Bước đầu nghiên cứu tác dụng của dịch chiết từ cây chó đẻ răng cưa (phyllanthus urinaria l ) đối với hoạt động thần kinh cấp cao và hàm lượng malonyl dialdehyde acid (MDA) trong não của chuột nhắt trắng

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA SINH - - NGÔ THỊ PHƯƠNG LAN Bước đầu nghiên cứu tác dụng dịch chiết từ chó đẻ cưa (Phyllanthus urinaria L.) hoạt động thần kinh cấp cao hàm lượng Malonyl dialdehyde acid (MDA) não chuột nhắt trắng (Mus musculus Var.Albino) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Em xin chân thành bày tỏ lòng cảm ơn sâu sắc đến Th S Nguyễn Cơng Thùy Trâm – Cơ tận tình hướng dẫn, động viên giúp đỡ em suốt trình học tập, nghiên cứu thực khóa luận Em xin chân thành cảm ơn cô Lê Thị Mai tồn thể thầy khoa Sinh – Môi trường quan tâm, giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho em suốt trình học tập thực khóa luận Em xin chân thành cảm ơn động viên gia đình suốt q trình học tập hồn thành khóa luận Em chân thành cảm ơn bạn lớp nhiệt tình trao đổi kinh nghiệm góp ý kiến giúp cho đề tài em hoàn thiện Đà Nẵng, ngày 21/05/2012 Sinh viên Ngô Thị Phương Lan DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Chữ viết đầy đủ ĐC Đối chứng MDA Malonyl dialdehyde acid PXCĐK Phản xạ có điều kiện PXKĐK Phản xạ không điều kiện PXVĐDDCĐK Phản xạ vận động dinh dưỡng có điều kiện DANH MỤC CÁC BẢNG STT Bảng Tên bảng Trang Thời gian hình thành PXVĐDDCĐK chuột nhắt trắng 18 Bảng Thời gian hình thành PXVĐDDCĐK bền vững chuột nhắt trắng 21 Bảng Thời gian phản xạ chuột nhắt trắng 24 Bảng Thời gian dập tắt PXVĐDDCĐK chuột nhắt trắng 27 Bảng Chỉ số I chuột nhắt trắng 31 Bảng Hàm lượng MDA chuột nhắt trắng 34 DANH MỤC CÁC HÌNH, BIỂU ĐỒ STT Tên hình Trang Hình Cây chó đẻ cưa Hình Khung hình Kaempferol Hình Acid linoleic Hình Khung sườn Acid linolenic Hình Chuột nhắt trắng 14 Hình Chuồng mê lộ 15 Hình Biểu đồ biểu diễn thời gian hình thành PXVĐDDCĐK chuột nhắt trắng sau 15 ngày uống dịch chiết chó đẻ cưa 18 Hình Biểu đồ biểu diễn thời gian hình thành PXVĐDDCĐK chuột nhắt trắng sau 30 ngày uống dịch chiết chó đẻ cưa 19 Hình Biểu đồ so sánh thời gian hình thành PXVĐDDCĐK chuột nhắt trắng sau 15 30 ngày uống dịch chiết chó đẻ cưa 19 10 Hình 10 Biểu đồ biểu diễn thời gian hình thành PXVĐDDCĐK bền vững chuột nhắt trắng sau 15 ngày uống dịch chiết chó đẻ cưa 22 11 Hình 11 Biểu đồ biểu diễn thời gian hình thành PXVĐDDCĐK bền vững chuột nhắt trắng sau 30 ngày uống dịch chiết chó đẻ cưa 22 12 Hình 12 Biểu đồ so sánh thời gian hình thành PXVĐDDCĐK bền vững chuột nhắt trắng sau 15 30 ngày uống dịch chiết chó đẻ cưa 23 13 Hình 13 Biểu đồ biểu diễn thời gian phản xạ chuột nhắt trắng sau 15 ngày uống dịch chiết chó đẻ cưa 25 14 Hình 14 Biểu đồ biểu diễn thời gian phản xạ chuột nhắt trắng sau 30 ngày uống dịch chiết chó đẻ cưa 25 15 Hình 15 Biểu đồ so sánh thời gian phản xạ chuột nhắt trắng sau 15 30 ngày