Điều tra nghiên cứu bệnh virus xoăn vàng ngọn cà chua tại hà nội và phụ cận năm 2009 2010

luận văn, khóa luận, cao học, thạc sĩ, tiến sĩ, đề tài

BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI ------------      ---------- NGÔ VIỆT BẮC ðIỀU TRA NGHIÊN CỨU BỆNH VIRUS XOĂN VÀNG NGỌN CÀ CHUA TẠI HÀ NỘI VÀ PHỤ CẬN NĂM 2009 - 2010 LUẬN VĂN THẠC SĨ NÔNG NGHIỆP Chuyên ngành: BẢO VỆ THỰC VẬT Mã số : 60.62.10 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS. NGÔ BÍCH HẢO HÀ NỘI - 2010 Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun vn thc s nụng nghip . i LI CAM OAN Tôi xin cam đoan số liệu và kết quả nghiên cứu trong luận văn là hoàn toàn trung thực và cha từng đợc sử dụng hoặc công bố trong bất cứ công trình nào khác. Tôi xin cam đoan rằng mọi sự giúp đỡ cho việc thực hiện luận văn này đã đợc cảm ơn và các thông tin trích dẫn trong luận văn đều đã đợc chỉ rõ nguồn gốc. Tác giả luận văn Tác giả luận vănTác giả luận văn Tác giả luận văn Ngô Việt Bắc Ngô Việt BắcNgô Việt Bắc Ngô Việt Bắc Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun vn thc s nụng nghip . ii LI CM N Để hoàn thành đề tài tốt nghiệp ngoài sự cố gắng của bản thân tôi đã nhận đợc rất nhiều sự quan tâm giúp đỡ nhiệt tình của thầy cô, bạn bè và ngời thân. Trớc tiên, tôi xin đợc bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới thầy giáo PGS.TS. Ngô Bích Hảo và TS. Hà Viết Cờng - Giám đốc Trung tâm Bệnh cây nhiệt đới - trờng Đại học Nông nghiệp Hà Nội đã tận tình hớng dẫn, giúp đỡ tôi trong quá trình thực hiện đề tài và hoàn thành bản luận văn này. Tôi xin đợc gửi lời chân thành cảm ơn tới các thầy cô giáo trong Khoa Nông học, Viện Đào tạo Sau đại học. Tôi xin gửi lời cảm ơn tới các bà con nông dân tại nhiều nơi đã tạo điều kiện thuận lợi cho tôi trong thời gian thực hiện đề tài. Tôi cũng xin đợc chân thành cảm ơn các cán bộ tại Trung tâm Bệnh cây nhiệt đới, trờng Đại học Nông nghiệp Hà Nội đã nhiệt tình giúp đỡ và tạo mọi điều kiện thuận lợi cho tôi trong thời gian thực hiện đề tài. Bên cạnh đó tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới tất cả ngời thân, bạn bè những ngời luôn bên cạnh động viên giúp đỡ tôi trong quá trình học tập và thực hiện bản luận văn này. Hà Nội, ngày Hà Nội, ngày Hà Nội, ngày Hà Nội, ngày 1 11 16 66 6 tháng tháng tháng tháng 9 99 9 năm 2010 năm 2010 năm 2010 năm 2010 Tác giả luận văn Tác giả luận vănTác giả luận văn Tác giả luận văn Ngô Việt Bắc Ngô Việt BắcNgô Việt Bắc Ngô Việt Bắc Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ………. iii MỤC LỤC Lời cam ñoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt vii Danh mục các bảng viii Danh mục các hình x 1. MỞ ðẦU 1 1.1 ðặt vấn ñề 1 1.2 Mục ñích và yêu cầu của ñề tài 3 1.2.1 Mục ñích 3 1.2.2 Yêu cầu 3 2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4 2.1 Những nghiên cứu ở ngoài nước 4 2.1.1 Bệnh virus hại cà chua trên thế giới 4 2.1.2 Những nghiên cứu về Tomato yellow leaf curl virus 8 2.2 Những nghiên cứu trong nước 15 3. ðỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 3.1 ðối tượng, ñịa ñiểm và thời gian nghiên cứu 18 3.1.1 ðối tượng nghiên cứu 18 3.1.2 ðịa ñiểm và thời gian nghiên cứu 18 3.2 Vật liệu nghiên cứu 18 3.2.1 Thu thập mẫu, cây thí nghiệm và côn trùng môi giới 18 3.2.2 Thiết bị, dụng cụ và hoá chất nghiên cứu 18 3.3 Nội dung nghiên cứu 19 3.4 Phương pháp nghiên cứu 20 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ………. iv 3.4.1 Phương pháp ñiều tra ngoài ñồng ruộng 20 3.4.2 Phương pháp thu thập, bảo