Khảo sát tác dụng độc tính tế bào của dược liệu hồng quân (flacourtia rukam)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC Y DƯỢC TP HỒ CHÍ MINH - BỘ Y TẾ BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP TRƯỜNG KHẢO SÁT TÁC DỤNG ĐỘC TÍNH TẾ BÀO CỦA DƯỢC LIỆU HỒNG QUÂN (Flacourtia rukam) Chủ nhiệm đề tài: PGS.TS Huỳnh Ngọc Thụy TP Hồ Chí Minh - 2018 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC Y DƯỢC TP HỒ CHÍ MINH - BỘ Y TẾ BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP TRƯỜNG KHẢO SÁT TÁC DỤNG ĐỘC TÍNH TẾ BÀO CỦA DƯỢC LIỆU HỒNG QUÂN (Flacourtia rukam) TP Hồ Chí Minh - 2018 SÀNG LỌC HOẠT TÍNH ĐỘC TẾ BÀO UNG THƯ VÚ CỦA CAO CHIẾT HỒNG QUÂN (Flacourtia rukam) TRÊN DÒNG TẾ BÀO UNG THƯ VÚ NGƯỜI MDA-MB-231 Trần Thị Phương Uyên, Đỗ Thị Hồng Tươi, Huỳnh Ngọc Thụy Mở đầu: Cây Hồng quân (Flacourtia rukam) dùng từ lâu dân gian điều trị nhiều bệnh khác nhờ tác động giảm đau, kháng khuẩn, chống oxy hóa, bảo vệ gan, hạ đường huyết… Đề tài này sàng lọc hoạt tính độc tế bào ung thư vú của cao chiết Hồng quân dòng tế bào ung thư vú người MDA-MB-231 Phương pháp: Tế bào MDA-MB-231 nuôi cấy môi trường DMEM, bổ sung 10% FCS, mM L-glutamin, 100 IU/ml penicilin 100 µg/ml streptomycin Tế bào xử lý với cao chiết Hồng quân (nồng độ 4-100 µg/ml) 72 Đánh giá ức chế tăng trưởng tế bào test MTT, Kết quả: Các cao chiết Hồng quân thể hiện hoạt tính độc tế bào dịng tế bào ung thư vú người MDA-MB-231, làm giảm tỷ lệ tế bào sống sau 72 mạnh theo thứ tự cao chiết cloroform > cao ethyl acetat > cao nước Giữa cao chiết cloroform và ethyl acetat của phận dùng khác nhau, cao chiết từ thân thể hiện tác dụng ức chế tăng trưởng tế bào tốt nhất, tiếp đến cao từ rễ > cao từ Kết luận Các cao chiết Hồng quân thể hiện hoạt tính độc tế bào dịng tế bào ung thư vú người MDA-MB-231 Từ khóa: Hồng quân, độc tế bào, ung thư vú, dòng MDA-MB-231, apoptosis, hoại tử STUDY ON CYTOTOXIC ACTIVITY OF EXTRACTS FROM Flacourtia indica IN HUMAN BREAST CANCER MDA-MB-231CELL LINE Tran Thi Phuong Uyen, Do Thi Hong Tuoi, Huynh Ngoc Thuy Introduction: Flacourtia indica has been used as a traditional medicine due to antiinflammatory, anti-oxidant, hepatoprotective and hypoglycemia effects This work studied on screening for cytotoxic activity in human breast cancer MDA-MB-231 cell line of extracts from different parts of this medicinal plant Methods: MDA-MB-231 cells ere cultured in DMEM supplemented with 10% FCS, mM L-glutamine, 100 IU/ml penicillin and 100 µg/ml streptomycin Cells were treated with extracts of F indica at different concentrations (4 - 100 µg/ml) for 72 hours Anti-proliferative effect was evaluated by MTT test; Results: All extracts from root, stem and leaf of F rukam showed cytotoxic activity in human breast cancer MDA-MB-231 cell line as decreases in cell viability after treatment for 72h in the order: chloroform extracts > ethyl acetat extracts > aqueous extracts For chloroform and ethyl acetat extracts of different parts, stem extracts exhibited the highest cytotoxic activity, after that root extracts > leaf extracts Conclusion: All extracts of F indica showed cytotoxic activity in human breast cancer MDA-MB-231 cell line Keywords: Flacourtia rukam, breast cancer, MDA-MB-231 cell, apoptosis, cytotoxic activity, necrosis MỤC LỤC DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT iii DANH MỤC HÌNH vii MỞ ĐẦU Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 TỔNG QUAN VỀ UNG THƯ VÚ 1.1.1 Định nghĩa 1.1.2 Dịch tễ học 1.1.3 Nguyên nhân và yếu tố nguy 1.1.3.1 Nguyên nhân gây bệnh 1.1.3.2 Yếu tố nguy [7] 1.1.4 Chẩn đoán 1.1.4.1 Thăm khám lâm sàng 1.1.4.2 Chẩn đoán cận lâm sàng 1.1.5 Phân loại 10 1.1.6 Các liệu pháp điều trị 11 1.1.6.1 Liệu pháp điều trị truyền thống 11 1.1.6.2 Chiến lược điều trị 12 1.2 PHƯƠNG PHÁP KHẢO SÁT HOẠT TÍNH ĐỘC TẾ BÀO 14 1.2.1 Phương pháp đo thay đổi điện trở [26] 15 1.2.2 Phương pháp dùng thuốc nhuộm đỏ trung tính [12] 15 1.2.3 Đếm tế bào sống dung dịch trypan blue [53] 15 1.2.4 Phương pháp SRB [47] 16 1.2.5 Đánh giá tỉ lệ tế bào sống phương pháp MTT [18] 16 1.2.6 Dùng dấu ATP đo tỷ lệ tế bào sống 17 1.2.7 Dùng dấu protease đo tỷ lệ tế bào sống 17 1.2.8 Khảo sát thời gian thực 17 1.3 KHẢO SÁT CƠ CHẾ HOẠT TÍNH ĐỘC TẾ BÀO UNG THƯ 18 1.4 TỔNG QUAN VỀ CÂY HỒNG QUÂN 22 1.4.1 Chi Flacourtia 22 1.4.1.1 Vị trí phân loại 22 1.4.1.2 Đặc điểm thực vật học 23 1.4.2 Đặc điểm thực vật loài Flacourtia indica (Burm.f.) Merr [3], [6] 23 1.4.2.1 Tên gọi 23 1.4.2.2 Mô tả đặc điểm thực vật 23 1.4.2.5 Thành phần hóa học 25 Flacourtia rukam 25 1.4.2.6 Tác dụng dược lý 25 1.4.2.7 Công dụng [1] 27 Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 29 2.1.1 Dòng tế bào 29 2.1.2 Nguyên liệu thử nghiệm 29 2.1.3 Hóa chất 30 2.1.4 Thiết bị dụng cụ 31 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 33 2.2.1 Nuôi cấy tế bào 33 2.2.2 Đếm tế bào dung dịch trypan blue 33 2.2.3 Bố trí thí nghiệm 34 2.2.4 Xử lý tế bào 34 2.2.5 Đánh giá tỉ lệ tế bào sống phương pháp MTT 35 Chương KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 37 .i 3.1 KHẢO SÁT ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT MẪU NGUYÊN LIỆU 37 Khảo sát mẫu tươi 37 3.2 SÀNG LỌC HOẠT TÍNH ĐỘC TẾ BÀO UNG THƯ VÚ NGƯỜI MDA-MB-231 CỦA CÁC CAO CHIẾT TỪ DƯỢC LIỆU HỒNG QUÂN 38 BÀN LUẬN 45 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 60 4.1 KẾT LUẬN 60 4.2 ĐỀ NGHỊ 60 TÀI LIỆU THAM KHẢO 62 PHỤ LỤC DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Tiếng Anh Ac-DEVD- Acetyl-Asp-Glu-Val-Asp pNA p-nitroanilide ADN Acid deoxyrinonucleic AO/EB Acridin orange/ethidium bromid ATCC American type culture collection Tiếng Việt Bảo tàng giống chuẩn Hoa kỳ ATM Ataxia telangiectasia mutated ATP Adenosine triphosphate BMP-4 Bone morphogenetic protein-4 BRCA Breast cancer CCl4 Carbon tetracloride CD24+ Cluster of differentiation 24 CD44+ Cluster of differentiation 44 CHEK2 Checkpoint kinase Gen ung thư vú Điểm kiểm soát CDH1 Cadherin CMF Cyclophosphamide, Methotrexate, 5-fluorouracil (5-FU) CAF Cyclophosphamide, Adriamycin, 5-fluorouracil (5-FU) CEF Cyclophosphamide, Epirubicin, 5-fluorouracil (5-FU) DAPI ', 6-diamidino-2-phenylindole DMEM Dulbecco's Modified Eagle's medium DMSO Dimethyl sulfoxide EDTA Ethylenediaminetetraacetic acid ER Estrogen receptor EtOAc Ethyl acetat FCS Fetal calf serum Huyết bào thai bê GC-MS Gas chromatography - mass spectrometry Sắc kí khí-khối phổ HCl Acid chlohydric LDH Lactate dehydrogenase MeOH Methanol MRI Magnetic Resonance Imaging MTT [3-(4,5-dimethyl-thiazol-2-yl)-2,5- Môi trường DMEM Thụ thể estrogen Chụp cộng hưởng từ diphenyl tetrazolium bromid)] Đỏ trung tính NRU Neutral red uptake NR Neutral red OD Optical Density Mật độ quang PET Positron Emission Tomography Chụp cắt lớp phát xạ PTEN Phosphatase and tensin homolog PR Progesteron receptor SRB Sulforhodamin B SDH Succinate dehydrogenase Thụ thể progesteron TE Tris HCl-EDTA TNM Tumor - Node - Metastasis TCA Acid trichloroacetic TAE Tris base, acetic acid and EDTA TNF-α Tumor necrosis factor alpha Yếu tố hoại tử khối u XTT Vascular Endothelial Growth Factor Yếu tố tăng trưởng nội mô mạch máu Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 62 TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT Nguyễn Đức Định, Nguyễn Thị Thanh Hương (2003), "Xây dựng mơ hình bảo tồn và phát triển loài thuốc vùng đệm vườn quốc gia Yok Don" Tạp chí hoạt động khoa học, 11, tr 84 Nguyễn Sào Trung, Hứa Thị Ngọc Hà (2007), Tìm hiểu bệnh Ung thư vú, Nhà xuất Y học, Hà Nội, tr 64-69, 74-78 Phạm Hoàng Hộ (1999), Cây cỏ Việt Nam, Tập I, Nhà xuất Trẻ, tr.540542 Trần Văn Thiệp (2012), Bài giảng ung thư vú dành cho bác sĩ, Bộ môn ung thư học, trường Đại Học Y Dược TP.HCM Trần Thị Thu Ngân và cộng (2013), "Dịch tễ học và giám sát bệnh ung thư giới và Việt Nam", Tạp chí Y học dự phịng, 10 (146), tr 308-313 Võ Văn Chi (2012), Từ điển thuốc Việt Nam, Tập I, Nhà xuất Y học, tr 227-229, 1153 Vũ Văn Vũ, Nguyễn Hoàng Hạnh Đoan Trang, Nguyễn Tôn Hoàng, Nguyễn Thị Bảo Hiền (2010), Yếu tố nguy ung thư vú phụ nữ Việt Nam: Nghiên cứu bệnh chứng Bệnh Viên Ung bướu TP.HCM từ tháng 08/2009 đến 08/2010, Y học thành phố Hồ Chí Minh, 14 (4), tr 453-468 TIẾNG ANH Al-Hajj Muhammad (2007), "Cancer stem cells and oncology therapeutics", Current opinion in oncology, 19 (1), pp.61-64 Ancy P, Padmaja V, Radha K et al (2013), "Diuretic activity of the roots of Flacourtia indica", Hygeia JD Med , (1), pp.79-83 10 Ashbeck E.L, Rosenberg R.D, Stauber P.M et al (2007), "Benign breast biopsy diagnosis and subsequent risk of breast cancer", Cancer Epidemiology and Prevention Biomarkers, 16 (3), pp.467-472 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 63 11 Berry D.A, Cronin K.A, Plevritis S.K et al (2005), "Effect of screening and adjuvant therapy on mortality from breast cancer", New England Journal of Medicine, 353 (17), pp.1784-1792 12 Borenfreund E, Jame A.P (1985), "Toxicity determined in vitro by morphological alterations and neutral red absorption", Toxicol Lett, 24 (2-3), pp.119-24 13 Brady Hugh J.M (2004), Apoptosis Menthods and Protocols, Springer Science & Business Media, London, pp.1-48 14 Bruening W, Schoelles K, Treadwwell J et al (2009), Comparative effectiveness of core-needle and open surgical biopsy for the diagnosis of breast lesions 15 Calaf G.M, Ponce-Cusi R, and Carrión F (2018), "Curcumin and paclitaxel induce cell death in breast cancer cell lines", Oncology reports, 40 (4), pp.2381-2388 16 Choi Y.H and Yoo Y.H (2012), "Taxol-induced growth arrest and apoptosis is associated with the upregulation of the Cdk inhibitor, p21WAF1/CIP1, in human breast cancer cells", Oncology reports, 28 (6), pp.2163-2169 17 Cicek Gercel-Taylor (2005), “Chemosensitivity: Volume II”, Humana Press, pp.79-82 18 Denizot F, Lang R (1986), "Rapid colorimetric assay for cell growth and survival Modifications to this tetrazolium dye procedure giving improved sensitivity and reliability", J Immunol Methods, 89 (2), pp.271-277 19 Eramma (2013), "Antibacterial potential and phytochemical analysis of Flacourtia indica (Burm f.) Merr root extract against human pathogens", Indo American Journal of Pharmaceutical Research, pp.3832-3846 20 Flores M.L, Castilla C, Avila R et al (2012), "Paclitaxel sensitivity of breast cancer cells requires efficient mitotic arrest and disruption of Bcl-xL/Bak interaction", Breast cancer research and treatment, 133 (3), pp.917-928 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 64 21 Gnanaprakash K, Madhusudhana Chetty C, Ramkanth S et al (2010), "Aqueous extract of Flacourtia indica prevents carbon tetrachloride induced hepatotoxicity in rat", Energy, 8, pp.2867 22 Godet I and Gilkes D.M (2017), "BRCA1 and BRCA2 mutations and treatment strategies for breast cancer", Integrative cancer science and therapeutics, (1),pp.1-17 23 Hai-Rim Shin (2008), Burden and Risk Factors of Cancer in Asia, International Agency for Research on Cancer, World Health Organization, Lyon, France 24 Harvard Extension’s Cell Biology (2013), Apoptosis & Necrosis, Harvard Extension’s Cell Biology course 25 Health Quality Ontario (2016), "Magnetic resonance imaging as an adjunct to mammography for breast cancer screening in women at less than high risk for breast cancer: a health technology assessment”, Ontario health technology assessment series, 16 (20), pp.1-30 26 Hogen Esch (2012), "Challenges in pre-clinical testing of anti-cancer drugs in cell culture and in animal models", Journal of Controlled Release, 164 (2), pp.183-186 27 Hugh J.M (2004), Apoptosis Menthods and Protocols, Springer Science & Business Media, London, pp.47-48 28 IARC screening group (2013), "Breast cancer" International Agency for Research of Cancer 29 Jänicke R.U, Sprengart M.L, Porter A.G(1998), "Caspase-3 is required for DNA fragmentation and morphological changes associated with apoptosis", Journal of Biological Chemistry, 273 (16), pp.9357-9360 30 Jemal A, Center M.M, Ferlay J, Ward E, Forman D (2012), "Global cancer statistics", A Cancer Journal for Clinicians, 61(2), pp.69-90 31 Kaou (2010), "Antimalarial compounds from the aerial parts of Flacourtia indica (Flacourtiaceae)", J Ethnopharmacol, 130 (2), pp.272-274 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 