Nghiên cứu xác định hàm lượng rhodamine b trong ớt bột ở đà nẵng bằng phương pháp sắc ký lỏng cao áp (hplc)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM KHOA HÓA - NGÔ THỊ VIỆT TRINH Tên đề tài: NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH HÀM LƢỢNG RHODAMINE B TRONG ỚT BỘT Ở ĐÀ NẴNG BẰNG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG CAO ÁP (HPLC) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Đà Nẵng, tháng 04 năm 2015 TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM CỘNG HOÀ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM KHOA HÓA Độc lập - Tự - Hạnh phúc NHIỆM VỤ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên : Ngô Thị Việt Trinh Lớp : 11CHP Tên đề tài: “Nghiên cứu xác định hàm lượng Rhodamine B ớt bột Đà Nẵng phương pháp sắc ký lỏng cao áp (HPLC)” Ngun liệu hóa chất, dụng cụ thiết bị chính: - Nguyên liệu: Rhodamine B chuẩn gốc ớt bột thị trường Đà Nẵng Dụng cụ, thiết bị: máy sắc ký HPLC, cân phân tích (độ xác 0.001g), máy đo quang, bể siêu âm, máy li tâm, bếp cách thủy, máy say, bình định mức 10, 25, 100ml, pipet loại, bình tam giác 250ml, xilanh, rây lọc, giấy lọc, vial Nội dung nghiên cứu: - Tìm hiểu chất phẩm màu thực phẩm Tìm hiểu Rhodamine B Tìm hiểu sắc ký lỏng hiệu cao HPLC Nghiên cứu trình phá mẫu (ớt bột) để xác định hàm lượng Rhodamine B Nghiên cứu trình chiết Rhodamine B từ ớt bột Nghiên cứu xác định hàm lượng Rhodamine B ớt bột phương pháp sắc ký lỏng cao áp (HPLC) Giáo viên hướng dẫn: ThS Nguyễn Thị Thu Phương Ngày giao đề tài: 10/9/2014 Ngày hoàn thành: 05/4/2015 - Chủ nhiệm khoa (Ký ghi rõ họ tên) Giáo viên hƣớng dẫn (Ký ghi rõ họ tên) PGS.TS Lê Tự Hải ThS Nguyễn Thị Thu Phương Sinh viên hoàn thành nộp báo cáo cho Khoa ngày… tháng… năm 2015 Kết điểm đánh giá: ……… Ngày … tháng … năm 2015 CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG (Ký ghi rõ họ tên) LỜI CẢM ƠN Với lòng biết ơn sâu sắc, em xin chân thành cảm ơn Cơ giáo ThS Nguyễn Thị Thu Phương tận tình hướng dẫn, bảo, động viên, giúp đỡ em suốt thời gian học tập, nghiên cứu hoàn thành khóa luận Em xin chân thành cảm ơn đến q Thầy, Cơ giáo khoa Hóa – Trường Đại học Sư phạm – Đại học Đà Nẵng người dìu dắt truyền đạt kiến thức, kinh nghiệm quí báo suốt năm học tập rèn luyện trường Qua đây, em xin tỏ lòng biết ơn đến thầy cơng tác phịng thí nghiệm khoa Hóa – Trường Đại học Sư phạm – Đại học Đà Nẵng tạo điều kiện để em hồn thành nhiệm vụ Em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến gia đình nơi cố gắng tạo điều kiện cho em học tập quãng đường sinh viên em xin chân thành cảm ơn tập thể lớp 11CHP sát cánh giúp đỡ em suốt năm học trường Đà Nẵng, ngày 26 tháng 04 năm 2015 Sinh viên Ngô Thị Việt Trinh MỤC LỤC MỞ ĐẦU CHƢƠNG I: TỔNG QUAN LÝ THUYẾT 1.1 Chất