc TB RSD (%) 42 3.5.4 Đánh giá độ thu hồi phƣơng pháp Độ thu hồi sử dụng để đánh giá mức độ xác đường chuẩn thiết lập từ đánh giá phương pháp nghiên cứu có xác hay khơng Để tính độ thu hồi, xác định nồng độ fenofibrat mẫu huyết tương theo quy trình xây dựng đường chuẩn Từ giá trị cường độ dòng đo mẫu, xác định nồng độ chất theo thực nghiệm (Ctt) dựa vào đường chuẩn Áp dụng cơng thức (5), kết tính tốn trình bày bảng 3.12 Bảng 3.12: Nồng độ fenofibrat mẫu huyết tương xác định dựa vào đường chuẩn Cltx105(mol/L-1) 10 15 Cttx105(mol/L-1) 2,07 3,66 7,61 9,8 15.4 H (%) 103,5 91,5 100,0 95,13 98,0 103 Hiệu suất thu hồi xác định fenofibrat mẫu huyết tương tìm thấy dao động khoảng 91,5% đến 103,5% Kết đo cường độ dòng mẫu huyết tương lặp lại chứng tỏ hiệu suất thu hồi cao Như vậy, với quy trình xử lý mẫu huyết tương nghiên cứu cho kết xác hiệu suất thu hồi ổn định Tuy nhiên, phương pháp hạn chế chưa áp dụng để phân tích mẫu thực tế bệnh nhân khó khăn việc lấy mẫu 43 KẾT LUẬN Với mục tiêu nghiên cứu đặc tính điện hóa quy trình xác định fenofibrat mẫu dược phẩm mẫu huyết tương phương pháp von - ampe điện cực giọt thủy ngân treo Luận văn đạt số kết sau: Nghiên cứu đặc tính điện hóa fenofibrat điện cực giọt thủy ngân treo: fenofibrat chất oxi hóa, có hấp phụ điện cực, q trình hịa tan cho píc khử bất thuận nghịch Đã nghiên cứu quy trình xác định fenofibrat mẫu thuốc phương pháp von - ampe hòa tan hấp phụ xung vi phân với điều kiện thích hợp: Đệm Britton - Robinson pH = 8,5, hấp phụ - 0,5 V, thời gian hấp phụ 60 s; tốc độ quét 0,01 V/s, khoảng tuyến tính từ 1x10-7 mol.L-1 đến 1x10-6 mol.L-1; giới hạn phát LOD = 2,2x10-8 mol.L-1, giới hạn định lượng LOQ = 7,3x10-8 mol.L-1 Ứng dụng phương pháp von – ampe hòa tan hấp phụ xác định hàm lượng fenofibrat mẫu thuốc có thị trường Đã nghiên cứu điều kiện xác định fenofibrat mẫu huyết tương : mẫu xử lý 4,00 mL acetonitrin, khoảng nồng độ fenofibrat tuyến tính thêm vào mẫu huyết tương từ 1x10-5 mol.L-1 đến 1,5x10-4 mol.L-1 , Giới hạn phát giới hạn định lượng phương pháp xác định fenofibrat mẫu huyết tương: LOD = 3,25x 10-6 mol.L-1 LOQ = 1,08x10-5 mol.L-1 Hiệu suất thu hồi phương pháp 98,5 % 44 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu Tiếng Việt Dược điển Việt Nam (2009), tái xuất lần thứ 4, Nhà xuất Y dược Dược lý học lâm sàng (2009), Trường đại học Y Hà Nội, Nhà xuất Y học Dược thư quốc gia Việt Nam (2011), Bộ Y tế, Nhà xuất Y học Lê Quốc Hùng, Vũ Thị Thu Hà (2006), “ Sự phát triển xu khả sử dụng điện cực màng thủy ngân phân tích điện hóa”, Tạp chí hóa học, Viện hóa học, Viện khoa học Công nghệ Việt Nam Nguyễn Văn Ri (2012), “Các phương pháp phân tích cơng cụ”, Đại Học Khoa Học Tự Nhiên–Đại Học Quốc Gia Hà Nội Phạm Luận (1998), “Giáo trình vấn đề sở kỹ thuật xử lý mẫu phân tích”, Khoa hóa học, Đại học Khoa học Tự Nhiên, Đại học Quốc Gia Hà Nội Phạm Luận (1989), “Sổ tay pha chế dung dịch”, Bộ mơn hóa phân tích, Khoa hóa học, Đại học Tổng hợp Hà Nội Tạ Thị Thảo (2006), “Chuyên đề thống kê hóa phân tích”, Đại Học Quốc Gia Hà Nội Từ Vọng Nghi ( 1969) , “Phương pháp phân tích cực phổ - Các tập mơn phân tích – khoa hóa học – Đại học Tổng hợp” 10 Từ Vọng Nghi, Trần Chương Huyến, Phạm Luận (1990), “Một số phương pháp phân tích điện hóa đại, Đại học tổng hợp Hà Nội” 11 Trần Tứ Hiếu, Từ Vọng Nghi, Nguyễn Văn Ri, Nguyễn Xuân