Tình trạng nhiễm Human Papillioma virus trên một số loại ung thư sinh dục

Hiroshi Ichimura (Kanazawa University) Background: We conducted a study at the National Cancer Hospital to determine the prevalence and distribution o f HPV genotypes i[r]

(1)

chúng nhận thấy cho dương tính với cặp mồi phát gen vrrA mà khơng có xuất cùa gen độc iực plasmid (của B anthracis) thi có íhể khẳng đính trịng mẫu thử nghiệm có mặt nhóm vi khuan Bacillus spp, khơng thề khẳng định vi khuẩn than (gây bệnh than - Anthrax) Ket minh chứng cho yêu cầu phải kiềm định panel mau với tất kit thương mại trước đưa thị trường yêu cầu WHO NIBSC [7,

8

2.4 Kết kiểm định độ đặc hiệu cùa kít mPCR Y pestis

Tiến hành kiểm tra độ đặc hiệu kít BaYp - mPCR 100 mẫu panel độ đặc hiệu với Y pesíỉs tạo íừ vỉ khuẩn E coli ATCC 25922 có cấu trúc gần loài với Y pestis Kết 100% mẫu không xuất gen đặc trưng Y pestis

'

2

6

8

0

10

Hình Kiềm định độ đặc hiệu với Y pestis cùa kít mPCR-BaYp panel đặc hiệu

Kết kiểm định cho thấy cặp mồi chẩn đốn Y pestis khơng bắt cặp chéo với gen vi khuẩn E coii Vi khuẩn E coỉi Y pestis vi khuẩn thuộc họ vi khuẩn đường ruột Enterobacteriaceae, trực khuẩn gram âm có nhiều tính chất tương đồng, E cl lại có mặt rộng rãi môi trường đất, nước thể người động vật Giả định đặt ỉổ chức khủng bố chuyển thông tin di truyền iừ Y pestis sang loài vỉ khuẩn khác gần gũi với người (như E coli) thỉ hậu lây nhiễm khó lường Trong hồn cảnh đó, giá trị panel mẫu nhóm thiết kế chế tạo kiểm định nghiên cứu với kit mPCR đa mồi cho phép phân biệt chùng Y pestis thật hay chùng E

coli tích hợp thêm gen độc lưc KẾT LUẬN

Đã chế tạo panel DNA kiểm định ngưỡng phát hiện, độ nhậy độ đặc hiệu kít PCR chẩn đoán V! khuẳn than dịch hạch.

Để khẳng định ià lồi B anthracis có độc lực kít PCR phải dương tính đồng thời gen chromosome (vrrA) hai gen độc lực capA, pagA

Đề khẳng định Y pestis cồ độc lực cac kit PCR phải ch? dương tính đồng thời gen chromosome (ypo2088) hai gen độc íực pla, caf1

TÀI LIỆU THAM KHẢO

1 Bộ Y tế (2012), "Ban hành quy chuẩn kỹ thuật Quốc gia thực hành An toàn sinh học phịng xét nghiệm" Thơng tư 25/2012 - BYT

2 Nguyễn Thái Sơn (2006), "Chẩn đoán số tác nhân sinh học nguy cao tráng khủng bố" Hội íhảo nghiên cứu phịng chống vũ hạt nhân, sinh học, hỏahọc(NBÒ) Tr: 127-136

3 Nguyễn Thái Sơn (2015), “Nghiên cứu chế tạo kit PCR đa mồi xác định nhanh đồng thời hai tác nhân vi khuẩn than dịch hạch” Báo cáo tổng kết nhiệm vụ cấp Bộ quốc phong Mã sổ: 2013.75.58

4 Abdul G L and Anthony M c (2008), "Clinical tests: sensitivity and specificity Continuing Education in Anaesthesia, Critical Care & Pain j Volume

