Nghiên cứu tác dụng bảo vệ gan của cao dịch chiết cloroform quả dứa dại việt nam (pandanus odoratissimus) trên chuột nhắt trắng (mus musculus var albino)

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM KHOA SINH - MƠI TRƢỜNG LÂM NGUYỄN HỒNG THỤY NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG BẢO VỆ GAN CỦA CAO DỊCH CHIẾT CLOROFORM QUẢ DỨA DẠI VIỆT NAM (Pandanus odoratissimus) TRÊN CHUỘT NHẮT TRẮNG (Mus musculus Var.Albino) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Đà Nẵng 2015 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM KHOA SINH - MƠI TRƯỜNG LÂM NGUYỄN HỒNG THỤY NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG BẢO VỆ GAN CỦA CAO DỊCH CHIẾT CLOROFORM QUẢ DỨA DẠI VIỆT NAM (Pandanus odoratissimus) TRÊN CHUỘT NHẮT TRẮNG (Mus musculus Var.Albino) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Cán hƣớng dẫn: ThS Nguyễn Cơng Thùy Trâm Niên khóa 2011 - 2015 LỜI CAM ĐOAN Em cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng em Các số liệu, kết nêu khóa luận trung thực chưa cơng bố cơng trình khác Sinh viên thực Lâm Nguyễn Hồng Thụy LỜI CÁM ƠN Để hồn thành khóa luận tốt nghiệp này, em xin bày tỏ lời cám ơn chân thành sâu sắc đến cô giáo ThS Nguyễn Công Thùy Trâm – người trực tiếp hướng dẫn, bảo tận tình cho em suốt trình thực đề tài Em xin gửi lời cám ơn đến quý thầy cô giáo khoa Sinh - Mơi trường tận tình giảng dạy tạo nhiều điều kiện để em hồn thành khóa luận tốt nghiệp Cuối em xin gửi lời cám ơn đến gia đình bạn bè, người ln bên cạnh quan tâm giúp đỡ em nhiều suốt thời gian vừa qua Đà Nẵng, ngày 27 tháng 04 năm 2015 Lâm Nguyễn Hoàng Thụy MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN LỜI CẢM ƠN DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT DANH MỤC BẢNG BIỂU DANH MỤC HÌNH ẢNH, ĐỒ THỊ MỞ ĐẦU CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 CÂY DỨA DẠI (PANDANUS ODORATISSIMUS) 1.1.1 Đặc điểm loài Pandanus odoratissimus 1.1.2 Dạng sống sinh thái 1.1.3 Công dụng dứa dại 1.1.4 Hoạt tính sinh học Dứa dại Việt Nam 1.2 CHUỘT NHẮT TRẮNG 1.3 GAN 1.3.1 Cấu trúc gan loại tế bào có gan 1.3.2 Các dạng bệnh lý gan 1.3.3 Các nghiên cứu hoạt tính bảo vệ gan loại thảo dược 13 CHƢƠNG ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU VÀ PHẠM VI NGHIÊN CỨU 15 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 15 2.1.2 Phạm vi nghiên cứu 15 2.2 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 15 2.3.1 Phương pháp xác định mẫu 15 2.3.2 Các phương pháp hóa học 15 2.3.3 Phương pháp gây độc gan tetraclorua carbon (CCl4) chuột nhắt trắng 16 2.3.4 Sàng lọc khả giải độc tetraclorua carbon (CCl4) cao dịch chiết cloroform dứa dại Việt Nam chuột nhắt trắng [5],[20] 16 2.3.5 Phương pháp xử lý số liệu 19 