Phân lập và tuyển chọn một số dòng vi khuẩn lactic sinh bacteriocin ứng dụng trong thức ăn thủy sản

UỶ BAN NHÂN DÂN TỈNH AN GIANG TRƢỜNG ĐẠI HỌC AN GIANG ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CẤP CƠ SỞ Tên đề tài: PHÂN LẬP VÀ TUYỂN CHỌN MỘT SỐ DÒNG VI KHUẨN LACTIC SINH BACTERIOCIN ỨNG DỤNG TRONG THỨC ĂN THỦY SẢN - Chủ nhiệm đề tài: Ths BẰNG HỒNG LAM - Cơ quan chủ trì đề tài: TRƢỜNG ĐẠI HỌC AN GIANG An Giang, tháng 04 2012 UỶ BAN NHÂN DÂN TỈNH AN GIANG TRƢỜNG ĐẠI HỌC AN GIANG _ ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CẤP CƠ SỞ Tên đề tài: PHÂN LẬP VÀ TUYỂN CHỌN MỘT SỐ DÒNG VI KHUẨN LACTIC SINH BACTERIOCIN ỨNG DỤNG TRONG THỨC ĂN THỦY SẢN Cơ quan chủ trì đề tài Chủ nhiệm đề tài …………………………… ……………………… Cơ quan chủ quản …………………………… DANH SÁCH NHỮNG NGƯỜI THỰC HIỆN Chủ nhiệm đề tài Họ tên: Bằng Hồng Lam (tham gia thực Chương I, Chương II; Chương III Chương IV) Học vị: Thạc sĩ Cán tham gia nghiên cứu - Họ tên: Trịnh Hoài Vũ (tham gia thực Chương II: Mục 2.2.1 2.2.2) Học vị: Thạc sĩ - Họ tên: Vương Bảo Ngọc (tham gia thực Chương II: Mục 2.2.1 2.2.2) Học vị: Thạc sĩ - Họ tên: Trình Thị Thu Hồng (tham gia thực Chương II: Mục 2.2.1 2.2.2) Học vị: Trung cấp LỜI CẢM ƠN Xin chân thành cảm ơn Sở Khoa học Công nghệ tỉnh An Giang Ban Giám hiệu trường Đại học An Giang tạo điều kiện kinh phí cho tơi thực đề tài Cảm ơn quý đồng nghiệp công tác Bộ môn Công nghệ sinh học Trường Đại học An Giang tham gia thực đề tài tơi, nhiệt tình hỗ trợ tơi thời gian thực đề tài Cảm ơn quý Thầy Cô bạn bè chia sẽ, trao đổi kinh nghiệm, giúp đỡ suốt thời gian thực đề tài Xin chân thành cảm ơn với lòng trân trọng nhất! i TĨM LƢỢC Với mục đích tìm dịng vi khuẩn lactic có khả sản xuất bacteriocin ứng dụng thức ăn thủy sản, đề tài “Phân lập tuyển chọn số dòng vi khuẩn lactic sinh bacteriocin ứng dụng thức ăn thủy sản” thực Kết thu trăm bảy mươi (170) dòng vi khuẩn lactic từ rau muối chua, sản phẩm thịt cá lên men cơm mẻ thu tỉnh Đồng sông Cửu Long Trong tổng số 170 dòng vi khuẩn lactic phân lập kiểm tra tổng hợp bacteriocin có bốn mươi hai dịng vi khuẩn lactic có khả sinh bacteriocin ức chế tăng trưởng dòng vi khuẩn thị Lactobacillus sakei subsp sakei JCM 1157 Kết định danh kỹ thuật PCR giải trình tự đoạn gen 16S ribosomal RNA mười dịng vi khuẩn lactic có khả sinh bacteriocin cao cho thấy có bốn dịng: DC12, RM18, MC16 