Kiểm nghiệm vacxin vô hoạt tụ huyết trùng trêu bò sản xuất bằng công nghệ sục khí

Luận văn

BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI ----------      ---------- NGUYỄN ðỨC VINH KIỂM NGHIỆM VACXIN VÔ HOẠT TỤ HUYẾT TRÙNG TRÂU BÒ SẢN XUẤT BẰNG CÔNG NGHỆ LÊN MEN SỤC KHÍ LUẬN VĂN THẠC SĨ NÔNG NGHIỆP Chuyên ngành : THÚ Y Mã số : 60.62.50 Người hướng dẫn khoa học: TS. TRẦN THỊ LIÊN Người giúp ñỡ khoa học: PGS.TS. TRƯƠNG QUANG HÀ NỘI - 2009 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… i LỜI CAM ðOAN Tôi xin cam ñoan ñây là công trình nghiên cứu của riêng tôi. Các số liệu, kết quả nêu trong bản luận văn này là hoàn toàn trung thực và chưa ñược sử dụng ñể bảo vệ một học vị nào khác. Tôi xin cam ñoan rằng các thông tin trích dẫn trong luận văn ñều ñã ñược chỉ rõ nguồn gốc. Tác giả luận văn Nguyễn ðức Vinh Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… ii LỜI CẢM ƠN ðể hoàn thành luận văn này ngoài sự cố gắng của bản thân tôi còn nhận ñược sự giúp ñỡ tận tình của nhiều cá nhân và tập thể. Qua ñây cho tôi xin bày tỏ lời cảm ơn sâu sắc tới: TS. Trần Thị Liên – Xí nghiệp thuốc thú y TW – Hoài ðức – Hà Nội. PGS.TS. Trương Quang – Khoa Thú y - Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội. Những người ñã tận tình hướng dẫn, giúp ñỡ tôi trong suốt quá trình làm nghiên cứu và hoàn thành luận văn này. Tôi xin bày tỏ long biết ơn tới Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội; Viện ñào tạo Sau ñại học; Khoa thú y; Bộ môn Vi sinh vật - Truyền nhiễm – Khoa thú y; Xí nghiệp thuốc thú y TW; Phòng Kiểm nghiệm vacxin, Tổ Vi trùng 2 – Xí nghiệp thuốc thú y Trung ương ñã tạo mọi ñiều kiện thuận lợi giúp ñỡ tôi trong suốt quá trình học tập và nghiên cứu. Xin cảm ơn tới gia ñình, bạn bè và ñồng nghiệp ñã giúp ñỡ, ñộng viên tôi trong suốt quá trình thực hiện luận văn tốt nghiệp. Hà Nội, ngày 23 tháng 9 năm 2009 Tác giả Nguyễn ðức Vinh Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… iii MỤC LỤC Lời cam ñoan i Lời cảm ơn i Mục lục iii Danh mục các chữ viết tắt vi Danh mục bảng vii Danh mục hình ix 1. MỞ ðẦU 1 1.1 ðặt vấn ñề 1 1.2 Mục ñích yêu cầu của ñề tài 2 1.3 Ý nghĩa của ñề tài 2 2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3 2.1 ðặc tính chung của vi khuẩn P.multocida 3 2.2 Kháng nguyên của P.multocida 6 2.3 Bệnh Tụ huyết trùng trâu bò 8 2.4 Vacxin và sử dụng vacxin phòng bệnh ñộng vật 16 2.5 Miễn dịch học ñộng vật 27 2.6 Vài nét về Xí nghiệp thuốc thú y Trung ương 32 2.7 Giới thiệu về công nghệ lên men sục khí trong sản xuất vacxin 33 3. ðỐI TƯỢNG, NỘI DUNG, NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 34 3.1 ðối tượng 34 3.2 Nội dung 34 3.3 Nguyên liệu 34 3.4 Phương pháp nghiên cứu 35 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… iv 4. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 41 4.1 Tình hình tiêu thụ vacxin phòng bệnh cho trâu bò của Xí nghiệp thuốc thú y Trung ương 41 4.2 Kết quả kiểm tra các chỉ tiêu kỹ thuật trong quá trình nuôi cấy vi khuẩn giống sản xuất vacxin vô hoạt THT trâu bò chế bằng công nghệ lên men sục khí 42 4.2.1 Kết quả kiểm tra giống sản xuất 44 4.2.2 Kết quả kiểm tra giống sau khi nhân giống lần 1 (trong nồi lên men Fermentor 10 lít) 46 4.2.3 Kết quả kiểm tra thuần khiết và số lượng vi khuẩn sau khi nhân giống lần 2 (trong nồi lên men Fermentor 100 lít) 50 4.2.4 Kiểm tra vô trùng canh trùng sau khi vô hoạt bằng formol 52 4.2.5 Kết quả kiểm tra bán thành phẩm sau khi hấp phụ keo phèn 53 4.3 Kết quả kiểm nghiệm của vacxin vô hoạt THT trâu bò sản xuất bằng công nghệ lên men sục khí 55 4.3.1 Kết quả kiểm tra vô trùng 5 lô vacxin vô hoạt THT trâu bò 55 4.3.2 Kết quả kiểm tra an toàn của 5 lô vacxin vô hoạt THT trâu bò 57 4.3.3 Kết quả kiểm tra hiệu lực của 5 lô vacxin vô hoạt THT