Đánh giá tác dụng bảo vệ gan của chế phẩm kế sữa, mật nhân, cát căn trên thực nghiệm

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH NGUYỄN THỊ THÙY DUNG ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG BẢO VỆ GAN CỦA CHẾ PHẨM KẾ SỮA, MẬT NHÂN, CÁT CĂN TRÊN THỰC NGHIỆM LUẬN VĂN BÁC SỸ NỘI TRÚ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH, NĂM 2021 BỘ Y TẾ BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH NGUYỄN THỊ THÙY DUNG ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG BẢO VỆ GAN CỦA CHẾ PHẨM KẾ SỮA, MẬT NHÂN, CÁT CĂN TRÊN THỰC NGHIỆM NGÀNH: Y HỌC CỔ TRUYỀN MÃ SỐ: 8720113 LUẬN VĂN BÁC SỸ NỘI TRÚ NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS NGUYỄN PHƯƠNG DUNG THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH, NĂM 2021 BỘ Y TẾ LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan luận văn dựa trình nghiên cứu trung thực cố vấn người hướng dẫn khoa học Các số liệu luận văn thu thập từ thực tế có nguồn gốc rõ ràng, đáng tin cậy, xử lý trung thực khách quan Kết nghiên cứu trình bày luận văn khơng chép luận văn chưa trình bày hay cơng bố cơng trình nghiên cứu khác trước Nếu có gian lận nào, xin chịu trách nhiệm trước Hội đồng kết luận văn Tác giả luận văn Nguyễn Thị Thùy Dung MỤC LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT I DANH MỤC BIỂU ĐỒ IV DANH MỤC BẢNG V DANH MỤC HÌNH VI MỞ ĐẦU MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổn thương gan rượu 1.2 Quan niệm tăng men gan theo YHHĐ 12 1.3 Quan niệm tăng men gan theo YHCT 16 1.4 Mơ hình gây hoại tử gan ethanol 26 Chương PHƯƠNG TIỆN - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 29 2.1 Nguyên vật liệu 29 2.2 Phương pháp nghiên cứu .30 Chương KẾT QUẢ 33 3.1 Độc tính cấp đường uống 33 3.2 Tác dụng bảo vệ gan viên nang KMC mơ hình gây độc gan ethanol 40% (5 g/kg x lần) 34 3.3 Tác dụng bảo vệ gan viên nang KMC mơ hình gây độc gan ethanol 40% (12 ml/kg x 10 ngày) 45 Chương BÀN LUẬN 56 4.1 Độc tính cấp đường uống chế phẩm .56 4.2 Mô hình gây tăng men gan ethanol 40% 56 4.3 Tác dụng bảo vệ gan chế phẩm KMC 58 4.4 Khả ứng dụng viên nang KMC dự phòng điều trị tăng men gan 60 4.5 Ưu điểm hạn chế đề tài 63 KẾT LUẬN – KIẾN NGHỊ 64 Kết luận 64 Kiến nghị 65 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC i DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT CHỮ VIẾT TẮT CHỮ ĐẦY ĐỦ Tiếng Việt BL Bệnh lý BT Bình thường YHCT Y học cổ truyền YHHĐ Y học đại KMC Kế sữa, Mật nhân, Cát Tiếng Anh American Association for the Study of Liver AASLD Diseases ACC Acetyl-coA carboxylase ADH Arginin vasopressin ADN Deoxyribonucleic acid AH Alcoholic hepatitis ALD Alcoholic liver disease ALT Alanin aminotransferase ARN Ribonucleic acid AMPK Adenosin monophosphat activated protein kinase AST Aspartat aminotransferase BDD Biphenyl dimethyl dicarboxylate CCl4 Carbon tetrachlorid Dmax Maximum dose EtOH Ethanol ii FNH Focal nodular hyperplasia GGT Gamma glutamyl transferase ICD International classification of diseases IL Interleukin LD50 Lethal dose 50 LD100 Lethal dose 100 LD0 Lethal dose LKB1 Liver kinase