CC1 Lactobacillus plantarum; năm dòng: DC19, MA1, CC4, LX7 CM13 Pediococcus acidilactici; dòng: NC11 Enterococcus faecium Dịng RM18 dịng có khả sinh bacteriocin cao 10 dòng định danh sử dụng để sản xuất chế phẩm vi khuẩn lactic phối trộn với thức ăn để đánh giá hiệu chế phẩm vi khuẩn lactic trình ni cá tra nghệ giống qui mơ phịng thí nghiệm, kết thí nghiệm cho thấy chế phẩm vi khuẩn lactic có hiệu việc nâng cao khả tăng trưởng tỷ lệ sống cá tra nghệ thí nghiệm Kết nghiên cứu đề tài cho thấy chế phẩm sinh học có nguồn gốc từ vi khuẩn lactic có khả sinh bacteriocin ứng dụng ni trồng thủy sản Từ khóa: Vi khuẩn acid lactic, bacteriocin, Lactobacillus sakei subsp sakei JCM 1157, Lactobacillus plantarum, Pediococcus acidilactici, Enterococcus faecium ii MỤC LỤC Trang LỜI CẢM ƠN i TÓM LƢỢC ii MỤC LỤC iii DANH SÁCH BẢNG vii DANH SÁCH HÌNH viii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT ix LỜI MỞ ĐẦU CHƢƠNG I LƢỢC KHẢO TÀI LIỆU 1.1 Một số thực phẩm lên men truyền thống 1.1.1 Rau (quả) muối chua 1.1.2 Mắm cá 1.1.3 Chượp cá 1.1.4 Lạp xưởng bò 1.1.5 Nem chua 1.1.6 Cơm mẻ 1.2 Vi khuẩn lactic 1.2.1 Đặc điểm chung vi khuẩn lactic (LAB) 1.2.2 Các yếu tố cần thiết cho phát triển vi khuẩn lactic (LAB) 1.2.3 Phân bố vi khuẩn lactic (LAB) 1.2.4 Một số ứng dụng vi khuẩn lactic (LAB) 1.3 Sơ lƣợc vi khuẩn thị Lactobacillus sakei subsp sakei JCM 1157 1.4 Bacteriocin tình hình nghiên cứu bacteriocin đƣợc sinh tổng hợp vi khuẩn lactic nƣớc 1.4.1 Sơ lược bacteriocin 1.4.2 Phân loại bacteriocin iii 1.4.3 Những nghiên cứu nước bacteriocin tạo vi khuẩn lactic 1.5 Định danh vi khuẩn lactic kỹ thuật PCR giải trình tự đoạn gen 16S ribosomal RNA 10 1.5.1 Sơ lược kỹ thuật PCR 10 1.5.2 Sơ lược kỹ thuật 16S ribosomal RNA (16S rRNA) 11 1.5.3 Các nghiên cứu dùng kỹ thuật PCR giải mã trình tự 16S rRNA để định danh vi khuẩn lactic 11 1.6 Sơ lƣợc cá tra nghệ 12 1.6.1 Phân loại cá tra nghệ 12 1.6.2 Phân bố 12 1.6.3 Đặc điểm 13 1.7 Chế phẩm sinh học (probiotics) 13 1.7.1 Tổng quan probiotics 13 1.7.2 Tình hình sử dụng probiotics ni trồng thuỷ sản 14 1.7.3 Tình hình sử dụng chế phẩm vi khuẩn lactic nuôi trồng thủy sản 14 CHƢƠNG II PHƢƠNG TIỆN VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 2.1 Phƣơng tiện nghiên cứu 16 2.1.1 Thời gian địa điểm 16 2.1.2 Thiết bị dụng cụ 16 2.1.3 Hóa chất mơi trường 16 2.1.4 Vật liệu 16 