Nghiên cứu xác định thành phần hóa học và chiết tách alkaloid tổng từ hoa đu đủ đực được thu hái tại thành phố đà nẵng

1 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HÓA  ĐỖ THỊ LỆ UYÊN NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ CHIẾT TÁCH ALKALOID TỔNG TỪ HOA ĐU ĐỦ ĐỰC ĐƯỢC THU HÁI TẠI THÀNH PHỐ ĐÀ NẴNG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN KHOA HỌC Đà Nẵng, 2015 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HÓA  NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ CHIẾT TÁCH ALKALOID TỔNG TỪ HOA ĐU ĐỦ ĐỰC ĐƯỢC THU HÁI TẠI THÀNH PHỐ ĐÀ NẴNG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN KHOA HỌC Sinh viên thực : ĐỖ THỊ LỆ UYÊN Lớp : 11CHD Giáo viên hướng dẫn : Ts Giang Thị Kim Liên Đà Nẵng, 2015 Đại học Đà Nẵng Cộng hòa xã hội chủ nghĩa Việt Nam Trường Đại học Sư Phạm Độc lập – Tự – Hạnh phúc Khoa Hóa NHIỆM VỤ KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên: ĐỖ THỊ LỆ UYÊN Lớp : 11CHD Tên đề tài: “ Nghiên cứu xác định thành phần hóa học chiết tách alkaloid tổng từ hoa đu đủ đực thu hái thành phố Đà Nẵng ” Nguyên liệu, dụng cụ thiết bị: - Nguyên liệu: Hoa đu đủ đực thu hái thành phố Đà Nẵng - Dụng cụ, thiết bị: Bộ chiết soxhlet, bình định mức, bình tam giác, cốc thủy tinh, chiết lỏng- lỏng, cân kỹ thuật, tủ sấy, máy quang phổ hấp thụ nguyên tử AAS, máy đo sắc ký lỏng - khối phổ Xevo TQ hãng Waters, Mỹ thiết bị đo sắc ký- khối phổ Agilent 7890A/5975 Nội dung nghiên cứu: - Xác định số tiêu hóa lý hoa đu đủ đực - Xác định thành phần hóa học dịch chiết từ hoa đu đủ đực - Định tính chiết tách alkaloid hoa đu đủ đực Giáo viên hướng dẫn: Ts Giang Thị Kim Liên Ngày giao đề tài: 10/01/2014 Ngày hoàn thành: 03/05/2015 Chủ nhiệm khoa Giáo viên hướng dẫn Sinh viên hoàn thành nộp báo cáo cho Khoa ngày…tháng…năm… Kết điểm đánh giá:………… Ngày…tháng…năm 2015 CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG LỜI CẢM ƠN Trong trình thực khóa luận tốt nghiệp, em học hỏi nhiều điều bổ ích tích lũy nhiều kiến thức quý báu lĩnh vực mà em nghiên cứu Do đó, trang đầu luận văn em xin bày tỏ lịng biết ơn mình: Em xin chân thành cảm ơn cô Ts Giang Thị Kim Liên, người tận tình hướng dẫn em suốt trình thực luận văn Em xin gửi lời cảm ơn đến thầy cô giáo giảng dạy mơn thầy cơng tác phịng thí nghiệm cán khoa Hóa – Trường Đại H ọc Sư Phạm – Đại học Đà Nẵng tạo điều kiện thuận lợi cho em tiến hành thí nghiệm phục vụ cho đề tài luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn bạn sinh viên lớp 11CHD, gia đình động viên giúp đỡ tơi hồn thành đề tài Xin chân thành cảm ơn! Đà Nẵng, tháng năm 2015 Sinh viên thực Đỗ Thị Lệ Uyên DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT AAS GC LC MS GC-MS LC-MS HD1 HD2 HD3 TR CTPT Phương pháp quang phổ hấp phụ nguyên tử Sắc ký khí Sắc ký lỏng Khối phổ Phương pháp sắc ký khí ghép khối phổ Phương pháp sắc ký lỏng ghép khối phổ Dịch chiết hoa đu đủ n-hexan Dịch chiết hoa đu đủ etyl axetat Dịch chiết hoa đu đủ ethanol Thời gian lưu Công thức phân tử DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1 Kết khảo sát độ ẩm hoa đu đủ đực 30 Bảng 3.2 Kết khảo sát hàm lượng tro hoa đu đủ đực 32 Bảng 3.3 Kết khảo sát hàm lượng số kim loại hoa đu đủ đực 32 Bảng 3.4 Hiệu suất chiết 34 Bảng 3.5 Thành phần hóa học dịch chiết hoa đu đủ đực dung môi n-hexan 35 Bảng 3.6 Thành phần hóa học dịch chiết hoa đu đủ đực dung môi etyl axetat 40 Bảng 3.6 Thành phần hóa học dịch chiết hoa đu đủ đực dung mơi chloform 47 DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1.1 Vườn đu đủ Hình 1.2 Cây đu đủ (Carica papaya) Hình 1.3 Quả đu đủ chín Hình 1.4 Hoa đu đủ đực Hình 1.5 Sơ đồ thiết bị sắc ký khí ghép khối phổ 15 Hình 1.6 Sơ đồ thiết bị sắc ký lỏng ghép khối phổ 17 Hình 2.1 Hoa đu đủ đực 22 Hình 2.2 Bột hoa đu đủ đực khơ 22 Hình 3.1 Các hình ảnh kết chiết hoa đu đủ đực với dung môi 33 Hình 3.2 Sắc ký GC dịch chiết hoa đu đủ đực n -hexan 34 Hình 3.3 Phổ khối stigmasterol 38 Hình 3.4 Phổ khối gamma - sitosterol 38 Hình 3.3 Phổ khối vitamin E 38 Hình 3.4 Phổ khối n -hexadecanoic acid 39 Hình 3.5 Phổ khối 9,12 -Octadecadienoic acid 39 Hình 3.8 Sắc ký đồ dịch chiết hoa đu đủ đực etyl axetat 40 Hình 3.9 Phổ khối Triacetin 42 Hình 3.10 Phổ khối Tetradecanoic acid 42 Hình 3.11 Sắc ký đồ LC dịch chiết hoa đu đủ đực dung mơi etyl acetat 43 Hình 3.12 Sắc ký đồ LC dịch chiết hoa đu đủ đực dung mơi methanol 44 Hình 3.13 Các hình ảnh mẫu thử với thuốc thử 45 Hình 3.14 Dịch chiết chloform ban đầu 46 Hình 3.15 Dịch chiết chloform chứa alkaloid tổng 46 Hình 3.16 Sắc ký đồ dịch chiết hoa đu đủ đực chloform 47 MỤC LỤC Trang MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1.Tổng quan Đu đủ 1.1.1 Sơ lược họ Đu đủ 1.1.2 Sơ lược chi Đu đủ 1.2.Khái quát Đu đủ Việt Nam 1.2.1.Hình thái 1.2.2 Giới tính đu đủ 1.2.3 Thành phần hóa học 1.3.Một số ứng dụng thực tế 1.3.1.Tác dụng dinh dưỡ ng 1.3.2.Tác dụng dưỡ ng sinh 1.3.3.Tác dụng làm đẹ p 1.3.4.Tác dụng chữa bệnh 1.4.Tình hình nghiên cứu đu đủ Việt Nam giới hiệ n 10 1.5.Xác định hàm lượng kim loại phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử (AAS) 11 1.6 Phương pháp ngâm chiết 13 1.7.Khảo sát thành phần hóa học phương pháp sắc ký khí ghép khối phổ (GC-MS) 14 1.7.1 Phương pháp sắc ký khí (GC) 14 1.7.2 Phương pháp khối phổ (MS) 14 1.7.3.Sắc ký khí ghép khối phổ (GC - MS) 15 1.7 Khảo sát thành phần hóa học phương pháp sắ c ký lỏng – khối phổ (LC MS) 16 1.7.1 Phương pháp sắc ký lỏng 16 1.7.2 Phương pháp sắc ký lỏng – khối phổ (LC - MS) 17 1.8 Phân tích định tính alkaliod hoa đu đủ đực 18 1.8.1 Các thuốc thử để định tính alkaloid 19 1.9 Phương pháp chiết tách alkaloid khỏi 19 1.9.1 Phương pháp chiết tách alkaloid dung môi hữu 20 1.9.2 Phương pháp chiết tách alkaloid dung dịch nước acid 21 CHƯƠNG NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 2.1 Nguyên liệu, dụng cụ hóa chất 22 2.1.1 Nguyên liệu 22 2.1.2 Xử lí nguyên liệu 22 2.1.3 Thiết bị, dụng cụ hóa chất 23 2.2 Quy trình nghiên cứu 24 2.3 Các phương pháp nghiên cứu 25 2.3.1 Các phương pháp xử lí mẫu 25 2.3.2 Xác định độ ẩm 26 2.3.3 Xác định hàm lượng tro phương pháp tro hó a mẫu 26 2.3.4 Xác định nồng độ ion kim loại phương pháp AAS 26 2.3.5 Khảo sát thành phần hoá học phương pháp GC -MS 27 2.3.6 Định tính alkaloid 28 2.3.7 Chiết alkaloid tổng 29 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN 30 3.1 Kết xác định số tiêu hóa lý hoa đu đủ đực 30 3.1.1 Độ ẩm 30 3.1.2 Hàm lượng tro 31 3.1.3 Xác định hàm lượng kim loại 32 3.2 Hiệu suất chiết 33 3.3.Thành phần hóa học hoa đu đủ đực 34 3.3.1 Thành phần hóa học hoa đu đủ đực dung mơi n-hexan 34 3.3.2 Thành phần hóa học dịch chiết hoa đu đủ đực dung môi etyl axetat 39 3.4 Sắc ký đồ LC-MS dịch chiết hoa đu đủ đực dung môi etyl axetat 42 3.5 Sắc ký đồ LC-MS dịch chiết hoa đu đủ đực dung môi methanol 43 3.6 Định tính hợp chất alkaloid phản ứng hoá học 44 3.7 Chiết tách alkaloid tổng từ hoa đu đủ đực 45 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 51 Tài liệu tham khảo 53 10 MỞ ĐẦU 1.1.Lí chọn đề tài Xã hội phát triển với mặt tích cực người phải đối mặt với nguy xuất bệnh tật ngày nhiều Từ ngàn xưa người biết tìm sử dụng sản phẩm từ thiên nhiên để phòng chữa bệnh Và ngày người có xu hướng sử dụng sản phẩm có nguồn gốc tự nhiên tổng hợp đường nhân tạo, hợp chất thiên nhiên từ thực vật xung quanh Trong vơ số lồi thực vật đa ng tồn phát triển, đu đủ loại đượ c trồng vườn phổ biến Việt Nam Đu đủ có r ất nhiều ứng dụng sống, đu đủ chín coi ăn bồi bổ giúp tiêu hóa chất có nhiều loại thịt, lòng trắng trứng Quả đu đủ xanh dùng nấu với thịt cứng cho mau mềm, hay trộn gỏi ăn hàng ngày Nhựa đu đủ sử dụng làm thuốc giun.Lá đu đủ dùng gói thịt nấu cho chóng mềm; nước sắc đu đủ dùng giặt vết máu vải để rửa vết thương, vết lở loét chữa ung thư Rễ đu đủ sắc uống làm cầm máu bệnh băng huyết, bệnh sỏi thận Hoa đu đủ đực tươi khô hấp với đường phèn chữa bệnh ho, viêm ống phổi, tiếng Tại Mỹ, nhựa đu đủ dùng làm kỹ nghệ chế bia, kỹ nghệ thực phẩm, kỹ nghệ thuốc, kỹ nghệ tơ sợi để làm cho sợi cỏ khô, kỹ nghệ làm da[1,2] Tuy có nhiều đu đủ có nhiều ứng dụng cịn nghiên cứu phận đu đủ Xuất phát từ thực tế trên, với mục đích góp phần nghiên cứu thành phần hóa học lồi làm sở cho việc nghiên cứu sâu hoạt tính sinh học việc sử dụng đu đủ tương lai xin chọn đề tài: “ Nghiên cứu xác định thành phần hóa học chiết tách alkaloid tổng từhoa đu đủ đực thu hái thành phố Đà Nẵng ” Qua đó, góp phần tăng thêm giá trị sử dụng loại 2.Đối tượng nghiên cứu - Hoa đu đủ đực thu hái thành phố Đà Nẵng 71 Phụ lục Phổ khối HD2 - 72 Phụ lục Phổ khối HD2 - 73 Phụ lục 10 Phổ khối HD3 - 74 Phụ lục 11 Phổ khối HD3 - 75 Phụ lục 12 Phổ khối HD3 - 76 Phụ lục 13 Phổ khối HD3 - 77 Phụ lục 14 Phổ khối HD3 - 78 Phụ lục 15 Phổ khối HD3 - 79 Phụ lục 16 Phổ khối HD3 - 80 Phụ lục 17 Phổ khối HD3 - 81 Phụ lục 18 Phổ khối HD3 - 82 Phụ lục 19 Phổ khối HD - 10 83 Phụ lục 20 Phổ khối HD3 - 11 84 Phụ lục 21 Phổ khối HD3 - 12 85 Phụ lục 22 Biên giám định tên loài thực vật ...2 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HÓA  NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ CHIẾT TÁCH ALKALOID TỔNG TỪ HOA ĐU ĐỦ ĐỰC ĐƯỢC THU HÁI TẠI THÀNH PHỐ ĐÀ NẴNG KHÓA LUẬN TỐT... dụng loại 2.Đối tượng nghiên cứu - Hoa đu đủ đực thu hái thành phố Đà Nẵng 11 Mục đích nghiên cứu - Xác định số thơng số hóa lý hoa đu đủ đực - Xác định thành phần hóa học, cơng thức cấu tạo... đốn thành phần hóa học hoa đu đủ đực chứa lượng lớn chất tương đối phân cực phân cực 3.3 .Thành phần hóa học hoa đu đủ đực 3.3.1 Thành phần hóa học hoa đu đủ đực dung môi n-hexan Dịch chiết hoa đu