8

6

5 Fasanelia, A., s Losito, R Adone, et (2003), "PCR assay to detect Bacillus anthracis spores in heat- treated specimens" J Clin Microbiol 41(2): p 896-9

e Jekel J et al (2011), "Sensitivity, specificity, Predictive Values and Likelihood Ratios” J Clinical Epidemiology 2011.1228: p 37 -54

7 NIBSC (2014) Genetic Reference materials in the diagnostics National Institute for Biological Standards and Control, Biological Reference Materials

8

TÌNH TRẠNG NHIỄM HUMAN PAPILLOMAVIRUS

TRÊN MỘT SỐ LOẠI UNG THƯ SINH DỤC

Phạm Thị Tâm (Thạc sĩ, Bộ môn Vi sinh Trường Đại học Y dược HảĩPhòng) Ts Nguyễn Hùng Cường (Bộ môn Vi sinh, Trường Đ ại học Y dược Hải Phịng) PGS.TS Phạm Văn Hán (Bộ mơn Y tế cơng cộng, Trường Đ ại học Y ơuiỵc Hải Phòng)

d s Hiroshi Ichimura (khoa Y, Đại học Kanazawa Nhật Bản) GS.TS Phạm VãQ Thức (Bộ môn Sinh Ịý bệnh- Dị ứng-Miễn dịch, Ttrường Đại học Y dược Hải Phịng) TĨM TẮT

(2)

thế giới Mục tiêu: Xác định tỷ lệ nhiễm phân bố genotype HPV mô UTCTC, UTAĐ, UTAH UTDV tại Bệnh viện K Trung ương Đối tượng phương pháp nghiên cứu: Nghiên cứu mô tả cắt ngang qua xét nghiệm HPV DNA kỹ thuật PCR định type HPV kỹ thuật reverse Dot blot giải trình tự gene sau tách dịng Trường Đại học Y dược Hải Phòng Đại học Kanazawa Nhật Bàn với 455 mẫu UTCTC, 114 mẫu UTAĐ, 184 mẫu UTAH 162 mẫu UTDV Kết quà: Tỷ lệ nhiễm HPVtrên mô UTCTC, UTAĐ, UTAH, UTDV lần lượt 92,5%, 89,1%, 81,6% 84,6% Đơn nhiễm HPV chủ đạo ung thư CTC (61,5%) đa nhiễm nhiều genotype HPV lại chủ đạo unơ thư âm đạo /86%), ung thư âm hộ S93 9%) ưnn thư dương vật (95,62%) Có tất 17 loại genotype phát hiện, genotype có tần suất xuất cao nhẫt là HPV16, 18, 11, 58, 51, 45, 35 Kết luận: Tỷ lệ nhiễm HPV loại UTCTC, UTAĐ, UTAH, UTDV cao >80%, cấc genotype nguy cao gặp phổ biến sau HPV16, 18 HPV58, 45, 51 HPV35

Từ khoâ: HPV, ung thư cổ từ cung, ung thư âm đạo, ung thư âm hộ, ung thư dương vật. SUMMARY

HUMANPAPILLOMA VIRUS INFECTION IN GENITALS CANCER IN NORTHERN VIETNAM

Pham Thi Tam (Hai Phong University O f Medicine and Pharmacy) Nguyen Hung Cuong (Hai Phong University O f Medicine and Pharmacy) Pham Van Han (Hai Phong University O f Medicine and Pharmacy) Pham Van Thuc (Hai Phong University O f Medicine and Pharmacy)

