Nghiên cứu xây dựng quy trình định tính, định lượng và xác định khả năng hấp phụ strychnin sulfat của diosmectit trong hỗn dịch thuốc

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y T ĐẠI HỌC Y DƢỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - LÊ MINH TRÂN NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG QUY TRÌNH ĐỊNH TÍNH, ĐỊNH LƢỢNG VÀ XÁC ĐỊNH KHẢ NĂNG HẤP PHỤ STRYCHNIN SULFAT CỦA DIOSMECTIT TRONG HỖN DỊCH THUỐC LUẬN VĂN THẠC SĨ DƢỢC HỌC Thành phố Hồ Chí Minh - 2018 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y T ĐẠI HỌC Y DƢỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - LÊ MINH TRÂN NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG QUY TRÌNH ĐỊNH TÍNH, ĐỊNH LƢỢNG VÀ XÁC ĐỊNH KHẢ NĂNG HẤP PHỤ STRYCHNIN SULFAT CỦA DIOSMECTIT TRONG HỖN DỊCH THUỐC Ngành: Kiểm nghiệm thuốc Độc chất Mã số: 8720210 LUẬN VĂN THẠC SĨ DƢỢC HỌC Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: TS HÀ MINH HIỂN Thành phố Hồ Chí Minh – 2018 LỜI CAM ĐOAN Tơi cam đoan dây cơng trình nghiên cứu Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chƣa đƣợc công bố cơng trình khác TP Hồ Chí Minh, ngày tháng năm 2018 Lê Minh Trân Luận văn Thạc sĩ – Khóa: 2016 – 2018 Ngành: Kiểm nghiệm thuốc Độc chất – Mã số: 8720210 NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG QUY TRÌNH ĐỊNH TÍNH, ĐỊNH LƢỢNG VÀ XÁC ĐỊNH KHẢ NĂNG HẤP PHỤ STRYCHNIN SULFAT CỦA DIOSMECTIT TRONG HỖN DỊCH THUỐC Lê Minh Trân Thầy hƣớng dẫn: TS Hà Minh Hiển Từ khóa: Nhiễu xạ tia X, diosmectit, dioctahedral smectit, strychnin sulfat Mở đầu: Diosmectit (dioctahedral smectit) loại đất sét có tính hấp phụ mạnh đƣợc sản xuất từ bentonit Mặc dù diosmectit đƣợc sử dụng rộng rãi để điều trị tiêu chảy nhƣng chƣa có chuyên luận diosmectit dƣợc điển tham chiếu Vì vậy, đề tài: “Nghiên cứu xây dựng quy trình định tính, định lƣợng xác định khả hấp phụ strychnin sulfat diosmectit hỗn dịch thuốc” đƣợc thực Đối tƣợng phƣơng pháp nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu: Hỗn dịch diosmectit, mã số lô: NC0118 công ty dƣợc phẩm H Phương pháp nghiên cứu: Xây dựng quy trình định tính diosmectit hỗn dịch thuốc phƣơng pháp nhiễu xạ tia X Xác định khả hấp phụ strychnin sulfat diosmectit hỗn dịch thuốc phƣơng pháp HPLC Nung nguyên liệu hỗn dịch diosmectit phân tích trọng lƣợng cắn thu đƣợc Kết quả: Đã xây dựng đƣợc quy trình định tính diosmectit hỗn dịch thuốc phƣơng pháp so sánh phổ nhiễu xạ tia X mẫu thử với phổ nguyên liệu đối chiếu Đã xây dựng đƣợc quy trình xác định khả hấp phụ strychnin sulfat diosmectit hỗn dịch thuốc phƣơng pháp HPLC-UV Điều kiện sắc ký bao gồm cột Gemini-NX C18 (150 x 4.6 mm, μm), pha động acetonitril nƣớc (60:40), nhiệt độ cột 35 o C, bƣớc sóng phát 254 nm Đã xây dựng đƣợc quy trình định lƣợng diosmectit hỗn dịch thuốc Cả quy trình đƣợc thẩm định đạt yêu cầu theo hƣớng dẫn ICH Kết luận: Kết nghiên cứu góp phần vào cơng tác đảm bảo chất lƣợng thuốc hỗn dịch uống diosmectit góp phần xây dựng chuyên luận diosmectit cho Dƣợc điển Việt Nam VI i Master’s thesis – Academic course: 2016 – 2018 Specialty: Drug Quality Control and Toxicology – Code: 8720210 STUDY ON IDENTIFICATION, ASSAY AND DETERMINATION OF STRYCHNINE SULFATE ADSORBILITY OF DIOSMECTITE IN ORAL SUSPENSION Le Minh Tran Supervisor: Dr Ha Minh Hien Keywords: X-Ray diffraction, diosmectite, dioctahedral smectite, strychnine sulfate Introduction: Diosmectite (dioctahedral smectite) is natural adsorbent clay, which is made of the natural bentonite Although diosmectit is popularly used in treatment of diarrhea, there is no special issue of diosmectite in Pharmacopoeial Discussion Group