Phân lập vi khuẩn lactic có khả năng sinh chất kháng khuẩn từ kiệu muối chua cơm mẻ lạp xưởng tươi và antibio

TRƢỜNG ĐẠI HỌC AN GIANG KHOA NÔNG NGHIỆP & TÀI NGUYÊN THIÊN NHIÊN BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC NGHIÊN CỨU KHOA HỌC PHÂN LẬP VI KHUẨN LACTIC CÓ KHẢ NĂNG SINH CHẤT KHÁNG KHUẨN TỪ KIỆU MUỐI CHUA, CƠM MẺ, LẠP XƢỞNG TƢƠI VÀ ANTIBIO Sinh viên thực hiện: PHAN THỊ BÍCH DUYÊN NGUYỄN THỊ PHƢƠNG THẢO An Giang, tháng 01 năm 2016 TRƢỜNG ĐẠI HỌC AN GIANG KHOA NÔNG NGHIỆP & TÀI NGUYÊN THIÊN NHIÊN BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC NGHIÊN CỨU KHOA HỌC PHÂN LẬP VI KHUẨN LACTIC CÓ KHẢ NĂNG SINH CHẤT KHÁNG KHUẨN TỪ KIỆU MUỐI CHUA, CƠM MẺ, LẠP XƢỞNG TƢƠI VÀ ANTIBIO Sinh viên thực hiện: PHAN THỊ BÍCH DUYÊN DSH113488 NGUYỄN THỊ PHƢƠNG THẢO DSH113512 GIÁO VIÊN HƢỚNG DẪN Ths Lê Hoàng Bảo Ngọc An Giang, tháng 01 năm 2016 Đề tài nghiên cứu khoa học” Phân lập vi khuẩn lactic có khả sinh chất kháng khuẩn từ kiệu muối chua, cơm mẻ, lạp xưởng tươi antibio”, sinh viên Phan Thị Bích Duyên Nguyễn Thị Phương Thảo thực hướng dẫn Lê Hồng Bảo Ngọc Tác giả báo cáo kết nghiên cứu Hội đồng Khoa học Đào tạo Khoa Nông nghiệp-TNTN, Trường Đại học An Giang thông qua ngày……………………… Chủ tịch hội đồng Phản biện Thƣ ký Phản biện Cán hƣớng dẫn Lời cảm ơn Trong suốt trình học tập nghiên cứu thực nghiên cứu khoa học này, nổ lực thân, chúng em hỗ trợ lớn tập thể thầy gia đình Qua chúng em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến: Cha mẹ với công ơn sinh thành, nuôi dưỡng chỗ dựa tinh thần vững quan tâm, lo lắng, tạo điều kiện vật chất tinh thần để chúng học tập, rèn luyện tự hồn thiện suốt thời gian qua Quý thầy cô Khoa Nông nghiệp – Tài nguyên Thiên nhiên Bộ môn Công nghệ Sinh học tận tình truyền đạt kiến thức, kinh nghiệm quý báu tạo điều kiện thuận lợi cho chúng em suốt trình học tập trường Cơ Lê Hồng Bảo Ngọc, Bằng Hồng Lam thầy Nguyễn Phú Thọ hết lòng hướng dẫn, nhiệt tình giúp đỡ đóng góp ý kiến cho chúng em suốt trình thực đề tài nghiên cứu Các thầy cơ, anh chị phịng thí nghiệm hỗ trợ tạo điều kiện thuận lợi để chúng em hoàn thành đề tài nghiên cứu Xin chân thành gửi lời chúc sức khỏe thành đạt đến tất quý thầy cô anh chị Trân trọng cảm ơn! An Giang, ngày 02 tháng 01 năm 2016 Sinh viên thực Phan Thị Bích Duyên Nguyễn Thị Phƣơng Thảo i Abstract Urgency: Food poisoning has become one of the urgent problems to be solved in order to protect human health, the use of food preservatives are restricted chemical use because of side effects its unprofitable Currently, many studies demonstrate that groups of lactic acid bacteria isolated in fermented foods have