tạo màu thực phẩm 1.1.1 Định nghĩa 1.1.2 Vai trò 1.1.3 Phân loại chất tạo màu 1.1.3.1 Các chất phẩm màu nhân tạo 1.1.3.2 Các phẩm màu tự nhiên 1.2 Phẩm màu Rhodamin B 18 1.2.1 Khái quát 18 1.2.2 Tính chất sinh học 20 1.2.3 Ứng dụng 20 1.3 Phƣơng pháp sắc ký lỏng hiệu cao HPLC 22 1.3.1 Khái quát 22 1.3.2 Các dạng sắc ký lỏng hiệu cao 24 1.3.2.1 Dạng trao đổi ion 24 1.3.2.2 Dạng HPLC phân bố 24 1.3.3 Máy sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) 25 1.3.3.1 Bình chứa pha động 26 1.3.3.2 Bộ khử khí Degases 27 1.3.3.3 Bơm cao áp 27 1.3.3.4 Bộ phận tiêm mẫu 28 1.3.3.5 Cột sắc ký 28 1.3.3.6 Detector 29 1.3.3.7 Bộ phận ghi nhận tín hiệu 30 1.3.3.8 In liệu 31 1.3.4 Một số kết nghiên cứu Rhodamine B phƣơng pháp sắc ký lỏng hiệu cao HPLC 31 CHƢƠNG II: NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 34 2.1 Nguyên liệu 34 2.2 Dụng cụ - Thiết bị 35 2.2.1 Thiết bị 35 2.2.2 Dụng cụ 35 2.3 Hóa chất, dung dịch chuẩn 36 2.3.1 Dung dịch chuẩn gốc Rhodamine B 36 2.3.2 Hóa chất 36 2.4 Tiến hành thực nghiệm 37 2.4.1 Chọn khảo sát tỉ lệ dung môi 37 2.4.2 Xác định hàm lƣợng Rhodamine B mẫu ớt 37 2.4.2.1 Điều kiện tiến hành phân tích sắc ký máy HPLC Agilent-1200 đặt phịng thí nghiệm Sắc ký trƣờng Đại học Sƣ Phạm: 37 2.4.2.2 Chuẩn bị dung dịch chuẩn mẫu 38 2.4.2.3 Dựng đƣờng chuẩn xác định phƣơng trình tuyến tính HPLC 38 2.4.2.4 Chiết tách xác định hàm lƣợng Rhdamine B mẫu ớt 39 2.4.2.5 Khảo sát hiệu suất thu hồi 41 CHƢƠNG III: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 43 3.1 Kết khảo sát tỉ lệ dung môi 43 3.2 Kết xác định hàm lƣợng Rhodamine B mẫu ớt bột 44 3.2.1 Phƣơng trình đƣờng chuẩn Spíc = f(C) 44 3.2.2 Kết hàm lƣợng Rhodamine B mẫu ớt bột 46 3.3 Kết khảo sát hiệu suất thu hồi 48 CHƢƠNG IV: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 49 4.1 Kết luận 49 4.2 Kiến nghị 50 DANH MỤC BẢNG Bảng 1: Liều lượng phẩm màu thực phẩm Bảng 2: Liều lượng sử dụng số chất màu tổng hợp Bảng 3: Các chất phẩm màu thường gặp thực phẩm Bảng 4: Các chất tạo màu tự nhiên 10 Bảng 5: Các phẩm màu tự nhiên rau 11 Bảng 6: Các dạng Anthocyanins 12 Bảng 7: Các loại cột sắc ký 29 Bảng 8: Các loại detector thông dụng 30 Bảng 9: Kết khảo sát tỉ lệ dung môi chiết 43 Bảng 10: Kết xác định hàm lượng Rhodamine B xây dựng đường chuẩn 44 Bảng 11: Kết phân tích mẫu ớt 46 Bảng 12: Kết xác định hàm lượng Rhodamine B thu sau phân tích 48 DANH MỤC HÌNH Hình 1: Cấu trúc Anthocyanins 12 Hình 2: Cấu trúc Betalains 14 Hình 3: Cấu trúc số Carotenoids 15 Hình 4: Cấu trúc chlorophylle 16 Hình 5: Cấu trúc Curcumin 17 Hình 6: Cấu tạo Rhodamine B 18 Hình 7: Phổ phát xạ huỳnh quang Rhodamine B hòa tan ethanol 19 Hình 8: Phương tình tổng hợp Rhodamine B 19 Hình 9: Sơ đồ hệ thống HPLC 25 Hình 10: Rhodamine B chuẩn gốc 34 Hình 