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 17 2.2.1 Thu mẫu 17 2.2.2 Thí nghiệm Phân lập định danh sơ dòng vi khuẩn phân lập thuộc vi khuẩn lactic 18 iv 2.2.3 Thí nghiệm Khảo sát khả sinh bacteriocin dòng vi khuẩn lactic phân lập 20 2.2.4 Thí nghiệm Định danh mười dịng vi khuẩn lactic có khả sinh bacteriocin cao kỹ thuật PCR giải trình tự đoạn gen 16S rRNA 23 2.2.5 Thí nghiệm Sản xuất chế phẩm vi khuẩn lactic 23 2.2.6 Thí nghiệm Đánh giá hiệu chế phẩm vi khuẩn lactic q trình ni cá tra nghệ giống qui mơ phịng thí nghiệm 25 2.3 Phân tích số liệu 27 CHƢƠNG III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 28 3.1 Thí nghiệm 1: Phân lập định danh sơ dòng vi khuẩn phân lập đƣợc thuộc vi khuẩn lactic 28 3.1.1 Phân lập vi khuẩn từ rau muối chua; thịt, cá lên men cơm mẻ 28 3.1.2 Định danh sơ dòng vi khuẩn phân lập 29 3.2 Thí nghiệm 2: Kiểm tra khả sinh bacteriocin dòng vi khuẩn lactic (LAB) phân lập đƣợc 37 3.3 Thí nghiệm 3: Định danh mƣời dịng vi khuẩn lactic sinh bacteriocin cao kỹ thuật PCR giải trình tự đoạn gen 16S rRNA 41 3.3.1 Kết PCR 41 3.3.2 Kết giải trình tự đoạn gen 16S rRNA 41 3.4 Thí nghiệm 4: Sản xuất chế phẩm vi khuẩn lactic 43 3.5 Thí nghiệm 5: Đánh giá hiệu chế phẩm vi khuẩn lactic q trình ni cá tra nghệ giống 44 3.5.1 Các yếu tố môi trường 44 3.5.2 Tăng trưởng khối lượng 49 3.5.3 Tỷ lệ sống 50 CHƢƠNG IV KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 53 5.1 Kết luận 53 5.2 Đề nghị 54 v TÀI LIỆU THAM KHẢO 55 PHỤ LỤC A pc-1 PHỤ LỤC B pc-5 vi DANH SÁCH BẢNG Trang Bảng Nguồn gốc số dòng vi khuẩn phân lập 28 Bảng Đặc tính khuẩn lạc số dòng vi khuẩn phân lập 31 Bảng Đặc điểm hình thái số dòng vi khuẩn phân lập 33 Bảng Khả ức chế Lactobacillus sakei subsp sakei JCM 1157 dịng LAB có khả tạo bacteriocin phương pháp khuếch giếng thạch 37 Bảng Sự biến động yếu tố mơi trường q trình thí nghiệm 44 Bảng Kết tăng trưởng khối lượng cá sau q trình thí nghiệm 49 Bảng Tỷ lệ sống cá tra nghệ sau 60 ngày thí nghiệm 51 vii 27 RM2 0 0 28 RM3 29 RM4 0 0 30 RM5 2 1,67 31 RM6 0 0 32 RM7 0 0 33 RM8 0 0 34 RM9 0 0 35 RM10 0 0 36 RM11 1,33 37 RM12 0 0 38 RM13 0 0 39 RM14 0 0 40 RM15 0 0 41 RM16 0 0 42 RM17 0 0 43 RM18 8 7,67 44 RM19 0 0 45 RM20 0 0 46 RM21 2 1,67 47 RM22 0 0 48 RM23 0 0 49 RM24 0 0 50 RM25 0 0 51 RM26 0 0 52 RM27 1 1,67 53 RM28 0 0 54 RM29 2 1,67 55 RM30 0 0 56 RM31 0 0 Pl-33 