antibacterial fertility This form of antibacterial resistance to the development of pathogens and is used as food preservatives Research Objective: Isolation of lactic acid bacteria 1-2 infertile antimicrobial in food fermentation and lyophilized enzyme Research Contents: Isolation of lactic acid bacteria from fermented products procession, fresh rice, fresh sausage, antibio survey morphological characteristics, biochemical test isolates was finally examined antibacterial fertility of the isolates Method: Check the ability to produce antimicrobial substances from the isolates by diffusion method on agar wells combined with indicator bacteria Escherichia coli Survey process was conducted on two experiments: - Experiment 1: Isolation of lactic acid bacteria from the batch of rice, fresh sausage, pickled and antibio procession and perform a few checks identify lactic bacteria - Experiment 2: The survey and selection of lactic acid bacteria antibacterial born Results: Isolation of 11 strains of lactic acid bacteria and antimicrobial test, in which strains capable synthetic antibacterial agent: CM1, LX1, LX2, A1 and A2 but their antimicrobial properties rather weak Therefore, the lactic acid bacteria in samples isolated antibacterial born weak ii Tóm tắt Tính cấp thiết: Ngộ độc thực phẩm trở thành vấn đề cấp thiết cần giải để bảo vệ sức khỏe người, việc dùng chất bảo quản thực phẩm hóa học bị hạn chế sử dụng tác dụng phụ khơng có lợi Hiện nay, có nhiều nghiên cứu chứng minh nhóm vi khuẩn lactic phân lập loại thực phẩm lên men có khả sinh chất kháng khuẩn Dạng chất kháng khuẩn có khả chống lại phát triển mầm bệnh ứng dụng chất bảo quản thực phẩm Mục tiêu nghiên cứu: Phân lập 1-2 chủng vi khuẩn lactic có khả sinh chất kháng khuẩn thực phẩm len men men tiêu hóa đơng khơ Nội dung nghiên cứu: Phân lập chủng vi khuẩn lactic từ sản phẩm kiệu muối chua, cơm mẻ, lạp xưởng tươi, antibio, khảo sát đặc điểm hình thái, kiểm tra sinh hóa chủng phân lập được, cuối khảo sát khả sinh chất kháng khuẩn chủng phân lập Phương pháp: Kiểm tra khả sản sinh chất kháng khuẩn từ dòng phân lập phương pháp khuếch tán giếng thạch kết hợp với vi khuẩn thị Escherichia coli Quá trình khảo sát tiến hành thí nghiệm: - Thí nghiệm 1: Phân lập vi khuẩn lactic từ sản phẩm cơm mẻ, lạp xưởng tươi, kiệu muối chua antibio đồng thời thực vài kiểm tra nhận diện vi khuẩn lactic - Thí nghiệm 2: Khảo sát chọn lọc chủng vi khuẩn lactic sinh chất kháng khuẩn Kết quả: Phân lập 11 chủng vi khuẩn lactic kiểm tra tính kháng khuẩn, chủng có khả tổng hợp chất kháng khuẩn: CM1, LX1, LX2, A1 A2 tính kháng khuẩn chúng yếu Vì vậy, chủng vi khuẩn lactic