11: Các mẫu ớt bột thị trường Đà Nẵng 35 Hình 12: Dãy dung dịch chuẩn rhodamine B 39 Hình 13: Các mẫu ớt sau trình chiết tách 40 Hình 14: Phổ Rhodamine B trình khảo sát tỉ lệ dung mơi 43 Hình 15: Đồ thị biểu diễn phụ thuộc diện tích píc (Spíc) vào nồng độ (C) 45 Hình 16:Sắc kí đồ Rhodamine B mẫu ớt bột 46 MỞ ĐẦU Khi xã hội ngày phát triển vấn đề sức khoẻ người ngày trọng, vệ sinh an toàn thực phẩm đặt lên hàng đầu có ảnh hưởng trực tiếp đến sức khoẻ người Hằng ngày, giới xảy vụ ngộ độc có liên quan đến thực phẩm, đặc biệt nước phát triển Việt Nam Ngộ độc thực phẩm nhẹ gây ảnh hưởng đến sức khỏe, nặng gây tử vong ảnh hưởng đến kinh tế Sử dụng thực phẩm không đảm bảo vệ sinh trước mắt bị ngộ độc cấp tính với triệu chứng ạt, dễ nhận thấy, vấn đề nguy hiểm tích lũy dần chất độc hại số quan thể, sau thời gian phát bệnh gây dị tật, dị dạng cho hệ sau Những ảnh hưởng tới sức khỏe phụ thuộc vào tác nhân gây bệnh Tại Việt Nam, theo cục thống kê An toàn Vệ sinh Thực phẩm cho biết, vụ ngộ độc thực phẩm nguyên nhân chủ yếu thực phẩm nhiễm vi sinh vật (33-49%), hóa chất độc hại (11-27%), chất độc tự nhiên (6-37,5%) Sự tồn dư chất độc hại có thực phẩm vấn đề đáng lo ngại người tiêu dùng Trong trình chế biến thực phẩm, để tạo cho thực phẩm màu sắc đẹp, bắt mắt, người ta sử dụng phẩm màu Và phẩm màu công nghiệp sử dụng phổ biến loại phẩm màu tự nhiên độ bền cao giá thành rẻ Vì vậy, nhiều người kinh doanh lạm dụng phẩm màu công nghiệp để tăng lợi nhuận chất từ lâu bị cấm sử dụng Phẩm màu cơng nghiệp nói chung Rhodamine B (một loại phẩm màu gây độc cấp mãn tính) nói riêng bị cấm sử dụng thực phẩm khó phân huỷ, tích tụ qua thời gian gây hậu khó lường sức khỏe người sử tiêu dùng Vì việc nghiên cứu xác định hàm lượng Rhodamine B vấn đề cần thiết sức khoẻ cộng đồng Ngày với phát triển khoa học kỹ thuật, nhiều kỹ thuật phân tích mới, đại áp dụng nhiều lĩnh vực khác đặc biệt đánh giá, kiểm định chất gây độc thực phẩm Đặc biệt, phương pháp sắc ký lỏng cao áp HPLC phương pháp tối ưu có độ xác cao cho phân tích chất dạng vết, hàm lượng Rhodamine B Chính lí nên tơi chọn đề tài: “Nghiên cứu xác định hàm lƣợng Rhodamine B ớt bột Đà Nẵng phƣơng pháp sắc ký lỏng cao áp (HPLC)” nhằm đóng góp thêm thơng tin phẩm màu gia vị đến người tiêu dùng Đề tài nghiên cứu với nội dung sau: Tìm hiểu chất phẩm màu thực phẩm Tìm hiểu Rhodamine B Tìm hiểu sắc ký lỏng hiệu cao HPLC Nghiên cứu trình phá mẫu (ớt bột) để xác định hàm lượng Rhodamine B Nghiên cứu trình chiết Rhodamine B từ ớt bột Nghiên cứu xác định hàm lượng Rhodamine B ớt bột phương pháp sắc ký lỏng cao áp (HPLC) 37 2.4 Tiến hành thực nghiệm 2.4.1 Chọn khảo sát tỉ lệ dung môi Dung môi hữu lựa chọn để xác định hàm lượng Rhodamine B ớt bột hỗn hợp dung môi ethanol (C2H5OH) nước (H2O) Tỉ lệ dung môi khảo sát mẫu sau: Lần lượt cân xác 0.001 ± 0.0001 g chất chuẩn Rhodamine B cho vào bình định mức 100 ml Định mức đến vạch bình với tỉ lệ dung mơi khác Cụ thể, bình chứa 30 ml C2H5OH 70 ml H2O; bình chứa 40 ml C2H5OH 60 ml H2O; bình chứa 50 ml C2H5OH 50 ml H2O; bình chứa 60 ml C2H5OH 40 ml H2O; bình chứa 70 ml C2H5OH 30ml H2O Lắc hỗn hợp siêu âm 10 phút Ta thu dung dịch chứa Rhodamine B 10 ppm với tỉ lệ dung môi khác Tiến hành ađo quang phổ Rhodamine B máy quang phổ UV-VIS LAMBDA25 để xác định bước sóng tối ưu (λmax) mật độ quang (D), từ lựa chọn dung môi chiết tốt với mật độ quang cao hình dạng peak đẹp Kết cho thấy với tỉ lệ dung môi C2H5OH/H2O = 7/3 (v/v) đáp ứng tốt yêu cầu đặt Chọn dung môi chiết với tỉ lệ C2H5OH/H2O = 7/3 (v/v) để chiết tách Rhodamine B khỏi mẫu 2.4.2 Xác định hàm lƣợng Rhodamine B mẫu ớt 2.4.2.1 Điều kiện tiến hành phân tích sắc ký máy HPLC Agilent1200 đặt phịng thí nghiệm Sắc ký trƣờng Đại học Sƣ Phạm: - Pha tĩnh: RP- C18 (4.6 x 150 mm, µm) - Pha động: CH3CN : H2O : đệm (H3PO4 + KHPO4), pH = 2.7 - Tốc độ dòng: 0.8 ml/phút - Nhiệt độ cột: Ở nhiệt độ phịng - Thể tích tiêm mẫu: 10 µl - Detector: UV-VIS 556 nm 38 2.4.2.2 Chuẩn bị dung dịch chuẩn mẫu  Chuẩn bị dung dịch chuẩn trung gian: Dùng pipet lấy xác 10 ml dung dịch chuẩn gốc Rhodamine B 1000 ppm cho vào bình định mức 100 ml Pha lỗng dung mơi chọn (mục 2.4.1) đến vạch Chuẩn bị dung dịch trước sử dụng  Chuẩn bị mẫu thử: Phần mẫu thử lấy không nhỏ 100 g Trộn nghiền mẫu thử máy nghiền mẫu lọt hồn tồn qua rây có cỡ lỗ 0,5 mm 2.4.2.3 Dựng đƣờng chuẩn xác định phƣơng trình tuyến tính HPLC Cân xác 0.01 ± 0.001 g cân Precisa (XR125SM) chất chuẩn Rhodamine B cân phân tích chuyển vào bình định mức 100 ml Pha lỗng hỗn hợp dung mơi chọn C2H5OH/H2O = 7/3 (v/v) đến vạch trộn đều; đánh siêu âm phút Ta thu dung dịch chuẩn gốc 100 ppm Dùng pipet lấy xác 0.10 ml, 0.20 ml, 0.50 ml, 1.00 ml, 5.00 ml, 10.00 ml, 20.00 ml dung dịch chuẩn gốc cho vào bình định mức 100ml Pha lỗng dung môi đến vạch Ta thu dung dịch chuẩn làm việc có nồng độ 0.10 ppm, 0.20 ppm, 0.50 ppm, 1.00 ppm, 5.00 ppm, 10.00 ppm, 20.00 ppm 39 Hình 12: Dãy dung dịch chuẩn rhodamine B Dùng xilanh lọc bơm dung dịch chuẩn làm việc theo thứ tự từ nồng độ thấp đến nồng độ cao, dung dich chuẩn bơm lần vào vial Tiến hành chạy HPLC Agilent-1200 đặt phịng thí nghiệm Sắc ký trường Đại học Sư Phạm sử dụng phần mềm Agilent Chemistation với điều kiện sắc ký chọn (mục 2.4.2.1) để xác định diện tích píc dung dịch chuẩn lập phương trình tuyến tính 2.4.2.4 Chiết tách xác định hàm lƣợng Rhdamine B mẫu ớt Cân xác ± 0.001 g mẫu ớt bột địa điểm cân phân tích chuyển vào vào bình tam giác 250 ml Thêm 30 ml dung mơi chọn vào bình tam giác, lắc đều, khuấy từ phút Sau đun cách