57 MC1 2 1,67 58 MC2 0 0 59 MC3 0 0 60 MC4 0 0 61 MC5 0 0 62 MC6 0 0 63 MC7 2 1,67 64 MC8 0 0 65 MC9 1 1,33 66 MC10 0 0 67 MC11 0 0 68 MC12 0 0 69 MC13 0 0 70 MC14 0 0 71 MC15 2 2 72 MC16 5 5,33 73 MC17 0 0 74 MC18 0 0 75 MC19 0 0 76 DS1 1,33 77 DS2 0 0 78 DS3 0 0 79 DS4 0 0 80 DS5 2 1,67 81 DS6 0 0 82 DS7 1 1,33 83 DS8 0 0 84 DS9 1 1,33 85 DS10 0 0 86 DS11 1,33 Pl-34 87 DS12 0 0 88 DS13 0 0 89 DS14 0 0 90 DS15 0 0 91 MA1 4 4,33 92 MA2 0 0 93 MA3 0 0 94 MA4 0 0 95 MA5 2 1,67 96 MA6 0 0 97 MA7 2 1,67 98 MA8 0 0 99 MA9 0 0 100 MA10 0 0 101 MA11 0 0 102 MA12 0 0 103 MA13 0 0 104 MA14 0 0 105 MA15 2 1,67 106 MA16 0 0 107 CC1 6 5,67 108 CC2 0 0 109 CC3 0 0 110 CC4 6 5,67 111 CC5 0 0 112 CC6 0 0 113 CC7 0 0 114 CC8 2 1,67 115 CC9 0 0 116 CC10 0 0 Pl-35 117 CC11 0 0 118 CC12 0 0 119 CC13 0 0 120 CC14 2 1,67 121 CC15 0 0 122 CC16 0 0 123 CC17 0 0 124 CC18 0 0 125 LX1 0 0 126 LX2 1 1,33 127 LX3 0 0 128 LX4 0 0 129 LX5 2 1,67 130 LX6 0 0 131 LX7 4 4,33 132 LX8 0 0 133 LX9 0 0 134 LX10 0 0 135 NC1 0 0 136 NC2 0 0 137 NC3 1,33 138 NC4 0 0 139 NC5 0 0 140 NC6 0 0 141 NC7 0 0 142 NC8 0 0 143 NC9 0 0 144 NC10 0 0 145 NC11 5 5,33 146 NC12 0 0 Pl-36 147 NC13 0 0 148 NC14 2 1,67 149 NC15 0 0 150 NC16 0 0 151 CM1 0 0 152 CM2 0 0 153 CM3 2 1,67 154 CM4 0 0 155 CM5 2 1,67 156 CM6 0 0 157 CM7 0 0 158 CM8 2 1,67 159 CM9 0 0 160 CM10 0 0 161 CM11 0 0 162 CM12 0 0 163 CM13 5,33 164 CM14 0 0 165 CM15 0 0 166 CM16 0 0 167 CM17 0 0 168 CM18 2 1,67 169 CM19 0 0 170 CM20 0 0 Pl-37 Bảng PL Theo dõi yếu tố mơi trƣờng thí nghiệm Nhiệt độ (0C) Yếu tố pH NT Ngày DC A B C D DC A B C D 29/08/11 25,8 26,3 26,2 26,2 25,8 7,7 7,8 7,7 7,7 7,5 01/09/11 26,4 26,4 26,4 26,3 26,3 7,7 8,0 7,5 7,8 7,8 04/09/11 26,8 27,1 26,8 27,1 26,7 7,8 7,7 7,8 7,7 7,7 07/09/11 26,8 27,0 26,7 26,8 26,7 7,7 7,8 7,7 7,8 7,8 100/9/11 25,6 25,4 25,4 25,4 25,4 7,8 7,7 7,8 7,8 8,0 13/09/11 26,5 26,5 26,5 26,5 26,5 7,8 7,7 7,7 7,8 7,7 16/09/11 27,5 27,5 27,5 27,5 27,5 7,8 7,7 7,8 7,7 7,8 19/09/11 26,7 26,8 26,8 26,7 26,8 8,0 7,7 7,8 7,7 7,8 22/09/11 25,8 25,8 25,8 25,8 25,8 7,7 8,0 7,7 7,8 7,7 25/09/11 25,5 25,5 25,5 25,5 25,5 7,8 7,8 7,8 7,7 7,8 28/09/11 25,8 25,8 25,8 25,8 25,8 7,5 7,7 8,0 7,7 7,7 01/10/11 26,8 26,8 26,8 26,8 26,8 7,7 7,8 7,7 7,8 7,8 04/10/11 26,5 26,7 26,5 26,6 26,6 7,8 7,8 7,7 7,8 7,7 07/10/11 27,0 27,0 27,0 27,0 27,0 7,8 7,8 8,0 7,7 7,8 10/10/11 27,0 27,0 27,0 27,0 27,0 7,7 7,7 7,8 7,8 8,0 13/10/11 26,6 26,6 26,7 26,6 26,8 7,8 7,8 7,7 7,8 7,7 16/10/11 26,5 26,5 26,5 26,5 26,5 7,7 7,7 7,7 7,8 7,8 19/10/11 27,1 27,0 27,0 27,1 27,0 7,7 7,8 7,7 7,8 7,7 22/10/11 27,5 27,5 27,5 27,5 27,5 7,8 7,8 7,8 7,7 7,8 25/10/11 28,0 28,0 28,0 28,0 28,0 7,8 7,7 7,8 7,8 7,5 28/10/11 27,5 27,5 27,5 27,5 27,5 7,7 7,7 7,7 7,8 7,7 TB 26,7 26,7 26,7 26,7 26,6 7,8 7,8 7,8 7,8 7,8 Max 28,0 28,0 28,0 28,0 28,0 8,0 8,0 8,0 7,8 8,0 Min 25,5 25,4 25,4 25,4 25,4 7,5 7,7 7,5 7,7 7,5 Var 0,46 0,46 0,45 0,47 0,48 0,01 0,01 0,01 0,02 0,01 Sd 0,68 0,68 0,67 0,69 0,69 0,1 0,1 0,1 0,14 0,1 Pl-38 Bảng PL Theo dõi yếu tố mơi trƣờng thí nghiệm (tiếp theo) Yếu tố NT Ngày 29/08/11 NH4+/NH3 (mg/l) DO (mg/l) DC A 5 B C D DC 0,50 A 0,83 B 0,67 C 0,67 D 0,67 01/09/11 5 5 0,50 0,83 0,67 0,67 0,67 04/09/11 5 5 0,50 0,50 0,67 0,67 0,67 07/09/11 5 5 0,50 0,50 0,67 0,50 0,50 10/09/11 5 5 1,00 0,83 0,50 0,50 0,50 13/09/11 5 5 1,00 1,00 0,50 0,50 0,50 16/09/11 5 5 1,33 1,00 0,50 0,50 0,50 19/09/11 5 5 1,33 1,00 0,50 0,50 0,50 22/09/11 5 5 1,67 1,17 1,00 0,50 0,50 25/09/11 5 5 1,67 1,33 1,17 0,50 0,50 28/09/11 5 5 2,00 1,67 1,33 0,67 0,50 01/10/11 5 5 2,00 2,00 2,00 0,83 0,50 04/10/11 5 5 2,33 1,00 1,00 0,83 0,50 07/10/11 5 5 2,33 1,00 1,00 0,83 0,50 10/10/11 5 5 2,33 1,00 1,00 1,00 0,50 13/10/11 5 5 2,33 1,00 1,00 1,00 0,83 16/10/11 5 5 2,33 1,00 1,00 1,00 0,83 19/10/11 5 5 3,67 1,00 1,00 1,00 0,83 22/10/11 5 5 3,67 2,33 1,00 1,00 1,00 25/10/11 5 5 5,0 3,67 1,00 1,00 1,00 28/10/11 5 5 5,00 5,00 1,00 1,00 1,00 TB 5 5 2,05 1,41 0,91 0,75 0,64 Max 5 5 5,00 5,00 2,00 1,00 1,00 Min 5 5 0,50 0,50 0,50 0,50 0,50 Var 1,81 1,18 0,12 0,05 0,04 Sd 1,35 1,09 0,35 0,22 0,20 Pl-39 Bảng PL Theo dõi yếu tố mơi trƣờng thí nghiệm (tiếp theo) NO2- (mg/l) Yếu tố NT Ngày DC A B C D 29/08/11 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 01/09/11 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 04/09/11 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 07/09/11 0,50 0,50 0,00 0,00 0,00 100/9/11 0,50 0,50 0,00 0,00 0,00 13/09/11 0,50 0,50 0,00 0,00 0,00 16/09/11 0,50 0,50 0,17 0,17 0,17 19/09/11 0,50 0,50 0,17 0,17 0,17 22/09/11 0,67 0,50 0,17 0,17 0,17 25/09/11 0,67 0,50 0,50 0,33 0,17 28/09/11 0,67 0,50 0,50 0,33 0,17 01/10/11 0,67 0,67 0,50 0,33 0,17 04/10/11 0,67 0,67 0,50 0,33 0,33 07/10/11 