mẫu phân lập sinh kháng khuẩn yếu iii Lời cam kết Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng Các số liệu công trình nghiên cứu có xuất xứ rõ ràng Những kết luận khoa học cơng trình nghiên cứu chưa công bố công trình khác Long Xuyên, ngày 02 tháng 01 năm 2016 Phan Thị Bích Duyên Nguyễn Thị Phương Thảo iv Mục lục Nội dung Trang Lời cảm ơn i Abstract ii Tóm tắt iii Lời cam kết .iv Mục lục v Danh sách hình viii Danh sách bảng ix Danh sách sơ đồ x Danh sách chữ viết tắt .xi Chƣơng Giới thiệu 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu nghiên cứu 1.3 Nội dung nghiên cứu Chƣơng Lƣợc khảo tài liệu 2.1 Giới thiệu cơm mẻ, kiệu muối chua, lạp xưởng tươi antibio 2.1.1 Cơm mẻ 2.1.2 Kiệu muối chua 2.1.3 Lạp xưởng tươi 2.1.4 Antibio 2.2 Vi khuẩn lactic 2.2.1 Đặc điểm chung 2.2.2 Sự phân bố 2.2.3 Phân loại vi khuẩn lactic 2.2.4 Nhu cầu dinh dưỡng vi khuẩn lactic 2.2.5 Những ứng dụng vi khuẩn lactic 10 2.3 Quá trình lên men lactic 12 2.4 Sơ lược vi khuẩn chủng thị Escherichia coli (E.coli) 13 2.4.1 Phân loại khoa học (Castellani & Chalmers, 1919) 13 2.4.2 Đặc điểm Escherichia coli (Nguyễn Lân Dũng, 2008) 13 v 2.5 Chất kháng khuẩn 15 2.5.1 Tính kháng khuẩn vi khuẩn lactic 15 2.5.2 Sơ lược bacteriocin 15 2.5.2.1 Giới thiệu chung 15 2.5.2.2 Phân loại 16 2.5.2.3 Cơ chế tác động 17 2.5.3 Lợi ích hạn chế bacteriocin 18 2.6 Tình hình nghiên cứu vi khuẩn lactic nước 19 2.6.1 Trong nước 19 2.6.2 Ngoài nước 20 Chƣơng Phƣơng pháp nghiên cứu 21 3.1 Địa điểm thời gian nghiên cứu 21 3.2 Mẫu nghiên cứu 21 3.3 Thiết kế nghiên cứu 21 3.4 Công cụ nghiên cứu 21 3.4.1 Thiết bị dụng cụ 21 3.4.2 Mơi trường hóa chất: 22 3.5 phương pháp nghiên cứu 23 3.5.1 Thí nghiệm 1: Phân lập vi khuẩn lactic từ mẫu: cơm mẻ, kiệu muối chua, lạp xưởng tươi, antibio quan sát đặc điểm hình thái, kiểm tra sinh hóa để nhận diện vi khuẩn lactic 23 3.5.1.1 Phân lập vi khuẩn lactic từ kiệu muối chua 23 3.5.1.2 Phân lập vi khuẩn lactic từ cơm mẻ, lạp xưởng tươi, antibio 24 3.5.1.3 Khảo sát đặc điểm hình thái kiểm tra sinh hóa để nhận diện vi khuẩn lactic 25 3.5.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát khả sinh chất kháng khuẩn chủng vi khuẩn lactic phân lập 28 3.5.2.1 Chuẩn bị dịch ly tâm vi khuẩn lactic 28 3.5.2.2 Chuẩn bị dịch huyền phù dòng thị vi khuẩn E.Coli 28 3.5.2.3 Thử khả sinh chất kháng khuẩn 28 Chƣơng Kết thảo luận 31 4.1 Kết phân lập chủng vi khuẩn lactic mẫu sản phẩm, quan sát hình thái khuẩn lạc, nhuộm gram kiểm tra sinh hóa chủng vi khuẩn phân lập 31 vi 4.1.1 Kết phân lập chủng vi khuẩn lactic mẫu sản phẩm quan sát hình thái khuẩn lạc chúng 31 4.1.2 Kết nhuộm gram kiểm tra sinh hóa chủng