thủy nhiệt độ 700C giữ bể siêu âm phút Chiết lấy phần dịch lỏng bình tam giác vào bình định mức 100 ml Phần bã chiết lặp lại lần, lần dùng 30 ml dung môi chọn 40 định mức dung môi đến vạch 100 ml Ta thu dịch chiết mẫu ớt bột địa điểm khác Hình 13: Các mẫu ớt sau trình chiết tách Dùng xilanh để lọc lại dịch chiết lần nữa, cho vào vial để tiến hành phân tích sắc ký HPLC Agilent-1200 đặt phịng thí nghiệm Sắc ký trường Đại học Sư Phạm sử dụng phần mềm Agilent Chemistation với điều kiện sắc kí chọn (mục 2.4.2.1) để xác định hàm lượng Rhodamine B mẫu ớt bột Mỗi mẫu phân tích thực lần, tính giá trị trung bình lần đo Nồng độ Rhodamine B dung dịch mẫu bơm vào vial phân tích HPLC tính dựa phương trình tuyến tính (mục 2.4.2.3.) 41 Hàm lượng Rhodamine B có mẫu X tính theo cơng thức sau: Trong đó: C : Nồng độ Rhodamine B dung dịch mẫu bơm vào vial phân tích HPLC (ppm) V : Thể tích mẫu pha lỗng cuối (ml) m : Khối lượng phần mẫu thử (g) k : Hệ số pha loãng 2.4.2.5 Khảo sát hiệu suất thu hồi Cân xác ± 0.001 g mẫu trắng cân phân tích chuyển vào vào bình tam giác 250 ml Sau thêm chuẩn Rhodamine B 50 ppm với thể tích ml, ml, 10 ml; thể tích lặp lại lần đưa giá trị trung bình Thêm 30 ml dung mơi chọn vào bình tam giác, lắc đều, khuấy từ phút Sau đun cách thủy nhiệt độ 700C giữ bể siêu âm phút Chiết lấy phần dịch lỏng bình tam giác vào bình định mức 100 ml Phần bã chiết lặp lại lần, lần dùng 30 ml dung môi chọn định mức dung môi đến vạch 100 ml Ta thu dịch chiết mẫu ớt bột địa điểm khác Dùng xilanh để lọc lại dịch chiết lần nữa, cho vào vial để tiến hành phân tích sắc ký HPLC Agilent-1200 đặt phịng thí nghiệm Sắc ký trường Đại học Sư Phạm sử dụng phần mềm Agilent Chemistation với 42 điều kiện sắc kí chọn (mục 2.4.2.1) để xác định hàm lượng Rhodamine B mẫu ớt bột Hiệu suất thu hồi xác định theo cơng thức sau: Trong đó: : hiệu suất thu hồi (%) C(tt) : nồng độ chất phân tích mẫu trắng thêm chuẩn (ppm) C(c) : nồng độ chuẩn thêm (lý thuyết) (ppm) 43 CHƢƠNG III: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Kết khảo sát tỉ lệ dung mơi Hình 14: Phổ Rhodamine B q trình khảo sát tỉ lệ dung mơi Bảng 9: Kết khảo sát tỉ lệ dung môi chiết Tỉ lệ dung mơi chiết Bƣớc sóng tối ƣu Mật độ quang (D) (C2H5OH : (λmax) (nm) (A) 3:7 552.77 1.5539 4:6 551.91 1.4054 5:5 550.85 1.1105 6:4 550.00 1.5978 7:3 548.94 1.7123 H2O)/100ml 44 Nhận xét: Dựa vào tỉ lệ khảo sát, nhận thấy tỉ lệ khác thu píc khác Rhodamine B Trong đó, tỉ lệ C2H5OH:H2O = 7:3 (v/v) cho píc rõ ràng mật độ quang cao Do đó, chọn tỉ lệ để chiết tách Rhodamine B 3.2 Kết xác định hàm lƣợng Rhodamine B mẫu ớt bột 3.2.1 Phƣơng trình đƣờng chuẩn Spíc = f(C) Bảng 10: Kết xác định hàm lượng Rhodamine B xây dựng đường chuẩn NỒNG ĐỘ (ppm) DIỆN TÍCH PÍC (mAu.s) 0.10 10.38861 