0,83 0,67 0,67 0,33 0,33 10/10/11 0,83 0,67 0,67 0,50 0,33 13/10/11 1,00 0,83 0,67 0,50 0,33 16/10/11 1,00 0,83 0,67 0,50 0,50 19/10/11 1,00 0,83 0,67 0,67 0,50 22/10/11 1,00 1,00 0,83 0,67 0,50 25/10/11 1,00 1,00 0,83 0,67 0,50 28/10/11 1,00 1,00 0,83 0,67 0,50 TB 0,64 0,58 0,40 0,3 0,23 Max 1,00 1,00 0,83 0,67 0,50 Min 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 Var 0,11 0,09 0,10 0,06 0,04 Sd 0,33 0,30 0,32 0,25 0,19 Pl-40 Pl-41 Bảng PL Khối lượng cá tra tra nghệ nghiệm thức sau 30 ngày thí nghiệm Khối lượng cá tra nghệ sau 30 ngày thí nghiệm (g) NT Stt DC A B C D DC1 DC2 DC3 A1 A2 A3 B1 B2 B3 C1 C2 C3 D1 D2 D3 5,12 4,81 4,91 5,86 5,61 6,11 7,13 7,09 7,26 8,39 8,37 8,18 9,34 8,81 9,37 4,66 5,1 4,43 5,75 6,08 6,26 7,08 6,93 7,21 7,93 7,78 7,81 8,76 9,17 8,85 4,3 5,17 4,51 5,51 5,67 5,54 7,25 6,52 6,74 7,98 8,05 8,15 8,8 9,42 8,94 4,46 4,71 4,95 6,34 5,46 5,87 6,46 7,16 7,14 8,0 8,53 8,44 9,13 9,63 9,31 4,88 4,75 4,3 5,92 5,4 5,45 7,07 6,57 7,11 7,55 8,51 8,21 9,05 9,32 9,23 4,56 4,39 4,61 5,68 5,77 5,74 6,85 6,74 6,5 8,42 7,97 7,64 8,97 8,86 9,59 4,42 4,63 4,75 6,03 5,53 5,82 6,89 6,87 6,63 7,76 7,53 7,61 9,71 8,94 9,74 4,37 4,58 5,09 5,99 5,6 5,59 6,78 6,98 6,73 8,16 8,09 8,26 9,18 9,22 9,28 4,83 5,02 4,57 5,7 5,72 5,48 7,17 7,32 6,95 8,08 7,59 7,85 9,31 9,89 9,86 10 4,69 4,85 4,97 5,59 6,25 6,31 7,41 7,05 6,67 7,84 8,34 8,03 9,55 9,45 9,77 Trung 4,63 4,8 4,71 5,84 5,71 5,82 7,01 6,92 6,89 8,01 8,08 8,02 9,18 9,27 9,39 bình 4,71 5,79 6,94 8,04 9,28 Pl-41 Bảng PL Khối lượng cá tra tra nghệ nghiệm thức sau 60 ngày thí nghiệm Khối lượng cá tra nghệ sau 30 ngày thí nghiệm (g) NT Stt DC A 14,61 14,96 15,82 17,57 17,07 17,18 22,66 16,37 13,87 14,41 18,01 18,11 19,04 20,47 20,32 21,59 23,65 24,16 25,66 31,12 28,59 28,75 14,8 14,43 15,35 18,16 17,54 17,25 22,22 22,12 20,04 24,93 23,11 24,74 28,14 13,81 14,83 16,26 17,85 18,04 18,42 20,68 20,14 22,73 25,29 25,25 25,51 27,05 29,19 28,01 15,64 15,75 14,94 18,56 19,06 17,12 21,95 22,33 20,25 23,48 24,25 24,69 14,14 13,62 14,48 17,03 17,81 19,37 22,04 21,41 21,42 25,73 25,18 23,62 28,26 28,45 29,62 15,72 15,11 16,17 13,55 14,91 17,31 19,07 18,05 20,55 21,67 21,03 23,26 24,55 25,13 27,38 30,94 28,11 15,38 15,81 14,31 18,09 17,74 17,44 20,63 10 13,92 15,04 15,96 17,94 18,22 18,49 21,26 22,45 22,41 23,16 25,83 23,76 30,43 27,42 31,69 Trung 15,06 