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 20 3.1 ẢNH HƯỞNG CỦA CAO CHIẾT CLOROFOM TỪ QUẢ DỨA DẠI ĐẾN HÀM LƯỢNG ENZYM GOT TRONG HUYẾT THANH CHUỘT NHẮT TRẮNG 20 3.2 ẢNH HƯỞNG CỦA CAO CHIẾT CLOROFOM TỪ QUẢ DỨA DẠI ĐẾN HÀM LƯỢNG ENZYM GPT TRONG HUYẾT THANH CHUỘT NHẮT TRẮNG 22 3.3 ẢNH HƯỞNG CỦA CAO CHIẾT CLOROFOM TỪ QUẢ DỨA DẠI ĐẾN HÀM LƯỢNG MDA TRONG GAN CHUỘT NHẮT TRẮNG 23 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 28 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT ALP Alkaline phosphatase ALT Alanin aminotransferase AST Aspartate aminotransferase CNT Chuột nhắt trắng GOT Glutamat oxaloacetat transaminase GPT Glutamat pyruvat transaminase GPx Glutathione peroxidase GSH Glutathione LC50 Lethal concentration LD50 Lethal dose LDH Lactate dehydrogenase MDA Malonyl dialdehyde SOD Superoxide dismutase DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng 1.1 Những thuốc gây ngộ độc gan 10 Bảng 1.2 Những chất độc từ mơi trường gây viêm gan 11 Bảng 3.1 Hàm lượng GOT (U/L) gan chuột nhắt trắng 20 Bảng 3.2 Hàm lượng GPT (U/L) chuột nhắt trắng 22 Bảng 3.3 Kết hàm lượng MDA gan chuột nhắt trắng 24 DANH MỤC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 3.1 Hàm lượng GOT (U/L) gan chuột nhắt trắng 20 Biểu đồ 3.2 Hàm lượng GPT (U/L) chuột nhắt trắng 22 Biểu đồ 3.3 Hàm lượng MDA (nmol/ml) gan chuột 25 Biểu đồ 3.4 Hoạt tính chống oxy hóa gan chuột 26 MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Gan phận quan trọng thể Gan đảm nhiệm nhiều chức quan trọng, chức gan tham gia vào trình giải độc gây chất nội ngoại sinh Trong trường hợp bệnh lý hay dư thừa mức chất độc hại gan, tế bào bị hủy hoại dẫn đến tổn thương gan không phục hồi xơ gan, chức giải độc [10] Bệnh gan bệnh phổ biến cộng đồng, theo số liệu hội gan mật Việt Nam hồi cuối năm 2012, nước ta tỷ lệ nhiễm virus viêm gan B 10% – 20% dân số, tức 10 – 16 triệu người, số người nhiễm viêm gan virus C khoảng 4,5 triệu Mỗi năm có 10.000 người chết biến chứng xơ gan giai đoạn nặng ung thư gan.[8] Hiện nay, nhiều loại thuốc điều trị bệnh gan có nguồn gốc tổng hợp nghiên cứu, phát triển, đưa vào sử dụng Tuy nhiên loại thuốc bên cạnh tác dụng điều trị gan có tác dụng phụ khơng mong muốn, ngồi giá thành loại thuốc thường cao Chính thuốc đông y loại thuốc có nguồn gốc thảo dược ý Dứa dại Pandanus odoratissimus) thảo dược sử dụng nhiều thuốc dân gian để diều trị số bệnh, có bệnh gan nhiên cơng trình nghiên cứu chứng thực hoạt tính dược liệu dứa dại cịn Chuột loại động vật sử dụng phổ biến nghiên cứu thực nghiệm y sinh Theo kết cơng trình nghiên cứu có đến 80% gen chuột tương ứng người Ngoài ra, chuột có giá thành tương đối thấp dễ dàng trì, nên chuột có nhiều ưu để sử dụng phịng thí nghiệm nghiên cứu 2.3.5 Phƣơng pháp xử lý số liệu