Đánh giá chất lượng và khả năng bảo vệ miễn dịch của vắc-xin vô hoạt tụ huyết trùng trâu bò sản xuất bằng công nghệ lên men sục khí

Mục ủớch yờu cầu của ủề tài

Kiểm nghiệm chất lượng vacxin Tụ huyết trùng trâu bò sản xuất bằng công nghệ lên men sục khí.

Tình hình tiêu thụ vacxin phòng bệnh cho trâu bò của Xí nghiệp thuốc thú y Trung ương

Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………41. Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………42. Do vậy, lượng tiêu thụ của 2 loại vacxin này chênh lệch khá lớn so với số lượng trâu bò thực tế thống kê.

Trong số những vacxin tiêu thụ phòng bệnh cho trâu bò thì vacxin Tụ huyết trùng trâu bò vẫn chiếm số lượng lớn nhất, trung bình 3.543,0 nghìn liều/năm. Tuy số lượng vacxin này so với số lượng ủàn trõu, bũ bỡnh quõn trong 5 năm (trõu: 2.921,4 nghỡn/năm; bũ: 6.004,3 nghỡn/năm) là chưa ủủ nhưng có thể thấy việc phòng bệnh Tụ huyết trùng cho trâu, bò của người chăn nuụi vẫn ủược quan tõm hơn cả. Chính vì tiêm phòng vacxin Tụ huyết trùng trâu bò là nhu cầu cần thiết và quan trọng ủối với người chăn nuụi, do vậy việc sản xuất vacxin Tụ huyết trựng trõu bũ cú chất lượng cao là cụng việc cần thiết ủối với ủơn vị sản xuất vacxin như Xớ nghiệp thuốc thỳ y.

Và cụng tỏc kiểm tra, ủỏnh giỏ chất lượng vacxin là yêu cầu quan trọng, mà phải thường xuyên và liên tục.

Kết quả kiểm tra các chỉ tiêu kỹ thuật trong quá trình nuôi cấy vi khuẩn giống sản xuất vacxin vô hoạt THT trâu bò chế bằng công

Trong phạm vi nghiờn cứu của ủề tài này, chỳng tụi tiến hành kiểm tra một số chỉ tiêu chất lượng 5 lô vacxin Tụ huyết trùng trâu bò sản xuất bằng cụng nghệ lờn men sục khớ, ủược ký hiệu là TB1, TB2, TB3, TB4, TB5. Từ kết quả thể hiện trong bảng 4.3 thấy rằng số lượng vi khuẩn ở cả 5 lụ giống vacxin tụ huyết trựng trõu bũ ủều ở mức hơn 1 tỷ VK/ml canh trựng, kết quả này phự hợp với yờu cầu sản xuất mà Xớ nghiệp thuốc ủề ra. Trong quá trình sản xuất vacxin tụ huyết trùng trâu bò, công nghệ lên men sục khí sẽ giúp tối ưu hoá các chỉ tiêu phục vụ nuôi cấy vi khuẩn như oxy, pH, nhiệt ủộ… Vỡ thế, vi khuẩn luụn cú ủiều kiện tốt nhất ủể tiếp xỳc với dưỡng chất, dưỡng khớ trong ủiều kiện pH thuận lợi.

Cỏc kết quả ở giai ủoạn kiểm tra chất lượng giống và ủếm số giống vi khuẩn trong môi trường tăng sinh chúng tôi nhận thấy cả 5 lô giống sản xuất vacxin tụ huyết trựng trõu bũ ủều ủạt cỏc tiờu chuẩn vi sinh vật ủú là: ủặc ủiểm hỡnh thỏi, tớnh chất bắt màu, khuẩn lạc ủặc trưng phự hợp với ủặc tớnh sinh vật của vi khuẩn P.multocida. Từ số liệu kiểm tra trong bảng 4.4 cho thấy, cả 5 lụ sản xuất ủều cho kết quả thuần khiết ở cả 5 loại môi trường nuôi cấy cơ bản: thạch máu, thạch thường, nước thịt ống, nước thịt gan yếm khí và thạch nấm. Như vậy, ở giai ủoạn nhõn giống lần thứ nhất (trong nồi lờn men 10 lớt), cỏc chỉ tiờu thuần khiết và ủếm số phự hợp với chỉ tiờu ủề ra của quy trỡnh sản xuất ủối với vacxin tụ huyết trựng trõu bũ sản xuất bằng cụng nghệ lờn men sục khí.

Tóm lại, sau toàn bộ quá trình nuôi cấy sản xuất và kiểm tra vi sinh vật thường qui, kết quả cho thấy các lô sản xuất vacxin tụ huyết trùng trâu bò ủược nghiờn cứu, ủều phự hợp với tiờu chuẩn trong quy trỡnh sản xuất của Xớ nghiệp thuốc thú y Trung ương. Vi khuẩn giống là vi khuẩn tụ huyết trựng trõu bũ cường ủộc nờn kết thỳc quỏ trỡnh nhõn giống và kiểm tra cỏc chỉ tiờu ủạt yờu cầu, canh trựng giống bắt buộc phải ủược vụ hoạt bằng formol. Khi tiờm, phèn chua có trong vacxin sẽ gây nên phản ứng viêm nhẹ tại chỗ tiêm (phản. Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………54. ứng viờm này mất ủi sau 2 - 3 ngày) khụng gõy hại cho con vật mà ngược lại nú giỳp cho quỏ trỡnh ủỏp ứng miễn dịch diễn ra nhanh hơn.

Kết quả kiểm nghiệm của vacxin vô hoạt THT trâu bò sản xuất bằng công nghệ lên men sục khí

Số lượng mẫu kiểm tra trong mỗi lụ vacxin ủược thể hiện bằng tỷ lệ % số mẫu vụ trựng trờn tổng số mẫu ủược kiểm tra (25 mẫu/1 lụ vacxin), và cỏc kết quả này ủược chúng tôi tổng hợp tại bảng 4.10. Kết luận, theo Tiờu chuẩn ngành 10 TCN 161 - 92 ban hành cả 5 lô vacxin vô hoạt tụ huyết trùng trâu bò sản xuất bằng công nghệ lờn men sục khớ ủều ủạt chỉ tiờu kiểm tra. Như vậy mọi thao tỏc trong quỏ trỡnh sản xuất ủều tuõn thủ chỉ tiờu vệ sinh cụng nghiệp, ủiều này ủược chứng minh bằng trước và sau khi ra chai vacxin ủều ủảm bảo vụ trựng.

Một vacxin ủược ủỏnh giỏ là an toàn khi tiờm cho bản ủộng vật với lượng vacxin bằng hoặc gấp ủụi liều sử dụng, ủộng vật không bị chết hoặc không có bất cứ triệu chứng lâm sàng nào có thể quan sỏt. Theo dừi trong vũng 10 ngày, nếu cú bất kỳ phản ứng nào hoặc nếu chuột bạch chết trong thời gian theo dừi phải ủược mổ khỏm, kiểm tra bệnh tớch, phõn lập vi khuẩn ủể xỏc ủịnh nguyờn nhõn chết. Từ số liệu trong bảng 4.12 khẳng ủịnh, toàn bộ số chuột bạch ủược tiờm ủều khụng cú biểu hiện bất thường nào, chuột bạch sống khoẻ mạnh và phỏt triển bình thường.

Từ số liệu trong bảng 4.13 cho thấy tất cả các lô vacxin kiểm tra hiệu lực ủối với thỏ ủều ủạt tiờu chuẩn, 100% thỏ ủược miễn dịch ủều sống khoẻ mạnh bỡnh thường, trong khi 100% thỏ ủối chứng chết trong vũng 25 - 35 giờ sau khi cụng cường ủộc. 21 ngày sau khi gây miễn dịch, 10 chuột bạch thí nghiệm, cựng với 5 chuột ủối chứng khụng tiờm vacxin, ủược thử thỏch bằng vi khuẩn cường ủộc tụ huyết trựng trõu bũ, liều 1MLD/chuột. Từ số liệu trong bảng 4.14 cho thấy tất cả các lô vacxin kiểm tra hiệu lực ủối với chuột bạch ủều ủạt tiờu chuẩn, 100% chuột bạch thớ nghiệm ủều sống bỡnh thường, trong khi 100% chuột bạch ủối chứng chết trong vũng 24 - 30 giờ sau khi cụng cường ủộc.