Therefore, the study “Study on identification, assay and determination of strychnine sulfate adsorbility of diosmectite in oral suspension” was done Materials and methods Materials: Diosmectite oral suspension, batch code NC0118 of H pharmaceutical company Methods: Develop method for identification diosmectite in oral suspension by XRay diffraction method Develop method for determination of strychnine sulfate adsorbility of diosmectite in oral suspension by HPLC-UV Ignition of the diosmectite powder and suspension and gravimetric assay of the residue Results: An X-Ray diffraction method was developed for identification of diosmectite by comparison of the analyzed spectrum with that of the reference diosmectite The procedure for determination of strychnine sulfate adsorbility of diosmectite in oral suspension by HPLC-UV was developed The analytical column was an Gemini-NX C18 (5 μm particle size, 150 x 4.6 mm), the isocratic mobile phase was acetonitrile – water (60:40, v/v), the column temperature was set at 35 oC and detection was monitored at 254 nm Qualification method of diosmectite in oral suspension were developed These methods were validated according to ICH guidelines Conclusion: The results can be applied for quality procedure of diosmectite oral suspension and contribute a special issue of diosmectite for Vietnamese Pharmacopoeia 6th edition MỤC LỤC DANH MỤC CHỮ VI T TẮT vi DANH MỤC BẢNG vii DANH MỤC HÌNH ix ĐẶT VẤN ĐỀ .1 CHƢƠNG I 1.1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU Diosmectit 1.1.1 Cấu trúc 1.1.2 Chỉ định 1.1.3 Dƣợc lý chế tác dụng 1.1.4 Dƣợc động học .5 1.2 Phƣơng pháp phân tích nhiễu xạ tia X 1.2.1 Giới thiệu 1.2.2 Nguyên tắc 1.2.3 Phƣơng pháp nhiễu xạ bột 1.3 Phƣơng pháp định tính bentonit dƣợc điển M 2017 1.4 Tiêu chuẩn diosmectit nguyên liệu 1.5 Strychnin .10 1.5.1 Tính chất 10 1.5.2 Chuyển hóa 11 1.5.3 Độc tính 11 1.5.4 Một số đề tài nghiên cứu strychnin hệ HPLC 11 1.6 Một số cơng trình nghiên cứu diosmectit 13 CHƢƠNG II ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 2.1 Đối tƣợng nghiên cứu 16 2.2 Hóa chất trang thiết bị 16 2.2.1 Hóa chất 16 2.2.2 Trang thiết bị 16 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 17 2.3.1 Định tính diosmectit phƣơng pháp nhiễu xạ tia X 17 2.3.2 Khả hấp phụ strychnin sulfat diosmectit 17 2.3.3 Xây dựng thẩm định quy trình định lƣợng diosmectit thuốc hỗn dịch thuốc phƣơng pháp phân tích khối lƣợng 22 CHƢƠNG III K T QUẢ NGHIÊN CỨU 25 3.1.1 Xây dựng thẩm định quy trình định tính diosmectit thuốc hỗn dịch uống phƣơng pháp nhiễu xạ tia X 25 3.1.2 Xây dựng thẩm định quy trình thử tính hấp phụ strychnin sulfat ngun liệu phƣơng pháp UV-Vis 30 3.1.3 Xây dựng quy trình thử tính hấp phụ strychnin sulfat c hỗn dịch thuốc 36 3.1.4 Xây dựng thẩm định quy trình định lƣợng diosmectit thuốc hỗn dịch uống phƣơng pháp phân tích khối lƣợng 45 CHƢƠNG IV BÀN LUẬN 57 4.1 Định tính diosmectit hỗn dịch thuốc phƣơng pháp nhiễu xạ tia X 57 4.2 Xác định tính hấp phụ strychnin sulfat diosmectit hỗn dịch thuốc 58 4.3 Định lƣợng diosmectit hỗn dịch thuốc .59 CHƢƠNG V K T LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 60 5.1 K T LUẬN 60 5.2 ĐỀ NGHỊ 60 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC i DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Tên đầy đủ dd Nghĩa tiếng Việt dung dịch HPLC High-performance liquid Sắc ký lỏng hiệu cao chromatography RSD Relative standard Độ lệch chuẩn tƣơng đối deviation STT Số thứ tự TB Trung bình TLTK Tài liệu tham khảo UV- Vis XRD Ultraviolet – visible Quang phổ tử ngoại khả Spectrophotomtry kiến X-ray Diffraction Nhiễu xạ tia X i DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Tiêu chuẩn diosmectit nguyên liệu theo Cơ quan Dƣợc phẩm Thực phẩm quốc gia Trung Quốc (SFDA) [15] .9 Bảng 1.2 Một số đề tài nghiên cứu strychnin hệ HPLC 11 Bảng 2.3 Danh mục hóa chất dung môi 16 Bảng 3.4 Ảnh hƣởng đệm 30 Bảng 3.5 Ảnh hƣởng thời gian hấp phụ (Phụ lục 6) 31 Bảng 3.6 Ảnh hƣởng pH 32 Bảng 3.7 Kết kiểm định t-test so sánh độ hấp thu giá trị pH 32 Bảng 3.8 Thẩm định tính xác (nguyên liệu) 33 Bảng 3.9 Tính tuyến tính trƣờng hợp (Phụ lục 11) 33 Bảng 3.10 Tính tuyến tính trƣờng hợp (Phụ lục 9) 34 Bảng 3.11 Tính tuyến tính trƣờng hợp (Phụ lục 12) 35 Bảng 3.12 Kết xác định ảnh hƣởng mẫu placebo (Phụ lục 21) 36 Bảng 3.13 Kết sắc ký điều kiện khảo sát 39 Bảng 3.14 Tính phù hợp hệ thống 40 Bảng 3.15 Thẩm định tính xác (hỗn dịch) 41 Bảng 3.16 Tính tuyến tính trƣờng hợp (Phụ lục 13,17) 42 Bảng 3.17 Tính tuyến tính trƣờng hợp (Phụ lục 14, 18) 43 Bảng 3.18 Tính tuyến tính trƣờng hợp (Phụ lục 19) 44 Bảng 3.19 Kết độ (Phụ lục 20) 44 Bảng 3.20 Lƣợng nguyên liệu sau nung 600 o C 45 Bảng 3.21 Độ phục hồi nung 600 oC 46 Bảng 3.22 Lƣợng nguyên liệu sau nung 600 o C 46 Bảng 3.23 Độ phục hồi nung 600 oC 46 ii Bảng 3.24 Lƣợng nguyên liệu sau nung 600 o C 15 47 Bảng 3.25 Độ phục hồi nung 600 oC 15 47 Bảng 3.26 Lƣợng nguyên liệu sau nung 800 o C 47 Bảng 3.27 Độ phục hồi nung 800 oC 48 Bảng 3.28 Lƣợng nguyên liệu sau nung 800 o C 48 Bảng 3.29 Độ phục hồi nung 800 oC 48 Bảng 3.30 Lƣợng nguyên liệu sau nung 800 o C 15 49 Bảng 3.31 Độ phục hồi nung 800 oC 15 49 Bảng 3.32 Lƣợng nguyên liệu sau nung 1000 oC 49 Bảng 3.33 Độ phục hồi nung 1000 oC 50 Bảng 3.34 Lƣợng nguyên liệu sau nung 1000 oC 50 Bảng 3.35 Độ phục hồi nung 1000 oC 50 Bảng 3.36 Lƣợng nguyên liệu sau nung 1000 oC 15 51 Bảng 3.37 Độ phục hồi nung 1000 oC 15 51 Bảng 3.38 Tóm tắt kết khảo sát 51 Bảng 3.39 Lƣợng nguyên liệu sau nung 53 Bảng 3.40 Lƣợng diosmectit gói 53 Bảng 3.41 Kết độ 53 Bảng 3.42 Kết độ xác 54 Bảng 3.43 Kết tính tuyến tính 55 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-63 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-64 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-65 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-66 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-67 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-68 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-69 Phụ lục 21 Đặc hiệu – Hỗn dịch (UV) Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-70 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-71 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-72 Phụ lục 22 Khảo sát chuẩn Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-73 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-74 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-75 Phụ lục 23 Khảo sát thử Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-76 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-77 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn ... tài ? ?Nghiên cứu xây dựng quy trình định tính, định lượng xác định khả hấp phụ strychnin sulfat diosmectit hỗn dịch thuốc? ?? đƣợc thực với mục tiêu sau: - Xây dựng thẩm định quy trình định tính diosmectit. .. Ngành: Kiểm nghiệm thuốc Độc chất – Mã số: 8720210 NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG QUY TRÌNH ĐỊNH TÍNH, ĐỊNH LƢỢNG VÀ XÁC ĐỊNH KHẢ NĂNG HẤP PHỤ STRYCHNIN SULFAT CỦA DIOSMECTIT TRONG HỖN DỊCH THUỐC Lê Minh Trân... chƣa có chuyên luận diosmectit dƣợc điển tham chiếu Vì vậy, đề tài: ? ?Nghiên cứu xây dựng quy trình định tính, định lƣợng xác định khả hấp phụ strychnin sulfat diosmectit hỗn dịch thuốc? ?? đƣợc thực