Các số liệu thực nghiệm xử lý theo phương pháp thống kê sinh học, sử dụng cơng cụ phân tích số liệu data analysis) Microsoft excel Kết thí nghiệm biểu thị M ± SD) M ± SE) Đánh giá, so sánh giá trị trung bình lơ thí nghiệm phương pháp thống kê sử dụng chuẩn t-Student 19 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 3.1 ẢNH HƢỞNG CỦA CAO CHIẾT CLOROFOM TỪ QUẢ DỨA DẠI ĐẾN HÀM LƢỢNG ENZYM GOT TRONG HUYẾT THANH CHUỘT NHẮT TRẮNG Kết xét nghiệm hàm lượng GOT chuột nhắt trắng trình bày qua bảng 3.1 biểu đồ 3.1 Bảng 3.1 Hàm lượng GOT (U/L) gan chuột nhắt trắng Lô chuột Liều uống (mg/kg) Hàm lƣợng GOT (U/L) Đối chứng 38,20±3,42 Đối chứng 142,16±3,62 Đối chứng 100 61,75±1,67 Lô 100 77,32±1,70 Lô 200 73,27±1,59 Lô 300 65,90±2,70 Lô 400 73,44±1,59 Lô 500 78,55±2,15 Biểu đồ 3.1 Hàm lượng GOT (U/L) gan chuột nhắt trắng 20 Qua bảng 3.1 hình 3.1 ta thấy: - Hàm lượng enzym GOT lô ĐC2 142,16U/L) cao so với lô ĐC1 38,20 U/L) Khi tiêm CCl4 vào màng bụng chuột, CCl4 theo máu đến gan Tại gan CCl4 thúc đẩy hoạt động hệ thống enzym cytochrom P450 đặt biệt enzym cytochrom P450.2E1) Enzym P450 trạng thái hoạt động chuyển hóa CCl4 thành tricloromethyl tác động đến mạng lưới nội chất tế bào, dẫn đến việc tạo acid béo khơng bão hịa Kết làm tăng q trình peroxy hóa lipid màng tế bào dẫn đến gây tổn thương tế bào làm cho tế bào gan bị phá hủy, enzym GOT tế bào gan giải phóng vào máu làm nồng độ enzym tăng lên máu [16], [19], [28] - Hàm lượng enzym GOT lô 1,2,3,4,5 thấp so với lô ĐC2 cao so với lô ĐC3 Điều chứng tỏ cao chiết clorofom từ Dứa dại có tác dụng bảo vệ tế bào gan ngăn cản trình phá hủy tế bào - So sánh lô 1,2,3,4,5 cho thấy lơ (lơ uống 300mg cao chiết/kg thể trọng) có nồng độ enzym GOT thấp liều 300mg cao chiết/kg thể trọng liều tốt hoạt tính bảo vệ gan Tuy nhiên nồng độ enzym GOT lô cao so với nồng độ enzym lô ĐC3 (lô uống Silymarin) 61,75 U/L Theo cơng trình nghiên cứu số tác giả thành phần hoạt tính Dứa dại , Dứa dại có chứa hợp chất polyphenol có đặc tính chống oxy hóa flavonoid, 3,4-bis (4-hydroxyl-3-methoxybenzyl) tetrahydrofuran pinoresinol với vai trị giảm q trình oxy hóa chống lại hoại tử tế bào Trong đó, hợp chất flavonoid bật với tác dụng chống độc, làm giảm tổn thương gan, bảo vệ chức gan chất độc đưa vào thể [25], [27] 21 3.2 ẢNH HƢỞNG CỦA CAO CHIẾT CLOROFOM TỪ QUẢ DỨA DẠI ĐẾN HÀM LƢỢNG ENZYM GPT TRONG HUYẾT THANH CHUỘT NHẮT TRẮNG Kết hàm lượng enzym GPT lơ chuột tiến hành thí nghiệm thể bảng 3.2 biểu đồ 3.2 Bảng 3.2 Hàm lượng GPT (U/L) chuột nhắt trắng Lô chuột Liều uống (mg/kg) Hàm lƣợng GOT (U/L) Đối chứng 21,25±0,40 Đối chứng 123,22±0,70 Đối chứng 100 57,88±1,73 Lô 100 66,80±1,00 Lô 200 64,20±1,36 Lô 300 58,20±1,94 Lô 400 63,72±0,55 Lô 500 69,15±0,59 Biểu đồ 3.2 Hàm lượng GPT (U/L) chuột nhắt trắng 22 Qua bảng 3.2 biểu đồ 3.2: - Lơ ĐC2 123,22U/L) có hàm lượng enzym GPT cao so với lô ĐC1 (21,25U/L) - Hàm lượng enzym GPT lô ĐC2 cao lô 1,2,4,5 Như gan bảo vệ hoạt tính bảo vệ gan cao chiết cloroform từ Dứa dại, làm ngăn cản trình phá hủy tế bào gan - Hàm lượng enzym GPT lô thấp so với lơ 1,2,4,5 nhận thấy liều 300mg cao chiết/kg thể trọng liều tốt hoạt tính bảo vệ gan Tuy nhiên nồng độ enzym GPT lô cao so với nồng độ enzym lô ĐC3 lơ uống Silymarin) 57,88 U/L Với vai trị bảo vệ gan hợp chất flavonoid, 3,4- bis (4hydroxyl-3-methoxybenzyl) tetrahydrofuran pinoresinol, hoạt chất có khả làm giảm số lượng tế bào gan bị phá hủy dẫn đến hàm lượng GPT máu giảm Trong đó, hợp chất flavonoid bật với tác dụng chống độc, làm giảm tổn thương gan, bảo vệ chức gan chất độc đưa vào thể [21], [27] 3.3 ẢNH HƢỞNG CỦA CAO CHIẾT CLOROFOM TỪ QUẢ DỨA DẠI ĐẾN HÀM LƢỢNG MDA TRONG GAN CHUỘT NHẮT TRẮNG Kết hàm lượng MDA gan chuột nhắt trắng thể bảng 3.3, hình 3.3 23 Bảng 3.3 Kết hàm lượng MDA gan chuột nhắt trắng Lô chuột Liều uống (mg/kg) Hàm lƣợng MDA HTCO% (nmol/ml) Đối chứng 18,90 ± 1,14 Đối chứng 30,96 ± 1,69 Đối chứng 100 22,16 ± 0,71 28,42 Lô 100 23,12 ± 0,82 25,32 Lô 200 22,74± 0,85 26,55 Lô 300 22,34 ± 0,61 27,84 Lô 400 23,74 ± 0,54 23,32 Lô 500 24,50±0,38 20,87 - Ghi chú:0  Đối chứng 1: chuột không bị gây độc CCl4 cho uống nước cất  Đối chứng : chuột bị gây độc CCl4 cho uống nước cất  Đối chứng 3: chuột bị gây độc CCl4 cho uống thuốc Silymarin  Lô – 5: chuột bị gây độc CCl4 cho uống cao dịch chiết cloroform với liều lượng 100 mg/kg, 200 mg/kg, 300 mg/kg, 400 mg/kg 500 mg/kg thể trọng 24 Biểu đồ 3.3 Hàm lượng MDA (nmol/ml) gan chuột Qua bảng 3.3, hình 3.3 nhận thấy: - Lơ ĐC2 30,96nmol/ml) có hàm lượng MDA gan cao so với lô ĐC1 18,90nmol/ml) - Hàm lượng MDA gan lô ĐC2 cao lô 1,2,4,5 Như tổn thương gan hoại tử tế bào gan bị ngăn cản hoạt tính bảo vệ gan cao chiết cloroform từ Dứa dại - Hàm lượng MDA gan lô thấp so với lơ 1,2,4,5 nhận thấy liều 300mg cao chiết/kg thể trọng liều tốt hoạt tính bảo vệ gan Tuy nhiên nồng độ MDA gan lô cao so với nồng độ MDA lô ĐC3 lô uống Silymarin) 22,16 nmol/ml Như cao dịch chiết cloroform dứa dại có tác dụng ngăn cản q trình peroxy hóa lipid màng tế bào dẫn đến hạn chế tổn thương tế bào gan, làm giảm hàm lượng MDA gan Tác dụng bảo vệ gan cao dịch chiết cloroform xuất phát từ hợp chất polyphenol có đặc tính chống oxi hóa 3,4-bis (4-hydroxyl-3-methoxybenzyl) tetrahydrofuran 25 pinoresinol có cao dịch chiết chloroform dứa dại [10][21] Trong polyphenol hoạt chất có khả chống lại q trình oxi hóa lipid lớn so với chất chống oxi hóa khác như: vitamin E, vitamin C Vì vậy, polyphenol cao dịch chiết Dứa dại làm giảm q trình peroxy hóa, hạn chế hoại tử gan qua