Nghiên cứu chiết tách, xác định thành phần hoá học trong một số dịch chiết của hạt quả lêkima ở tỉnh savanakhet, cộng hòa dân chủ nhân dân lào

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG KHENSOULIYAKHAM PHONESADET NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRONG MỘT SỐ DỊCH CHIẾT CỦA HẠT QUẢ LÊKIMA Ở TỈNH SAVANAKHET, CỘNG HÕA DÂN CHỦ NHÂN DÂN LÀO LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Đà Nẵng - Năm 2013 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG KHENSOULIYAKHAM PHONESADET NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRONG MỘT SỐ DỊCH CHIẾT CỦA HẠT QUẢ LÊKIMA Ở TỈNH SAVANAKHET, CỘNG HÕA DÂN CHỦ NHÂN DÂN LÀO Chuyên ngành : Hóa hữu Mã số : 60.44.27 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Ngƣời hƣớng dẫn khoa học : PGS.TS LÊ TỰ HẢI Đà Nẵng - Năm 2013 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi, số liệu kết nghiên cứu nêu luận văn trung thực, đồng tác giả cho phép sử dụng chưa công bố cơng trình khác Tác giả luận văn Khensouliyakham Phonesadet MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết đề tài Mục tiêu nghiên cứu Đối tƣợng phạm vi nghiên cứu Các phƣơng pháp nghiên cứu Bố cục đề tài CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 GIỚI THIỆU VỀ CÂY LÊKIMA 1.1.1 Nguồn gốc, phân bố 1.1.2 Phân loại 1.1.3 Đặc tính sinh thái lêkima 1.1.4 Thành phần hóa học giá trị dinh dƣỡng 1.1.5 Giới thiệu lêkima Savanakhet 1.2 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU TRONG NƢỚC VÀ TRÊN THẾ GIỚI 1.2.1 Tình hình nghiên cứu nƣớc 1.2.2 Tình hình nghiên cứu giới [6][7][8][10] 11 1.2.3 Tình hình sản xuất lêkima [15] [16] 12 CHƢƠNG NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14 2.1 NGUYÊN LIỆU 14 2.1.1 Thu hái nguyên liệu 14 2.1.2 Xử lý nguyên liệu 14 2.2 HÓA CHẤT VÀ THIẾT BỊ NGHIÊN CỨU 14 2.2.1 Hóa chất 14 2.2.2 Thiết bị nghiên cứu 15 CÁC PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 2.3.1 Các phƣơng pháp xác định số tiêu hóa lý 15 2.3.2 Phƣơng pháp tách chất từ hạt lêkima dung môi khác 19 2.3.3 Phƣơng pháp xác định thành phần hóa học dịch chiết hạt lêkima 20 2.3.4 Phƣơng pháp thăm dò hoạt tính sinh học 20 2.4 CÁC PHƢƠNG PHÁP PHÂN TÍCH 22 2.4.1 Phƣơng pháp đo quang phổ hấp thụ nguyên tử AAS [1][2][3] 22 2.4.2 Phƣơng pháp sắc kí khí GC-MS [1][2][3] 25 2.5 CÁC NGHIÊN CỨU THỰC NGHIỆM 33 2.5.1 Sơ đồ thực nghiệm 33 2.5.2 Khảo sát ảnh hƣởng dung môi đến trình tách chất 34 2.5.3 Khảo sát yếu tố thời gian tỷ lệ R/L đến trình tách chất từ cao MeOH 35 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 36 3.1 KẾT QUẢ XÁC ĐỊNH CÁC CHỈ TIÊU HÓA LÝ CỦA HẠT QUẢ LÊKIMA 36 3.1.1 Độ ẩm 36 3.1.2 Hàm lƣợng tro 36 3.1.3 Hàm lƣợng kim loại 37 3.2 KẾT QUẢ KHẢO SÁT ẢNH HƢỞNG CỦA CÁC LOẠI DUNG MÔI 38 3.3 KẾT QUẢ KHẢO SÁT ẢNH HƢỞNG THỜI GIAN ĐẾN HIỆU SUẤT CHIẾT TÁCH CÁC CHẤT TRONG CAO MEOH 39 3.3.1 Trong dung môi hexan 39 3.3.2 Trong dung môi EtOAc 40 3.3.3 Trong dung môi etanol 41 3.4 KẾT QUẢ KHẢO SÁT ẢNH HƢỞNG TỈ LỆ RẮN/LỎNG (R/L) ĐẾN HIỆU SUẤT CHIẾT TÁCH TRONG CAO MEOH 42 3.4.1 Trong dung môi hexan 42 3.4.2 Trong dung môi etyl axetat 43 3.4.3 Trong dung môi etanol 44 3.5 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CÁC DỊCH CHIẾT 44 3.5.1 Kết nghiên cứu thành phần hóa học dịch chiết etanol hạt lêkima 44 3.5.2 Kết nghiên cứu thành phần hóa học dịch chiết etyl axetat hạt lêkima 47 3.5.3 Kết nghiên cứu thành phần hóa học dịch chiết nhexan hạt lêkima 49 3.5.4 Kết nghiên cứu TPHH dịch chiết dầu hạt lêkima 51 3.6 KẾT QUẢ THỬ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA HẠT QUẢ LÊKIMA 54 3.6.1 Kết hoạt tính chống oxi hóa 54 3.6.2 Kết hoạt tính kháng sinh 54 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 57 TÀI LIỆU THAM KHẢO 59 QUYẾT ĐỊNH CHUYỂN GIAO ĐỀ TÀI 61 PHỤ LỤC 62 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT KÝ HIỆU nm nanomet μm micromet ppm