0.20 18.12569 0.50 40.46040 1.00 135.93701 5.00 788.02873 10.00 1477.35820 20.00 3200.40911 45 Hình 15: Đồ thị biểu diễn phụ thuộc diện tích píc (Spíc) vào nồng độ (C) Nhận xét:Dựa vào thơng số thu q trình phân tích trên, chúng tơi xây dựng phương trình tuyến tính y = 159.45.9x – 28.152 với số tương quan cao R2 = 0.9987 nên áp dụng để phân tích mẫu Từ phương trình tuyến tính trên, chúng tơi tiến hành xác định hàm lượng Rhodamine B số mẫu ớt thị trường Đà Nẵng 46 3.2.2 Kết hàm lƣợng Rhodamine B mẫu ớt bột Hình 16:Sắc kí đồ Rhodamine B mẫu ớt bột Bảng 11: Kết phân tích mẫu ớt Thơng số Diện tích píc Nồng độ Hàm lƣợng Hàm lƣợng (mAu.s) Rhodamine Rhodamine Rhodamine B vial B mẫu B trung (ppm) (ppm) bình Địa điểm Chợ mẫu (ppm) - - - - - - - - - Hòa Khánh - 47 2045.47451 13.005 5.202 2173.84552 13.810 5.524 1921.67835 12.228 4.891 Chợ 1450.13290 9.271 3.708 Bắc Mỹ An 1307.65983 8.378 3.351 1511.56632 9.656 3.862 1430.38678 9.147 3.659 1492.02555 9.534 3.814 1730.67536 10.403 4.161 - - - - - - - - - Chợ 5.206 Cẩm Lệ Chợ Cồn Siêu thị 3.640 3.878 - Big C Nhận xét: Bảng số liệu cho thấy Rhodamine B có mặt ớt bột số địa điểm thị trường Đà Nẵng chợ Cẩm Lệ (5.206 ppm); chợ Bắc Mỹ An (3.640 ppm); chợ Cồn (3.878 ppm) 48 3.3 Kết khảo sát hiệu suất thu hồi Bảng 12: Kết xác định hàm lượng Rhodamine B thu sau phân tích Mẫu M1 M2 M3 Lần Spíc Ctt Cc R Rtb (mAu.s) (ppm) (ppm) (%) (%) 139.11205 0.4196 131.13925 0.3996 145.44719 0.4355 87.10 815.05946 2.1153 84.61 899.28893 2.3266 746.97431 1.9445 77.78 1795.87628 4.5758 91.52 1754.7382 4.4726 1867.07076 4.7544 83.92 0.5 2.5 5.0 79.92 93.06 89.45 83.65 85.15 95.09 95.09 Hiệu suất thu hồi trung bình: R = (83.65 + 85.15 + 95.09) : = 87.96 % Nhận xét: Hiệu suất thu hồi phân tích 87.96 % nằm khoảng 80 – 110 % theo tiêu chuẩn hội đồng châu Âu đưa 49 CHƢƠNG IV: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 4.1 Kết luận Trên sở nghiên cứu điều kiện thực nghiệm, nhằm ứng dụng kỹ thuật phân tích sắc ký lỏng hiệu cao HPLC sử dụng detector UV-Vis để nghiên cứu xác định hàm lượng Rhodamine B thực phẩm, thu số kết sau đây:  Bằng phương pháp đo quang phổ UV-VIS, xác định dung môi cần để sử dụng chiết tách Rhodamine B khỏi ớt bột hỗn hợp gồm C2H5OH:H2O = 7:3 (v/v)  Đã dựng phương trình tuyến tính: y = 159.45x – 28.152 với khoảng tuyến tính Rhodamine B: 0,1 – 20 ppm  Khảo sát mẫu thực - Đã chọn quy trình phân tích khảo sát dung môi chiết tách mẫu ớt bột 70% ethanol - 30% nước Trên sở quy trình tối ưu tìm tiến hành xác định hàm lượng Rhodamine B mẫu thực phẩm ớt bột với hiệu thu hồi 87.96 % với hàm lượng Rhodamine B mẫu ớt bột chợ Bắc Mỹ An (quận Ngũ Hành Sơn) 3.640 ppm; chợ Cẩm Lệ (quận Cẩm Lệ) 5.206 ppm; chợ Cồn (quận Hải Châu) 3.878 ppm; chợ Hòa Khánh (quận Liên Chiểu) siêu