Hiroshi Ichimura (Kanazawa University) Background: We conducted a study at the National Cancer Hospital to determine the prevalence and distribution o f HPV genotypes in patients with cervical cancer, vagival cancer and vulva cancer in northern Vietnam Materials and method: the cross-sectional study in 455 cervical cancer, 184 vulvar cancer, 114 vaginal cancer and 162 penile cancer HPV infection was determined by PCR amplification o f L1 gene region with GP5+/GP6+ and GP5+M1,2,3/GP6+M1,2,3 primers HPV genotype was determined by reverse Dot blot technique and sequencing o f the L1 gene Results: the rate o f positive HPV DNA in cervical cancer, vulvar cancer, vaginal cancer and penile cancer respectively 92.5%, 89.1%, 81.6% and 84.6% HPV infection is the major single among cervical cancer (61.5%) while the majority o f HPV infections are more dominant genotype among vaginal cancer (86%), vulvar cancer (93.9%) and penile cancer (95.6) 17 genotypes were detected in cancer tissue and the genotypes had the highest frequency o f the HPV16, 18, 11, 58, 51 and45 Conclusion: the rate o f positive HPV DNA in four genitals cancer are very high over 80% HPV16, 18 are highest, and then HPV 58, 45, 51, 35 are lower.

Keywords: HPV, cervical cancer, vaginal cancer, vulva cancer, penile cancer.

ĐẶT VÁN ĐỀ thư cổ tử cung, ung thư âm hộ, ung thư âm đạo

Ung thư cổ tử cung đứng đầu nhóm ung íhư ung thư dương vậí

sinh đục gây từ vong phụ nữ Việt Nam Theo ước Đối TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN u

(3)

KÉT QUÂ NGHIÊN cứ u

1 Tỷ lệ nhiễm HPV mô ung th sinh dục

1.1 Tỷ lệ nhiễm HPV

Bảng 1: Tỷ lệ nhiễm HPV loại mô ung thư sinh due

Loại ung thư Tuổi trung bình HPVADN (+)

n %

Ung thư CTC (n=455) 51,06 ±11,39 421 92,5 Ung thư âm đao fn=114) 52,68 ±11,90 93 81,6 Ung thư âm hô (n=184) 52,54 ±11,88 164 89,1 Ung thư dươnq vat (n=162ì 56,40 ±11,61 137 84,6 114 mâu UTAĐ 162 mẫu UTDV, tỷ iệ dương tính với HPV 92,5%, 89,1%, 81,6% 84 6%

1.2 Tỷ lệ đơn nhiễm, đa nhiễm HPV

Bảng 2: Tỷ lệ đơn nhiễm, đa nhiễm HPV m A I » r t / i ị U i I I o t í n U J

Tỷ lệ đơn nhiễm - đa nhiễm Ung thư CTC (n=455) UT âm đạo (n=il4) UT âm hộ (n=184) UT dương vật (n=Ì62) : n(%) n(%) n(%) n (%) Đơn nhiễm 259 (61,5) (14,0)13 (6,1)

6

cớ cao 257 (99,2) (84,6)

11

100

10

0

6

cơ thấp

2 (0,

8)

0

Đa nhiễm 162 (38,5) 80 154 131 (95,6)

(86,0) (93,9) Genotype nguy

cớ cao

88

cơ ihầp

0

Genotype nguy cao nguy

cơ thếp 74 (45,7) 62

(77,5) (94,8)146 109 (83,2)

6,1% UTAH, 14% UTAD 4% UTDV Đa số chủng genotype nguy cỡ cao (99,2% với ung thư CTC, 84,6% với ung thư âm đạo, 100% với UTAH UTDV) Tỷ lệ đa nhiễm nhiều genotype HPV chiếm 38,5% ung thư CTC,

86

2 Tỷ ỉệ phân bố genotype HPVn

2.1 Ty tỷ phân bố genotype HPV trê mô ungthưC TC

Từ 421 mẫu mơ UTCTC dương tính với HPV, 17 loại genotype 656 chủng HPV xác định Các genotype có tần suất xuất cao nhấỉ HPV16 (316/656=48,17%), 18 (206/656=31,40%), 71 (40/656=6,09%) 11 (34/656=5,18%) Các genotype nguy cao chiếm ty lệ 87,8%; genotype nguy thấp chiếm tỷ lệ

12

2

3 3 0 2 2 0 1 1 0 5 A

-I -I Nhóm n g u y C c a o l\

— «** a « r T p r - “ »

~~m

m

hóm n g u y thấp

\J

H P V -1 6 H P V -1 8 H P V -3 1 H P V -3 3 H P V -3 5 H P V -3 9 H P V -4 5 H P V -S 1 H P V -5 2 H P V -5 3 H P V -5 8 H P V -5 9 H P V -Ố 6 1 H P V -6 Ị H P V -1 1 ị H P V -7 1 " ị H P V -8 1 « ~s

Biểu Tỷ lệ phân bố genotype HPV mô ung thư CTC

2.2 Tỷ lệ phãn bố genotype HPV ừẽn mô ung thư âm đạo

(4)

Nhóm nguy cao

Biểu tỳ lệ phân bổ genotype HPV mô ung thư> âm đạo

2.3 Tỷ lệ phân bổ cảc genotype HPV mô ung thư âm hộ

Từ 164 mẫu niô ung thư âm hộ dương tính với HPV, 13 loại genotype, 603 chủng HPV đưực xác định Các genotype có tần suất xuất cao HPV16 (156/603=25,87%), 11 (147/603=24,37%), 18 (145/603=24,04%), 58 (68/603=11,27%), 45 (32/603=5,3%)

6

Biều Tỷ iệ phản bố genotype HPV trên mô ung thu’ âm hộ

2.4 Tỷ lệ phân bố genotype cùa HPV mô ung thư dương vật

140

120

100

BO

eo

40

20

0

■.& ,>s ,>' .i> »s

Nghiên cứu xác định 472 chủng HPV íừ 137 mẫu UTDV nhiễm HPV Các chùng phân bố tập trung vào 14 genotype, HPV16 genotype phổ biến (95%), HPV18, 11, 58 HPV45 iần lượt chiếm ty lệ 91,2%, 77,4%, 29,2%, 13,9%

BẨN LUẬN

1 v ề tỷ lệ nhiễm HPV mô ung th sinh dục

* Tỷ lệ nhiễm:

Tỷ íệ 'nhiễm HPV nghiên cứu cao Trong số 455 mẫu ung thư CTC, 184 mẫu mô ung âm hộ, 114 mẫu ung thư âm đạo, 162 mẫu ung thư đương vật tỷ lệ dương tính với HPV 92,5%, 89,1%, 81,6%, 84,6% Tỉ lệ nhiễm HPV mẫu ung thư CTC tới 92,5% Tì lệ cao nghiên cửu Nguyễn Phi Hùng Việt Nam: 80,7% (4), Trung Quốc: 89,9% (5), Thailand:

86% (6

8

(5)

khác Ngoài khác địa lý, địa, lối sống íạo nên khác tỉ lệ nhiễm HPV

* Tỷ lệ đơn nhiễm, đa nhiễm HPV

Tỷ lệ đơn nhiễm chiếm đa số mô UTCTC (61,5%) chiếm tỷ iệ thấp mô UTAĐ (14,0%), UTAH (6,1%) UTDV (4,4%) Chỉ có trường hợp UTCTC trường hợp UTAĐ đơn nhiễm HPV11 gentype nguy thấp, tất trường hợp lại đơn nhiễm gentype thuộc nhóm nguy cao, chủ yếu ià HPV16~ 18 Kết lần chứng minh vai trò gây ung thư hai gentype quan trọng HPV16, 18 Trong nhóm đa nhiễm có hai hình thức phối hợp đa nhiễm geníype thuộc nhóm nguy cao với đa nhiễm nhóm nguy cao- nguy thấp, khơng có trường hợp chĩ đa nhiễm gentype thuộc nhóm nguy thấp Nhiều nghiên cứu giới có kết tương đồng với kếí cùa chúng tơi (2) (10) Các nhà nghiên cứu khẳng định đa số !à nhiễm HPV genoíype nguy cao (hoặc đơn nhiễm, íà đa nhiễm) đa nhiễm genotype cao genotype nguy thấp, trường hợp đơn nhiễm HPV genotype nguy thấp (1 1)

2 Sự phân bố genotype HPV mô ung th

Trong nghiên cứu chúng tôi, mô UTCTC xác định 17 loại genotype (13 loại genotype nguy cao loại genotype nguy thấp) Các genotype có tần suất xuất cao HPV16 (48,17%), 18 (31,40%), 71 (6,09%) va 11 (5,18%) Tương tự mơ UTAĐ, có 13 loại genotype (9 loại genotype nguy cao loại genotype nguy thấp) genotype có tần suẳỉ xuất cao ià HPV16 (27,36%), 18 (25,0%), 11 (21,28%), 58 (8,78%), 51 (4,72%) va 45 (4,05%) Đối với ung thư âm hộ genotype có tần suất diện cao HPV16 (25,87%), 11 (24,37%), 18 (24,04%), 58 (11,27%), 45 (5,3%) (2,48%) Trên mô ung thư dương vật xác định 14 genotype (9 genotype nguy cao genotype nguy thấp) Trong genotype chiếm tỷ lệ cao la HPV16 (95%), HPV18 (91,2%), HPV11 (77,4%), HPV58 (29,2%), HPV45 (13,9%)

Để giải thích cho khác biệt phân bố genotype HPV mô ung thư sinh dục, tham khảo kết nhiều nghiên cứu khác nhau, điểm chung nhẩt kết nghiên cứu ià HPV16; HPV18 xuất với tần xuất cao (1) (12) Các genotype cịn lại có thay đỗi lớn tv lệ nhiễm vùng địa dự, chủng tộc, nhóm đối tượng, nhóm tuổi Tiếp sau HPV16; HPV18, chúng tơi thấy thường xuất genype45, 51, 58, 35, 71, 11 Hai genotype HPV11 HPV71 hầu hết đa nhiễm với genotype thuộc nhóm nguy cao

KẾT LUẬN

Tỷ lệ nhiễm HPV mô UTCTC, UTAĐ, UTAH UTDV cao >80% trường hợp

Trên loại ung thư, HPV16, 18 giữ vai trò chủ đạo, tiếp đến genotype nguy cao HPV58, 45, 51, 35 Hai genotype nguy thấp chiếm tỷ lệ cao HPV11, 71, hầu hết đa nhiễm với genotype nhóm nguy cao

TAI LIẸU THAM KHAO

1 Human Papillomavirus and related cancer (2010) Summary report update WHO, February 19, 2010: 32- 33

2 De Martel c et al (2012) Global burden of cancers attributable to infections in 2008: a review and synthetic analysis Lancet Oncoi; 13(6): 607-615

3 Eifel PJ, Berek JS, Markman MA (2011) Cancer of the cervix, vagina, and vulva In: DeVita VT Jr, Lawrence TS, Rosenberg SA: Cancer: Principles and Practice of Oncology 9th ed Philadelphia, Pa: Lippincott Williams & Wiikins: 1311-1344

4 Nguyễn Phi Hùng, Nguyễn Thị Lan Anh, Tạ Văn Tờ cộng (2011) Nghiên cứu xác định íýp HPV thườngI gạp trịng ung thư cổ tử cung Tạp chí Y học Thành Phố Hồ Chí Minh, 15 (2), 160-167

5 Huang L , Chao

s.,

6 Chansaenro] J., Junyangdikul p., Chinchai I , et al

7 Faezeh Khorasanizadeh, Jaleh Hassanloo, Nafiseh Khaksar, et a! (2013) Epidemiology of cervical cancer and human papillomavirus infection among Iranian woman- Analyses of national data and systematic review of the literature Gynecology Oncology, 128, 277-281

8 Torneselỉo ML., Losiio

s.,

9 Smith, Jennifer s., et al (2009) Human Papiilomavirus Type-Distribuiion in Vuivar and Vaginal Cancers and Their Associated Precursors Obstetrics & Gynecology: 113 (4) 917-924

10 Bobbie

c