uống dịch chiết chó đẻ cưa 26 16 Hình 16 Biểu đồ biểu diễn thời gian dập tắt PXVĐDDCĐK chuột nhắt trắng sau 15 ngày uống dịch chiết chó đẻ cưa 28 17 Hình 17 Biểu đồ biểu diễn thời gian dập tắt PXVĐDDCĐK chuột nhắt trắng sau 30 ngày uống dịch chiết chó đẻ cưa 28 18 Hình 18 Biểu đồ so sánh thời gian dập tắt PXVĐDDCĐK chuột nhắt trắng sau 15 30 ngày uống dịch chiết chó đẻ cưa 29 19 Hình 19 Biểu đồ biểu diễn số I chuột nhắt trắng sau 15 ngày uống dịch chiết chó đẻ cưa 31 20 Hình 20 Biểu đồ biểu diễn số I chuột nhắt trắng sau 30 ngày uống dịch chiết chó đẻ cưa 32 21 Hình 21 Biểu đồ so sánh số I chuột nhắt trắng sau 30 ngày uống dịch chiết chó đẻ cưa 32 22 Hình 22 Biểu đồ biểu diễn hàm lượng MDA chuột nhắt trắng sau 15 ngày uống dịch chiết chó đẻ cưa 34 23 Hình 23 Biểu đồ biểu diễn hàm lượng MDA chuột nhắt trắng sau 30 ngày uống dịch chiết chó đẻ cưa 35 24 Hình 24 Biểu đồ so sánh hàm lượng MDA chuột nhắt trắng sau 15 30 ngày uống dịch chiết chó đẻ cưa 35 MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài: Trong thời đại ngày nay, áp lực công việc, phương pháp ăn uống lối sống không môi trường bị ô nhiễm yếu tố gây trạng thái stress ảnh hưởng trực tiếp đến hệ thần kinh, xuất nhiều triệu chứng lão hóa, sa sút trí tuệ gây bệnh thường gặp khác Một nguyên nhân nhà khoa học quan tâm gia tăng q trình peroxy hóa lipid tạo gốc tự tế bào não Chính gốc tự sinh q trình nguyên nhân sâu xa bệnh lão hóa giảm sút trí tuệ lâu dài Vì vậy, việc tìm kiếm nguồn dịch chiết có tác dụng chống oxy hóa, bảo vệ quan (não, tim, mạch máu, gan, thận) khỏi tác động xấu stress đặc biệt loại thảo dược có nguồn gốc tự nhiên với hoạt tính sinh học bảo vệ thể, tăng tuần hoàn não chống gốc tự do, tăng cường trí nhớ làm giảm lão hóa người nghiên cứu Cây chó đẻ cưa (Phyllanthus urinaria L.[10]) với nhiều công dụng điều trị bệnh như: viêm họng, viêm da lở ngứa, trẻ em tưa lưỡi, chàm má, bệnh viêm gan… [1], [10] nhà khoa học chọn làm đối tượng nghiên cứu Dịch chiết xem nguyên liệu chứa nhiều chất chống oxy hóa Theo cơng trình nghiên cứu thành phần hóa học, chó đẻ cưa chứa hoạt chất flavonoid, lignan phyllanthin, acid lenoleic, acid lenolenic…[21] thành phần có tác dụng chống oxy hóa, tăng trí nhớ, tăng tuần hồn não….Tuy nhiên, việc nghiên cứu ảnh hưởng dịch chiết số sinh lý động vật đặc biệt hoạt động thần kinh cịn chưa toàn diện Chuột động vật thử nghiệm phổ biến nghiên cứu khoa học, y học Sở dĩ chuột sử dụng rộng rãi nghiên cứu y khoa kích thước nhỏ (nặng 25 đến 40g), dễ kiểm sốt phịng thí nghiệm, sinh sản nhanh, đời sống ngắn giá thành tương đối rẻ Nhưng quan trọng đặc điểm cấu trúc gen chuột gần gũi với người Theo cơng trình giải mã toàn gen người chuột công bố cho thấy chuột người có khoảng 30.000 gen khoảng 98% gen người gen tìm thấy chuột Dựa sở đó, tiến hành đề tài “Bước đầu nghiên cứu tác dụng của dịch chiết từ chó đẻ cưa (Phyllanthus urinaria L.) hoạt