việc làm giảm hàm lượng MDA tế bào gan Biểu đồ 3.4 Hoạt tính chống oxy hóa gan chuột Qua bảng 3.3 hình 3.4 ta thấy: - Hoạt tính chống oxy hóa dịch chiết cloroform dứa dại tế bào gan tăng dần từ lô đến lô 3, lô 25,32 %, lơ cịn 26,55 lơ 27,84 %, lô lô giảm xuống, lô 23,32% lô 20,87% - Hoạt tính chống oxy hóa tỉ lệ nghịch với hàm lượng MDA gan chuột nhắt trắng - Tuy vậy, hoạt tính chống oxy hóa gan chuột cao dịch chiết cloroform Dứa dại Việt Nam thấp so với lô đối chứng (28,42%), lô chuột cho uống thuốc Silymarin Silymarin 26 hỗn hợp gồm flavolignan tách từ Cúc gai Silybum marianum, sử dụng làm thuốc bảo vệ gan, có tác dụng chống lại nhiều loại chất độc có hại gan Cao dịch chiết cloroform Dứa dại Việt Nam có hoạt tính chống oxy hóa gan, điều giải thích cao dịch chiết Dứa dại có chứa hợp chất polyphenol có đặc tính chống oxi hóa 3,4-bis (4hydroxyl-3-methoxybenzyl) tetrahydrofuran pinoresinol [4] [21] \ 27 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Từ kết nghiên cứu, rút kết luận sau: - Cao dịch chiết cloroform Dứa dại Việt Nam có khả bảo vệ gan thông qua việc làm giảm hàm lượng MDA gan hàm lượng GOT, GPT máu, liều 0,3 g/kg thể trọng/ngày liều hiệu  Cao dịch chiết cloroform từ Dứa dại có tác dụng hạn chế phản ứng peroxy hóa lipid tế bào gan chuột nhắt trắng, với liều 0,3 g/kg thể trọng/ngày có khả ức chế phản ứng peroxy hóa lipit tốt nhất, hàm lượng MDA gan: 22,34 ± 0,61 (nmol/ml)  Cao dịch chiết cloroform Dứa dại có khả làm giảm hàm lượng hai enzym GOT, GPT gan chuột nhắt trắng, liều 0,3 g/kg thể trọng/ngày làm hàm lượng hai enzym giảm nhiều nhất, hàm lượng GOT: 65,9 ± 2,7 U/L), hàm lượng GPT: 58,2 ± 1,94 (U/L) - Hoạt tính bảo vệ gan chuột nhắt trắng (Mus musculus) với cao dịch chiết cloroform Dứa dại Việt Nam thấp so với thuốc đối chứng Silymarin Legalon) Madaus Đức) KIẾN NGHỊ Trong q trình nghiên cứu, tơi nhận thấy cao dịch chiết cloroform từ Dứa dại Việt Nam (Pandanus Odoratissimus) có hoạt tính bảo vệ gan chuột nhắt trắng Nhưng bước đầu đánh giá ảnh hưởng cao dịch chiết cloroform Dứa dại Việt Nam (Pandanus Odoratissimus) đến việc bảo vệ gan chuột nhắt trắng Vì vậy, để thu kết tồn diện tốt hơn, em có kiến nghị sau: 28 - Tăng thời gian thí nghiệm chia nhỏ liều lượng dịch chiết để làm rõ tác dụng cao dịch chiết cloroform từ Dứa dại Việt Nam đến tác dụng bảo vệ gan - Cần nghiên cứu phân đoạn cloroform cao dịch chiết Dứa dại để xác định ảnh hưởng hợp chất sinh học đến trình peroxy hóa chuột nhắt trắng - Cần thí nghiệm nhiều đối tượng hơn, theo hướng nhiễm độc gan khác để có kết luận có độ tin cậy cao 29 DANH MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu nƣớc [1] Bộ Y tế, Vụ khoa học đào tạo, Hóa sinh lâm sàng, Nhà xuất Y học, trang 123-124 [2] Nguyễn Thị Mai Anh, Đỗ Văn Phan 2003), Nghiên cứu tác dụng bảo vệ gan nấm Linh chi Việt Nam (Ganodermalucium) chuột suy gan thực nghiệm, Tạp chí nghiên cứu Y học số [3] Nguyễn Thị Vân Anh, Phạm Xuân Phong, Nguyễn Văn Long 2013), Nghiên cứu ảnh hưởng viên Bogamin lên hoạt độ AST, ALT tình tràng oxy hóa thực nghiệm, Tạp chí Y- Dược học qn số 09, trang 128 – 135 [4] Lê Thị Ngọc Chúc (2012), Khảo sát thành phần hóa học cao chloroform dứa dại (Pandanus kaida kurz) họ dứa dại (Pandanaceae) Luận văn thạc sĩ khoa học hóa học, ngành hóa hữu cơ, Khoa Hóa – Đại học khoa học tự nhiên - Đại học Quốc gia Tp Hồ Chí Minh [5] Nguyễn Ngọc Hồng Huỳnh Ngọc Thụy, Tác dụng bảo vệ gan cao chiết ethyl acetate từ Nghễ lông dày (Polygonum tomentosum Wild.) râu mèo (Orthosiphon aristatus (Blume) Miq.) mơ hình gan chuột bị gây độc mãn tính Carbon tetrachoride, Tạp chí sinh học, 34(3SE): tr 313-318 [6] Phạm Hoàng Hộ 2002), Cây cỏ Việt Nam, tập III, Nhà xuất Trẻ, 333 [7] Lê Thị Bích Mai (2006), Nghiên cứu tác dụng giải độc cam thảo mã tiền paracetamol, khóa luận cử nhân khoa học, chuyên ngành Sinh học động vật, Khoa Sinh – Đại học khoa học tự nhiên Đại học Quốc gia Tp Hồ Chí Minh [8] Thống kê tình hình bệnh gan Việt Nam năm 2012, Hội gan mật Việt Nam, 2012 [9] Trung tâm học liệu Huế, Y học cổ truyền, Thư viện Y học Trung ương [10] Nguyễn Thị Hoài Thương 2007), Nghiên cứu tác dụng giải độc chuột chế phẩm từ nguồn gốc thiên nhiên, khoa Sinh học Đại học Quốc gia HCM [11] Mai Thy (2012), Công dụng tuyệt vời từ Dứa dại, Nhà xuất Trẻ Tài liệu nƣớc [12] Alan L Miller, ND (1996), Antioxidant Flavonoids: Structure, Function and Clinical Usage, Alternative medicine, volume 1, number [13] Ali Canbay et al (2003), Kupffer cell engulfment ò apoptotic bodies stimulates death ligand and cytokine expression, Hepatology, pp.1189-1198 [14] Bedabati Dasgupta cộng (2012), Hepatoprotective activity of Nelsonia canescens (Lam.) spereng on acute hepatotoxicity induced by paracetamol, International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences ISSN- 0975-1491 Vol 4, Suppl 1, pp.107-112 [15] Burtis- Ashwood (1994), Tietz Textbook of Clinical Chemistry, Second Edition [16] Clin.C, Biochem (1970) 658; 10 (1972) 182 [17] Earl L Green (1966), Biology of the Laboratory Mouse, Dover publications, INC, New York [18] Holy TE, Guo Z (2005), Ultrasonic Songs of Male Mice, PLoS Biol (12): e386 [19] HU Bergmeyer (1987), Methods of enzymatic analysis [20] K Zahra, M A Malik,M.S.Mughal, M Arshad and M I Sohail (2012), Hepatoprotective role of extracts of Momordica charantia L in acetominophen-induced toxicity in rabbits, The Journal of animal & Plant Sciences, 22(2): 2012, page: 273-277 [21] Kusuma R, et al.