luận văn
Trang 1BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠ I HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI
Trang 2Lời cam ñoan
Tôi xin cam ñoan các số liệu và kết quả nghiên cứu ñược nêu trong luận văn là trung th ực và ch ưa từng ñược ai công b ố trong b ất kì công trình nào khác
Tôi xin cam ñoan rằng các thông tin trích d ẫn trong lu ận văn ñều ñã ñược chỉ rõ nguồn gốc
Tác giả luận văn:
Vũ Thị Chuyên
Trang 3Lời cảm ơn
ðể hoàn thành ñề tài này ngoài sự nỗ lực của bản thân, tôi ñã nhận ñược sự giúp ñỡ của rất nhiều các cá nhân và tập thể Do vậy tôi muốn bày tỏ lòng biết ơn tới tất cả các nhân, t ập thể, các ñơn vị ñã giúp ñỡ tôi trong quá trình thực hiện ñề tài
Trước hết tôi xin bày t ỏ lòng bi ết ơn sâu s ắc tới người cô h ết sức tận tình và chu ñáo ñó là PGS.TS Ngô Bích Hảo Cô ñã truyền ñạt cho tôi những kiến thức và kinh nghiệm quí báu cũng như lòng say mê nhiệt tình nghiên cứu khoa học
Tôi xin chân thành cám ơn các thầy cô giáo trong khoa Nông học - Trường ðại học Nông nghi ệp Hà N ội ñặc biệt là các th ầy cô giáo trong b ộ môn Bệnh cây- Nông dược, các anh chị em ñang làm việc tại Trung tâm Nghiên cứu bệnh cây nhiệt ñới Các ñồng chí, ñồng nghiệp công tác tại Trung tâm Khuyến nông Hải Phòng, Chi cục BVTV Hải Phòng, Chi cục Kiểm dịch vùng I luôn sẵn lòng tạo mọi ñiều kiện thuận lợi ñể cho tôi có thể hoàn thành luận văn nghiên cứu khoa học
Cám ơn các bạn cùng tham gia ñề tài khoa học ñã hỗ trợ tôi trong những lúc cần thiết
Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc ñến gia ñình, người thân ñã tạo mọi ñiều kiện cho tôi yên tâm công tác và học tập Một lần nữa tôi xin chân thành cảm cám ơn!
Hà Nội, ngày 17 tháng 12 năm 2009
Tác giả luận văn:
Vũ Thị Chuyên
Trang 4MỤC LỤC
Lời cam ñoan……… i
Lời cảm ơn……… ii
Mục Lục……… iii
Danh mục các chữ viết tắt……… vi
Danh mục các bảng……… vii
Danh mục ñồ thị……… ix
1 Mở ñầu 1
1.1 Tính cấp thiết của ñề tài 1
1.2 Mục ñích - yêu cầu của ñề tài .2
1.2.1 Mục ñích 2
1.2.2 Yêu cầu 3
2 Tình hình nghiên cứu trong và ngoà i nước 4
2.1 Tình hình nghiên cứu ngoài nước 4
2.1.1 Bệnh lở cổ rễ và thối nâu (Rhizoctonia solani) 4
2.1.2 Bệnh ñốm vòng 8
2.1.3 Bệnh thối hạch 12
2.1.4 Bệnh sưng rễ cải bắp 14
2.2 Tình hình nghiên cứu trong nước 16
2.1.1 Bệnh lở cổ rễ và thối nâu 16
2.1.2 Bệnh ñốm vòng 17
2.1.3 Bệnh thối hạch 18
2.1.4 Bệnh sưng rễ cải bắp 18
3 Vật liệu và phương pháp nghiên cứu 20
3.1 ðối tượng nghiên cứu 20
3.2 ðịa ñiểm và thời gian nghiên cứu 20
Trang 53.3 Vật liệu nghiên cứu 20
3.4 Nội dung nghiên cứu 20
3.5 Phương pháp nghiên cứu 21
3.5.1 Phương pháp nghiên cứu ngoài ñồng. 21
3.5.1.1 Phương pháp ñiều tra bệnh hại lá cây cải bắp 21
3.5.2 Phương pháp nghiên cứu trong phòng. 22
3.6 Phương pháp tính toán và xử lý số liệu 26
3.6.1 Các công thức tính toán 26
3.6.2 Xử lý thống kê 28
4 Kết quả nghiên cứu và thảo luận 29
4.1 Tình hình bệnh hại trên cây Cải bắp tại Hải Phòng 29
4.1.1 Thành phần bệnh hại cây Cải bắp vụ ñông 2008 và vụ xuân 2009 29
4.1.2 ðặc ñiểm triệu chứng của một số bệnh nấm hại cây Cải bắp 31
4.1.3 Diễn biến một số bệnh nấm chủ yếu hại cải bắp vụ ñông 2008 và vụ xuân năm 2009 tại Hải Phòng. 34
4.1.4 Mức ñộ nhiễm bệnh sưng rễ, lở cổ rễ, ñốm vòng và thối hạch trên một số giống cải bắp trồng khảo nghiệm vụ ñông năm 2008 tại xã Hồng Phong – An Dương- Hải Phòng 40
4.1.5 Ảnh hưởng của công thức luân canh ñến mức ñộ nhiễm bệnh sưng rễ, lở cổ rễ, ñốm vòng và thối hạch tại Hải Phòng vụ ñông năm 2008. 42
4.2 Kết quả nghiên cứu trong phòng thí nghiệm 44
4.2.1 Nghiên cứu một số ñặc ñiểm hình thái và sinh học của một số loài nấm chính hại cây cải bắp 44
4.2.2 Nghiên cứu một số ñặc ñiểm sinh học của nấm Alternaria brassicae, Alternaria brassicicola và nấm Sclerotinia sclerotiorum 51
4.3 Nghiên cứu một số biện pháp phòng trừ bệnh 56
4.3.1 Khảo sát hiệu quả của chế phấm nấm Trichoderma hazianum và
Trang 6chất kháng Bion trong phòng trừ bệnh lở cổ rễ, ñốm vòng, thối hạch trên cải
bắp vụ ñông năm 2008 Hải Phòng. 56
4.3.2 Ảnh hưởng của thuốc hóa học ñến sự sinh trưởng của nấm
Alternaria brassicae và nấm Alternaria brassicicola trên môi trường PGA 59
5 Kết luận 64
5.1 Kết luận 64
5.2.ðề nghị 65
TÀI LIỆU THAM KHẢO……… …… 66
Trang 8Bảng 4.3 Diễn biến bệnh lở cổ rễ trên một số giống cải bắp vụ ñông 2008 35
Bảng 4.4 Diễn biến bệnh lở cổ rễ trên giống Tokita vụ xuân năm 2009 tại
Bảng 4.9 Mức ñộ nhiễm bệnh trên một số giống cải bắp trồng khảo
nghiệm vụ ñông năm 2008 tại Hồng Phong- An Dương- Hải
Phòng 41
Bảng 4.10 Ảnh hưởng của công thức luân canh ñến bệnh lở cổ rễ, ñốm
vòng, thối hạch, sưng rễ hại cải bắp vụ ñông 2008 vùng Hải
Phòng 43
Bảng 4.11 ðặc ñiểm hình thái một số loài nấm chính gây hại trên cải bắp 47
Bảng 4.12 Ảnh hưởng của môi trường nuôi cấy ñến sự phát triển tản nấm
và mật ñộ bào tử nấm Alternaria brassicae 51
Bảng 4.13 Ảnh hưởng của môi trường nuôi cấy ñến sự phát triển tản nấm
và mật ñộ bào tử nấm Alternaria brassicicola 53
Trang 9Bảng 4.14 Ảnh hưởng của môi trường ñến sự phát triển tản nấm
S sclerotiorum 56
Bảng 4.15 Hiệu quả phòng trừ ñối với bệnh lở cổ rễ vụ ñông năm 2008 tại
Tân Dân – An Lão - Hải Phòng 57
Bảng 4.16 Hiệu quả phòng trừ của chế phẩm nấm Trichoderma hazianum,
chất kích kháng Bion ñến bệnh ñốm vòng hại cải bắp vụ ñông 2008 58
Bảng 4.17 Hiệu quả phòng trừ của chế phẩm nấm Trichoderma hazianum và
chất kích kháng Bion ñến bệnh thối hạch cải bắp vụ ñông năm 2008 60
Bảng 4.18 Tác dụng của chế phẩm nấm ñối kháng Trichoderma hazianum,
chất kích kháng Bion với sự sinh trưởng cải bắp tại Tân Dân – An Lão - Hải Phòng 61 Bảng 4.19 Ảnh hưởng của một số thuốc hoá học ñến sự phát triển tản nấm
A brassicae và A brassicicola 63
Trang 10DANH MỤC ðỒ THỊ
Biểu ñồ 1 Mức ñộ nhiễm bệnh LCR, ðV, TH, SR trên 4 giông cải bắp trồng
khảo nghiệm vụ ñông năm 2009 tại Hồng Phong – An Dương - Hải
Phòng 41 Biểu ñồ 2 Ảnh hưởng của môi trường nuôi cấy ñến sự phát triển tản
Trang 111 Mở ñầu
1.1 Tính cấp thiết của ñề tài