Trung (2006), “Hóa học phân tích”, Đại Học Khoa Học Tự Nhiên – NXB Đại Học Quốc Gia Hà Nội 12 Trương Xuân Hà (2014), “ Thuốc giả ngành công nghiệp tội lỗi”, Sức khẻo & đời sống, Cơ quan ngôn luận Y tế, Hà Nội 45 13 Trung Kiên (2015), “ Sóng ngầm thuốc giả”, An ninh thủ đô, Cơ quan công an thành phố Hà Nội, Hà Nội Tài liệu Tiếng Anh 14 A.Arora1, M.T.Zzaman1, O.Ahmad2, S.A.Khan2,(2009) “Method development and validation of fenofibrat by HPLC using human plasma” , Rev Electron Biomed Electron J Biomed 2009, 3, pp.41-54 15 Abdel - Hay KM, Korany MHewala II, (2008) “Determination of etofibrate, fenofibrate, and atorvastatin in pharmaceutical preparations and plasma using differential pulse polarographic and square wave voltammetric techniques”, US National Library of Medicine National Institutes of HealthSearch database 16 Alaa El-Gindy, Samy Emara, Mostafa K Mesbah, Ghada M Hadad, (2005) “Spectrophotometric and liquid chromatographic determination of fenofibrate and vinpocetine and their hydrolysis products”, II Farmaco pp.425-438 17 Alothman ZA, Mohsin K and Wabaidur SM,( 2013) “Development of a stability indicating UPLC-MS/MS method for rapid and reliable determination of fenofibrat in marketed product (lypanthyl 200M) and human plasma”, Journal of pharmaceutic & drug development 18 Amer M.A Alanazi, Gamal A.E.Mostafa, Mohammed A.Abounassif, Mohamed M.Hefnawy, Mostafa S Mohamed “High-performance liquid chromatography and derivative spectrophotometry for simultaneous determination of pravastatin and fenofibrate in the dosage form”, Pharmaceutical Chemistry, (2014), pp.433-446 19 Ali Z., Abu Z., Wolfgang V (1998), “Applications of adsorptive stripping voltammetry for the trace analysis of metals, pharmaceuticals and biomolecules”, Fresenius J Anal Chem, vol.360, pp.1-9 20 Anandakumar Karunakaran, Vetsa Subhash, Ramu Chinthala, Jayamaryapan Muthuvijayan, (2011) “Simultaneous estimation of rosuvastatin calcium and 46 fenofibrate in bulk and in tablet dosage form by UV-Spectrophotometry and RPHPLC”, Stamford Journal of Pharmaceutical Sciences, 4(1),pp 58-63 21 Archita Patel, Chhaya MaCwana, Vishal Parmar, Samir Patel, (2012) “ Simultaneous determination of atorvastatin calcium, ezetimibe, and fenofibrate in a tablet formulation by HPLC” Journal of AOAC International 95(2), pp.419 22 Bond A.M (1980), Modern polarographic methods in analytical chemistry, New York 23 B Streel, Ph Hubert, A Ceccato (2000), “Determination of fenofibric acid in human plasma using automated solid - phase extraction coupled to liquid chromatography”, Journal of Chromatography B, 742, 391-400 24 Ceren Yardımcı, NuranÖzaltın, (2004) “Electrochemical studies and square wave voltammetric determination of fenofibrat in pharmaceutical formulations”, analytical and bioanalytical chemistry Vol 378, pp 495 - 498 25 Dasandi Bhavesh, Sanjay Shaha and Shivprakash (2009), “John Wiley & Sons, Ltd Determination of fenofibric acid in human plasma by ultra - performance liquid chromatography – electrospray ionization mass spectrometry: application to a bioequivalence study”, Biomedical Chromatography, 23, 922-928 26 Faizal PP (2012), Mohammed Shameer,Sheeja Velayudhan Kutty, Susamma Cicy Eapen “Validated UV-Visible spectrophotometric method for the estimation of fenofibrat in pure and pharmaceutical