14,7 15,02 15,3 18,2 A2 A3 B1 B2 20,9 B3 C1 C2 D DC2 16,6 A1 C DC1 bình DC3 B C3 D1 20,19 24,24 24,85 23,42 27,67 27,1 D2 D3 30 29,67 27,4 29,91 27,09 27,47 17,21 17,86 21,14 20,87 21,82 24,09 23,39 24,24 30,28 28,06 27,94 20,5 20,13 24,6 23,71 24,02 30,44 29,26 27,39 17,87 17,99 18,02 21,36 21,27 21,16 24,24 24,43 24,48 28,79 28,64 28,86 17,96 21,26 24,38 28,76 Pl-42 III PHÂN TÍCH THỐNG KÊ Bảng 10 PC Phân tích phương sai kiểm định LSD 95% đường kính vịng vơ khuẩn tạo kiểm tra khả ức chế Lactobacillus sakei subsp sakei JCM 1157 dòng LAB có khả sinh bacteriocin phương pháp khuếch tán giếng thạch Analysis of Variance for Dk vong vo khuan Type III Sums of Squares Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value A:mau 356,802 41 8,70248 RESIDUAL 30,6667 84 0,365079 MAIN EFFECTS TOTAL (CORRECTED) 387,468 23,84 0,0000 125 Multiple Range Tests for Dk vong vo khuan by mau Method: 95.0 percent LSD mau Count LS Mean LS Sigma Homogeneous Groups NC3 1,33333 0,348845 X RM11 1,33333 0,348845 X MC9 1,33333 0,348845 X DS9 1,33333 0,348845 X DS1 1,33333 0,348845 X DC24 1,33333 0,348845 X DS7 1,33333 0,348845 X DC8 1,33333 0,348845 X DS11 1,33333 0,348845 X LX2 1,33333 0,348845 X MA5 1,66667 0,348845 X MA15 1,66667 0,348845 X MC1 1,66667 0,348845 X DC1 1,66667 0,348845 X NC14 1,66667 0,348845 X Pl-43 CM8 1,66667 0,348845 X CM5 1,66667 0,348845 X MC7 1,66667 0,348845 X RM5 1,66667 0,348845 X MA7 1,66667 0,348845 X LX5 1,66667 0,348845 X RM29 1,66667 0,348845 X CM3 1,66667 0,348845 X RM27 1,66667 0,348845 X CM18 1,66667 0,348845 X RM21 1,66667 0,348845 X DS5 1,66667 0,348845 X DC7 1,66667 0,348845 X CC8 1,66667 0,348845 X CC14 1,66667 0,348845 X RM3 2,0 0,348845 X MC15 2,0 0,348845 X DC19 4,33333 0,348845 X MA1 4,33333 0,348845 X LX7 4,33333 0,348845 X CM13 5,33333 0,348845 X NC11 5,33333 0,348845 X MC16 5,33333 0,348845 X CC4 5,66667 0,348845 X DC12 5,66667 0,348845 X CC1 5,66667 0,348845 X RM18 7,66667 0,348845 X Pl-44 Bảng 11 PC Phân tích phương sai kiểm định LSD 95% khối lượng cá sau 30 ngày thí nghiệm Analysis of Variance for 30 - Type III Sums of Squares Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value MAIN EFFECTS A:mau 38,8743 RESIDUAL 0,0283333 10 0,00571333 TOTAL (CORRECTED) 38,9472 9,71858 1701,03 0,0000 14 Multiple Range Tests for 30 by mau Method: 95.0 percent LSD mau Count LS Mean LS