Cây cải bắp (Brassica oleracea.var.capitata.Lizg), thuộc họ thập tự
(Brassiceae), có nguồn gốc từ ðịa Trung Hải nơi có khí h ậu ôn ñới Cải bắp không chỉ là món ăn ngon mà còn có tác d ụng chữa ñược bệnh như nước bắp cải chữa ñược bệnh loét da, ăn cải bắp hàng tuần giảm ñược 70% xác suất ung thư ruột, phòng bệnh ung thư vú ở phụ nữ , là nguồn cung cấp tốt các nguyên tố khoáng cho cơ thể con người ñặc biệt là kali, các vitamin A và C Thành phần dinh dưỡng chứa trong 100g cải bắp tươi gồm : 92,4% nước; 0,1g chất béo; 5,8g cacbonhydrat; protein 1,28g; vitamin B1 0,061mg; Vitamin C 36,6mg; Vitamin A : 400(UI); Ca 40mg; P: 26mg; K: 2,71mg; Vitamin B6 : 0,124mg
Về mặt giá tr ị hàng hoá, cây c ải bắp là nguyên li ệu và m ặt hàng xu ất khẩu có giá trị Do vậy cải bắp cũng như một số các loại rau khác ñã góp phần vào việc phát triển các ngành kinh tế khác và là nguồn thức ăn cho chăn nuôi
Trong những năm gần ñây, sản xuất rau của Hải Phòng nói riêng và c ả nước nói chung có những bước thay ñổi rõ rệt cả về diện tích, năng suất, chất lượng và ña dạng hoá về chủng loại Tuy nhiên nhìn về khía cạnh chất lượng, vấn ñề sản xuất rau theo hướng công nghệ cao, ñảm bảo an toàn ñã và ñang là một thách th ức không nh ỏ, ñòi hỏi phải có một hệ thống giải pháp có tính chiến lược và ñồng bộ của các cơ quan ban ngành chức năng
Hải Phòng là m ột thành phố du lịch có khoảng 1,75 triệu dân, tiêu th ụ
200 - 250 nghìn tấn rau m ỗi năm, ñó là một nguồn tiêu th ụ lớn cho ngành nông nghiệp Trong những năm qua, Hải Phòng ñã xây dựng ñược nhiều vùng trồng rau với qui mô tập trung khép kín, ñảm bảo an toàn sản phẩm theo tiêu chuẩn của Việt Nam như Trung tâm Công nghệ cao nông lâm nghiệp tại
Trang 12huyện An lão, vùng sản xuất rau của công ty ñóng tàu Nam Triệu…, tuy nhiên giá thành cao, chưa phù hợp với thị yếu người tiêu dùng
Bên cạnh ñó, diện tích ñất nông nghi ệp tại Hải Phòng ngày m ột giảm
do xu thế ñô thị hoá, riêng tính từ năm 2005 - 2008 tỷ lệ giảm ñạt 1,2%/năm
Do vậy việc sản xuất rau còn mang tính ch ất manh mún của các hộ nông dân mang tính tự phát nên hiệu quả chưa cao Cùng với việc chạy theo lợi nhuận, việc lạm dụng thuốc bảo vệ thực vật ñể phòng trừ sâu bệnh ñã gây nên hi ện tượng kháng thu ốc, làm cho sâu b ệnh phát tri ển ngày càng mạnh hơn, trong
ñó có bệnh lở cỗ rễ, bệnh sưng rễ, bệnh thối hạch, ñốm vòng, sương mai xuất hiện và gây hại ở tất cả các vùng trồng cải bắp quanh năm
Do vậy ñối với việc mở rộng các vùng tr ồng rau với qui mô t ập trung trong ñó có vùng trồng cải bắp cần quan tâm ñến công tác phòng trừ dịch hại, ñánh giá thiệt hại, sự phát sinh phát tri ển của các bệnh hại chính gây ra trên cải bắp Xuất phát t ừ yêu c ầu thực tiễn sản xuất, từ ñiều kiện phát tri ển các vùng trồng rau với qui mô lớn ñáp ứng nhu cầu tiêu thụ trong và ngoài thành phố ñạt tiêu chuẩn cho phép và ñòi hỏi trong công tác nghiên c ứu, chúng tôi tiến hành thực hiện ñề tài:
“Nghiên cứu bệnh nấm hại cải bắp và biện pháp phòng trừ tại Hải
Phòng vụ ñông 2008 và vụ xuân 2009”
1.2 Mục ñích - yêu cầu của ñề tài
1.2.1 Mục ñích
Xác ñịnh thành ph ần bệnh nấm hại cải bắp vụ ñông 2008 và vụ xuân
2009, ñặc ñiểm phát sinh phát triển của bệnh lở cổ rễ, sưng rễ, ñốm vòng, thối hạch do nấm gây ra tại các vùng tr ồng rau Hải Phòng: huyện An Lão, huy ện
An Dương và khảo sát một số biện pháp phòng trừ
Trang 13- Thử nghiệm phòng trừ bệnh nấm bằng chế phẩm sinh học nấm ñối
kháng Trichoderma hazianum, ch ất kích kháng Bion và thu ốc hoá học
trong ñiều kiện ngoài ñồng ruộng và phòng thí nghiệm
Trang 142 Tình hình nghiên cứu trong và ngoà i nước
Cây cải bắp thường nhiễm một số bệnh chủ yếu như bệnh sưng rễ, bệnh
lở cổ rễ, bệnh ñốm vòng và bệnh thối hạch, bệnh thối nâu, ñây là nguyên nhân chính làm giảm chất lượng và năng suất trồng cải bắp Có nhiều tài liệu nghiên cứu trong và ngoài n ước ñã ñược công b ố về thành ph ần bệnh chính hại cải bắp trên thế giới và ở nước ta và ñây là những tài liệu vô cùng hữu ích giúp chúng tôi trong quá trình thực hiện ñề tài
2.1 Tình hình nghiên cứu ngoài nước
2.1.1 Bệnh lở cổ rễ và thối nâu (Rhizoctonia solani)
Nấm Rhizoctonia solani là tác nhân gây bệnh cho cây trồng có nguồn gốc
trong ñất, là loài nấm phổ biến xuất hiện ở khắp các vùng trồng trọt trên thế giới Loài nấm này có phạm vi ký chủ rất rộng trên mọi vùng sinh thái trồng trọt, hại trên
32 họ cây trồng khác nhau và 20 loài cỏ dại thuộc 11 họ Chỉ riêng ở Mỹ ñã có khoảng 550 loài cây khác nhau thuộc phạm vi ký chủ của R solani [13]
Nấm Rhizoctonia solani ñã ñược Decandolle mô t ả ñầu tiên vào n ăm
1815 khi ñó có tên là Rhizoctonia crocorum trong ñó loài R solani là loài quan trọng nhất của loại nấm Rhizoctonia Tuy nhiên b ệnh chỉ ñược biết ñến
vào năm 1858, khi Julius Kuhn nghiên c ứu bệnh lở cổ rễ trên cây khoai tây (Paulo Ceresini, 1999) [34]
Triệu chứng gây bệnh hại của nấm R.solani rất khác nhau, tu ỳ từng bộ
phận như lở cổ rễ, thối rễ, chết rạp cây con, thối bẹ lá và thối gốc Tuy nhiên chúng chủ yếu tấn công vào ph ần dưới mặt ñất của cây nh ư rễ, trụ dưới lá mầm và hạt giống (Paulo Ceresini, 1999) [34] Giai ñoạn cây con từ 2 lá mầm
và 1-2 lá thật khi bị loài nấm này tấn công có thể bị ñổ gục và chết Triệu chứng thường xuất hiện trên cây bị bệnh là những chấm nâu, nâu ñỏ ở gần phần thân
sát mặt ñất, rễ bị thối Hạt giống bị nhiễm nấm R.solani thường mất sức nảy
Trang 15mầm Bên cạnh ñó nấm R.solani cũng có khả năng xâm nhiễm qua thân, lá, quả,
nơi có vị trí gần mặt ñất hoặc tiếp giáp với ñất (Janice Y Uchida, 2008) [26]
Nấm Rhizoctonia solani gây b ệnh lở cổ rễ ñược xác ñịnh là thu ộc bộ
nấm trơ (Mycelia sterilia), nhóm nấm bất toàn (Fungi imperfecti) [26] giai ñoạn
hữu tính là Thanatephorus cucumeris thuộc họ Ceratobasidiaceae, bộ
Ceratobasidiales, lớp nấm ñảm Basidiomycetes [13]
Sợi nấm Rhizoctonia solani giai ñoạn non không màu trong suốt và
mọc ñược trên môi trường nhân tạo hay trên bề mặt cây trồng Các nhánh của sợi nấm ngắn ñi và phát tri ển thành h ạch Trong t ự nhiên, s ợi nấm có màu vàng nhạt rồi chuyển sang vàng nâu (Baruch Sneh và CTV, 1998) [12]
Sợi nấm sinh ra tạo thành các nhánh bên và hợp với sợi chính tạo thành một góc xiên, có màu tối Sợi nhánh thắt lại một ñoạn ngắn ở phần gốc, thường
có một vách ngăn ở gần gốc sợi nhánh Nấm R solani cũng sinh dạng sợi ñặc
biệt, các tế bào kết lại với nhau t ạo thành thể thống nhất, ñược gọi là t ế bào
Monilioid Những tế bào Monilioid hoà lẫn với nhau tạo ra cấu trúc dày ñặc ñược gọi là h ạch nấm, ñể chống lại ñiều kiện môi trường bất thuận, ñảm bảo nấm sống sót trong ñiều kiện bất lợi [33]
Theo Baruch Sneh và ctv, hạch nấm có màu nâu, hình dạng và kích thước khác nhau, ñường kính hạch nấm dao ñộng từ 1-8µm Hạch nấm thường ñược hình thành trên bề mặt ký chủ, trên bộ phận cây trồng và trên mô thực vật [12]
Nấm R.solani chịu tác ñộng của ñiều kiện nhiệt ñộ, ẩm ñộ, pH và hệ vi sinh
vật ñất ñến sự tồn tại và khả năng xâm nhiễm lan truyền (Mc Carter, SM 1993) [29] ðiều kiện nhiệt ñộ cho nấm sinh trưởng phát triển mạnh là 25 - 300C
Theo tác giả Kokalis – Burelle, N và cộng sự (1997) cho thấy nấm R
solani sản sinh ra một số ñộc tố gây hại cho cây trồng như axit oxalic có thể làm
biến ñổi màu ở hạt và gây ra các v ết ñốm trên lá vào giai ñoạn ñầu của bệnh Nấm là nguyên nhân chính gây ra bệnh thối hạt làm chết cây con, thối lá mầm,
Trang 16thối rễ, gây cháy lá khi n ấm xâm nhập tiết ra enzym cellulilitic pectinolitic và các ñộc tố thực vật [27]
Do có phổ ký chủ rộng, khả năng gây hại lớn trên nhiều loại cây trồng nên
bệnh lở cổ rễ do nấm R solani gây hại nghiêm trọng ở hầu hết các vùng sản xuất
trên thế giới
Có nhiều tác giả ñã nghiên cứu và ñề xuất áp dụng một số biện pháp phòng trừ như : chọn tạo giống chống chịu, canh tác, chế phẩm sinh học, thuốc hoá học
ðối với biện pháp chọn tạo giống chống bệnh các nhà nghiên cứu ñã sử dụng các phương pháp lai tạo, chọn lọc cá thể ñể chọn tạo ra các gi ống cây trồng có khả năng kháng bệnh cao
Áp dụng biện pháp canh tác như: trước khi gieo trồng cần tiêu nước, trồng cây với mật ñộ khoảng cách thích hợp ñể tránh dẫn ñến ẩm ñộ cao là ñiều kiện thích hợp cho nấm phát sinh, phát triển Tiến hành dọn sạch tàn dư cây bệnh ra khỏi ñồng ruộng cũng có tác dụng làm giảm số lượng nguồn bệnh trong ñất ñồng thời tiến hành luân canh v ới các cây tr ồng khác họ hoặc ít mẫn cảm với nấm bệnh cũng có tác dụng giảm mức ñộ gây bệnh
Tuy nhiên ñể có hiệu quả phòng trừ nhanh các nhà nghiên cứu ñã sử dụng các loại thuốc hoá học Các loại thuốc trừ nấm như Methyl thiophanate, chlorothalanil ñược sử dụng một cách hợp lý ñều có tác dụng phòng trừ bệnh
do nấm R.solani gây ra (Janice Y.Uchida, 2008) [26]
Ngày nay, với xu thế sản xuất theo hướng an toàn nên con người ñã chú trọng nhiều ñến việc sử dụng các sản phẩm có nguồn gốc sinh học ñể phòng trừ dịch hại cây trồng Các sản phẩm này có nhiều ưu ñiểm là an toàn với môi trường, vật nuôi và con người, không tạo ra tính kháng và các nòi, ch ủng mới ñồng thời ñảm bảo tính cân bằng trong hệ sinh thái
Nhiều nghiên cứu ñược tiến hành ở các nước trên thế giới như Anh, Pháp,
Trang 17Mỹ, ñã sử dụng các loài sinh vật có ích ñặc biệt là các vi sinh vật ñối kháng
trong ñó loài nấm Trichoderma sp ñược ñánh giá cao nhất
Nấm Trichoderma sp là một loại nấm sống hoại sinh trong ñất và trên các tàn dư thực vật, thuộc bộ Hyphales, lớp nấm bất toàn (Fungi imperfecti) Cơ chế ñối kháng của nấm Trichoderma sp ñối với nấm gây bệnh chủ yếu là ký sinh dẫn
ñến tiêu diệt sợi nấm (Dubey, 1995) [19] hoặc tạo ra các chất kháng sinh có hoạt tính sinh học cao ức chế sự phát triển của nấm gây bệnh (Chet, 1981) [14]
Ngoài ra loài nấm này còn có thể tiết ra các loại men gây biến ñổi thành
tế bào sợi nấm gây bệnh (Elad và cộng sự, 1983) [19] Theo tác giả Chet I.,
Baker R (1981) nấm Trichoderma sp còn thể hiện tính ñối kháng thông qua việc
cạnh tranh dinh dưỡng, nơi cư trú với nấm gây bệnh làm ức chế sự sinh trưởng, phát triển của chúng [14]
Kết quả nghiên cứu của Strashnov Y (1985) [34] ñược thực hiện ở ngoài
ñồng cho thấy nấm ñối kháng Trichoderma hazianum khi phun vào ñất nhiễm nấm Rhizoctonia solani hoặc phun lên cây, quả sẽ làm giảm tỷ lệ thối quả từ 43- 83% Khi trộn Trichoderma hazianum với ñất bị nhiễm nấm tự nhiên sẽ có tác
dụng làm giảm khả năng lây nhiễm của bệnh là 86%, làm giảm tỷ lệ thối quả từ
27 - 51%
Ngoài tác dụng ức chế nấm bệnh phát triển, nấm ñối kháng Trichoderma
sp còn có tác dụng kích thích cây trồng sinh trưởng phát triển Qua các kết quả
nghiên cứu của nhiều nhà khoa học thì cơ chế của sự tác ñộng này có thể là do
nấm Trichoderma sp ức chế các nấm thứ yếu trong vùng rễ cây, sản sinh ra các
chất kích thích sinh trưởng hoặc các Vitamin, phân giải thành các chất dễ hấp
thụ cho cây trồng Do vậy dùng chế phẩm Trichoderma sp có tác dụng phòng
trừ bệnh hại cây trồng, làm giảm tỷ lệ cây bị bệnh, giúp cây tăng sức ñề kháng, ñối với vi sinh vật gây bệnh, có tác dụng kích thích sinh trưởng ñối với cây trồng (Elad và cộng sự, 1980; Harman và cộng sự , 2004) [20], [22]
Trang 182.1.2 Bệnh ñốm vòng
Bệnh ñốm vòng do hai loài nấm Alternaria brassicae và Alternaria
brassicicola gây ra, n ấm gây h ại hầu hết các cây h ọ thập tự như súp l ơ, cải
canh, cải tàu, cải bắp, cải dầu và cây cải củ …
ðây là hai loài nấm gây hại rất phổ biến ở các vùng trồng cải bắp trên toàn thế giới Nấm gây bệnh chịu ảnh huởng nhiều của thời tiết, nấm gây hại nặng cho cây trồng khi gặp ñiều kiện thời tiết mát mẻ, mưa nhiều và ở những khu vực
có lượng mưa tương ñối cao (Humpherson-Jones và Phelps, 1989) [24]
Alternaria brassicae và Alternaria brassicicola phá hại cây ký chủ ở tất
cả các giai ñoạn sinh trưởng kể cả hạt Trên cây con v ết bệnh xuất hiện trên thân màu ñen, làm cho cây còi c ọc hoặc làm ch ết rạp cây con (Valkonen và Koponen, 1990) [49]
Trên cây trưởng thành, bệnh hại chủ yếu ở phần lá già do chúng thường xuyên tiếp xúc với ñất và dễ bị vết thương xây xát khi có mưa, gió lớn Khi bệnh xâm nhiễm vào lá già thường không gây thiệt hại lớn ñến năng suất và bệnh có thể ñược kiểm soát bằng cách loại bỏ các lá bị bệnh (Chupp và Sherf, 1960) [15] Trên cành mang qu ả hoặc trên v ỏ hạt bị bệnh thường tối màu, ho ặc có những ñốm ñen làm cho h ạt nhiễm bệnh dễ bị nứt, dẫn ñến năng suất giảm ñáng kể Sự xâm nhiễm gây hại còn xảy ra trên các cây cải trước hoặc sau thu hoạch, ñiển hình với triệu chứng ñỉnh bông bị biến màu nâu ở súp lơ, bắp cải
bị thối
Theo tác gi ả Chupp và Sherf, 1960[15] cho bi ết cả hai loài n ấm gây bệnh trên ñều truyền qua hạt giống Chúng làm nhăn hạt, héo cuống quả trước khi hình thành hạt hoặc chúng tạo ñiều kiện cho vi khuẩn xâm nhiễm làm thối mềm thân, cu ống dẫn tới có th ể làm ch ết cây Ngoài vi ệc gây h ại hạt giống cây trồng, chúng còn có th ể tồn tại trong h ạt giống, truyền bệnh cho v ụ cây trồng sau dẫn ñến làm mất cây con (Rangel, 1945) [36]
Trang 19• Nghiên cứu ñặc ñiểm sinh học của nấm gây bệnh ñốm vòng
Các tác giả S.B Mathur và Olga Kongsdal, (2000) ñã mô tả cành bào tử
của nấm A brassicae có màu oliu sáng ho ặc màu nâu tối, bào tử thường mọc
riêng lẻ hoặc ñôi khi mọc thành cụm Thể sợi nấm có màu trắng, mượt với các bào tử bao phủ lên hạt giống Bào tử nấm thẳng, dạng chuỳ ngược, có vòi, bào tử
có từ 6-19 vách ng ăn ngang (thông thường có từ 11-15), có từ 0-8 vách ng ăn theo chiều dọc không ñối xứng Bào tử nhẵn với kích thước 75-35 x 20-30µm, vòi có chiều dài bằng 1/3 - 1/2 chiều dài của bào tử [37]
Cành bào tử A brassicae tạo ra bào tử vô tính có chiều dài khoảng
160-200 µm Sự hình thành bào t ử xảy ra ở nhiệt ñộ khoảng 8 - 240C, tương ứng với khoảng nhiệt ñộ này bào tử sẽ thành thục sau 24 - 14h Tại nhiệt ñộ tối ưu
là 16 - 240C chuỗi bào tử ñược hình thành sau 12 - 14h
Tản nấm Alternaria brassicicola có màu ñen sáng bóng bao gồm bào tử
ñính trên các chuỗi ñơn, hẹp dài Hiếm khi sợi nấm phân nhánh và không thấy có thể sợi nấm trên hạt giống Bào tử thẳng, hình trụ thường thon dần về phía ñỉnh có
từ 1-11 vách ngang, vách dọc hiếm thấy (S.B Mathur và Olga, 2000) [37]
Nấm A brassicicola hình thành bào t ử ở nhiệt ñộ 8 - 300C, tại ñó bào
tử thành thục sau 43-14h Nhiệt ñộ tối ưu là 18 - 300C ở ñó bào tử ñược hình thành sau 13h
Sự xâm nhiễm của nấm lên cây tr ồng chỉ xảy ra với ñiều kiện phải có giọt mưa, sương hoặc ẩm ñộ không khí cao Quá trình xâm nhi ễm sẽ xảy ra tối thiểu sau 9-18h (Humpherson-Jones và Phelps, 1989) [25]
Theo tác giả Chupp và Sherf (1960); Rangel (1945) cho rằng ẩm ñộ duy trì liên tục trong 24h hoặc hơn sẽ ñảm bảo cho sự xâm nhiễm thành công
Ở ñộ ẩm tương ñối 91.5% hoặc cao hơn nấm sẽ hình thành ñược 1 lượng lớn bào tử thành thục sau 24h [15], [36]
Bào tử nấm A brassicae n ảy mầm ñược trong khoảng nhiệt ñộ từ 8 -
Trang 20310C, nhưng hầu hết bào t ử nấm nảy mầm nhanh chóng trong vòng 3h khi nhiệt ựộ khoảng 21 - 280C (khoảng 98% bào tử nảy mầm) Khi nhiệt ựộ giảm, lượng thời gian c ần thiết ựể 98% bào t ử nảy mầm tăng (Degenhardt et al., (1982) [16]
Bào tử nấm Alternaria brassicicola nảy mầm ở nhiệt ựộ 7 - 310C Bào
tử nảy mầm ựược 98% tại 150C sau 10h ủ bệnh, 98% bào tử nảy mầm sau 3h tại 310C Khi lây b ệnh nhận tạo, nấm Alternaria brassicicola bi ểu hiện triệu
chứng nhanh nhất ở nhiệt ựộ 250C Nhưng riêng trên cây con, triệu chứng biểu hiện nhanh nhất ở 300C Nước hoặc ựộ ẩm cao là ựiều kiện cần thiết cho
sự nảy mầm và xâm nhiễm của nấm (Degenhardt et al., 1982) [16]
Nấm gây bệnh ựốm vòng tồn tại dưới dạng bào tử trên vỏ hạt hoặc sợi nấm trong hạt cũng như tàn dư cây bệnh Mẫu hạt cũ trên 20 tháng nhiễm nấm
Alternaria brassicae ựược lưu trữ ở 00C trong 14 tháng thấy sức nảy mầm của
bào tử nấm vẫn cao Nấm A brassicae trong mẫu h ạt bảo quản 6 tháng ở
nhiệt ựộ 23 - 300C thấy bào tử vẫn còn hữu hiệu và còn khả năng lây nhiễm đôi khi trong hạt còn có những sợi nấm tiềm sinh, vì vậy khi ựã xử lý bề mặt hạt cây con vẫn có thể bị nhiễm bệnh (Rangel, 1945) [36]
Bào tử nấm Alternaria brassicicola có thể tồn tại trên bề mặt hạt khoảng
2 năm khi hạt ựược bảo quản ở 100C, ựộ ẩm 50%, sợi nấm có thể tồn tại trong hạt khoảng 12 năm (Maude và Humpherson-Jones, 1980a, b) Trên tàn dư cây bệnh, bào tử nấm tồn tại ựược khoảng 12 tuần Những ruộng cây trồng ựược thu hoạch trong vụ này sẽ là nguồn bệnh lây nhiễm cho các ruộng trồng xung quanh và cây trồng vụ sau (Humpherson-Jones, 1989) [24], [25]
Các tác giả Tripathi và Kaushik (1984) cho rằng nấm Alternaria brassicae
và Alternaria brassicicola còn tồn tại ở dạng vi hạch (microsclerotia) và hậu bào tử khi trên lá bệnh có một phần bị thối rữa [44] Cả vi hạch và hậu bào tử ựều có thể ựược hình thành trong tế bào bào tử ựắnh, chúng phát triển tốt nhất ở ựiều kiện nhiệt
Trang 21độ thấp (30C) Bào tử hậu cũng cĩ thể phát triển trong tế bào bào tử đính trên đất tự nhiên ở nhiệt độ phịng (Tsuneda và Skoropad, 1977) [45]
Nấm gây bệnh đốm vịng lan truyền chủ yếu qua hạt giống, nhiễm bệnh nhờ bào t ử trên v ỏ hạt và các s ợi nấm tiềm tàng trong h ạt Các bào t ử được phát tán nhờ giĩ, nước, cơng cụ, và động vật Tản nấm cĩ thể sống được trên cây cỏ mẫn cảm và trên những cây trồng lâu năm (Chupp và Sherf, 1960; Rangel, 1945; Maude và Humpherson-Jones, 1989) [15], [24]
Nấm gây bệnh đốm vịng cịn tồn tại trên tàn dư cây bệnh Trong một số nghiên cứu cho thấy các tác nhân gây bệnh trên tàn dư lá cây cải dầu và cải bắp
cĩ thể tồn tại lâu như trên lá bị bệnh cịn tươi Với cải dầu tác nhân gây bệnh tồn tại được trong 8 tuần, cịn đối với cải bắp là 12 tuần (Humpherson-Jones, 1989) [24] Theo nghiên cứu của tác giả Rangel (1945) cho rằng phương thức lây nhiễm qua tàn dư cây bệnh thường xảy ra ở giai đoạn vườn ươm và cây con bị nhiễm bệnh ở vườn ươm cĩ thể mang nguồn bệnh ra ruộng sản xuất [36]
Dựa trên các nghiên cứu về đặc điểm phát sinh phát triển, đặc điểm sinh học của nấm gây bệnh đốm vịng, các tác giả đã đề suất một số biện pháp quản lý dịch bệnh sau:
+ Cơng tác dự tính dự báo: Trong nghiên cứu invitro người ta đã chỉ ra rằng nhiệt độ và sự nảy mầm của bào tử cĩ mối quan hệ với nhau Nếu những mối quan hệ này được gắn với điều kiện đồng ruộng thì cĩ thể dự đốn được
sự nảy mầm và quá trình phát triển tiếp theo của nấm, từ đĩ cĩ kế hoạch phịng trừ trên diện rộng (Humpherson-Jones và Phelps, 1989) [24], [25]
+ Luân canh cây trồng: Bố trí luân canh với những cây trồng khơng thuộc họ thập tự và dọn sạch tàn dư cây bệnh, cỏ dại là ký chủ phụ của bệnh đốm vịng Vì bào t ử cĩ thể sống trong mơ lá t ừ 8 - 12 tu ần, mơ thân khoảng
23 tuần nên những cách đồng trồng lại ngay sau khi thu ho ạch thường bị các tác nhân gây bệnh tấn cơng sớm từ giai đoạn đầu sinh trưởng của cây
Trang 22khuẩn Streptomyces arabicus ñều có tác dụng diệt trừ nấm Alternaria
brassicae và Alternaria brassicicola (Sharma và c ộng sự., 1984; Sharma và
cộng sự., 1985) [39], [40] Ở Phần Lan, người ta xử lý bề mặt hạt giống bằng
Streptomyces griseoviridis (15 mg /g h ạt giống) mang lại hiệu quả phòng trừ
tốt (Valkonen và Koponen, 1990) [49]
+ Sử dụng thuốc hóa học: Có nhiều loại thuốc trừ nấm ñã ñược thử
nghiệm cho hiệu quả phòng trừ tốt ñối với nấm A brassicae Có khoảng 18 loại thuốc có tác dụng phòng trừ nấm A brassicae, trong ñó Dithane M-45
(Mancozeb) và Dithane Z-78 (Zineb) là hai thuốc hoá học có tác dụng phòng trừ hữu hiệu nhất Có 7 loại thuốc hoá học kìm hãm sự phát triển của bệnh trên ñồng ruộng: Benlate, Dithane M-45, Dithane Z-78, Ziram, Difolatan-80, Thiram và Blitox-50 Có thể xử lý hạt bằng Benlate, Dithane M-45, Dithane Z-78
Theo tác giả Maude và cộng sự (1984) cho th ấy: Hai thuốc Iprodione
và fenpropimorph có hiệu quả ttrong phòng trừ nấm Alternaria sp trên ñồng
ruộng và trong xử lý hạt với liều lượng 0.25 lb a.i./100g hạt [30]
Xử lý bề mặt hạt bằng Thiram với liều lượng 0.55 lb/100 lb h ạt ñể trừ
nấm Alternaria brassicicola (Valkonen and Koponen,1990) [49]
2.1.3 Bệnh thối hạch
Bệnh thối hạch cải bắp gây ảnh hưởng ñến sự phát triển của nhiều giống cải bắp trong s ự bảo quản và ñộ tươi của sản phẩm Nguyên nhân do
nấm Sclerotinia sclerotiorum gây ra, là ñối tượng nguy hiểm gây giảm năng
suất trên ñồng ruộng, trong kho bảo quản, dưới ñiều kiện vận chuyển và tiêu
Trang 23thụ ( Helene R Dillard, 1987) [23]
Theo tác giả Helene R Dillard (1987) cho biết nấm Sclerotinia
sclerotiorum phân b ố rộng và liên quan ñến thời tiết mát m ẻ và ẩm ñộ của
nhiều vùng trên th ế giới Nấm này có ph ổ ký chủ rộng, nấm có thể tấn công trên khoảng 320 loài cây trồng Chỉ tính riêng họ Cruciferae ñã tìm thấy trên
18 chủng và 32 loài Ở Mỹ nấm này có khả năng lây lan trên nhiều chủng loại rau và ñặc biệt gây hại nặng trên họ ñậu ñỗ Nấm cũng gây ảnh hưởng ñến các
loài cỏ dại như cây bồ công anh Trung Qu ốc, cây cúc b ạc Senecio jacobaea
và nhiều loài cỏ làm thức ăn cho gia súc [23]
Cũng theo tác gi ả này cây c ải bắp có th ể bị hại bất kỳ giai ñoạn phát triển nào của cây nhưng gây hại nặng nhất từ giữa ñến cuối vụ Ở Mỹ, sự xâm nhiễm của nấm có thể xảy ra ở cây trên m ặt ñất, trên lá non ho ặc trên tán lá tiếp xúc với ñất Vết bệnh ñầu tiên có màu xám, th ối ướt, hình tròn, bao ph ủ một lớp nấm màu trắng Mô ký chủ trở nên mềm, ướt khi bệnh phát triển Sau
ñó nấm phát triển trên toàn bộ bắp và hình thành hạch nấm có màu ñen [23]
Theo nghiên cứu của tác giả Shiva R và Beasley D (2005) cho thấy nấm
Sclerotinia sclerotiorum sản sinh ra các sợi nấm màu trắng và hạch to màu ñen trên thân và lá của nhiều cây trồng lá rộng như cải bắp, ñậu tương, ñậu cô ve lùn và cô ve leo, cà chua, khoai tây, lạc, súplơ xanh, súplơ trắng và xà lách [40]
Hạch nấm tồn tại trong ñất qua thời gian dài Trong ñiều kiện thuận lợi, hạch nấm nảy mầm hình thành quả thể ñĩa Các quả thể ñĩa mang túi các bào
tử túi xâm nhiễm vào cây (Erwin D.C và Ribeiro O.K, 1996) [21]
Cũng theo tác giả Erwin D.C và Ribeiro O.K (1996) cho r ằng: Bào tử thường xâm nhi ễm vào cây ở vị trí nách lá Các cánh hoa già c ũng tạo ñiều kiện thuận lợi cho nấm bệnh trong quá trình xâm nhiễm [21]
Nguồn bệnh ban ñầu là các bào t ử túi, chúng nảy mầm trong ñiều kiện
ẩm ướt trên các tàn dư cây bệnh (Steadman, 1979) [42]
Trang 24Theo tác giả Tu (1986) [46] sự lan truyền bệnh thối hạch phụ thuộc vào những yếu tố sau: nguồn bệnh trong ñất, ñộ ẩm ñất, lượng mưa, tưới tiêu, ñộ mẫn cảm của giống, ñộ cao luống, mật ñộ cây trồng Trên ñồng ruộng khi gặp ñiều kiện không khí lạnh, ñộ ẩm cao bệnh có thể bùng phát thành dịch
Mật ñộ trồng có ảnh hưởng ñến tỷ lệ bệnh, mật ñộ cao thì tỷ lệ bệnh tăng ðộ mẫn cảm của giống cũng là một nhân tố quan trọng trong quá trình lan truyền bệnh Những giống mẫn cảm như Fleetwood, t ỷ lệ bệnh có th ể từ 0-100% trong 4 tuần với bề rộng luống trồng 80cm trong khi ñó giống kháng ExRico 23 tỷ lệ bệnh chỉ từ 0 - 35% Lượng mưa cũng là một yếu tố rất quan trọng trong quá trình lan truyền bệnh (Tu, 1987) [47]
Qua các nghiên cứu trên các tác giả ñưa ra một số biện pháp phòng trừ bệnh thối hạch sau:
- Lựa chọn vùng trồng thích hợp: Theo tác giả Tu (1986) cho rằng các vùng trồng khác nhau có tỷ lệ bệnh khác nhau, dao ñộng từ 0 - 85% [47] Do vậy cần lựa chọn vùng trồng sạch bệnh hoặc vùng có tỷ lệ bệnh thấp ñể trồng cây
-Biện pháp luân canh: Luân canh với các cây trồng như ngô, bông, không
nên luân canh những cây trồng là phổ ký chủ của Sclerotinia sclerotiorum như
cải bắp, ñậu tương, ñậu cô ve lùn và cô ve leo, cà chua, khoai tây và xà lách kế tiếp nhau tại những vùng có mùa ñông lạnh ( Erwin D.C.và Ribeiro O.k,1996,Stirling G.R và Eden L.M, 2007) [21], [43]
- Xử lý hạt: Do nấm Sclerotinia sclerotiorum có khả năng tồn tại trên hạt
dưới dạng sợi Nấm tiềm sinh ở mày hạt, nội nhũ trong khoảng 3 năm nên làm giảm khả năng nảy mầm của hạt tới 88-100%, có thể xử lý hạt bằng Captan và thiophanate – metylen với hiệu lực trừ nấm 100% (Tu, 1989a) [48]
2.1.4 Bệnh sưng rễ cải bắp
Bệnh sưng rễ cải bắp do nấm Plasmodiophora brassicae gây ra
Plasmodiophora brassicae còn gây hại trên nhiều loài cây họ thập tự như: súp
Trang 25lơ, cải dầu, cải tàu, …
Theo tác giả Sherf và MacNab (1986); Agrio (1978) [40] Khi cây bị bệnh lá trở lên vàng, cây héo và còi c ọc, lá dưới có thể bị rụng Triệu chứng quan trọng nhất là rễ cây bị sưng, nấm hại cả rễ cái, rễ phụ, thậm chí cả phần thân dưới mặt ñất Rễ bị sưng phồng lên ở giữa và thắt lại ở phía dưới Bệnh
có thể gây hại một phần hoặc toàn bộ hệ thống rễ
Nấm gây bệnh sưng rễ tồn tại qua ñông dưới dạng bào tử tĩnh Khi thuận lợi chúng nảy mầm tạo ra các b ọc bào tử ñộng Bào tử ñộng nảy mầm xâm nhiễm vào trong rễ và tạo ra các ổ bào tử tĩnh trong rễ, mỗi ổ bào tử tĩnh tạo ra một u sưng
Theo tác giả Shef và MacNab (1986) ở ñiều kiện ñất lạnh, ẩm, và chua thuận lợi cho nấm phát sinh phát triển Tuy nhiên nhiệt ñộ thích hợp cho nấm
Plasmodiophora brassicae phát triển khoảng 15-250C, trong ñó nhiệt ñộ tối thích
là 18-200C Trong ñiều kiện ñất kiềm, nhiệt ñộ cao bệnh phát triển chậm [40]
Cũng theo tác giả này bệnh sưng rễ có thể lan truyền qua dụng cụ canh tác, ñộng vật, con người Những ruộng sản xuất có thể bị nhiễm bệnh qua cây giống, nước tưới (Sherf và MacNab, 1986) [40]
Từ ñặc ñiểm phát sinh phát tri ển và khả năng lây lan của bệnh sưng rễ các nhà nghiên cứu ñã ñề ra nhiều biện pháp ñể quản lý, phòng trừ dịch bệnh như sau:
Theo nghiên c ứu của tác giả Myers và Campbell (1985) cho r ằng : s ử dụng cây giống sạch bệnh kết hợp chọn ruộng thoát nước tốt, ñất sạch bệnh, không luân canh với những cây họ thập tự có hiệu quả cao trong trừ bệnh sưng rễ Những ruộng bị bệnh nặng cần luân canh v ới các cây tr ồng không phải ký chủ của bệnh sưng rễ trong vòng 7 năm, giữ cho pH ñất trên 7,2, Có thể dùng giống chống chịu [31]
Sau khi thu hoạch cần thu dọn sạch tàn dư cây bệnh có tác dụng làm giảm
Trang 26nguồn bệnh lây truyền cho vụ sau Xử lý ñất, vườn ươm bằng Chloropicrin 14 -
21 ngày trước khi gieo trồng cũng có tác dụng hạn chế nguồn bệnh (Sherf và MacNab, 1986) [31]
2.2 Tình hình nghiên cứu trong nước
2.1.1 Bệnh lở cổ rễ và thối nâu
Nấm Rhizoctonia solani ở Việt Nam là loài n ấm gây h ại phổ biến, có
phổ ký chủ rộng trên ñồng ruộng Theo ñiều tra nghiên cứu của các nhà khoa
học thuộc Viện Bảo vệ thực vật cho thấy nấm R solani gây hại trên nhiều loại cây trồng trong ñó có 13 loài cỏ dại, 2 loài làm cây phân xanh (Azla sp.,
Sesbania sp.) và m ột số cây tr ồng khác nh ư ngô, ñậu tương, lúa (Ph ạm Văn
Lầm, 2006) [4]
Theo nghiên cứu của tác gi ả ðặng Lưu Hoa và c ộng sự nấm R.solani
có thể gây hại cho cây trồng quanh năm và ñặc bi ệt gây hại nặng cho cây trồng vào vụ xuân ( ðặng Lưu Hoa và cộng sự, 2002) [3]
Trên cải bắp nấm thường gây h ại vào giai ñoạn cây con Tri ệu chứng ñặc trưng nhất là rễ, cổ rễ và gốc thân sát mặt ñất bị thâm ñen ở gốc thân, cổ
rễ sau ñó lan rộng ra rất nhanh bao bọc quanh cổ rễ, sau 5-6 ngày b ị héo cây bệnh ñổ gục chết lụi hàng loạt trên ruộng
Nấm này còn gây triệu chứng thối bắp trên cây trưởng thành còn gọi là bệnh thối nâu, vết bệnh lúc ñầu là những vết lá chết màu nâu vàng, ở các lá ngoài và các s ợi nấm màu tr ắng xám, sau ñó vết bệnh lan r ất nhanh và gây thối toàn bắp (Nguyễn Kim Vân, Ngô Vĩnh Viễn, 2001) [10]
Sợi nấm hình ống ña bào phân nhánh th ẳng góc, chỗ phân nhánh h ơi thắt nhỏ, giáp ngay ñó là màng ngăn ngang, có mầu nâu vàng (Vũ Triệu Mân,
Lê Lương Tề, 1998) [7] Hạch nấm dẹt, có màu nâu, trên bề mặt hạch có lỗ rất nhỏ (ðặng Lưu Hoa và cộng sự, 2002) [3]
Nguồn bệnh nấm tồn tại dưới dạng sợi và h ạch n ấm ở trong ñất, tàn
Trang 27dư, cây ký chủ phụ và cỏ dại
Nấm Trichoderma viride có hiệu l ực phòng tr ừ bệnh rất cao ñối với nấm Rhizoctonia solani (Lê Lương Tề, 2001) [7]
Tiến hành luân canh cây tr ồng cạn với cây lúa n ước từ 2-3 n ăm, cày bừa k ỹ, ñể ải khô, bón vôi ñể tiêu hu ỷ tàn d ư cây b ệnh, lên lu ống cao d ễ thoát nước, không gieo tr ồng quá sâu
ðối với bi ện pháp hoá h ọc có th ể sử dụng một số thuốc hoá h ọc ñể phòng trừ bệnh lở cổ rễ như: Ridomil MZ 72WP, Topsin 70WP, Rovral …
2.1.2 Bệnh ñốm vòng
Bệnh ñốm vòng c ải bắp là b ệnh hại rất phổ biến trong các vùng tr ồng cải bắp ở nước ta Bệnh hại từ giai ñoạn cây con, cây ñã cuốn b ắp và trên nhiều cây họ thập tự khác su hào, súp lơ (Vũ Triệu Mân, 2007) [6]
Trên cây con bệnh thường xuất hiện trên lá sò và thân non Trên cây ñã lớn, vết bệnh hình thành trên lá hình tròn, có nhi ều vòng ñồng tâm màu nâu nhạt hoặc nâu sẫm, xung quanh có thể có quầng vàng Bệnh có thể xuất hiện ở
cả giai ñoạn thu ho ạch, trong th ời kỳ vận chuyển và b ảo quản cải bắp trong kho làm lá bắp thối hỏng (Vũ Triệu Mân, 2007) [6]
Theo tác giả Vũ Triệu Mân (2007) cho biết bệnh ñốm vòng do nấm
Alternaria brassicae (Berk.) Sacc gây ra N ấm thuộc bộ Moniliales, lớp nấm
bất toàn Sợi nấm ña bào, phân nhánh màu vàng nâu Bào tử phân sinh ña bào,
có nhiều vách ngăn ngang và ngăn dọc, màu nâu nhạt, hình trái lựu ñạn có vòi dài, kích thước khoảng 60 – 140 x 14 – 18 µm [6]
Cũng theo tác giả này nấm gây bệnh thuộc loài bán ký sinh, xâm nhập vào cây qua v ết thương xây xát và qua v ết hại của côn trùng ðiều kiện ẩm ướt, nhiệt ñộ trung bình khoảng 250C là thuận lợi cho bệnh phát triển [6]
Dựa vào các kết quả nghiên cứu ñặc ñiểm phát sinh, ñặc ñiểm sinh học các tác giả ñã ñưa ra một số biện pháp phòng trừ bệnh ñốm vòng:
Trang 28Một là dọn sạch tàn dư cây bệnh sau khi thu hoạch
Hai là dùng giống sạch bệnh, ngắt tỉa những lá già, lá bị bệnh, tưới nước và phải lên luống cao
Ba sử dụng thuốc hoá học ñể phòng trừ như: Zineb 80WP, Rovral, Kasuran 50WP Hạt giống trước khi gieo cần xử lý nước nóng 500C trong vòng 20-25 phút (Vũ Triệu Mân, 2007) [6]
2.1.3 Bệnh thối hạch
Bệnh thối hạch do nấm Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) De Bary gây ra
Nấm thuộc họ Scloerotiniceae, bộ Helotiales, lớp nấm túi
Theo tác giả Vũ Triệu Mân (2007) Cây con b ị bệnh, gốc thân sát m ặt ñất bị thối nhũn làm cây ñổ gục trên ruộng Trên cây lớn vết bệnh thường bắt ñầu từ các lá già sát m ặt ñất và góc thân Trên thân v ết bệnh lúc ñầu có màu vàng nâu, n ếu trời ẩm ướt chỗ bị bệnh thối nhũn, nếu trời khô hanh ch ỗ bị bệnh khô teo có màu nâu nhạt Hạch nấm ñược hình thành bám vào bắp Hạch nấm khi gặp ñiều kiện thuận lợi sẽ nảy mầm thành quả thể ñĩa Bên trong là hàng triệu bào tử túi [6]
Cũng theo tác giả này nấm gây bệnh thối hạch tồn tại chủ yếu ở dạng hạch nấm Bào tử túi lan truyền nhờ gió Ngoài gió thì nước mưa và nước tưới cây cũng
là con ñường lan truyền bệnh (Vũ Triệu Mân, 2007) [6]
Phòng trừ bệnh thối hạch theo quy trình phòng trừ tổng hợp Chú ý luân canh triệt ñể, vệ sinh ñồng ruộng, ruộng trồng phải khô ráo, thoát nước tốt (Tạ Thu Cúc, 2001) [1]
Có thể dùng thuốc Aliette 80WP, Ridomil 68WP ñể phun trừ khi bệnh chớm phát sinh
2.1.4 Bệnh sưng rễ cải bắp
Bệnh do nấm Plasmodiophora brassicae Woronin tồn tại trong ñất dưới
dạng bào tử, rồi tấn công vào bộ rễ, sống ký sinh và phát tri ển ở ñấy, gây hại
Trang 29không chỉ trên cải bắp mà cả cây súp lơ, cải thảo, …
Cây bị bệnh có tế bào rễ lớn gấp 3 lần tế bào rễ cây bình thường Các u sưng lúc ñầu có màu sắc tương tự màu rễ cây sau chuyển sang màu nâu, th ối mục (Vũ Triệu Mân, 2007) [6]
Nấm có thể xâm nhập trong suốt thời gian sinh trưởng của cây, nhưng thời
kỳ còn non là giai ñoạn dễ xâm nhập và phá hại mạnh (Vũ Triệu Mân, 2007) [6] Theo tác giả Vũ Triệu Mân (2007) dể phòng trừ bệnh sưng rễ cải bắp cần tiến hành chọn lọc giống , canh tác cải tạo ñất trồng, chọn ñất trung tính hoặc hơi kiềm, bón vôi thích hợp ở vườn ươm và ruộng sản xuất Không luân canh với các cây trồng họ thập tự Khi thấy bệnh xuất hiện phải nhổ cả gốc rễ ñem ñốt hoặc vùi sâu trong các hố có vôi bột [6]
Trang 303 Vật liệu và phương pháp nghiên cứu
3.1 ðối tượng nghiên cứu
- Cây cải bắp
- Bệnh nấm hại cây cải bắp: bệnh lở cổ rễ, bệnh thối hạch, bệnh sưng rễ, bệnh ñốm vòng
3.2 ðịa ñiểm và thời gian nghiên cứu
* ðề tài ñược tiến hành tại:
- Các vùng trồng bắp cải ở An Lão, An Dương - Hải Phòng
- Trung tâm nghiên cứu Bệnh cây nhiệt ñới trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội, Chi Cục Kiểm dịch vùng 1 – Hải Phòng
* Thời gian nghiên cứu: từ tháng 9/2008 ñến tháng 6/2009
3.3 Vật liệu nghiên cứu
- Giống cải bắp trồng phổ biến trong s ản xuất: Green Helmet, Tokita, KKcross (giống nhập nội)
- Các mẫu nấm gây bệnh trên cây cải bắp: nấm Alternaria brassicicola,
Alternaria brassacae, Sclerotinia sclerotiorum, Rhizoctonia solani thu th ập
ngoài ñồng ruộng tại các vùng trồng bắp cải tiến hành ñiều tra
- Chế phẩm sinh học nấm ñối kháng Trichoderma hazianum
(3,2.109cfu/gam), chất kích kháng Bion 50WG, các thuốc trừ nấm : Score 250EC , Ricide 72WP, Penncozeb 80WP
- Các môi trường nhân tạo : PCA,CMA,WA, PGA
- Dụng cụ nghiên cứu ñiều tra, giám ñịnh bệnh: ðĩa petri, buồng ñếm, ống nghiệm, kính hi ển vi, môi tr ường nhân t ạo, túi nilon, khay lam, lamen, ñũa thuỷ tinh, nồi hấp, tủ sấy, buồng cấy
3.4 Nội dung nghiên cứu
- Xác ñịnh thành phần bệnh hại trên c ải bắp vụ ñông năm 2008 và v ụ
Trang 31xuân năm 2009
- Giám ñịnh bệnh nấm chính hại cây cải bắp ở một số vùng sản xuất tại
An Lão, An Dương
- ðiều tra diễn biến bệnh hại trên cây cải bắp tại một số ruộng ñại diện
ở An Lão, An Dương vào vụ ñông 2008 và xuân năm 2009
- Nghiên cứu ảnh hưởng của môi trường ñến sự phát triển tản nấm và
mật ñộ bào tử nấm A brassicae và nấm A brassicicola, sự phát triển tản nấm
và sự hình thành hạch nấm Sclerotinia sclerotiorum
- Khảo sát hiệu lực phòng trừ nấm hại cải bắp của một số thuốc hoá học
trong phòng thí nghiệm, chế phẩm nấm ñối kháng Trichoderma hazianum và
chất kích kháng Bion ngoài ñồng ruộng
3.5 Phương pháp nghiên cứu
3.5.1 Phương pháp nghiên cứu ngoài ñồng
Lựa chọn vùng s ản xuất rau t ập trung ở hai huyện An Lão, huy ện An Dương – thành phố Hải Phòng chọn ngẫu nhiên một số ruộng ñại diện ñể tiến hành ñiều tra theo dõi các ch ỉ tiêu ðiều tra ñịnh kỳ 7 ngày/lần, theo 5 ñiểm chéo góc, mỗi ñiểm lấy 10 cây
3.5.1.1 Phương pháp ñiều tra bệnh hại lá cây cải bắp
- ðếm số lá bị bệnh và phân cấp cây bị bệnh theo thang 5 cấp như sau:
+ Cấp 0 : 0% diện tích của cây (lá) bị bệnh
+ Cấp 1: > 0- 1% diện tích của cây (lá) bị bệnh
+ Cấp 2: >1-5% diện tích của cây (lá) bị bệnh
+ Cấp 3: > 5% - 25% diện tích của cây (lá) bị bệnh
+ Cấp 4: > 25% - 50% diện tích của cây (lá) bị bệnh
+ Cấp 5: > 50% diện tích của cây (lá) bị bệnh
3.5.1.2 Phương pháp ñiều tra bệnh hại thân, rễ cây cải bắp
- Lấy 10 cây ngẫu nhiên /ñiểm ðếm số cây bị bệnh
Trang 32- Chỉ tiêu theo dõi: Tỷ lệ bệnh (%)
3.5.2 Phương pháp nghiên cứu trong phòng
Phân lập, nuôi cấy, giám ñịnh nguyên nhân gây bệnh hại theo tài liệu của Mathur và Olga (1999)
3.5.2.1 Các môi trường nuôi cấy
Trong quá trình nghiên c ứu chúng tôi ñã sử dụng các loại môi trường: PGA, PCA, CMA, WA
•••
• Môi trường PGA:
- Thành phần Khoai tây 250g, glucose 20g, Agar 20g, nước cất 1000ml
- Cách ñiều chế : Cân 250g khoai tây ñã rửa sạch, thái nhỏ cho vào nồi, thêm 1000ml nước cất ñun sôi Sau khi n ấu sôi ñược 30 phút thì l ọc lấy hết phần nước chiết, bổ sung thêm nước cất cho ñủ 1000ml Cho từ từ 20g ñường glucose và 20g agar vào dung d ịch nước trên Môi tr ường ñược cho vào các bình thuỷ tinh sau ñó ñem hấp khử trùng ở 1210C tại 1,5atm trong th ời gian
30 phút Sau ñó ñể môi trường nguội khoảng 550C ñưa vào buồng cấy ñể ñổ vào các ñĩa petri ñã sấy khử trùng
•••
• Môi trường PCA:
- Thành phần : khoai tây 20g, cà rốt 20g, Agar 20g, nước cất 1000ml
•••
• Môi trường WA: Thành phần Agar 20g, nước cất 1000ml
- Cách ñiều chế: Cho ñủ lượng nước cất vào nồi, ñun ñến gần sôi thì cho Agar vào khuấy ñều cho ñến khi sôi Sau ñó ñem hấp khử trùng ở 1210C (1,5atm) trong vòng 45 phút ðể nguội 55 – 600C trước khi rót vào ñĩa petri
• Môi trường CMA: Thành phần 30g bột ngô, 17g agar, 1000ml nước cất Cách nấu : trương tự như môi trường PGA
3.5.2.2 Phương pháp phân lập mẫu bệnh
•••
• Phương pháp lấy mẫu:
Trang 33Lấy mẫu lá, thân, rễ bệnh mới, ñiển hình cho bệnh cần nghiên cứu Sau khi lấy mẫu cho vào túi nilon có lót gi ấy thấm ẩm, ñem về phòng phân l ập luôn hoặc bảo quản ở nhiệt ñộ 40C trong tủ lạnh
• Các bước cơ bản phân lập nấm bệnh từ lá hoặc thân:
- Rửa mẫu lá hoặc thân trong nước ñể loại bỏ ñất bụi và các tạp chất khác Sau khi rửa cắt những mẫu bệnh dài 1-3cm, gồm cả mô bệnh và mô khoẻ
- Lau sạch bàn làm việc bằng cồn etylen 70%
- Nhúng panh và dao mổ trong cồn etylen 70% và hơ trên ngọn lửa ñèn cồn
- Nhúng nhanh mẫu lá hoặc thân vào cồn etylen 70% , rửa lại trong nước vô trùng và ñể khô trên giấy thấm vô trùng
- Dùng dụng cụ ñã khử trùng cắt những vết bệnh nhỏ (2 x 2mm) từ phần ranh giới giữa mô khỏe và mô b ệnh, sau ñó cấy lên môi tr ường WA (5 miếng một ñĩa 90cm) ñặt những miếng cấy gần mép ñĩa
- ðặt ñĩa cấy ở 250C trong ñiều kiện ánh sáng
- Khi nấm phát triển cách miếng mô b ệnh từ 1-2cm, dùng qua c ấy ñã khử trùng cắt phần ñỉnh sinh trưởng cấy truyền sang môi trường PGA ñể tiến hành giám ñịnh
3.5.2.3 Phương pháp giám ñịnh
Quan sát nấm dưới kính hiển vi, chụp ảnh và ño kích thước sợi nấm, bào
tử nấm, hạch nấm Quan sát màu sắc bào tử, hạch nấm, tản nấm trên môi trường (PGA) Từ ñó tra tài liệu giám ñịnh ñể xác ñịnh loài nấm ñang nghiên cứu
3.5.2.4 Nghiên cứu một số ñặc ñiểm sinh học của nấm Alternaria brassicae, A brassicicola, Sclerotinia sclerotiorum
* Ảnh hưởng của môi trường ñến sự phát triển tản nấm Alternaria
brassicae, A brassicicola, S sclerotiorum
Nuôi cấy nấm trên các môi trường PGA, PCA, CMA, WA m ỗi isolate
Trang 34có 3 lần nhắc lại, mỗi lần nhắc lại là một ñĩa petri Theo dõi ñường kính tản
nấm sinh trưởng, mật ñộ bào tử sau 3, 5, 7, 9 ngày (nấm A brassicae), sau 2,
4, 6, 8 ngày (nấm A brassicicola), sau 2,4,6 ngày (S sclerotiorum)
* Ảnh hưởng của môi trường ñến sự hình thành bào tử (mật ñộ bào tử)
nấm Alternaria brassicae, A brassicicola,
- ðo mật ñộ bào tử sau 3, 5, 7, 9 ngày (n ấm A Brassicae), sau 4, 6, 8 ngày (nấm A Brassicicola)
- Phương pháp ño mật ñộ bào tử: ðo bằng buồng ñếm
+ Ứng với mỗi ngày ño mật ñộ của 1 nấm lấy 4 ñĩa ñại diện cho 4 môi trường tương ứng
+ Với mỗi ñĩa cắt ¼ tản nấm cho vào 1 l ọ penicilin có 10 ml n ước vô trùng tương ứng, lắc ñều ta ñược dung dịch bào tử
+ Dùng pipet hút 1ml dd bào t ử trong lọ vừa pha nhỏ vào buồng ñếm, ñậy lamen, sau ñó dùng pipet hút hết phần dung dịch thừa
+ ðưa buồng ñếm soi dưới kính hiển vi
* Ảnh hưởng của thuốc hoá học ñến sự phát triển của tản nấm
Alternaria brassicae và Alternaria brassicicola
- Thí nghiệm với các công thức:
+ Score 250EC
+ Penncozeb 80WP
+ Ricide 72WP
- Cách tiến hành:
Trang 35+ Cân thuốc giảm 10 lần so với nồng ñộ khuyến cáo
3.5.2.5 Nghiên cứu ảnh hưởng của chế phấm nấm ñối kháng Trichoderma hazianum , chất kích kháng Bion ñến sự phát triển của nấm gây bệnh lở cổ rễ, ñốm vòng và thối hạch trên cây cải bắp
* Thí nghiệm ñược bố trí ngẫu nhiên với 3 lần nhắc lại tại xã Tân Dân - huyện An Lão - H ải Phòng g ồm 4 công th ức, mỗi công th ức là 1 ô có diện tích 30m2 có dải bảo vệ xung quanh Tổng diện tích làm thí nghiệm là 420m2
- Công thức 1: 4kg ch ế phẩm /sào ủ với 400kg phân chu ồng trước khi bón lót
- Công thức 2: 4kg chế phẩm /sào ủ với phân chuồng trước khi bón lót kết hợp với phun chất kích kháng Bion
- Công thức 3:Tưới chế phấm 4kg/sào kết hợp với phun chất kích kháng Bion (100g/ha)
- Công thức 4 : ðối chứng (Phòng trừ theo nông dân)
Trang 36Cách tiến hành : Trộn 4kg chế phẩm nấm ñối kháng Trichoderma
hazianum với 400 kg phân chu ồng hoai m ục ñể 10-15 ngày sau ñó bón vào
hốc cho một sào Bắc bộ, lấp ñất nhẹ rồi trồng cây Không sử dụng các thuốc trừ bệnh khác
Phòng trừ theo nông ñược tiến hành như sau: Sau khi tr ồng 5-10 ngày tiến hành nhổ bỏ các cây bị bệnh, dặm tỉa vào các chỗ bị khuyết nhằm ñảm bảo mật ñộ Thường xuyên ngắt tỉa các lá bị già, lá bệnh
3.5.2.6 Chỉ tiêu theo dõi
- Năng suất thực thu (tấn/ha)
Trang 37Trong ủú : a- số lỏ bị bệnh ở mỗi cấp
b- trị số cấp bệnh của mỗi cấp tương ứng
∑(a.b)- tổng số của cỏc tớch số axb
N- tổng số toàn bộ lỏ ủiều tra
T- trị số cấp bệnh cao nhất trong bảng phõn cấp bệnh ủó dựng
*Độ chặt của bắp đ−ợc tính theo công thức
P = G/(h1 x h2 x h3 x 0,52)
Trong đó: P - độ chặt của bắp, P<1 bắp rất chặt, P>1 bắp rất xốp
G - khối l−ợng trung bình bắp tính bằng gam
N: Số bào tử trung bỡnh của 30 ụ nhỏ
* Cụng thức tớnh hiệu lực của thuốc:
Cụng thức Abbott:
HLT(%) =∑(C - T)/ C x 100
Trong ủú:
C: ðường kớnh tản nấm ở cụng thức ủối chứng
T: Chỉ số bệnh hoặc ủường kớnh tản nấm ở cụng thức thớ nghiệm
Trang 38* Công thức tính hiệu quả phòng trừ của nấm Trichoderma sp theo công
Trong ñó:
HQPT: Hiệu quả phòng trừ B: Số cây chết ở công thức không xử lí Trichoderma hazianum
N : Số cây chết ở công thức xử lý Trichoderma hazianum sau thí nghiệm
Trang 394 Kết quả nghiên cứu và thảo luận
4.1 Tình hình bệnh hại trên cây cải bắp tại Hải Phòng
Hải Phòng là thành ph ố ven biển với khí hậu nhiệt ñới mát mẻ, ñộ ẩm cao do v ậy thuận lợi cho phát tri ển nông nghi ệp tuy nhiên c ũng là ñiều kiện làm phát sinh nhiều loài bệnh nấm hại cây trồng trong ñó ñặc biệt là các bệnh nấm gây hại cho cây rau là khá phổ biến
Cây cải bắp là một trong những cây rau có hiệu quả kinh tế cao của vụ ñông Do vậy việc xác ñịnh thành phần bệnh nấm hại cải bắp và ñặc ñiểm phát sinh phát triển của chúng là vi ệc có ý ngh ĩa quan trọng, từ ñó giúp xây dựng qui trình phòng trừ tổng hợp sâu bệnh hại có hiệu quả Chúng tôi ñã tiến hành nghiên cứu ñề tài này
4.1.1 Thành phần bệnh hại cây cải bắp vụ ñông 2008 và vụ xuân 2009
Vụ ñông và vụ xuân là 2 vụ trồng rau chính của thành phố Hải Phòng
Vụ ñông năm 2008 di ễn ra v ới thời tiết có rét xen k ẽ lẫn mưa nhỏ, nhiệt ñộ trung bình từ 21-270C, vụ xuân 2009 nhiệt ñộ trung bình dao ñộng từ 16-210C
là ñiều kiện thuận lợi cho cây trồng phát triển Bên cạnh ñó cũng tạo ñiều kiện cho nấm bệnh phát sinh, gây hại
Chúng tôi tiến hành ñiều tra thành phần bệnh hại trên cây c ải bắp tại hai huyện An Lão và An Dương, kết quả ñược trình bày ở bảng 4.1
Trang 40Bảng 4.1 Thành phần bệnh hại cây cải bắp vụ ñông 2008 và vụ xuân