65 32 Korzeniewski (1983), "An enzyme-release assay for natural cytotoxicity", J Immunol Methods, 64 (3), pp.313-320 33 Kundu J (2013), "Analgesic, anti-inflammatory, and diuretic activity of methanol extract of Flacourtia indica", Archives of Basic and Applied Medicine, (1), pp.39-44 34 Lim T.K (2013), Edible Medicinal And Non-Medicinal Plants, Springer, pp 761-766 35 Lisa C.C, Brooke J M, Nigel J.W (2016), "Analyzing cell death by nuclear staining with Hoechst 33342", Cold Spring Harbor Protocols, 2016 (9), pp.778-781 36 Mahmood T and Yang P.C (2012), "Western blot: technique, theory, and trouble shooting", North American journal of medical sciences, 4(9), pp.429 37 National Cancer Institute of America (2017), “Female Breast Cancer”, https://seer.cancer.gov/statfacts/html/breast.html (ngày truy cập 01-Jun2018) 38 Nazneen (2009), "Protective effects of Flacourtia indica aerial parts extracts against paracetamol-induced hepatotoxiciy in rats", Journal of Taibah University for Science, 2, pp.1-6 39 Ndhlala (2007), "Phenolic composition of Flacourtia indica, Opuntia megacantha and Sclerocarya birrea", Food Chemistry, 103(1), pp.82-87 40 Park K.W, Kundu J, Chae I.G et al (2014), "Methanol extract of Flacourtia indica aerial parts induces apoptosis via generation of ROS and activation of caspases in human colon cancer HCT116 cells", Asian Pac J Cancer Prev, 15(17), pp.7291-7296 41 Perez A.T, Domenech G.H, Frankel C, Vogel C.L (2002), "Pegylated liposomal doxorubicin (Doxil®) for metastatic breast cancer: the Cancer Research Network, Inc., experience", Cancer investigation, 20 (2), pp.22-29 42 Phuc V Pham, Nhung T Nguyen, Nhung H Truong, Thuy T Duong, Dong V Le (2011), " Differentiation of breast cancer stem cells by knockdown of Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 66 CD44: promising differentiation therapy", Journal of Translational Medicine, 9, pp.209 43 Rieger A.M, Nelson K.L, Konowalchuk J.D, Barreda D.R (2011), "Modified annexin V/propidium iodide apoptosis assay for accurate assessment of cell death" Journal of visualized experiments: JoVE, (50), pp.2597 44 Sashidhara (2013), "Isolation and identification of beta-hematin inhibitors from Flacourtia indica as promising antiplasmodial agents", Eur J Med Chem, 60, pp.497-502 45 Saxena (2010), "In vitro antioxidant activity of methanolic and aqueous extract of Flacourtia indica Merr", American-Eurasian Journal of Scientific Research, 5(3), pp.201-206 46 Scarlett S.L, Albert Y.L (2002), "Breast cancer characteristics of Vietnamese women in the Greater San Francisco Bay Area" The Western Journal of Medicine, 176(2), pp.87-91 47 Skehan P (1990), "New colorimetric cytotoxicity assay for anticancer – drug screening" Journal of the Nation Cancer Institute, 82 (13), pp.1107 – 1112 48 Sleumer H.O (1980), "Flora neotropica: monograph number 22 Flacourtiaceae", New York Botanical Garden for Organization for Flora Neotropica, pp.35-37 49 Susan G.Komen for the Cure (2008), Types of Breast Cancer Tumors, Susan G.Komen for the Cure 50 Tabar L, Yen M.F, Vitak B et al (2003), "Mammography service screening and mortality in breast cancer patients: 20-year follow-up before and after introduction of screening", The Lancet, 361 (9367), pp.1405-1410 51 Takhtajan Armen (2009), Flowering plants, 2nd edition, Springer, pp.350 52 Tchibozo M.A.D, Savadogo A, Karou D et al (2012), "Connaissances endogènes et études phytochimiques de Flacourtia flavescens Willd.(Flacourtia indica (Burm f.) Merr.)", Tropicultura, 30 (1), pp.3-8 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 67 53 Tran S.L (2011), "Trypan blue dye enters viable cells incubated with the pore – forming toxin Hlyll of Bacillus cereus", PloS One, (99), pp.22876 54 Yiannis A Ioannou and Fannie W Chen (1996), "Quantitation of DNA fragmentation in apoptosis", Nucleic Acids Research, 24 (5), pp.992-993 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-1 PHỤ LỤC Phụ lục Kết khảo sát hoạt tính độc tế bào của cao chiết Hồng quân nồng độ 100 µg/ml dòng tế bào ung thư vú người MDA-MB-231sau72 Mẫu Cao cloroform chứng Rễ Thân OD1 0,589 0,099 0,064 0,064 0,055 0,067 OD2 0,494 0,119 0,062 0,067 0,068 OD3 0,589 0,128 0,066 0,063 0,060 Lá Cao nước Cao EtOAc Rễ Thân Lá Rễ Thân Lá 0,087 0,176 0,379 0,417 0,066 0,119 0,184 0,362 0,415 0,071 0,111 0,185 0,331 0,403 Phụ lục Kết khảo sát hoạt tính độc tế bào của paclitaxel dòng tế bào ung thư vú người MDA-MB-231 sau 72 Môi trường Paclitaxel 2,5 µM Paclitaxel 1,25 µM Paclitaxel 0,25 µM OD1 0,411 0,121 0,206 0,243 OD2 0,426 0,140 0,175 0,228 OD3 0,415 0,128 0,191 0,231 Trần Thị Phương Uyên Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-2 Phụ lục Kết khảo sát hoạt tính độc tế bào của cao Hồng quân dòng tế bào ung thư vú người MDA-MB-231 sau xử lý 72 Nồng độ (µg/ml) Cao Cloroform Rễ Thân Lá Ethyl acetat Rễ Thân Lá Nước Rễ Thân Lá OD 570nm 100 (200) 75 (150) 50 (100) 25 (50) 12,5 (25) 0,077 0,125 0,170 0,194 0,239 0,080 0,111 0,093 0,209 0,240 0,071 0,107 0,112 0,173 0,238 0,074 0,111 0,128 0,139 0,187 0,095 0,064 0,086 0,127 0,191 0,081 0,158 0,138 0,138 0,182 0,059 0,091 0,163 0,217 0,232 0,058 0,106 0,174 0,188 0,203 0,059 0,080 0,169 0,208 0,257 0,060 0,105 0,148 0,193 0,326 0,070 0,106 0,123 0,221 0,283 0,055 0,102 0,137 0,251 0,338 0,057 0,072 0,125 0,218 0,205 0,064 0,071 0,082 0,212 0,278 0,054 0,067 0,090 0,156 0,330 0,076 0,204 0,266 0,301 0,327 0,074 0,175 0,156 0,303 0,303 0,072 0,155 0,211 0,311 0,350 0,119 0,221 0,301 0,370 0,139 0,225 0,328 0,315 0,131 0,215 0,275 0,306 0,108 0,179 0,227 0,256 0,309 0,111 0,159 0,212 0,245 0,338 0,096 0,169 0,238 0,262 0,245 0,088 0,215 0,253 0,271 0,259 0,093 0,217 0,200 0,237 0,254 0,149 0,188 0,238 0,261 0,269 Trần Thị Phương Uyên Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-3 Phụ lục Kết khảo sát tác động gây hoại tử tế bào của cao Hồng quân dòng tế bào ung thư vú người MDA-MB-231 sau xử lý 72 Nồng độ (µg/ml) Cao Cloroform Rễ Thân Ethyl acetat Rễ Thân Hoạt tính LDH (mU/ml) 100 50 25 465,778 402,444 305,778 576,889 353,556 368,000 529,111 490,222 296,889 