B1 LSM Liver stiffness measurement GSH Glutathion MDA Malondialdehyd MELD Model for end-stage liver disease MEOS Microsomal ethanol oxidating system NAD Nicotinamid adenin dinucleotid NADH Nicotinamid adenin diphosphat hydrogen NAFLD Non-alcoholic fatty liver disease NASH Non-alcoholic steatohepatitis NF‐ κB Nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B Nrf2 Nuclear factor erythroid 2–related factor PBC Primary biliary cirrhosis ROS Reactive oxygen species SIL Silymarin SOD Superoxid dismutase TNFα Tumor necrosis factor WHO World Health Organization iii DANH MỤC ĐỐI CHIẾU THUẬT NGỮ ANH – VIỆT TIẾNG ANH TIẾNG VIỆT American Association for the Study of Liver Diseases Hiệp hội nghiên cứu bệnh gan Hoa Kỳ Alcoholic hepatitis Viêm gan rượu Alcoholic liver disease Bệnh gan rượu Adenosin monophosphat activated protein kinase Protein kinase hoạt hóa adenosin monophosphat Maximum dose Liều cao cho uống qua kim đầu tù mà không làm chết chuột Focal nodular hyperplasia Tăng sản dạng nút cục International classification of diseases Phân loại quốc tế bệnh tật Lethal dose 50 Liều gây chết 50% súc vật thử nghiệm Lethal dose 100 Liều gây chết 100% súc vật thử nghiệm Lethal dose Liều không gây chết súc vật thử nghiệm Liver stiffness measurement Đo độ cứng gan Model for end-stage liver disease Mơ hình bệnh gan giai đoạn cuối Microsomal ethanol oxidating system Hệ thống oxy hóa ethanol vi tiểu thể Non-alcoholic fatty liver disease Bệnh gan nhiễm mỡ không rượu Non-alcoholic steatohepatitis Viêm gan nhiễm mỡ không rượu Nuclear factor kappa-light-chainenhancer of activated B Yếu tố hạt nhân tăng cường chuỗi nhẹ kappa tế bào B hoạt động Primary biliary cirrhosis Xơ gan ứ mật tiên phát Reactive oxygen species Các dạng oxy hoạt hóa Tumor necrosis factor Yếu tố hoại tử khối u World Health Organization Tổ chức Y tế Thế Giới iv DANH MỤC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 3.1 Nồng độ AST (U/L) chuột sau uống ethanol 40% (5 g/kg x lần) 35 Biểu đồ 3.2 Nồng độ ALT (U/L) chuột sau uống ethanol 40% (5 g/kg x lần) 37 Biểu đồ 3.3 Nồng độ GGT (U/L) chuột sau uống ethanol 40% (5 g/kg x lần) 39 Biểu đồ 3.4 Nồng độ men gan (U/L) chuột sau uống ethanol 40% (5 g/kg x lần) 40 Biểu đồ 3.5 Nồng độ AST (U/L) chuột sau 12 uống ethanol 40% (12 ml/kg x 10 ngày) .46 Biểu đồ 3.6 Nồng độ ALT (U/L) chuột sau 12 uống ethanol 40% (12 ml/kg x 10 ngày) 48 Biểu đồ 3.7 Nồng độ GGT (U/L) chuột sau 12 uống ethanol 40% (12 ml/kg x 10 ngày) .50 Biểu đồ 3.8 Nồng độ men gan (U/L) chuột sau 12 uống ethanol 40% (12 ml/kg x 10 ngày) .51 v DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Tác dụng dược lý vị thuốc chế phẩm .25 Bảng 3.1 Kết thử nghiệm độc tính cấp đường uống chế phẩm KMC 33 Bảng 3.2 Nồng độ AST (U/L) chuột sau uống ethanol 40% (5 g/kg x lần) .34 Bảng 3.3 Nồng độ ALT (U/L) chuột sau uống ethanol 40% (5 g/kg x lần) .36 Bảng 3.4 Nồng độ GGT (U/L) chuột sau uống ethanol 40% (5 g/kg x lần) .38 Bảng 3.5 Đặc điểm vi thể gan chuột sau uống ethanol 40% (5 g/kg x lần) .40 Bảng 3.6 Nồng độ AST (U/L) chuột sau 12 uống ethanol 40% (12 ml/kg x 10 