thị Big C (quận Hải Châu) khơng có dấu hiệu xuất Rhodamine B ớt bột - Chúng tơi hy vọng nghiên cứu góp phần vào việc ứng dụng kỹ thuật sắc ký lỏng hiệu cao HPLC để xác định Rodamine B đối tượng mẫu thực phẩm, nhằm phục vụ đắc lực cho ngành khoa học đặc biệt lĩnh vực vệ sinh an toàn thực phẩm giúp bảo vệ sức khoẻ người 50 4.2 Kiến nghị Thực phẩm có vai trị quan trọng sống người Do phải tạo sản phẩm sạch, tự nhiên, có lợi cho sức khỏe thân thiện với môi trường số biện pháp sau: - Nói khơng với phẩm màu độc hại - Sử dụng phẩm màu tự nhiên thay cho phẩm màu công nghiệp - Thường xuyên kiểm tra vấn đề an toàn vệ sinh thực phẩm thị trường - Tư vấn, tuyên truyền cho doanh nghiệp sản xuất thực phẩm lớn nhỏ vệ sinh an toàn thực phẩm – phẩm màu công nghiệp - Tư vấn, tuyên truyền cho người tiêu dùng cách nhận biết thực phẩm độc hại để tụ phòng tránh - Nghiên cứu thêm nhiều phương pháp xác định chất độc hại thực phẩm để cung cấp thơng tin kịp thời xác cho người tiêu dùng, tránh hậu đáng tiếc xảy TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Bùi Thị Ngoan, Trần Cao Thắng, Bùi Thị Kim Ngân (2010), “ Xác định hàm lượng Rhodamine B thực phẩm kỹ thật sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC)”, Tạp chí y học thực hành (732), số 9/2010, trang 47 – 49 [2] PGS.TS Lê Thị Mùi (2008), giảng “Thuốc thử hữu cơ”, trang 252 – 253 [3] PGS.TS Nguyễn Duy Thịnh, giảng “Các chất phụ gia dùng sản xuất thực phẩm” [4] PGS.TS Phạm Xuân Đà, “Thẩm định phân tích phân tích hóa học vi sinh vật”, trang 57 [5] R.W Mason L.R.Edwards (1989), “High-performance liquid chromatographic determination of rhodamine B in rabbit and human plasma”, Journal of Chromatography, 491 page 468- 472 [6] TCVN 8670 : 2011 “Thực phẩm – Xác định Rhodamine B phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC)” [7] TS Bùi Xuân Vững (2009), giảng “Phương pháp phân tích sắc ký” [8] http://vesinhantoanthucpham.com.vn/thong-ke-ngo-doc-thuc-pham-taiviet-nam [9] http://en.wikipedia.org/wiki/ [10] http://wordpress.com/2010/03/02/vấn-đề-an-toàn-thực-phẩm-tại-việtnam-nổi-cộm-trở-lại-với-vụ-bột-gia-vị-nhiễm-rhodamine B/ ... Rhodamine B Tìm hiểu sắc ký lỏng hiệu cao HPLC Nghiên cứu trình phá mẫu (ớt b? ??t) để xác định hàm lượng Rhodamine B Nghiên cứu trình chiết Rhodamine B từ ớt b? ??t Nghiên cứu xác định hàm lượng Rhodamine. .. tài: ? ?Nghiên cứu xác định hàm lượng Rhodamine B ớt b? ??t Đà Nẵng phương pháp sắc ký lỏng cao áp (HPLC)? ?? Ngun liệu hóa chất, dụng cụ thiết b? ?? chính: - Nguyên liệu: Rhodamine B chuẩn gốc ớt b? ??t thị... Nghiên cứu trình chiết Rhodamine B từ ớt b? ??t Nghiên cứu xác định hàm lượng Rhodamine B ớt b? ??t phương pháp sắc ký lỏng cao áp (HPLC) Giáo viên hướng dẫn: ThS Nguyễn Thị Thu Phương Ngày giao đề tài: