Khảo sát mối tương quan giữa nồng độ ldl c định lượng trực tiếp và ƣớc tính theo công thức de cordova

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƢỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH NGUYỄN NGỌC TÂM KHẢO SÁT MỐI TƢƠNG QUAN GIỮA NỒNG ĐỘ LDL-C ĐỊNH LƢỢNG TRỰC TIẾP VÀ ƢỚC TÍNH THEO CƠNG THỨC DE CORDOVA LUẬN VĂN THẠC SĨ KỸ THUẬT Y HỌC CHUYÊN NGÀNH: XÉT NGHIỆM Y HỌC Mã số: 60720333 NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: TS.BS NGUYỄN MINH HÀ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - NĂM 2017 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan nghiên cứu riêng tơi Các tài liệu trích dẫn, số liệu luận văn hoàn toàn trung thực tuân theo yêu cầu luận văn nghiên cứu Luận văn chƣa đƣợc công bố cơng trình khác Tác giả luận văn NGUYỄN NGỌC TÂM MỤC LỤC TRANG PHỤ BÌA LỜI CAM ĐOAN MỤC LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG, BIỂU ĐỒ, HÌNH, SƠ ĐỒ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan Lipoprotein 1.1.1 Phân loại cấu trúc chức loại Lipoprotein máu 1.1.2 Vai trò LDL-c chế sinh xơ vữa bệnh động mạch vành 1.2 Phƣơng pháp xác định nồng độ LDL-c máu 10 1.2.1 Định lƣợng trực tiếp 10 1.2.2 Ƣớc lƣợng gián tiếp công thức 12 CHƢƠNG 2: ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 2.1 Đối tƣợng nghiên cứu 16 2.1.1 Dân số mục tiêu 16 2.1.2 Dân số chọn mẫu 16 2.2 Tiêu chuẩn chọn mẫu 16 2.2.1 Tiêu chuẩn đƣa vào 16 2.2.2 Tiêu chuẩn loại trừ 16 2.3 Cỡ mẫu 18 2.4 Thiết kế nghiên cứu 18 2.5 Các bƣớc tiến hành nghiên cứu 19 2.6 Kỹ thuật tiến hành nghiên cứu 20 2.6.1 Kỹ thuật định lƣợng 20 2.6.2 Hóa chất 22 2.6.3 Trang thiết bị 22 2.7 Phân tích xử lý số liệu 22 2.8 Vấn đề y đức nghiên cứu y sinh 24 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 25 3.1 Đặc tính chung mẫu nghiên cứu 25 3.2 Hệ số tƣơng quan LDL-c định lƣợng trực tiếp ƣớc tính theo cơng thức Friedewald de Cordova nhóm nghiên cứu 29 3.3 Độ tƣơng hợp LDL-c định lƣợng trực tiếp ƣớc tính theo cơng thức Friedewald de Cordova nhóm nghiên cứu 37 CHƢƠNG 4: BÀN LUẬN 47 4.1 Tƣơng quan LDL-c định lƣợng trực tiếp ƣớc tính theo công thức Friedewald de Cordova 49 4.1.1 Hệ số tƣơng quan r 49 4.1.2 Phƣơng trình hồi qui 55 4.2 Độ tƣơng hợp phƣơng pháp định lƣợng LDL-c trực tiếp ƣớc tính theo cơng thức Friedewald de Cordova 56 4.2.1 Sự tƣơng hợp phƣơng pháp định lƣợng trực tiếp ƣớc tính 56 4.2.2 So sánh mức độ tƣơng hợp hai cơng thức ƣớc tính 58 KẾT LUẬN 63 KIẾN NGHỊ 64 Tài liệu tham khảo Phụ lục Danh sách bệnh nhân nghiên cứu DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT ATP III : The Adult Treatment Panel III (Hƣớng dẫn Điều trị Ngƣời lớn III) 4AAP : 4-Aminoantipyrine CD : Cholesterol dehydrogenase CHE : Cholesterol esterase CHO : Cholesterol oxidase CM : Chylomicron CT : Công thức cs : Cộng CV % : Coefficient of variation (hệ số biến thiên %) DSBmT : N,N-bis-(4-sulfobutyl)-m-toluidine ĐLTT : Định lƣợng trực tiếp FDAOS : N-ethyl-N-(2-hydroxy-3-sulfopropyl)-3,5-dimethoxy-4-fluoraniline GPO : Glycerol-3-phosphate oxidase GTTB : Giá trị trung bình HDAOS : N-(2-hydroxy-3-sulfopropyl)-3,5-dimethoxyaniline HDL-c : High density lipoprotein-cholesterol (Lipoprotein tỷ trọng cao) LCAT : Lecithin cholesterol acyl transferase LDL-c : Low density lipoprotein-cholesterol (Lipoprotein tỷ trọng thấp) LDLdiff : Low density lipoprotein-cholesterol difference (Sự khác biệt giá trị LDL-c) LP : Lipoprotein LPL : Lipoproteinlipase MADB : N,N-bis(4-sulfobutyl)-3,5-dimethylaniline MeanLDLdiff: Mean Low density lipoprotein-cholesterol difference (Trung bình khác biệt giá trị LDL-c) NAD : Nicotinamid adenine dinucleotide NADH : Nicotinamid adenine dinucleotide hydrogen NCEP : The National Cholesterol Education Program (Chƣơng trình Giáo Dục Cholesterol Quốc gia) POD : Peroxidase SD : Standard deviation (Độ lệch chuẩn) TC : Total cholesterol (Cholesterol toàn phần) TG : Triglyceride TLPT : Trọng lƣợng phân tử VLDL-c : Very low density lipoprotein-cholesterol (Lipoprotein tỷ trọng thấp) DANH MỤC CÁC BẢNG, BIỂU ĐỒ, HÌNH, SƠ ĐỒ Bảng 1.1 : Apoprotein LP huyết thanh/ huyết tƣơng ngƣời Bảng 1.2 : Tính chất, thành phần hóa học LP Bảng 1.3 : Các mức nguy với mục đích hạ LDL-c Bảng 1.4 : Các cơng thức biến đổi khác ƣớc tính nồng độ LDL-c 13 Bảng 3.1 : Phân bố số lƣợng bệnh nhân vào nhóm nghiên cứu 25 Bảng 3.2 : Phân bố giới tính vào nhóm nghiên cứu 26 Bảng 3.3 : Phân bố tuổi vào nhóm nghiên cứu 26 Bảng 3.4 : Các giá trị thông số lipid nghiên cứu 27 Bảng 3.5 : Phân bố mẫu bệnh phẩm khơng thể ƣớc tính LDL-c 29 Bảng 3.6 : Tƣơng quan LDLĐLTT LDLƣớc tính nhóm 30 Bảng 3.7 : Các thông số so sánh mức độ tƣơng hợp phƣơng pháp ĐLTT ƣớc tính nồng độ LDL-c nhóm nghiên cứu 38 Bảng 4.1 : So sánh hệ số tƣơng quan (r) phƣơng pháp ĐLTT ƣớc tính LDL-c CT Friedewald de Cordova nghiên cứu khác 50 Bảng 4.2 : So sánh hệ số tƣơng quan (r) phƣơng pháp ĐLTT ƣớc tính LDL-c CT Friedewald de Cordova theo TG 53 Bảng 4.3 : Các phƣơng pháp ĐLTT LDL-c sử dụng nghiên cứu 55 Bảng 4.4 : So sánh trung bình khác biệt nồng độ LDL-c % số mẫu nằm khoảng giới hạn tƣơng hợp phƣơng pháp ĐLTT ƣớc tính số nghiên cứu 59 Biểu đồ 3.1 : So sánh nồng độ LDL-c theo phƣơng pháp khác nghiên cứu 28 Biểu đồ 3.2 : Tƣơng quan LDLĐLTT LDLFriedewald LDLĐLTT LDLde Cordova toàn nghiên cứu 31 Biểu đồ 3.3 : Tƣơng quan LDLĐLTT LDLFriedewald LDLĐLTT LDLde Cordova nhóm IA 32 Biểu đồ 3.4 : Tƣơng quan LDLĐLTT LDLFriedewald LDLĐLTT LDLde Cordova nhóm IB 33 Biểu đồ 3.5 : Tƣơng quan LDLĐLTT LDLFriedewald LDLĐLTT LDLde Cordova nhóm II 34 Biểu đồ 3.6 : Tƣơng quan LDLĐLTT LDLFriedewald LDLĐLTT LDLde Cordova nhóm IIIA 35 Biểu đồ 3.7 : Tƣơng quan LDLĐLTT LDLFriedewald LDLĐLTT LDLde Cordova nhóm IIIB 36 Biểu đồ 3.8 : Tƣơng quan LDLĐLTT LDLFriedewald LDLĐLTT LDLde Cordova nhóm IIIC 37 Biểu đồ 3.9 : Biểu đồ Bland-Altman so sánh độ tƣơng hợp nồng độ LDLĐLTTCT Friedewald LDLĐLTT-CT de Cordova toàn nghiên cứu 39 Biểu đồ 3.10: Biểu đồ Bland-Altman so sánh độ tƣơng hợp nồng độ LDLĐLTTCT Friedewald LDLĐLTT-CT de Cordova nhóm IA 40 Biểu đồ 3.11: Biểu đồ Bland-Altman so sánh độ tƣơng hợp nồng độ LDLĐLTTCT Friedewald LDLĐLTT-CT de Cordova nhóm IB 41 Biểu đồ 3.12: Biểu đồ Bland-Altman so sánh độ tƣơng hợp nồng độ LDLĐLTTCT Friedewald LDLĐLTT-CT de Cordova nhóm II 42 Biểu đồ 3.13: Biểu đồ Bland-Altman so sánh độ tƣơng hợp nồng độ LDLĐLTTCT Friedewald LDLĐLTT-CT de Cordova nhóm IIIA 43 Biểu đồ 3.14: Biểu đồ Bland-Altman so sánh độ tƣơng hợp nồng độ LDLĐLTTCT Friedewald LDLĐLTT-CT de Cordova nhóm IIIB 44 Biểu đồ 3.15: Biểu đồ Bland-Altman so sánh độ tƣơng hợp nồng độ LDLĐLTTCT Friedewald LDLĐLTT-CT de Cordova nhóm IIIC 45 Hình 1.1 : Cấu trúc phân tử lipoprotein Sơ đồ 2.1 : Sơ đồ tiến hành nghiên cứu 17 ĐẶT VẤN ĐỀ Thuyên tắc động mạch xơ vữa nhóm bệnh phổ biến tồn giới Ở Việt Nam nay, bệnh có xu hƣớng ngày tăng Nguyên nhân bệnh lắng động lipid lớp dƣới nội mạc động mạch vành làm hẹp dần lịng mạch máu Tình trạng xơ vữa động mạch tiến triển gây tắc lòng động mạch hình thành huyết khối gây thun tắc lịng mạch, dẫn đến biến chứng nhƣ nhồi máu não, nhồi máu tim, tắc động mạch chi,…hoặc tử vong Những yếu tố nguy bệnh tim mạch bao gồm béo phì, rối loạn lipoprotein, đái tháo đƣờng, hút thuốc tăng huyết áp Giữa nhiều yếu tố tham gia, nồng độ cholesterol máu cao, LDL-cholesterol (LDLc), đóng vai trị quan trọng khởi đầu tiến triển xơ vữa động mạch nhƣ biến chứng lâm sàng, nhƣ: nhồi máu tim (NMCT), đột quỵ, bệnh mạch máu ngoại vi suy tim Dựa vào thử nghiệm lâm sàng điều trị hạ LDL-c dự phòng tiên phát thứ phát, khuyến cáo ATP III (The Adult Treatment Panel III) Chƣơng trình Giáo dục Cholesterol Quốc gia (The National Cholesterol Education Program, NCEP) Hoa Kỳ năm 2001 [33] cập nhật năm 2004 xác định: LDL-c mục tiêu chính, giúp đánh giá nguy bệnh mạch vành, xơ vữa động mạch theo dõi điều trị rối loạn lipid máu, dựa mức nguy thấp, trung bình, cao cao với ngƣỡng đích khác Việc định lƣợng trực tiếp LDL-c thơng qua nhiều giai đoạn, địi hỏi kỹ thuật viên có kinh nghiệm, hóa chất trang thiết bị có chi phí cao, cịn nhiều khó khăn ứng dụng rộng rãi khoa/phòng xét nghiệm nhỏ số bệnh viện, đặc biệt bệnh viện tuyến tỉnh/huyện Xác định nồng độ LDL-c huyết công thức Friedewald đƣợc sử dụng từ năm 1970, đến sử dụng rộng rãi Phƣơng pháp ƣớc tính địi hỏi phải thực ba xét nghiệm định lƣợng cholesterol toàn phần (TC), triglyceride (TG) HDL-c mẫu huyết nhịn đói 10 giờ, nên phụ thuộc lớn vào độ xác xét nghiệm này, TG Giá trị LDL-c ƣớc tính khơng xác khơng tính đƣợc số trƣờng hợp: tăng chylomicrons, tăng lipoprotein týp III TG máu > 400 mg/dL (> 4,5 mmol/L) Ngồi ra, cơng thức Friedewald đƣợc khuyến cáo không sử dụng để ƣớc tính LDL-c cho bệnh nhân đái tháo đƣờng týp 2, hội chứng thận hƣ, bệnh gan nghiện rƣợu mãn tính Do đó, nhằm góp phần phát triển phƣơng pháp ƣớc lƣợng LDL-c mới, đơn giản, tin cậy, phục vụ cho lâm sàng, khắc phục hạn chế công thức Friedewald, đề tài “ Khảo sát mối tƣơng quan nồng độ LDL-c định lƣợng trực tiếp ƣớc tính theo cơng thức de Cordova” đƣợc thực Khoa Xét Nghiệm, Bệnh viện Nguyễn Tri Phƣơng với mục tiêu sau: MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU Khảo sát mối tƣơng quan nồng độ LDL-c định lƣợng trực tiếp ƣớc tính theo cơng thức de Cordova Khảo sát độ tƣơng hợp nồng độ LDL-c định lƣợng trực tiếp ƣớc tính theo cơng thức de Cordova So sánh độ tƣơng quan tƣơng hợp nồng độ LDL-c ƣớc tính theo cơng thức de Cordova Friedewald với phƣơng pháp định lƣợng trực tiếp 58 liệu chi tiết hữu ích hơn, từ phịng xét nghiệm bác sỹ lâm sàng có thêm sở vững để sử dụng CT Friedewald CT de Cordova 4.2.2 So sánh mức độ tƣơng hợp hai cơng thức ƣớc tính Trong phân nhóm, so với cặp phƣơng pháp ĐLTT - ƣớc tính cịn lại, cặp phƣơng pháp có độ tƣơng hợp cao thoả mãn tiêu chí: (1) giá trị trung bình khác biệt nồng độ LDL-c (mean LDLdiff) nhỏ hơn; (2) độ lệch chuẩn (SD LDLdiff) hẹp hơn; (3) % trung bình khác biệt nồng độ LDL-c (%mean LDLdiff) nhỏ hơn; (4) % số mẫu có kết vƣợt ngồi khoảng tƣơng hợp (±12% so với LDLĐLTT) Kết nghiên cứu cho thấy cặp phƣơng pháp ĐLTT - CT de Cordova có mức độ tƣơng hợp tốt xét tổng thể tất mức nồng độ TG Giá trị mean LDLdiff ĐLTT-Friedewald mean LDLdiff ĐLTT-de Cordova lần lƣợt 0,902 0,109 mmol/L Mean LDLdiff ĐLTT-de Cordova nghiên cứu tƣơng tự với số nghiên cứu khác giới (bảng 4.3), CT de Cordova ƣớc tính nồng độ LDL-c cao phƣơng pháp ĐLTT khoảng 0,1 mmol/L [19], [23], [31] Tuy vậy, mean LDLdiff ĐLTT-Friedewald có khác biệt lớn nghiên cứu, dẫn đến ƣớc tính cao [19], [31] thấp [23] phƣơng pháp ĐLTT Nguyên nhân khác nồng độ TG dân số khảo sát Xem xét % số mẫu nằm khoảng giá trị tƣơng hợp, kết nghiên cứu 4,5% 2,96%, tƣơng ứng với ƣớc tính CT Friedewald de Cordova Thơng số nghiên cứu tác giả Siddique lần lƣợt 19% 51% [31] Một số nghiên cứu khác khơng cơng bố số liệu Nhìn chung, liệu có thống CT de Cordova có mức tƣơng hợp tốt cơng thức Friedewald Tn thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 59 Bảng 4.4 So sánh trung bình khác biệt nồng độ LDL-c % số mẫu nằm khoảng giới hạn tƣơng hợp phƣơng pháp định lƣợng trực tiếp ƣớc tính số nghiên cứu Nghiên cứu Cỡ mẫu 587 ĐLTT – CT de Cordova % số mẫu Mean nằm LDLdiff khoảng giá (mmol/L) trị tƣơng hợp 0,18 - ĐLTT – CT Friedewald % số mẫu Mean nằm LDLdiff khoảng giá (mmol/L) trị tƣơng hợp -0,3 - Onyenekwu CP cs (2013) [23] Martins J cs (2013) [19] 14219 0,174 - 0,106 - Sidiqque cs (2014) [31] 400 0,13 19% 0,927 51% Nghiên cứu (2017) 912 0,109 2,96% 0,90 4,5% Khi sử dụng tiêu chí so sánh để xét riêng phân nhóm (bảng 3.7 4.3), trừ phân nhóm IIIC (TG > 15 mmol/L, khơng có tƣơng quan tƣơng hợp phƣơng pháp ĐLTT ƣớc tính), LDLde Cordova có mức tƣơng hợp tốt LDLFriedewald phân nhóm IB, II, IIIA IIIB, so với LDLĐLTT Ở nhóm IA (nồng độ TG thấp < 1,2 mmol/L), ƣớc tính CT Friedewald cho mức tƣơng hợp với ĐLTT tốt Kết luận ngƣợc với nghiên cứu tác giả Onyenekwu cs, mean LDLdiff ĐLTT-de Cordova nhóm TG < 1,13 mmol/L 0,19 mmol/L so với -0,33 mmol/L mean LDLdiff ĐLTT-Friedewald [23] Kết tác giả Onyenekwu có độ tin cậy cao 81% dân số khảo sát (473/587) có nồng độ TG < 1,13 mmol/L, so với nghiên cứu 6,9% (63/912) Cần thu thập thêm liệu phân nhóm để có kết luận vững Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 60 Ở phân nhóm IB, mức độ tƣơng hợp xét tiêu chí mean LDLdiff, SD LDLdiff % mean LDLdiff tƣơng đƣơng nhau; biểu đồ Bland-Atlman nhóm (biểu đồ 3.11) cho thấy xu hƣớng lệch dãy số liệu khơng có khác biệt hai CT Tuy nhiên, % số mẫu nằm khoảng giới hạn tƣơng hợp CT Friedewald 4,17% CT de Cordova 3,03% Do đó, nhìn chung, nhóm này, LDLde Cordova có mức tƣơng hợp tốt LDLFriedewald so với LDLĐLTT Ở phân nhóm II, tiêu chí so sánh cặp phƣơng pháp ĐLTT-CT de Cordova tốt cặp phƣơng pháp ĐLTT-CT Friedewald; biểu đồ BlandAtlman nhóm (biểu đồ 3.12) cho thấy xu hƣớng dãy số liệu LDLĐLTTFriedewald lệch dƣơng nhiều LDLĐLTT-de Cordova, dẫn đến CT Friedewald ƣớc tính nồng độ LDL-c xác cao CT de Cordova Ở phân nhóm IIIA, tiêu chí so sánh cặp phƣơng pháp ĐLTT-CT de Cordova tốt cặp phƣơng pháp ĐLTT-CT Friedewald; biểu đồ BlandAtlman nhóm (biểu đồ 3.13) cho thấy xu hƣớng dãy số liệu LDLĐLTTFriedewald lệch dƣơng nhiều LDLĐLTT-de Cordova; khoảng giới hạn tƣơng hợp rộng nhƣng % số mẫu nằm khoảng lại cao (5,98% so với 5,43%), dẫn đến CT Friedewald ƣớc tính nồng độ LDL-c xác cao CT de Cordova Bắt đầu từ phân nhóm IIIB đến IIIC, kết nghiên cứu phản ánh bất đồng xu hƣớng ƣớc tính nồng độ LDL-c hai CT Ở phân nhóm IIIB, dãy số liệu LDLĐLTT-Friedewald lệch dƣơng mạnh, dãy số liệu LDLĐLTT-de Cordova bắt đầu lệch âm Có 9,5% (10/105) mẫu khơng thể ƣớc tính LDL-c CT Friedewald kết LDL-c < (bảng 3.5) Khi xét đồng thời tiêu chí khác, cặp ĐLTT-CT de Cordova có độ tƣơng hợp tốt nhƣng bắt đầu xuất Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 61 hiện tƣợng ƣớc tính LDL-c cao phƣơng pháp ĐLTT, có lẽ ảnh hƣởng 13/105 mẫu có huyết đục đục Ở phân nhóm IIIC, dãy số liệu LDLĐLTT-Friedewald lệch dƣơng mạnh, dãy số liệu LDLĐLTT-de Cordova lệch âm mạnh Có 40,9% (9/22) mẫu khơng thể ƣớc tính LDL-c CT Friedewald kết LDL-c < (bảng 3.5) Giá trị mean LDLdiff SD LDLdiff lớn % số mẫu nằm khoảng giới hạn tƣơng hợp hai CT cao (đều 9,09%) Đặc biệt, biến thiên kết ƣớc tính (phản ánh qua thơng số %mean LDLdiff) hai CT không chấp nhận đƣợc (73,2% -129%) Vì vậy, mức nồng độ TG (> 15 mmol/L), không nên áp dụng CT hai CT để ƣớc tính nồng độ LDL-c, có liệu khác vững thuyết phục Tƣơng tự nhƣ phân nhóm IA, khuyết điểm nghiên cứu số lƣợng mẫu phân nhóm IIIC cịn ít, có 2,4% (22/912), lại có đến 15/22 mẫu có huyết thanh/huyết tƣơng đục đục (bảng 3.5) Vì vậy, trƣớc tiên, cần tăng số lƣợng mẫu nhóm để dãy số liệu có tính đại diện Mặt khác, phân nhóm IIIB, cần loại bỏ ảnh hƣởng tình trạng huyết thanh/huyết tƣơng đục (dù đƣợc pha loãng định lƣợng) lên kết định lƣợng LDL-c cách sử dụng phƣơng pháp ĐLTT siêu ly tâm Bởi này, ƣu điểm CT de Cordova (không bị phụ thuộc vào nồng độ TG) bị che lấp khuyết điểm kỹ thuật đo quang sinh hoá Nhìn chung, kết đánh giá độ tƣơng quan tƣơng hợp CT ƣớc tính LDL-c tác giả de Cordova so với phƣơng pháp ĐLTT nghiên cứu phù hợp với nghiên cứu trƣớc giới Đây nghiên cứu Việt Nam việc thẩm định lại công thức ƣớc tính LDL-c khác, ngồi CT kinh điển Friedewald Bên cạnh việc đối chiếu, so sánh với CT Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 62 Friedewald, nghiên cứu cung cấp thêm liệu chi tiết mức nồng độ TG mà số báo cáo khác giới không công bố, để từ rút đƣợc khuyến cáo sát sƣờn, phù hợp cho tình hình phịng xét nghiệm Việt Nam, nhƣ lƣu ý cho bác sĩ lâm sàng cân nhắc áp dụng cơng thức ƣớc tính Do hạn chế thời gian kinh phí thực hiện, thiết kế nghiên cứu nhiều khuyết điểm cần khắc phục, gồm: số lƣợng mẫu cho phân nhóm cịn chƣa hợp lý; chƣa khảo sát phân nhóm theo đặc điểm lâm sàng dân số nghiên cứu; chƣa khảo sát ảnh hƣởng hai biến số công thức de Cordova nồng độ TC nồng độ HDL-c; chƣa loại trừ đƣợc ảnh hƣởng tình trạng huyết thanh/huyết tƣơng đục lên kỹ thuật định lƣợng LDL-c chƣa khảo sát xác định điểm cắt nồng độ biến số (TG, cholesterol TP, HDL-c) kỹ thuật thống kê phù hợp Hy vọng kết thu đƣợc từ nghiên cứu kiện ban đầu cho nghiên cứu mở rộng Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 63 KẾT LUẬN Từ tháng 09/2016 đến tháng 04/2017, có tổng cộng 912 bệnh nhân thực xét nghiệm lipid máu Khoa Xét Nghiệm, bệnh viện Nguyễn Tri Phƣơng, thỏa tiêu chuẩn chọn mẫu, đƣợc đƣa vào nghiên cứu Qua trình khảo sát mức độ tƣơng quan tƣơng hợp nồng độ LDL-c ƣớc tính theo cơng thức de Cordova Friedewald với phƣơng pháp định lƣợng trực tiếp, nghiên cứu chúng tơi có kết luận đƣợc rút nhƣ sau: (1) Nồng độ LDL-c ƣớc tính cơng thức de Cordova tƣơng quan tuyến tính thuận, mức độ mạnh với LDL-cĐLTT mức nồng độ TG ≤ 15 mmol/L, với hệ số tƣơng quan r lớn 0,90 hệ số góc phƣơng trình hồi qui từ 0,82 - 1,09 (p < 0,001) (2) Phƣơng pháp ƣớc tính nồng độ LDL-c theo cơng thức de Cordova tƣơng hợp tốt với phƣơng pháp định lƣợng trực tiếp mức nồng độ TG ≤ 15 mmol/L, với giá trị tuyệt đối trung bình khác biệt LDL-c (mean LDLdiff) hai phƣơng pháp dao động từ 0,129 - 0,706 mmol/L, độ lệch chuẩn từ 0,18 - 0,55 mmol/L, khoảng tin cậy 95% hẹp, % trung bình khác biệt từ 3,2 - 18,4% (3) So sánh với phƣơng pháp ƣớc tính cơng thức “kinh điển” Friedewald, mức TG ≤ 15 mmol/L, phƣơng pháp ƣớc tính cơng thức de Cordova tƣơng hợp với phƣơng pháp định lƣợng trực tiếp tốt Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 64 KIẾN NGHỊ Từ kết thu đƣợc, nghiên cứu có số kiến nghị sau: (1) Ở phòng xét nghiệm không triển khai phƣơng pháp ĐLTT triển khai chọn lọc:  Đối với bệnh nhân có nồng độ TG < 4,5 mmol/L: nên áp dụng công thức Friedewald để ƣớc tính nồng độ LDL-c  Đối với bệnh nhân có nồng độ TG khoảng 4,5 - 15 mmol/L: nên áp dụng CT de Cordova để ƣớc tính nồng độ LDL-c  Đối với bệnh nhân có nồng độ TG > 15 mmol/L: khuyến cáo sử dụng phƣơng pháp siêu ly tâm để định lƣợng trực tiếp LDL-c (2) Trong khuôn khổ nghiên cứu hạn chế kinh phí thời gian thực hiện, cỡ mẫu nên đƣợc mở rộng mối tƣơng quan nồng độ LDLĐLTT - CT de Cordova cần đƣợc khảo sát:  Tăng cỡ mẫu  Theo nồng độ TC HDL-c  Trên đối tƣợng bệnh nhân có rối loạn lipid máu khác (đái tháo đƣờng, hội chứng thận hƣ ) bị ảnh hƣởng tuổi, giới tính Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 65 TÀI LIỆU THAM KHẢO A TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT Nguyễn Thị Cẩm Châu, Vũ Quang Huy (2010), “So sánh hai phƣơng pháp định lƣợng LDL-c trực tiếp gián tiếp”, Tạp chí Y học TP.HCM, tập 14 (3), tr.163-168 Nguyễn Nghiêm Luật (2012), Hóa sinh, NXB Y học, Hà Nội, tr 144-146 Phạm Đình Lựu (2012), Sinh lý bệnh học, NXB Y học, TP.HCM, tr 215-219 Lê Xuân Trƣờng (2015), Hóa sinh lâm sàng, NXB Y học, TP.HCM, tái lần thứ 1, tr 141-146 B TÀI LIỆU TIẾNG ANH Ahmadi SA, Boroumand MA, Moghaddam KG et al (2008), “The impact of low serum triglycerides on low density lipoprotein cholesterol estimation”, Arch Iranian Med., vol 11, pp 318-21 Allain CC, Poon LS, Chan CSG et al (1974), “Enzymatic determination of total cholesterol”, Clin Chem., pp 20:470-475 Ananandaraja S, Narang R, Godeswar R et al (2005), “Low density lipoprotein cholesterol estimation by a new formula in Indian population”, Int J Cardiol., vol 102, pp 117-20 Bachorik PS and Ross JW (1995), “National Cholesterol Education Program recommendations for measurements of low-density lipoprotein cholesterol: executive summary National Cholesterol Education Program Working Group on lipoprotein measurements” Clin Chem, vol 41, pp 1414–1420 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 66 Brunzel JD, Davidson M et al (2008),“Lipoprotein Management in Patients With Cardiometabolic Risk”, Consensus statement from the American Diabetes Association anh the American College of Cardiology Foundation Diabetes care, vol 31, pp 811 – 823 10 Canon CP, Braunwald E, McCabe CH et al (2004), “ Pravastatin or Atorvastatin Evaluation and Infection Therapy-Thrombolysis in Myocardial Infarction 22 Investigators”, Intensive versus moderate lipid lowering with statins after acute coronary syndromes N Engl J Med, vol 350, pp 1495-1504 11 Chen Y, Zhang X and Pan B (2010), “A modified formula for calculating low density lipoprotein cholesterol values”, Lipids Health Dis., vol 9, pp 52-57 12 Cordova CM and Cordova MM (2013), “A new accurate simple formula for LDL-cholesterol estimation based on directly measured lipids from alarg cohort”, Ann Clin Biochem., vol 50, pp 13-9 13 Dansethakul P, Thapanathamchai L, Saichanma S et al (2015), “Determining a new formula for calculating low-density lipoprotein cholesterol: data mining approach”, EXCLI Journal, vol.14, pp.478-483 14 Friedewald WT, Levy RI and Fredrickson DS (1972), “Estimation of the concentration of low-density lipoprotein cholesterol in plasma, without use of preparative ultracentrifuge”, Clin Chem., vol 18, pp 449-02 15 Grundy SM, Cleeman JI, Merz CNB et al (2004),“Implications of recent clinical trials for the National Cholesterol Education Program Adult Treatment Panel III guidelines”, Cir., vol 110, pp 227 – 39 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 67 16 Hattori Y, Suzuki M, Tsushima M et al (1998), “Development of approximate formula for LDL-cholesterol, LDL-apoB and LDL-cho/LDLapoB as indices of hyperapobetalipoproteinemia and small dense LDL”, Atherosclerosis, vol 138, pp 289-99 17 Heart Protection Study Collaborative Group (2002), MRC/BHF Heart Protection Study of cholesterol lowering with simvastatin in 20 536 high – rish individuals: a randomized placebo – controlled trial Lancet, Vol 360(9326), pp – 22 18 Hichem B, Mouna Z, Radia S et al (2016) “The best formula for estimating the lowdensity lipoprotein cholesterol on a North African population” Posted online Oct 26, 2016; doi: http://dx.doi.org/10.1101/083790 19 Martins J, Olorunju SAS, Murray LM et al (2015), “Comparision of equations for the calculation of LDL-cholesterol in hospitalized patients”, Clinica Chimiaca Acta, vol.444, pp.137-142 20 Miller WG, Myers GL, Sakurabayashi I et al (2010), “Seven direct methods for measuring HDL and LDL cholesterol compare with ultracentrifugation reference measurement procedures”, Clin Chem., vol.56, pp 977-986 21 Nakamura M, Kayamori Y, Sato S et al (2006), “Focus on cholesterol research”, MA Kramer, ed., Nova Science Publishers, Inc., New York 22 Nauck M, Warnick GR, Rifai N (2002), “Methods for measurement of LDLcholesterol: a critical assessment of direct measurement by homogeneous assays versus calculation”, Clin Chem., vol 48, pp 236-254 23 Onyenekwu CP, Hoffmann M, Smit F, et al (2014), “Comparision of LDLcholesterol estimate using the Friedewald formula and newly proposed de Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 68 Cordova formula with a directly measured LDL-cholesterol in a healthy South African population”, Ann Clin Biochem, vol.51(6), pp 672-679 24 Patil M, Jayaram S (2016), “Asseement of various calculation methods for measurement of LDL-Cholesterol”, Int J Clin Biochem Res, vol 3(4), pp 402-408 25 Planella T, Cortes M, Martinez-Bur C et al (1997), “Calculation of LDLcholesterol by using apolipoprotein B for classification of nonchylomicronemic dyslipemia”, Clin Chem., vol 43, pp 808-15 26 Puavillai W and Laorugpongse D (2004), “Is calculated LDLc by using the new modified Friedewald equation better than the standard Friedewald equation”, J Med Assoc Thai., vol 87, pp 589-93 27 Riesen WF, Lipi metabolism In: Thomas L., ed Clinical laboratory diagnostics Use and assessment of clinical laboratory results Frankkuft/Main: TH-Books Verlagsgesellschaft, 1998:169-171.(cho167169;hdl171-173) 28 Saeidullah M, Rahman M and Khan MAH, (2009), “A simple modification of Friedewald’s formula to calculate low-density lipoprotein cholesterol up to serum triglycerides concentration of 1000 mg/dl”, Bang J Med Biochem., vol 2, pp 62-5 29 Sever PS, Dahlof B, Poulter NR et al (2003), “Prevention of coronary and stroke events with atorvastatin in hypertensive patients who have average of lower-than-average cholesterol concentrations, in the Anglo- Scandinavian Cardiac Outcomes Trial-Lipid Lowering Arm (ASCOTLLA): a multicenter randomized controlled trial”, Lancet., vol 361, pp 1149-1158 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 69 30 Shephered J, Blauw GJ, Murphy MB et al (2002), “Pravastatin in the elderly individuals at risk of vascular disease (PROSPER): a randomized controlled trial”, PROspective Study of Pravastatin in the Elderly at Risk Lancet, vol 360, pp 1623 – 1630 31 Siddique AH, Saiedullah M, Chowdhury N et al (2014), “ Evaluation of performance of the newly developed de Cordova’s formula for calculation of low-density lipoprotein cholesterol without use of triglycerides”, Journal of Enam Medical College, vol.4(1), pp.10-14 32 The ALLHAT Officers and Coordinators for the ALLHAT Collaborative Research Group (2002), “The Antihypertensive and Lipid-Lowering Treatment to Prevent Heart Attack Trial (ALLHAT-LLT)”, JAMA., vol 288, pp 2981-2997 33 Third Report of the National Cholesterol Education Program (NCEP) (2002), Expert Panel on Detection, Evulation, and Treatment of High Blood Cholesterol in Adults (Adult Treatment Panel III) final report Circulation, vol 106, pp 3143 – 3421 34 Tietz NW (1995), Clinical guide to laboratory tests, 3rd ed Philadelphia: WB Saunders Company, pp 610-611 35 Vujoic A, Kotur-Stevuljevic J,Spasic S et al (2010), “ Evaluation of different formulas for LDLc calculation”, Lipids Health Dis., vol 9, pp 27-35 36 Wagner AM, Zapico E, Boner R et al (2003), “The effect of VLDL particles on the accuracy of a direct LDL-cholesterol method in type diabetic patients”, Clin Chem., vol 36, pp 177-83 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 70 PHỤ LỤC PHIẾU THU THẬP THÔNG TIN BỆNH NHÂN Ngày: _/ _/20_ _ Mã số: _ _ _ _ Họ tên bệnh nhân: Tuổi: Giới tính: Dân tộc: Quốc tịch: Đối tƣợng: Ngoại trú Nội trú Khoa: Ngày nhập viện: Tiền sử (nếu có): Chẩn đốn lâm sàng: Xét nghiệm sinh hóa thực hệ thống AU680 – Beckman Coulter: Cholesterol toàn phần: mmol/L Triglyceride : mmol/L HDL-c : mmol/L LDL-c : mmol/L Khác: Phân loại nhóm: Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 71 PHỤ LỤC THÀNH PHẦN HĨA CHẤT SỬ DỤNG TRONG NGHIÊN CỨU  Hóa chất chuẩn nội kiểm Chất chuẩn ( System Calibrator), code 66300 HDL-C Calibrator, code ODC0011 LDL-C Calibrator, code ODC0012 HDL-C/ LDL-C Control Serum, code ODC0005 Control Serum 1, code ODC0003 Control Serum 2, code ODC0004  Thuốc thử định lƣợng TC: Phosphate buffer (pH 6,5) 103 mmol/L 4-Aminoantipyrine 0,31 mmol/L Phenol 5,2 mmol/L Cholesterol esterase ≥ 0,2 kU/L (3,3 µkat/L) Cholesterol oxidase ≥ 0,2 kU/L (3,3 µkat/L) Peroxidase ≥ 10 kU/L (166 µkat/L) Chất bảo quản  Thuốc thử định lƣợng TG: PIPES buffer (pH 7,5) 50 mmol/L Mg2+ 4,6 mmol/L MADB 0,25 mmol/L 4-Aminoantipyrine 0,5 mmol/L ATP 1,4 mmol/L Lipases 1,5kU/L (25 µkat/L) Glycerol kinase 0,5 kU/L (8,3 µkat/L) Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 72 Peroxidase 0,98 kU/L (16,3 µkat/L) Ascorbate oxidase 1,48 kU/L (24,6 µkat/L) Glycerol-3-phosphate oxidase 1,48 kU/L (24,6 µkat/L) Chất bảo quản  Thuốc thử định lƣợng HDL-c: Anti human-β-lipoprotein antibody variable Cholesterol esterase 0,8 IU/mL Cholesterol oxidase 4,4 IU/mL Peroxidase 1,7 IU/mL Ascorbate oxidase 2,0 IU/mL Good’s buffer (pH 7,0) 30 mmol/L F-DAOS 0,20 mmol/L 4-Aminoantipyrine 0,67 mmol/L Chất bảo quản Chất tẩy  Thuốc thử định lƣợng LDL-c: Cholesterol esterase 3,7 IU/mL Cholesterol oxidase 3,7 IU/mL Peroxidase 4,9 IU/mL Sodium azide 0,1 % Good’s buffer (pH 6,8) 25 mmol/L 4-Aminoantipyrine 0,8 mmol/L Catalase 743 IU/mL HDAOS 0,47 IU/mL Chất tẩy Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn ... de Cordova Khảo sát độ tƣơng hợp nồng độ LDL- c định lƣợng tr? ?c tiếp ƣ? ?c tính theo c? ?ng th? ?c de Cordova So sánh độ tƣơng quan tƣơng hợp nồng độ LDL- c ƣ? ?c tính theo c? ?ng th? ?c de Cordova Friedewald... LDL? ?LTT LDLde Cordova c? ? mối tƣơng quan nghịch, m? ?c độ yếu (r = -0,29) 3.3 ĐỘ TƢƠNG HỢP GIỮA LDL- C ĐỊNH LƢỢNG TR? ?C TIẾP VÀ Ƣ? ?C TÍNH THEO C? ?NG TH? ?C FRIEDEWALD VÀ DE CORDOVA Ở C? ?C NHÓM NGHIÊN C? ??U... lƣợng tr? ?c tiếp ƣ? ?c tính theo c? ?ng th? ?c Friedewald de Cordova nhóm nghiên c? ??u 29 3.3 Độ tƣơng hợp LDL- c định lƣợng tr? ?c tiếp ƣ? ?c tính theo c? ?ng th? ?c Friedewald de Cordova nhóm nghiên c? ??u