trâu bò sản xuất bằng công nghệ lên men sục khí 59 4.4. Kết quả kiểm tra ñộ dài miễn dịch của vacxin vô hoạt THT trâu bò sản xuất bằng công nghệ lên men sục khí 63 4.5 Kết quả ñịnh kỳ kiểm tra ñộ dài bảo quản của vacxin vô hoạt THT trâu bò sản xuất bằng công nghệ lên men sục khí 68 4.5.1 Kết quả kiểm tra hiệu lực của vacxin vô hoạt THT trâu bò ñối với thỏ sau 1 tháng bảo quản 69 4.5.2 Kết quả kiểm tra hiệu lực của vacxin vô hoạt THT trâu bò ñối với thỏ sau 3 tháng bảo quản 70 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… v 4.5.3 Kết quả kiểm tra hiệu lực của vacxin vô hoạt THT trâu bò ñối với thỏ sau 6 tháng bảo quản 71 4.5.4 Kết quả kiểm tra hiệu lực của vacxin vô hoạt THT trâu bò ñối với thỏ sau 9 tháng bảo quản 71 4.5.5 Kết quả kiểm tra hiệu lực của vacxin THT trâu bò ñối với thỏ sau 12 tháng bảo quản 72 5. KẾT LUẬN VÀ ðỀ NGHỊ 75 5.1 Kết luận 75 5.2 ðề nghị 76 TÀI LIỆU THAM KHẢO 77 PHỤ LỤC 85 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… vi DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Cð: Cường ñộc Ig: Immuloglobulin KT: Kiểm tra MLD: Minimum Lethal Dose (Liều gây chết tối thiểu) OIE: Office International des Epizootie (Tổ chức dịch tễ Thế giới) TB: Trâu bò TCN: Tiêu chuẩn ngành THT: Tụ huyết trùng TK: Thuần khiết TL: Tỷ lệ VK: Vi khuẩn Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… vii DANH MỤC BẢNG STT Tên bảng Trang 4.1 Sản lượng vacxin tiêu thụ của Xí nghiệp so với số lượng ñàn trâu bò cả nước trong 5 năm trở lại ñây 41 4.2 Kết quả kiểm tra thuần khiết của 5 lô giống THT trâu bò sản xuất vacxin 45 4.3 Kết quả ñếm số lượng vi khuẩn THT trâu bò giống trong môi trường tăng sinh 46 4.4 Kết quả kiểm tra thuần khiết giống sau khi nhân giống lần 1 48 4.5 Kết quả ñếm số lượng vi khuẩn giống sau khi nhân giống lần 1 49 4.6 Kết quả kiểm tra thuần khiết sau khi nhân giống lần 2 51 4.7 Kết quả ñếm số vi khuẩn sau khi nhân giống lần 2 51 4.8 Kết quả kiểm tra vô trùng canh trùng sau khi vô hoạt bằng formol 53 4.9 Kết quả kiểm tra vô trùng bán thành phẩm sau khi hấp phụ keo phèn 54 4.10 Kết quả kiểm tra vô trùng của 5 lô vacxin vô hoạt THT trâu bò 56 4.11 Kết quả kiểm tra an toàn của vacxin vô hoạt THT trâu bò ñối với thỏ 57 4.12 Kết quả kiểm tra an toàn của vacxin vô hoạt THT trâu bò ñối với chuột bạch 58 4.13 Kết quả kiểm tra hiệu lực của vacxin vô hoạt THT trâu bò ñối với thỏ 60 4.14 Kết quả kiểm tra hiệu lực của vacxin vô hoạt THT trâu bò ñối với chuột bạch 62 4.16 Kết quả kiểm tra khả năng bảo hộ của vacxin vô hoạt THT trâu bò ñối với thỏ sau 6 tháng 65 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… viii 4.17 Kết quả kiểm tra khả năng bảo hộ của vacxin vô hoạt THT trâu bò ñối với thỏ sau 9 tháng 66 4.18 Kết quả kiểm tra hiệu lực của vacxin vô hoạt THT trâu bò ñối với thỏ sau 1 tháng bảo quản 70 4.19 Kết quả kiểm tra hiệu lực của vacxin vô hoạt THT trâu bò ñối với thỏ sau 3 tháng bảo quản 70 4.20 Kết quả kiểm tra hiệu lực của vacxin vô hoạt THT trâu bò ñối với thỏ sau 6 tháng bảo quản 71 4.21 Kết quả kiểm tra hiệu lực của vacxin vô hoạt THT trâu bò ñối với thỏ sau 9 tháng bảo quản 72 4.22 Kết quả kiểm tra hiệu lực của vacxin vô hoạt THT trâu bò ñối với thỏ sau 12 tháng bảo quản 72 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… ix DANH MỤC HÌNH STT Tên hình Trang 2.1: Nhuộm gram vi khuẩn P.multocida 3 4.1. ðường biểu diễn ñộ dài miễn dịch của các lô vacxin 68 4.2. ðường biểu diễn ñộ dài bảo quản của các lô vacxin 73 . lô vacxin vô hoạt THT trâu bò 56 4.11 Kết quả kiểm tra an toàn của vacxin vô hoạt THT trâu bò ñối với thỏ 57 4.12 Kết quả kiểm tra an toàn của vacxin vô. tra an toàn của 5 lô vacxin vô hoạt THT trâu bò 57 4.3.3 Kết quả kiểm tra hiệu lực của 5 lô vacxin vô hoạt THT trâu bò sản xuất bằng công nghệ lên men sục