(2012) Phytochhemical and pharmacological studies of P.O: L: Int I Res Phytocheum Pharmacol., (4), 171 -174 [22] Lawrence MJ, & Brown RW (1974), Mammals of Britain Their Tracks, Trails and Signs, Blandford Press [23] Lyneborg L (1971), Mammals of Europe, Blandford Press [24] Oyinbo C.A., Dare W.N., Okogun G.R.A., Anyanwu L.C., Ibeabuchi N.M., Noronha C.C and Okanlawon O.A (2006), The Hepatoprotective Effect of Vitamin C and E on Hepatotoxicity Induced by Ethanol in Sprague Dawley Rats, Pakistan Journal of Nutrition (6), pp.507-511 [25] Panigrahi B.B, Panda P.K and Patro V (2011), Antitumor and invivo antioxidant activities of Pandanus odoritisissmus L againts ehrich ascites carcinoma on albino mice, Research article 034, volume 8, issue [26] Ramesh Londonkar and Abhaykumar Kamble (2011), Hepatotoxic and invivo antioxidant potential of Pandanus odoratissimus against carbon tetrachloride induced liver injury in rats, Orient Pharm Exp Med 11: 229-234 [27] Ramesh Londonkar, Abhaykumar Kamble and V Chinnappa Reddy (2011), Anti-Inflammatory Activity of Pandanus odoratissimus extract, International Journal of Pharmacology, 6: 311-314 [28] R.A.M Elhag et al, 2011., Hepatoprotective activity of Solanum nigrium ex tracts on chemically induced liver damage in rát., Tourrnal of Veterinary medicine and Animal Health Vol 3(4), pp 45-50 [29] Ruth A Roberts et al (2007), Role of the Kupffer cell in mediating hepatic toxicity and carcinogenesis, Toxicological sciences 96(1), 2– 15 [30] Ting-Ting Jong, Shang-Whang Chau (1998), Antioxidative activities of constituents isolated from Pandanus odoratissimus, Phytochemistry, 49 (7), 2145-2148 [31] Videla L.A., Rodrigo R., Orellana M., Fernandez V., (2004), Oxidative stressrelated parameters in the liver of non-alcoholic fatty liver disease patients, Clinical Science 106, pp.261–268 [32] Yata Y., Enosawa S., Suzuki S., Li X.K., Tamura A., Kimura H., Takahara T., Watanabe A (1999), An improved method for the purification of stellate cells from rat liver with dichloromethylene diphosphate (CL2MDP), Methods in Cell Science 21, pp.19–24 ... TRƯỜNG LÂM NGUYỄN HỒNG THỤY NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG BẢO VỆ GAN CỦA CAO DỊCH CHIẾT CLOROFORM QUẢ DỨA DẠI VIỆT NAM (Pandanus odoratissimus) TRÊN CHUỘT NHẮT TRẮNG (Mus musculus Var. Albino) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP... sử dụng phịng thí nghiệm nghiên cứu Trên sở đó, chúng tơi tiến hành đề tài: ? ?Nghiên cứu tác dụng bảo vệ gan cao dịch chiết Dứa dại Việt Nam (Pandanus odoratissimus) chuột nhắt trắng (Mus musculus. .. thấy cao dịch chiết cloroform từ Dứa dại Việt Nam (Pandanus Odoratissimus) có hoạt tính bảo vệ gan chuột nhắt trắng Nhưng bước đầu đánh giá ảnh hưởng cao dịch chiết cloroform Dứa dại Việt Nam (Pandanus