vi khuẩn phân lập 34 4.2 Kết xác định chọn lọc chủng vi khuẩn lactic có tính kháng khuẩn cao 40 Chƣơng Kết luận kiến nghị 44 5.1 Kết luận 44 5.2 Kiến nghị 44 Tài liệu tham khảo 45 vii Hình 11: Hình thái khuẩn lạc mẫu Antibio: A1 Hình 12: Hình thái khuẩn lạc mẫu cơm mẻ: CM2 33 Hình 13: Hình thái khuẩn lạc mẫu Kiệu: K1 Hình 14: Hình thái khuẩn lạc mẫu Lạp xƣởng tƣơi: LX1 4.1.2 Kết nhuộm gram kiểm tra sinh hóa chủng vi khuẩn phân lập đƣợc 34 Khi tiến hành nhuộm gram chủng vi khuẩn, cho thấy 11 chủng vi khuẩn phân lập gram dương có màu tím phẩm nhuộm crystal violet Dưới kính hiển vi 100X, tế bào vi khuẩn có dạng hình cầu que đơn, đơi kết thành chuỗi ngắn Qua phép thử catalase, 11 chủng vi khuẩn lactic cho kết âm tính (-) Q trình thử khả di động cho thấy tất chủng vi khuẩn phân lập khơng có khả di động Bảng 5: Kết kiểm tra sinh hóa chủng vi khuẩn lactic phân lập Mẫu phân lập Kiệu muối chua Cơm mẻ Lạp xƣởng Antibio Kí hiệu chủng Hình thái tế bào vi khuẩn Thử catalase Thử khả di động K1 Hình que dài, xếp thành chuỗi dài Âm tính (-) Khơng di động K2 Hình que dài, xếp thành chuỗi dài Âm tính (-) Khơng di động K3 Hình que dài, xếp thành chuỗi ngắn Âm tính (-) Khơng di động CM1 Hình que dài, xếp thành chuỗi dài Âm tính (-) Khơng di động CM2 Hình que dài, xếp thành chuỗi ngắn Âm tính (-) Khơng di động CM3 Hình que dài, xếp thành chuỗi ngắn Âm tính (-) Khơng di động LX1 Hình cầu, xếp thành cụm Âm tính (-) Khơng di động LX2 Hình cầu, xếp thành cụm Âm tính (-) Khơng di động LX3 Hình cầu, xếp thành cụm Âm tính (-) Khơng di động A1 Hình que ngắn, xếp thành chuỗi ngắn Âm tính (-) Khơng di động A2 Hình que ngắn, xếp thành chuỗi ngắn Âm tính (-) Khơng di động 35 Hình 15: Hình thái tế bào vi khuẩn chủng A1 Hình 16: Hình thái tế bào vi khuẩn chủng CM2 36 Hình 17: Hình thái tế bào vi khuẩn dịng K1 Hình 18: Hình thái tế bào vi khuẩn dịng LX1 37 Hình 19a Hình 19b Hình 19: Kết kiểm tra sinh hóa chủng A1 19a: kết kiểm tra catalase 19b: kết kiểm tra di động Hình 20a Hình 20b Hình 20: Kết kiểm tra sinh hóa chủng CM2 20a: kết kiểm tra catalase 20b: kết kiểm tra di động 38 Hình 21a Hình 21b Hình 21: Kết kiểm tra sinh hóa chủng K1 21a: kết kiểm tra catalase 21b: kết kiểm tra di động Hình 22a Hình 22b Hình 22: Kết kiểm tra sinh hóa chủng LX1 22a: kết kiểm catalase 22b: kết kiểm tra di động Dựa vào kết trên, ta kết luận: Những chủng vi khuẩn phân lập mang đặc điểm thiết yếu vi khuẩn lactic Tuy chủng vi khuẩn lactic phân lập giống đặc tính chúng khác hình dạng khuẩn lạc, tế bào nguồn gốc mẫu phân lập, chứng tỏ hệ vi khuẩn lactic sống khắp nơi đa dạng loài đặc trưng cho sản phẩm 39 4.2 Kết xác định chọn lọc chủng vi khuẩn lactic có tính kháng khuẩn cao Sau 24 giờ, 11 chủng vi khuẩn lactic phân lập từ mẫu sản phẩm có chủng: CM1, A1, A2, LX1 LX2 có xuất vùng sáng vô khuẩn xung quanh bề mặt vi khuẩn lactic với kích thước khác Đối với chủng vi khuẩn tạo vịng kháng khuẩn kích thước vòng kháng khuẩn thể bảng Bảng 6: Kích thước vịng kháng khuẩn chủng vi khuẩn Mẫu phân lập Chủng vi khuẩn Cơm mẻ Kích thƣớc vịng kháng khuẩn (mm) Lần Lần Lần Trung bình CM1 18 17 16 17 Lạp xƣởng tƣơi LX1 14 13 11 12,67 LX2 6,67 Antibio A1 13 11 10 11,33 A2 10 8,33 Theo kết ta thấy, có chủng vi khuẩn CM1, A1 LX1 có đường kính vịng sáng lớn 10 mm nên thể tính kháng mạnh chủng cịn lại Tiêu biểu, chủng CM1 có đường kính vịng sáng rộng 17mm, thể tính kháng mạnh Bên cạnh đó, chủng vi khuẩn lactic cịn lại LX2, A2 cho vịng vơ khuẩn nằm khoảng – 10 mm, biểu tính kháng khuẩn mức trung bình Trong đó, chủng LX2 mẫu Lạp xưởng tươi có vịng kháng khuẩn nhỏ (6,67mm) nên tính kháng khuẩn yếu so với chủng lại Như vậy, dòng vi khuẩn phân lập từ mẫu cơm mẻ men vi sinh đơng khơ (Antibio) có tính kháng khuẩn mạnh dòng phân lập từ nhiều nguồn khác Tuy nhiên, sau khoảng 48 vùng sáng đĩa kháng khuẩn nhanh chóng bị vi khuẩn E.coli mọc lên Nguyên nhân chủng phân lập có tính kháng khuẩn yếu Vì vậy, kết chưa phân lập dịng vi khuẩn lactic có tính kháng khuẩn mạnh 40 Hình 23: Vịng kháng khuẩn chủng A1 Hình 24: Vịng kháng khuẩn chủng A2 41 Hình 25: Vịng kháng khuẩn chủng CM1 Hình 26: Vịng kháng khuẩn chủng LX1 42 Hình 27: Vịng kháng khuẩn chủng LX2 Kết luận có chủng vi khuẩn lactic: CM1, LX1, LX2, A1 A2 sinh chất kháng khuẩn để chống lại vi khuẩn thị E.coli tính kháng khuẩn yếu 43 Chƣơng Kết luận kiến nghị 5.1 Kết luận Dựa vào kết thu sau trình tiến hành thí nghiệm, đưa kết luận rằng: Từ loại sản phẩm thực phẩm lên men loại men tiêu hóa phân lập 11 chủng vi khuẩn lactic sinh acid lactic có đặc tính thuộc hệ vi khuẩn lactic: Gram dương, catalase âm tính, khơng di động có phân giải CaCO3 Kết khảo sát tính kháng khuẩn phương pháp khuếch tán giếng thạch phát chủng vi khuẩn lactic: CM1, LX1, LX2, A1 A2 có tính kháng khuẩn tính kháng khuẩn chúng yếu Vì vậy, khẳng định vi khuẩn lactic mẫu phân lập có tính kháng khuẩn yếu 5.2 Kiến nghị Do điều kiện vật chất, phương tiện nghiên cứu, thời gian nghiên cứu phạm vi kiến thức cịn nhiều hạn chế nên khơng thể tiến hành phân lập chủng vi khuẩn lactic từ sản phẩm khác, khảo sát tìm hiểu số đặc tính ứng dụng vi khuẩn lactic nghiên cứu đời sống Vì vậy, đề nghị hướng nghiên cứu để phát triển thêm đề tài: - Phân lập thêm chủng vi khuẩn lactic khác từ loại sản phẩm lên men khác địa bàn khác - Phân lập, tìm dịng vi khuẩn lactic có tính kháng khuẩn mạnh loại thực phẩm lên men khác - Khảo sát mơi trường điều kiện thích hợp cho sản xuất chất kháng khuẩn vi khuẩn lactic 44 Tài liệu tham khảo Abee, Tjakko, G Beldman, B Broek, J Houben, R Nout., F Rombouts, S Schoustra, F.Voragen, J Wouters, A Noomen, P Walstra (1999) Food fermentation part 1, Department of Food Technology and Nutritional Sciences, Wageningen Agriculture University Axelsson, Lars (2004) Acid lactic Bacteria: Classification and Physiology Acid lactic Bacteria microbiological and Functional Aspects Third Edition, Revised and Expanded MATFORSK, Norwegian Food Research Institute, A°s, Norway, 19-67 Bernet-Camard, M.F, Liévin, V, Brassart, D, Neeser, J.R, Servin, A.L and Hudault, S (1997), The human Lactobacillus acidophilus strain la1 secretes a nonbacteriocin antibacterial substance(s) active in-vitro and in-vivo, Applied and Environmental Microbiology, 63(7), pp 2747-2753 Cintas, L.M., Herranz, C., Hernández, P.E., Casaus, M.P and Nes, L.F (2001), Review: Bacteriocins of lactic acid bacteria Food Sci Tech Int., 7, pp 281305 De Martinis, E.C.P., Públio, M.R.P., Santarosa, P.R and Freitas, F.Z (2001), Antilisterial activity of lactic acid bacteria isolated from vacuum-packaged Brazilian meat and meat products Braz J Microbiol., 32, pp 32-37 Deegan, L.H.; Cotter, P.D.; Hill, C and Ross, P (2006), Bacteriocins: Biological tools for bio-preservation and shelf-life extension Int Dairy J., 16, pp 10581071 Đinh Nguyễn Mỹ Hồng (2008) Phân lập tuyển chọn vi khuẩn sinh acid lactic cao từ cơm mẻ Luận văn tốt nghiệp kỹ sư ngành công nghệ sinh học Khoa NNTNTN, Trường đại học An Giang Đồng Thanh Thu (2003) Sinh hóa ứng dụng TPHCM NXB đại học quốc gia TPHCM Lê Văn Nhương (2009) Cơ sở công nghệ sinh học - tập 4: công nghệ vi sinh NXB Giáo dục Lê Văn Việt Mẫn (2004) Công nghệ sản xuất sản phẩm từ sữa thức uống – tập NXB Đại học Quốc gia Thành phố Hồ Chí Minh Lindgren, S.E., and & Dobrogosz, W.J 1990 Antagonistic activities of lactic acid bacteria in food and feed fermentations FEMS Microbiology Reviews 87, 149-164 Lương Đức Phẩm (2005) Vi sinh vật vệ sinh an tồn thực phẩm NXB Nơng nghiệp, Hà Nội 45 Nguyễn Đức Lượng (2004) Công nghệ vi sinh vật, NXB nông nghiệp, Hà Nội.Nguyễn Nguyễn Đức Lượng (2006) Công nghệ vi sinh - tập NXB đại học quốc gia TP Hồ Chí Minh Nguyễn Lân Dũng et al., (2000) Vi sinh vật học NXB giáo dục TP Hồ Chí Minh Nguyễn Lân Dũng et al., (1976) Một số phương pháp nghiên cứu vi sinh vật học tập NXB Khoa học Kỹ thuật Hà Nội Nguyễn Lân Dũng (2010) Vi sinh vật học NXB Giáo dục Hà Nội Nguyễn Văn Bá (2008) Bài giảng công nghệ sinh học truyền thống Tài liệu Internet Hoàng Văn Vinh 28.03.2006 Muốn nhận biết có mặt lactic acid [trực tuyến] Đọc từ: http://vietsciences.free.fr/nhipcaubandoc/thacmachoiai/Uffelmannacidlactic.htm (đọc ngày 15.04.2015) Huỳnh Ngọc Nhiều 23.01.2014 Phương pháp làm cơm mẻ [trực tuyến] Đọc từ: http://123doc.org/document/993301-tai-lieu-phuong-phap-lam-com-meppt.htm (đọc ngày 15.04.2015) Luanvan 28.03.2014 Phân lập tuyển chọn vi khuẩn Lactic có khả kháng khuẩn từ sản phẩm thủy sản lên men [trực tuyến] Đọc từ: http://luanvan.net.vn/luan-van/luan-van-phan-lap-va-tuyen-chon-vi-khuanlactic-co-kha-nang-khang-khuan-tu-cac-san-pham-thuy-san-len-men-60462/ (đọc ngày 15.04.2015) Menvisinh „khơng ngày tháng‟ Đặc tính điều trị chủng vi khuẩn sinh axit lactic [trực tuyến] Đọc từ: http://menvisinh.org/content/dac-tinh-dieu-tri-cua-chungvi-khuan-sinh-axit-lactic (đọc ngày 15.04.2015) Nguyễn Thị Thúy Hiền 25.12.2013 Tình hình nghiên cứu sản xuất ứng dụng probiotic thức ăn chăn nuôi [trực tuyến] Đọc từ: http://doc.edu.vn/tailieu/khoa-luan-tim-hieu-tinh-hinh-nghien-cuu-san-xuat-va-ung-dungprobiotic-trong-thuc-an-chan-nuoi-52391/ (đọc ngày 15.04.2015) Pharmacity.vn „không ngày tháng‟ Antibio Đọc từ: http://nhathuoconline.vn /antibio (đọc ngày 15.04.2015) Slideshare 17.12.2013 Phân lập, tuyển chọn chủng vi khuẩn lactic từ bã sắn [trực tuyến] Đọc từ: http://www.slideshare.net/ngocdungmt/lv-phn-lp-tuynchn-cc-chng-vi-khun-lactic-t-b-sn (đọc ngày 15.04.2015) Scribd „khơng ngày tháng‟ Các q trình lên men [trực tuyến] Đọc từ: http://vi scribd.com/doc/98362808/cac-qua-trinh-len-men#scribd.(đọc ngày 15.04.2015) Tài liệu-Ebook 25.04.2013 Ứng dụng công nghệ lên men lactic từ thịt heo tươi chế biến thực phẩm truyền thống [trực tuyến] Đọc từ: http://doc.edu.vn/tai-lieu/de-tai-ung-dung-cong-nghe-len-men-lactic-tu-thitheo-tuoi-trong-che-bien-thuc-pham-truyen-thong-10708 (đọc ngày 15.04.2015) 46 Yeutretho 20.09.2013 Làm để tránh nguy hại dùng đồ hộp [trực tuyến] Đọc từ: http://www.yeutretho.com/lam-sao-de-tranh-nguy-hai-khi-dung-do-hop170694.ytt (đọc ngày 15.04.2015) 47 ... Đề tài ? ?Phân lập vi khuẩn lactic rau muối chua, cơm mẻ, lạp xưởng tươi antibio có khả sinh chất kháng khuẩn? ?? thực Nhằm làm tiền đề cho vi? ??c nghiên cứu dịng vi khuẩn lactic có khả kháng khuẩn cao... cứu Phân lập - chủng vi khuẩn có khả sinh chất kháng khuẩn sản phẩm kiệu muối chua, cơm mẻ, lạp xưởng tươi, antibio khảo sát khả kháng khuẩn chúng 1.3 Nội dung nghiên cứu Phân lập chủng vi khuẩn. .. kiểm tra sinh hóa để nhận diện vi khuẩn lactic 23 3.5.1.1 Phân lập vi khuẩn lactic từ kiệu muối chua 23 3.5.1.2 Phân lập vi khuẩn lactic từ cơm mẻ, lạp xưởng tươi, antibio