ngày) .45 Bảng 3.7 Nồng độ ALT (U/L) chuột sau 12 uống ethanol 40% (12 ml/kg x 10 ngày) 47 Bảng 3.8 Nồng độ GGT (U/L) chuột sau 12 uống ethanol 40% (12 ml/kg x 10 ngày) 49 Bảng 3.9 Đặc điểm vi phẫu gan chuột sau 12 uống ethanol 40% (12 ml/kg x 10 ngày) .51 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục 6: Nồng độ GGT (U/L) chuột mơ hình ethanol 40% (12 ml/kg x 10 ngày) sau thí nghiệm LƠ TÊN MẪU Sau TN LƠ TÊN MẪU Sau TN LC N1 KMC K11 7,7 N2 2,8 K12 6,2 N3 1,2 K13 4,8 N4 2,2 K14 5,8 N5 K15 4,9 N6 1,5 K16 N7 3,1 K17 N8 1,6 K18 5,4 AVERAGE 2,2 AVERAGE 5,7 SD 0,7 SD D1 7,8 K21 4,7 D2 5,9 K22 3,7 D3 9,9 K23 3,8 D4 6,4 K24 3,8 D5 9,6 K25 2,9 D6 7,2 K26 3,9 D7 7,3 K27 D8 8,3 K28 2,2 AVERAGE 7,8 AVERAGE 3,6 SD 1,4 SD 0,8 BL Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn KMC Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh SIL S1 6,6 K29 5,2 S2 4,8 K30 7,1 S3 5,9 K31 6,1 S4 K32 5,9 S5 K33 3,2 S6 K34 S7 4,1 K35 7,1 S8 3,1 K36 5,2 AVERAGE 5,1 AVERAGE 5,6 SD 1,1 SD 1,3 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn KMC Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục 7: Hình ảnh mơ học gan lơ BT mơ hình ethanol 40% (5 g/kg x lần) (HE x40) N1 N2 N3 N5 N8 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục 8: Hình ảnh mơ học gan lơ BL mơ hình ethanol 40% (5 g/kg x lần) (HE x40) D1 D5 D7 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn D4 D6 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục 9: Hình ảnh mơ học gan lơ SIL mơ hình ethanol 40% (5 g/kg x lần) (HE x40) S1 S4 S5 S7 S8 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục 10: Hình ảnh mơ học gan lơ KMC1 mơ hình ethanol 40% (5 g/kg x lần) (HE x40) K12 K13 K14 K16 K18 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục 11: Hình ảnh mơ học gan lơ KMC2 mơ hình ethanol 40% (5 g/kg x lần) (HE x40) K22 K23 K25 K26 K28 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục 12: Hình ảnh mơ học gan lơ KMC3 mơ hình ethanol 40% (5 g/kg x lần) (HE x40) K31 K32 K34 K36 K37 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục 13: Hình ảnh mơ học gan lơ BT mơ hình ethanol 40% (12 ml/kg x 10 ngày) (HE x40) N2 N4 N5 N7 N8 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục 14: Hình ảnh mơ học gan lơ BL mơ hình ethanol 40% (12 ml/kg x 10 ngày) (HE x40) D1 D4 D5 D6 D7 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục 15: Hình ảnh mơ học gan lơ SIL mơ hình ethanol 40% (12 ml/kg x 10 ngày) (HE x40) S1 S2 S3 S4 S8 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục 16: Hình ảnh mơ học gan lơ KMC1 mơ hình ethanol 40% (12 ml/kg x 10 ngày) (HE x40) K12 K13 K14 K15 K17 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục 17: Hình ảnh mơ học gan lơ KMC2 mơ hình ethanol 40% (12 ml/kg x 10 ngày) (HE x40) K23 K24 K25 K27 K28 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục 18: Hình ảnh mơ học gan lơ KMC3 mơ hình ethanol 40% (12 ml/kg x 10 ngày) (HE x40) K31 K32 K34 K35 K36 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục 19: Phiếu kết kiểm nghiệm chế phẩm Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn