Nghiên cứu chiết tách và xác định thành phần hóa học trong một số dịch chiết rễ, lá cây bồ công anh ở đà nẵng

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM NGUYỄN TRƯƠNG THIỆN VŨ NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH VÀ XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRONG MỘT SỐ DỊCH CHIẾT RỄ, LÁ CÂY BỒ CÔNG ANH Ở ĐÀ NẴNG LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC ĐÀ NẴNG, NĂM 2017 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM NGUYỄN TRƯƠNG THIỆN VŨ NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH VÀ XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRONG MỘT SỐ DỊCH CHIẾT RỄ, LÁ CÂY BỒ CƠNG ANH Ở ĐÀ NẴNG Chun ngành: Hóa hữu Mã số : 60 44 01 14 LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC Người hướng dẫn khoa học: GS.TS ĐÀO HÙNG CƯỜNG ĐÀ NẴNG, NĂM 2017 LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tôi, số liệu kết nghiên cứu nêu luận văn trung thực, đồng tác giả cho phép sử dụng chưa cơng bố cơng trình khác Tác giả luận văn Nguyễn Trương Thiện Vũ MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết đề tài Mục tiêu nghiên cứu .2 Đối tượng nghiên cứu .2 Phương pháp nghiên cứu Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài .3 Bố cục đề tài CHƯƠNG TỔNG QUAN .4 1.1 TỔNG QUAN VỀ CÂY BỒ CÔNG ANH 1.1.1 Giới thiệu chung bồ công anh .4 1.1.2 Sơ lược họ Cúc 1.1.3 Sơ lược chi Lactuca 1.1.4 Giới thiệu số đặc điểm bồ công anh Việt Nam 1.1.5 Công dụng bồ công anh đời sống 1.1.6 Nghiên cứu dược tính bồ cơng anh 1.1.7 Một số cơng trình nghiên cứu bồ công anh 1.2 THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CÂY BỒ CÔNG ANH .10 1.3 MỘT SỐ KỸ THUẬT THỰC NGHIỆM TRONG NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH HỢP CHẤT THIÊN NHIÊN 13 1.3.1 Kỹ thuật chiết Soxhlet 13 1.3.2 Lựa chọn dung môi để chiết tách 15 1.3.3 Chưng cất để loại dung môi 16 1.3.4 Quang phổ hấp thụ nguyên tử AAS 16 1.3.5 Cơ sở lý thuyết sắc kí khí ghép khối phổ (GC-MS) 17 CHƯƠNG NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 2.1 NGUYÊN LIỆU 19 2.1.1 Thu nguyên liệu rễ, lá bồ công anh 19 2.1.2 Sơ chế nguyên liệu 19 2.2 HÓA CHẤT VÀ THIẾT BỊ THÍ NGHIỆM 20 2.2.1 Thiết bị, dụng cụ .20 2.2.2 Hóa chất 20 2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 21 2.3.1 Các phương pháp xác định số tiêu hóa lí 21 2.3.2 Khảo sát điều kiện chiết thích hợp 22 2.3.3 Phương pháp tách chất 23 2.3.4 Phương pháp xác định thành phần hóa học 23 2.3.5 Phương pháp xác định hoạt tính kháng oxi hóa DPPH 24 2.4 SƠ ĐỒ QUI TRÌNH NGHIÊN CỨU 27 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 28 3.1 KẾT QUẢ XÁC ĐỊNH MỘT SỐ CHỈ TIÊU HÓA LÝ 28 3.1.1 Độ ẩm .28 3.1.2 Hàm lượng tro 29 3.1.3 Hàm lượng kim loại 29 3.2 KẾT QUẢ KHẢO SÁT THỜI GIAN CHIẾT, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC CÓ TRONG DỊCH CHIẾT RỄ, LÁ CÂY BỒ CÔNG ANH BẰNG CÁC DUNG MÔI 30 3.2.1 Khảo sát thời gian chiết xác định thành phần hóa học dịch chiết dung môi n-hexan .31 3.2.2 Khảo sát thời gian chiết xác định thành phần hóa học dịch chiết dung môi diclometan 40 3.2.3 Khảo sát thời gian chiết xác định thành phần hóa học dịch chiết dung môi etyl axetat 49 3.2.4 Khảo sát thời gian chiết xác định thành phần hóa học dịch chiết dung môi metanol .58 3.2.5 Hiệu chiết rễ, lá bồ công anh các dung môi theo thời gian 68 3.2.6 Tổng hợp xác định thành phần hóa học dịch chiết rễ, lá bồ công anh các dung môi 69 3.3 KẾT QUẢ THỬ HOẠT TÍNH SINH HỌC 74 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 76 DANH MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO .78 QUYẾT ĐỊNH GIAO ĐỀ TÀI (Bản sao) DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT AAS : Atomic Absorption Spectrophotometric DCM : Diclometan EtOAc : Etyl axetat GC : Phương pháp sắc kí khí GC-MS : Phương pháp sắc kí khí ghép khối phổ MeOH : Metanol MS : Phương pháp khối phổ STT : Số thứ tự DANH MỤC CÁC BẢNG Số hiệu Tên bảng bảng 1.1 Thành phần hóa học tìm thấy lồi bồ cơng anh khác Trang 10 2.1 Hóa chất sử dụng q trình làm thí nghiệm 21 3.1 Kết xác định độ ẩm mẫu rễ bồ công anh khô 28 3.2 Kết xác định độ ẩm mẫu bồ công anh khô 28 3.3 Kết xác định hàm lượng tro mẫu rễ bồ công anh khô 29 3.4 Kết xác định hàm lượng tro mẫu bồ công anh khô 29 3.5 3.6 3.7 3.8 3.9 3.10 3.11 3.12 Kết xác định hàm lượng số kim loại nặng rễ bồ công anh Kết xác định hàm lượng số kim loại nặng bồ công anh Kết chiết rễ bồ công anh dung môi n-hexan theo thời gian Kết định danh thành phần hóa học dịch chiết n-hexan từ rễ bồ công anh Kết chiết bồ công anh dung môi n-hexan theo thời gian Kết định danh thành phần hóa học dịch chiết n-hexan từ bồ công anh Kết chiết rễ bồ công anh dung môi diclometan theo thời gian Kết định danh thành phần hóa học dịch chiết diclometan từ rễ bồ công anh 30 30 32 33 35 37 41 42 Số hiệu Tên bảng bảng 3.13 3.14 3.15 3.16 3.17 3.18 3.19 3.20 3.21 3.22 3.23 3.24 3.25 Kết chiết bồ công anh dung môi diclometan theo thời gian Kết định danh thành phần hóa học dịch chiết diclometan từ bồ công anh Kết chiết rễ bồ công anh dung môi etyl axetat theo thời gian Kết định danh thành phần hóa học dịch chiết etyl axetat từ rễ bồ công anh Kết chiết bồ công anh dung môi etyl axetat theo thời gian Kết định danh thành phần hóa học dịch chiết etyl axetat từ bồ công anh Kết chiết rễ bồ công anh dung môi metanol theo thời gian Kết định danh thành phần hóa học dịch chiết metanol từ rễ bồ công anh Kết chiết bồ công anh dung môi metanol theo thời gian Kết định danh thành phần hóa học dịch chiết metanol từ bồ công anh Ảnh hưởng thời gian đến hiệu suất (%) chiết Tổng hợp định danh cấu tử có dịch chiết rễ, bồ công anh dung môi Kết thử nghiệm hoạt tính chống oxy hố hệ DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) Trang 45 46 50 51 54 55 59 60 63 64 68 70 75 DANH MỤC CÁC HÌNH Số hiệu Tên hình hình Trang 1.1 Một số thuộc họ Cúc 1.2 Một số thuộc chi Lactuca 1.3 Cây bồ công anh Việt Nam 1.4 Hệ thống chiết soxhlet 15 1.5 Sơ đồ khối thiết bị AAS 17 2.1 Cây bồ công anh huyện Hòa Vang, thành phố Đà Nẵng 19 2.2 Rễ, bồ công anh sau phơi khô 20 2.3 Bột rễ, bột bồ công anh sau xay 20 2.4 Sơ đồ quy trình nghiên cứu rễ, bồ công anh 27 3.1 GC-MS dịch chiết n-hexan từ rễ bồ công anh 33 3.2 GC-MS dịch chiết n-hexan từ bồ công anh 36 3.3 GC-MS dịch chiết diclometan từ rễ bồ công anh 42 3.4 GC-MS dịch chiết diclometan từ bồ công anh 46 3.5 GC-MS dịch chiết etyl axetat từ rễ bồ công anh 51 3.6 GC-MS dịch chiết etyl axetat từ bồ công anh 55 3.7 GC-MS dịch chiết metanol từ rễ bồ công anh 60 3.8 GC-MS dịch chiết metanol từ bồ công anh 64 77 Dodecatriene, 7,11-dimethyl-3-methylene, Caryophyllene oxide, beta.-Amyrin, alpha.-Amyrin, đó các cấu tử Stigmasta-7, 16-dien-3-ol, (3.beta., alpha.), beta.-Amyrin alpha.-Amyrin chiếm hàm lượng cao hầu hết các dung môi Các chất có khả kháng khuẩn, chống oxi hóa có giá trị chữa bệnh cao y học Đã thử hoạt tính kháng oxi hóa các cao chiết Cao chiết metanol rễ bồ công anh không biểu hoạt tính chống oxy hóa hệ DPPH nồng độ thử nghiệm KIẾN NGHỊ - Phân lập xác định cấu trúc hợp chất có các dịch chiết thử hoạt tính sinh học đặc biệt khả kháng khuẩn, kháng ung thư hợp chất phân lập nhằm góp phần làm tăng giá trị sử dụng chữa bệnh rễ bồ công anh - Tiếp tục nghiên cứu phận khác bồ công anh 78 DANH MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt [1] Nguyễn Thị Dân An (2015), Khảo sát thành phần hóa học hoạt tính chống oxi hóa cao hexan bình bát dây coccinia grandis (L.) J.Voight họ Cucurrbitaceae, Khóa luận tốt nghiệp, Trường Đại học Sư phạm Thành phố Hồ Chí Minh [2] Hồng Minh Châu, Từ Văn Mặc, Từ Vọng Nghi (2002), Cơ sở hoá học phân tích, Nhà xuất Khoa học kỹ thuật, Hà Nội [3] Nguyễn Văn Đàn (2005), Chuyên đề số hợp chất thiên nhiên, NXB Đại học Quốc gia TP Hồ Chí Minh [4] Phạm Cơng Đồn, Nguyễn Ngọc Hạnh, Phùng Văn Trung Phan Nhật Minh (2008), “Kết bước đầu khảo sát thành phần hóa học bồ cơng anh (Taraxacum Officinale Wigg)”, Tạp chí Khoa học (2008) - Trường Đại học Cần Thơ, tr 227-231 [5] Lê Khả Kế, Vũ Văn Chuyên, Võ Văn Chi các cộng (1975), Cây cỏ thường thấy Việt Nam, tập V, NXB Khoa học Kỹ thuật Hà Nội, [6] Phan Quốc Kinh (2011), Giáo trình hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học, Nhà xuất Giáo dục Việt Nam [7] Phạm Thị Lê (2008), Nghiên cứu chiết tách, xác định thành phần hóa học số dịch chiết bòng bong (L.Flexuosum L.Japonicum) Điện Bàn, Luận văn thạc sĩ khoa học, Đại học Đà Nẵng [8] Đỗ Tất Lợi (2004), Những thuốc và vị thuốc Việt Nam, NXB Khoa học kỹ thuật Hà Nội [9] Hồ Viết Quý (2005), Các phương pháp phân tích cơng cụ hóa học đại, NXB Đại học Sư phạm [10] Lê Thanh Tâm (2010), Nghiên cứu hoạt tính chống oxi hóa và độc tính tế bào số hợp chất lignan stilbene, Luận văn thạc sĩ khoa học chuyên ngành Hóa phân tích, trường Đại học Khoa học tự nhiên, Đại học Quốc 79 gia Thành phố Hồ Chí Minh [11] Hoàng Châu Thanh Thảo (2016), Nghiên cứu chiết tách và xác định thành phần hóa học số dịch chiết rẻ quạt, Luận văn thạc sĩ khoa học chuyên ngành hóa hữu cơ, khoa Hóa,Trường Đại học Sư phạm – Đại học Đà Nẵng [12] Võ Thị Thanh Thủy (2016), Nghiên cứu chiết tách, xác định thành phần hóa học tinh dầu số dịch chiết ngò om, Luận văn thạc sĩ khoa học chuyên ngành hóa hữu cơ, khoa Hóa, Trường Đại học Sư phạm – Đại học Đà Nẵng [13] Nguyễn Đình Triệu (2005), Các phương pháp phân tích vật lý và hóa lý, NXB Khoa học Kĩ thuật Hà Nội [14] Bùi Quang Tuấn (2015), Nghiên cứu chiết tách và xác định thành phần hóa học số dịch chiết thân, rễ sống đời Quảng Ngãi, Luận văn thạc sĩ khoa học chuyên ngành hóa hữu cơ, khoa Hóa, Trường Đại học Sư phạm – Đại học Đà Nẵng Tiếng Anh [15] Adbul Kadir M N Jassim, Safanah Ahmed Farhan (2012), “Identification of Dandelion Taraxacum officinale Leaves Components and Study Its Extracts Effect on Different Microorgannisms”, Journal of Al-Nahrain University, pp 7-14 [16] Belén García-Carrasco, Raquel Fernandez-Dacosta, Alberto Dávalos, José M Ordovás and Arantxa Rodriguez-Casado (2015), “In vitro Hypolipidemic and Antioxidant Effects of Leaf and Root Extracts of Taraxacum Officinale”, Medical sciences [17] Brand-Williams, W., Cuvelier, M E and Berset C (1995), Use of a Free Radical Method to Evaluate Antioxidant Activity, Lebensm.-Wiss u.-Technol [18] Jeong-Hun Park, Jeoung-Hwa Shin, Swapan Kumar Roy & Hyeon-Yong Park (2014), “Evaluation of Cytotoxicity, Total Phenolic Content and Antioxidant Innate Reveal Efficient Medications in Native Lactuca 80 indica”, Journal of Agricultural Science; Vol 6, No 10, pp 135-146 [19] Kais Kassim Ghaima*, Noor Makie Hashim, Safaa Abdalrasool Ali (2013), “Antibacterial and antioxidant activities of ethyl acetate extract of nettle (Urtica dioica) and dandelion (Taraxacum officinale)”, Journal of Applied Pharmaceutical Science Vol (05), pp 096-099 [20] Ki Hyun Kim, Young Ho Kim, and Kang Ro Lee (2010), “Isolation of Hepatoprotective Phenylpropanoid from Lactuca indica” Natural Product Sciences 16, pp 6-9 [21] Zongxi Sun, Ruiqiang Su, Jianwei Qiao, Zhiquan Zhao, and Xinsheng Wang (2014), “Flavonoids Extraction from Taraxacum officinale (Dandelion): Optimisation Using Response Surface Methodology and Antioxidant Activity”, Hindawi Publishing Corporation Journal of Chemistry Volume 2014 Websites [23] http://www.cayboconganh.vn/tin-tuc/gioi-thieu-cay-bo-cong-anh-vietnam39.html [23] http://duocson.com/120n/bai-thuoc-tu-cay-bo-cong-anh-viet-nam.html [24] http://tuoitre.vn/tin/song-khoe/20091224/ich-loi-cua-bo-conganh/354865.html [25] https://vi.wikipedia.org/wiki/H%E1%BB%8D_C%C3%BAc [26] https://vi.wikipedia.org/wiki/Chi_Rau_di%E1%BA%BFp [27] http://yhocbandia.vn/duoc-chat-steroid-thao-duoc.html ...ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM NGUYỄN TRƯƠNG THIỆN VŨ NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH VÀ XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRONG MỘT SỐ DỊCH CHIẾT RỄ, LÁ CÂY BỒ CÔNG ANH Ở ĐÀ NẴNG Chuyên ngành: Hóa hữu... dịch chiết từ phận bồ công anh chưa biết nhiều đến [24] Vì vậy, tơi chọn đề tài ? ?Nghiên cứu chiết tách xác định thành phần hóa học số dịch chiết rễ, bồ công anh Đà Nẵng? ?? 2 Mục tiêu nghiên cứu. .. 1.1.5 Công dụng bồ công anh đời sống 1.1.6 Nghiên cứu dược tính bồ cơng anh 1.1.7 Một số cơng trình nghiên cứu bồ cơng anh 1.2 THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CÂY BỒ CÔNG ANH .10 1.3 MỘT