716,889 455,778 405,778 612,444 535,778 370,222 719,111 403,556 476,889 596,889 440,222 423,556 502,444 566,889 521,333 521,333 449,111 525,778 662,444 475,778 356,889 640,889 455,880 380,222 684,000 413,556 302,444 376,330 344,440 Paclitaxel µM 408,220 Mẫu chứng DMSO 1% 162,440 Trần Thị Phương Uyên Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 131,330 141,330 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-4 Phụ lục Kết nhuộm AO/EB của cao chiết cloroform từ thân Hồng quân Nồng độ 100 µg/ml Nồng độ 75 µg/ml Nồng độ 50 µg/ml Nồng độ 25 µg/ml Paclitaxel nồng độ µM DMSO nồng độ 1% Trần Thị Phương Uyên Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-5 Phụ lục Kết nhuộm AO/EB của cao chiết cloroform từ rễ Hồng quân Nồng độ 100 µg/ml Nồng độ 75 µg/ml Nồng độ 50 µg/ml Nồng độ 25 µg/ml Trần Thị Phương Uyên Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-6 Phụ lục Kết nhuộm AO/EB của cao chiết ethyl acetat từ thân Hồng quân Nồng độ 100 µg/ml Nồng độ 75 µg/ml Nồng độ 50 µg/ml Nồng độ 25 µg/ml Trần Thị Phương Uyên Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-7 Phụ lục Kết nhuộm AO/EB của cao chiết ethyl acetat từ rễ Hồng quân Nồng độ 100 µg/ml Nồng độ 75 µg/ml Nồng độ 50 µg/ml Nồng độ 25 µg/ml Trần Thị Phương Uyên Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-8 Phụ lục Kết về tỷ lệ ADN phân mảnh tế bào ung thư vú người MDA-MB-231 sau xử lý 72 với cao Hồng quân Nồng độ (µg/ml) Cao Cloroform Rễ Thân Ethyl acetat Rễ Thân Tỉ lệ ADN phân mảnh (%) 75 50 25 41,176 35,178 29,224 38,068 20,290 28,571 39,216 34,025 22,069 44,022 32,995 25,767 35,519 31,402 17,143 39,301 31,933 27,419 43,842 36,571 24,294 26,271 29,858 26,230 43,523 34,400 34,239 15,556 24,204 27,830 26,519 21,528 10,759 33,333 11,290 13,095 29,084 31,250 5,036 9,655 Paclitaxel µM 38,947 Mẫu chứng DMSO 1% 10,875 Trần Thị Phương Uyên Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-9 Phụ lục 10 Kết khảo sát hoạt tính enzym caspase tế bào ung thư vú người MDA-MB-231 sau xử lý 72 với cao Hồng quân Nồng độ (µg/ml) Cao Cloroform Rễ Thân Ethyl acetat Rễ Thân Nồng độ pNA (µM) 75 15,51 50 9,51 25 7,61 13,51 7,51 8,49 12,09 8,66 7,70 22,37 16,66 9,30 22,66 16,09 8,88 21,80 13,23 7,92 15,51 7,80 7,53 10,94 12,37 7,90 10,37 10,66 6,87 10,37 7,23 6,80 8,09 8,09 6,51 8,66 9,23 4,99 18,657 17,514 6,371 6,085 Paclitaxel µM 19,514 Mẫu chứng DMSO 1% 6,086 Trần Thị Phương Uyên Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn ... TẠO ĐẠI HỌC Y DƯỢC TP HỒ CHÍ MINH - BỘ Y TẾ BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP TRƯỜNG KHẢO SÁT TÁC DỤNG ĐỘC TÍNH TẾ BÀO CỦA DƯỢC LIỆU HỒNG QUÂN (Flacourtia rukam) TP Hồ... HOẠT TÍNH ĐỘC TẾ BÀO UNG THƯ VÚ CỦA CAO CHIẾT HỒNG QUÂN (Flacourtia rukam) TRÊN DÒNG TẾ BÀO UNG THƯ VÚ NGƯỜI MDA-MB-231 Trần Thị Phương Uyên, Đỗ Thị Hồng Tươi, Huỳnh Ngọc Thụy Mở đầu: Cây Hồng quân. .. 3.2 Hoạt tính độc tế bào ung thư vú MDA-MB-231 cao Hồng quân 41 Bảng 3.3 Tỷ lệ (%) ức chế tăng trưởng tế bào ung thư vú cao Hồng quân 41 Bảng 3.4 IC50 dòng tế bào MDA-MB-231 cao Hồng quân paclitaxel