động thần kinh cấp cao hàm lượng Malonyl dialdehyde acid (MDA) não của chuột nhắt trắng (Mus musculus Var.Albino)” Mục đích nghiên cứu: - Đánh giá ảnh hưởng dịch chiết từ chó đẻ cưa đến trình hình thành phản xạ có điều kiện thay đổi hàm lượng MDA não chuột nhắt trắng - Góp phần làm sở để nghiên cứu tác dụng chó đẻ cưa đến hiệu điều trị phòng bệnh người - Giúp thân làm quen với công tác nghiên cứu khoa học Nội dung nghiên cứu: Nghiên cứu ảnh hưởng dịch chiết từ chó đẻ cưa đến: - Thời gian hình thành phản xạ vận động dinh dưỡng có điều kiện (PXVĐDDCĐK) chuột nhắt trắng - Thời gian hình thành PXVĐDDCĐK bền vững chuột nhắt trắng - Thời gian phản xạ chuột nhắt trắng - Thời gian dập tắt PXVĐDDCĐK chuột nhắt trắng - Chỉ số I chuột nhắt trắng - Hàm lượng MDA não chuột nhắt trắng Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Đại cương chó đẻ cưa: 1.1.1 Mơ tả thực vật: Tên gọi khác: Diệp hạ châu, trân châu thảo, lão nha châu, cỏ chó đẻ, diệp hòe thái, cam kiềm, rút đất…[1], [10] Tên khoa học: Phyllanthus urinaria L thuộc họ Thầu dầu (Euphorbiaceae) - Sơ ri (Malpighiales) – lớp Ngọc Lan (Magnoliopsida) [16] Hình Cây chó đẻ cưa (Phyllanthus urinaria L.) Hình thái – cấu tạo: Cây thân thảo sống hàng năm, thân cứng màu hồng đỏ, thn hay hình bầu dục ngược, mặt màu xanh lơ, không có cuống cuống ngắn Hoa mọc kẻ lá, nhỏ, màu đỏ nâu, đơn tính Cụm hoa đực mọc nách gần phía ngọn, hoa mọc đơn độc phía cành Quả nang khơng có cuống Hạt ba cạnh, hình trứng, màu nâu nhạt, có vân ngang [10] 1.1.2 Phân bố phận sử dụng: Phân bố: Cây chó đẻ cưa phân bố rộng khắp vùng nhiệt đới cận nhiệt đới Ở Việt Nam, loài thường thấy mọc tự nhiên hầu hết tỉnh thành nước, điển hình như: Thái Nguyên, Bắc Ninh, Nghệ An, Hà Giang… [10] Bộ phận sử dụng: Chủ yếu sử dụng phần thân làm thuốc 1.1.3 Tính vị tác dụng: Cây chó đẻ cưa có tính hàn, vị đắng Y học cổ truyền nhiều dân tộc sử dụng diệp hạ châu chữa vàng da, lậu, tiểu đường, u xơ tuyến tiền liệt, hen, sốt, đau đớn kéo dài, táo bón, viêm phế quản, ho, viêm âm đạo, khó tiêu, viêm đại tràng, viêm gan,… Nó cịn đắp chỗ chữa bệnh da lở loét, sưng nề, ngứa ngáy [1], [10] 1.1.4 Thành phần hóa học [21] - Flavonoid: Kaempferol 0.9% - Lignan: Hypophyllanthin 0.05 – 0.17%; Phyltetralin 0.14%; Phyllanthin 0.18% - Tinh dầu: Cymene 11%; Limonine 4.5% - Axít béo: Acid Linolenic 51.4%; Acid Linoleic 21%; Acid Ricinoleic 1.2% - Vitamin: Vitamin C 0.41%; - Tanin: Geranin 0.23% - Ngồi cịn có số penolic acid gallic, isobubialine… Kaempferol Hình 2: Khung hình kaempferol Bảng Chỉ số I chuột nhắt trắng Thời gian uống dịch chiết 15 Ngày 30 Ngày Phân lô Liều lượng (ml/20g/ ngày) ĐC âm Lô Lô Lô Lô ĐC âm Lô Lô Lô Lô Uống nước 0.05 0.1 0.15 0.2 Uống nước 0.05 0.1 0.15 0.2 Độ tin cậy (p) Chỉ số I 0.43 ± 0.03 0.65 ± 0.04 0.83 ± 0.05 0.98 ± 0.02 1.03 ± 0.06 0.44 ± 0.02 0.97 ± 0.02 1.13 ± 0.08 1.48 ± 0.07 1.16 ±0.06 Giữa lô So với ĐC P (2/1)