formulation using MBTH reagent”, International journal of pharmaceutical sciences and drug research 2012; 4(1), pp.74-76 27 Fathy M M Salama, Mohamed W I Nassar, Mohie M K Sharaf El-Din, Khalid A M Attia, Mohamed Yousri Kaddah, (2011) “Determination of fenofibrate and the degradation product using simultaneous UV-Derivative spectrometric method and HPLC”, American journal of analytical chemistry, 2, pp.332-34 28 Gosser Jr D.K (1993), Cyclic Voltammetry: Simulation and analysis of reaction mechanisms, VCH Publishers, New York, p 43 47 29 K.G.Kamble, K.H.Maharshi, M.M.Khandare, M.S.Kondawar “UV spectrophotometric estimation of ezetimibe and fenofibrat in Bulk drug and Dosage form using simultaneous equation method”, International Joumal of ChemTech CODEN(USA), (2011), 3(2), pp.748-754 30 N.Jain, R Raghuwanshi and Deepti Jain (2008), “Development and validation of RP-HPLC method for simultaneous estimation of atorvastatin calcium and fenofibrate in table dosage forms”, Indian journal of Pharmaceutical Sciences, 70 (2), 263-265 31 Panikumar D Anumolu, Swetha Bhavani N, Sathesh Babu Pr, Subrahmanyam Cvs (2009) “A validated spectral discriminating derivative spectrophotometric method for simultaneous quantification of atorvastatin calcium and fenofibrat combination in tablets”, Oriental Journal of Chemistry 29(4) 32 Rayan G Alamri, Kazi Mohsina, Ajaz Ahmad, Mohammad Raishc Fars K Alanazia (2016), “ Development and validation of bioanalytical UHPLC - UV method for simultaneous analysis of unchanged fenofibrat and its metabolite fenofibric acid in rat plasma: application to Pharmaceutical Journal, Accepted Manuscript 48 pharmacokinetics”, Saudi PHỤ LỤC Bảng 1: Kết phân tích mẫu thuốc fenbrat (fenofibrat100 mg) Nồng độ fenofibrat có thuốc (mol.L-1) Cx Cx + 1,96x10-7 Thể tích chất chuẩn 10-5 mol.L-1(mL) 0,5 Cường độ dịng đỉnh píc (nA) 58,5 82,5 Hình 1: Đường von - ampe hịa tan fenofibrat mẫu thuốc fenbrat 100 mg Bảng 2: Kết phân tích mẫu thuốc fenbrate (fenofibrat 300 mg) Nồng độ fenofibrat có thuốc (mol.L-1) Thể tích chất chuẩn 10-5 mol.L-1(mL) Cường độ dịng đỉnh píc (nA) Cx Cx + 1,96x10-7 0,5 55,0 80,8 Hình 2: Đường von - ampe hòa tan fenofibrat mẫu thuốc fenbrat 300 mg Hình 3: Đường von - ampe hòa tan fenofibrat mẫu thuốc hafenthyl (fenofibrat 200m Bảng 3: Kết phân tích mẫu thuốc hafenthyl Nồng độ fenofibrat có thuốc (mol.L-1) Thể tích chất chuẩn 10-5 mol.L-1(mL) Cường độ dịng đỉnh píc (nA) Cx Cx + 1,96x10-7 0,5 35,8 60,5 Bảng 4: Bảng 3: Kết phân tích mẫu thuốc fenofibrat Nồng độ fenofibrat có thuốc (mol.L-1) Thể tích chất chuẩn 10-5 mol.L-1(mL) Cường độ dịng đỉnh píc ( nA) Cx Cx + 1,96x10-7 0,5 24,8 39,4 Hình 4: Đường von - ampe hòa tan fenofibrat mẫu thuốc fenofibra ... NHIÊN - ĐỖ THỊ KIM DUNG NGHIÊN CỨU ĐẶC TÍNH ĐIỆN HĨA CỦA FENOFIBRAT VÀ ỨNG DỤNG TRONG PHÂN TÍCH Chun ngành: Hóa phân tích Mã số: 60440118 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA... dương 14 CHƢƠNG 2: NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Nội dung nghiên cứu 2.1.1 Mục tiêu nghiên cứu Mục tiêu đề tài nghiên cứu đặc tính điện hóa quy trình xác định fenofibrat phương pháp von... ampe hòa tan Trong điều kiện xác định, Ep đặc trưng cho chất điện hóa chất phân tích dùng để phân tích định tính Ip tỉ lệ thuận với nồng độ chất phân tích dung dịch, Ip dùng để phân tích định lượng