Kết quả kiểm tra ủộ dài miễn dịch của vacxin vụ hoạt THT trõu bũ sản xuất bằng công nghệ lên men sục khí

Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………63. Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………64. Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………65.

Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………66. Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………67. Sau khi gõy miễn dịch cho thỏ ủược 3 thỏng, số liệu thể hiện trong bảng 4.15 cho thấy, kết quả kiểm tra hiệu lực của 5 lô vacxin so với kết quả kiểm tra hiệu lực tại thời ủiểm 21 ngày sau khi tiờm vacxin ủó cú sự thay ủổi.

Thời ủiểm 9 thỏng là mốc thời gian kiểm tra ủộ dài miễn dịch cuối cựng ủối với thỏ trong phạm vi nghiờn cứu của ủề tài này. Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………68. Như vậy, qua hỡnh 4.1 cú thể quan sỏt rừ hơn sự ổn ủịnh hay giảm xuống về tỷ lệ bảo hộ của mỗi lụ vacxin ủối với ủộng vật thớ nghiệm ở từng thời ủiểm kiểm tra ủộ dài miễn dịch.

Kết quả ủịnh kỳ kiểm tra ủộ dài bảo quản của vacxin vụ hoạt THT trâu bò sản xuất bằng công nghệ lên men sục khí

Trong quỏ trỡnh nghiờn cứu ủề tài, từng lụ vacxin trong quỏ trỡnh bảo quản ủược chỳng tụi ủịnh kỳ lấy mẫu ở cỏc thời ủiểm 1, 3, 6, 9 và 12 thỏng, tớnh từ thời ủiểm kết thỳc quỏ trỡnh sản xuất vacxin, ủể tiến hành kiểm tra hiệu lực. 21 ngày sau khi tiờm vacxin, 4 thỏ ủược gõy miễn dịch cựng với 2 thỏ ủối chứng khụng tiờm vacxin ủược thử thỏch bằng vi khuẩn cường ủộc P.multocida. Từ kết quả trong bảng 4.18 cho thấy, sau bảo quản 1 thỏng trong ủiều kiện 2 - 80C, vacxin ủược ủem kiểm tra hiệu lực thỡ tất cả cỏc lụ vacxin chưa cú sự thay ủổi gỡ về chất lượng.

Ở mốc thời ủiểm bảo quản sau 6 thỏng, ủem kiểm tra hiệu lực, kết quả trong bảng 4.20 dễ dàng nhận thấy, sự ổn ủịnh về chất lượng vacxin tụ huyết trựng trõu bũ sản xuất bằng cụng nghệ lờn men sục khớ, 100% số thỏ ủược bảo hộ khi cụng cường ủộc. Kết quả ủược thể hiện trong bảng 4.21 cho thấy, ủó bắt ủầu cú dấu hiệu về sự thay ủổi tỷ lệ bảo hộ của 5 lụ vacxin vụ hoạt tụ huyết trựng trõu bũ tại thời ủiểm 9 thỏng sau khi bảo quản. Kết quả trong bảng 4.22 cho thấy, chỉ có lô vacxin tụ huyết trùng trâu bò số 3 còn giữ nguyên tỷ lệ bảo hộ ủối với thỏ so với ban ủầu.

Trong hình 4.2 chúng tôi nhận thấy rằng: trong số 5 lô vacxin vô hoạt Tụ huyết trùng trâu bò sản xuất bằng công nghệ lên men sục khí nghiên cứu, chỉ. Với kết quả thu ủược trong quỏ trỡnh xỏc ủịnh hiệu lực của vacxin vụ hoạt tụ huyết trựng trõu bũ ủối với thỏ, ủó khẳng ủịnh sau bảo quản 12 thỏng ở ủiều kiện 2 - 80C, vacxin vẫn duy trỡ ủược khả năng bảo hộ. Kết quả này giỳp cho Xớ nghiệp thuốc thỳ y Trung ương cú thể chủ ủộng hơn trong kế hoạch sản xuất, cung ứng vacxin và cũng giúp cho người sử dụng có thể xây dựng một chương trỡnh tiờm phũng chủ ủộng cú hiệu quả, ủặc biệt ủối với miền núi và các vùng xa.