nồng độ phần triệu CÁC CHỮ VIẾT TẮT AAS Atomic absorption spectroscopy CTCT Công thức cấu tạo DPPH 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl EtOAc Etylacetat GC-MS Gas chromatography–mass spectrometry IC50 50% inhibitor concentration MBC Minimum bactericidal concentration MIC Minimum inhibitor concentration TPHH Thành phần hóa học DANH MỤC CÁC BẢNG Số hiệu Tên bảng Trang bảng 1.1 Thành phần hóa học lêkima bột tƣơi 1.2 So sánh thành phần giá trị dinh dƣỡng 100g bột tƣơi bột khô 3.1 Độ ẩm hạt lêkima 36 3.2 Hàm lƣợng tro hạt lêkima 37 3.3 Hàm lƣợng kim loại hạt lêkima 37 3.4 Kết khảo sát dung môi 38 3.5 Kết khảo sát thời gian chiết soxlet dung môi n-hexan 39 3.6 Kết khảo sát thời gian chiết soxlet dung môi EtOAc 40 3.7 Kết khảo sát thời gian chiết soxlet dung môi etanol 41 3.8 Kết khảo sát tỉ lệ R/L dung môi n-hexan 42 3.9 Kết khảo sát tỉ lệ R/L dung môi EtOAc 43 3.10 Kết khảo sát tỉ lệ R/L dung môi etanol 44 3.11 TPHH dịch chiết etanol hạt lêkima 45 3.12 TPHH dịch chiết EtOAc hạt lêkima 48 3.13 TPHH dịch chiết hexan hạt lêkima 49 3.14 TPHH dịch chiết dầu hạt lêkima 52 3.15 Kết thử hoạt tính chống oxy hóa DPHH 54 3.16 Kết hoạt tính kháng vi sinh vật Gram (+) 55 3.17 Kết hoạt tính kháng vi sinh vật Gram (-) 55 3.18 Kết hoạt tính kháng nấm 55 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ Số hiệu Tên hình vẽ hình vẽ Trang 1.1 Cây lêkima 1.2 Hoa lêkima 1.3 Bánh bò lêkima 11 1.4 Cá cơm áo lêkima 11 2.1 Cây, hạt lêkima 14 2.2 Quy trình xử lý mẫu xác định hàm lƣợng kim loại nặng 17 2.3 Sơ đồ thực nghiệm 33 3.1 Sắc ký đồ GC dịch chiết etanol hạt lêkima 46 3.2 Sắc ký đồ GC dịch chiết EtOAc hạt lêkima 48 3.3 Sắc ký đồ GC dịch chiết n-hexan hạt lêkima 50 3.4 Sắc ký đồ GC dầu hạt lêkima 53 MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Lêkima loại trái cận nhiệt đới có nguồn gốc từ thung lũng Andes, Nam Mỹ Nó có tên khoa học Pouteria lucuma đƣợc phân loại thực vật có hoa, hai mầm, họ Hồng xiêm (Sapotacea) Lêkima đƣợc trồng thành công chân núi cận nhiệt đới California Ngoài Peru, lêkima đƣợc trồng đến mức độ hạn chế Bolivia Costa Rica Nó phát triển tốt hầu hết khu vực nhiệt đới, nhƣng lại không đƣợc ƣa chuộng Trái có sẵn với số lƣợng lớn nƣớc Cộng hòa Dân chủ Nhân dân Lào Việt Nam Theo Leonel Rojo, nhà nghiên cứu trƣờng đại học Rutgers, số thành phần hóa học trái lêkima có khả chống viêm, chống lão hóa hỗ trợ q trình tái tạo da Dầu hạt lêkima có ba tác dụng chính, thúc đẩy tái sinh tế bào màng trong, chuyển dịch nguyên bào sợi q trình sản sinh mơ Ngồi khả giúp tăng chuyển động nguyên bào sợi, chiết xuất dầu từ hạt lêkima giúp làm gia tăng phát triển tồn elastin, chất giúp ngăn ngừa nếp nhăn da Ông đƣa minh chứng công dụng làm lành vết thƣơng chống viêm dầu hạt lêkima Cây lêkima có nhiều cơng trình nghiên cứu giới lá, vỏ hạt lêkima với nhiều tác dụng chữa bệnh Tuy nhiên, cơng trình nghiên cứu trình chiết, tách xác định thành phần hoá học, cấu trúc hợp chất hạt lêkima chƣa hệ thống Với mong muốn tìm hiểu hạt lêkima nhằm làm sáng tỏ cơng dụng nó, chúng tơi chọn đề tài “Nghiên cứu chiết tách, xác định thành phần hoá học số dịch chiết hạt lêkima tỉnh Savanakhet, Cộng hòa dân chủ nhân dân Lào” 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 ... TẠO ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG KHENSOULIYAKHAM PHONESADET NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRONG MỘT SỐ DỊCH CHIẾT CỦA HẠT QUẢ LÊKIMA Ở TỈNH SAVANAKHET, CỘNG HÕA DÂN CHỦ NHÂN DÂN LÀO Chuyên... tỉnh Savanakhet, Cộng hòa dân chủ nhân dân Lào? ?? 2 Mục tiêu nghiên cứu Xác định thành phần hoá học hợp chất có hạt lêkima tỉnh Savanakhet- Lào Đối tƣợng phạm vi nghiên cứu - Hạt lêkima dịch chiết. .. dịch chiết etanol hạt lêkima 44 3.5.2 Kết nghiên cứu thành phần hóa học dịch chiết etyl axetat hạt lêkima 47 3.5.3 Kết nghiên cứu thành phần hóa học dịch chiết nhexan hạt