Sigma DC 4,71333 0,0436399 A 5,79 0,0436399 B 6,94 0,0436399 C 8,03667 0,0436399 D 9,28 0,0436399 Homogeneous Groups X X X X X Bảng 12 PC Phân tích phương sai kiểm định LSD 95% khối lượng cá sau 60 ngày thí nghiệm Analysis of Variance for 60 - Type III Sums of Squares Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value MAIN EFFECTS A:mau 346,936 RESIDUAL 0,2724 10 0,02724 TOTAL (CORRECTED) 347,208 86,7339 3184,06 0,0000 14 Multiple Range Tests for 60 by mau Method: 95.0 percent LSD mau Count LS Mean LS Sigma DC 15,02 0,095289 A 17,96 0,095289 B 21,2633 0,095289 C 24,3833 0,095289 D 28,7633 0,095289 Homogeneous Groups X X X X X Pl-45 Bảng 13 PC Phân tích phương sai kiểm định LSD 95% tốc độ tăng trưởng cá sau 60 ngày thí nghiệm Analysis of Variance for DWG - Type III Sums of Squares Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value A:mau 0,100227 3758,50 0,0000 RESIDUAL 0,0000666667 10 0,00000666667 MAIN EFFECTS TOTAL (CORRECTED) 0,100293 0,0250567 14 Multiple Range Tests for DWG by mau Method: 95.0 percent LSD mau Count LS Mean LS Sigma DC 0,23 0,00149071 A 0,28 0,00149071 B 0,34 0,00149071 C 0,39 0,00149071 D 0,463333 0,00149071 Homogeneous Groups X X X X X Bảng 14 PC Phân tích phương sai kiểm định LSD 95% tỷ lệ sống sót cá sau 60 ngày thí nghiệm Analysis of Variance for Ty le song - Type III Sums of Squares Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value MAIN EFFECTS A:mau 182,298 45,5745 30,73 0,0000 RESIDUAL 14,8297 10 1,48297 TOTAL (CORRECTED) 197,127 14 Multiple Range Tests for Ty le song by mau Method: 95.0 percent LSD mau Count LS Mean LS Sigma DC 90,0 0,703081 A 92,22 0,703081 B 95,5567 0,703081 C 96,67 0,703081 D 100,0 0,703081 Homogeneous Groups X X X X X Pl-46 ... đích tìm dịng vi khuẩn lactic có khả sản xuất bacteriocin ứng dụng thức ăn thủy sản, đề tài ? ?Phân lập tuyển chọn số dòng vi khuẩn lactic sinh bacteriocin ứng dụng thức ăn thủy sản? ?? thực Kết thu... ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CẤP CƠ SỞ Tên đề tài: PHÂN LẬP VÀ TUYỂN CHỌN MỘT SỐ DÒNG VI KHUẨN LACTIC SINH BACTERIOCIN ỨNG DỤNG TRONG THỨC ĂN THỦY SẢN Cơ quan chủ trì đề tài Chủ nhiệm đề tài ……………………………... pc-5 vi DANH SÁCH BẢNG Trang Bảng Nguồn gốc số dòng vi khuẩn phân lập 28 Bảng Đặc tính khuẩn lạc số dòng vi khuẩn phân lập 31 Bảng Đặc điểm hình thái số dòng vi khuẩn phân lập 33