quản mẫu bệnh virus hại cà chua 21 3.4.3 Xác ñịnh phổ ký chủ của bệnh xoăn vàng ngọn cà chua phương pháp cây chỉ thị 21 3.4.4 Xác ñịnh tính gây bệnh của virus gây bệnh xoăn vàng ngọn cà chua bằng kỹ thuật lây nhiễm agroiculation 23 3.4.5 Khảo sát hiệu quả của sử dụng bẫy dính màu vàng ñối với phòng trừ môi giới truyền virus xoăn vàng ngọn cà chua 24 3.4.6 Khảo sát hiệu lực phòng trừ của thuốc hóa học Actara 25WG phòng trừ môi giới truyền virus xoăn vàng ngọn cà chua 25 3.4.7 Phương pháp giám ñịnh virus bằng phương pháp huyết thanh 25 3.4.8 Phương pháp giám ñịnh virus gây bệnh bằng phương pháp PCR 27 3.5 Phương pháp tính và xử lý số liệu 30 3.5.1 ðiều tra ngoài ñồng ruộng 30 3.5.2 Thí nghiệm trong nhà lưới 30 4. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 31 4.1 Kết quả ñiều tra bệnh do virus hại cà chua tại Hà Nội và vùng phụ cận năm 2009 - 2010 31 4.1.1 Mô tả triệu chứng bệnh 31 4.1.2 Tình hình bệnh virus tại Hà Nội và vùng phụ cận vụ xuân hè năm 2010 34 4.1.3 Kết quả ñiều tra bệnh xoăn vàng ngọn cà chua trên ruộng tại Hà Nội và vùng phụ cận vụ xuân hè năm 2010 35 4.2 Mối quan hệ bọ phấn (Bemisia tabaci) và bệnh xoăn vàng ngọn cà chua vụ xuân hè năm 2010 tại Hà Nội và vùng phụ cận 37 4.2.1 Diễn biến bệnh xoăn vàng ngọn và mật ñộ bọ phấn trên giống cà chua XanhPie vụ xuân hè 2010 tại Cổ Bi - Gia Lâm - Hà Nội 37 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ………. v 4.2.2 Diễn biến bệnh xoăn vàng ngọn và mật ñộ bọ phấn trên giống cà chua Mec-89 và VL-2000 vụ xuân hè 2010 tại Văn Lâm - Hưng Yên 39 4.2.3 Diễn biến bệnh xoăn vàng ngọn trên tập ñoàn giống cà chua trồng tại Viện Nghiên cứu Rau quả vụ xuân hè năm 2010 41 4.2.4 Diễn biến bệnh xoăn vàng ngọn trên tập ñoàn giống cà chua tại Khoa Nông học, trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội vụ xuân hè năm 2010 44 4.3 Kết quả phòng trừ bệnh xoăn vàng ngọn cà chua bằng bẫy dính màu vàng và biện pháp hoá học 48 4.3.1 Ảnh hưởng của bẫy dính màu vàng ñến bệnh xoăn vàng ngọn và mật ñộ bọ phấn trên giống cà chua Hồng Ngọc vụ xuân hè 2010 tại ða Tốn - Gia Lâm - Hà Nội 48 4.3.2 Ảnh hưởng của biện pháp hóa học ñến bệnh xoăn vàng ngọn và mật ñộ bọ phấn trên giống cà chua 269 vụ xuân hè 2010 tại Tân Quang - Văn Lâm - Hưng Yên 50 4.3.3 ðánh giá ảnh hưởng của bệnh xoăn vàng ngọn cà chua ñến một số chỉ tiêu sinh trưởng phát triển của giống cà chua 269 53 4.4 Kết quả lây nhiễm nhân tạo xác ñịnh phổ ký chủ của virus gây bệnh xoăn vàng ngọn cà chua 54 4.5 Kết quả lây nhiễm bệnh nhân tạo bệnh xoăn vàng ngọn cà chua bằng phương pháp agroinoculation và truyền qua bọ phấn 56 4.6 Kết quả kiểm tra các mẫu bệnh virus hại cà chua thu thập ngoài ñồng ruộng năm 2010 bằng kỹ thuật ELISA và PCR 57 4.6.1 Kết quả kiểm tra ELISA mẫu bệnh hại cà chua thu thập ngoài ñồng ruộng năm 2010 57 4.6.2 Kết quả kiểm tra PCR mẫu bệnh virus gây hại cà chua bằng cặp mồi ñặc hiệu ToLCVV 61 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ………. vi 4.6.3 Kết quả kiểm tra PCR mẫu bệnh virus gây hại cà chua bằng cặp mồi ñặc hiệu TYLCVNV 63 4.6.4 Kết quả kiểm tra PCR mẫu bệnh hại cà chua bằng cặp mồi chung BegoA-For1/BegoA-Rev1 66 5. KẾT LUẬN VÀ ðỀ NGHỊ 69 5.1 Kết luận 69 5.2 ðề nghị 70 TÀI LIỆU THAM KHẢO 71 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ………. vii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT STT Chữ viết tắt Từ viết vắt 1 CPB Cây phát bệnh 2 CT Công thức 3 MðBP Mật ñộ bọ phấn 4 NXB Nhà xuất bản 5 SCTN Số cây thí nghiệm 6 STT Số thứ tự 7 TLB Tỷ lệ bệnh 8 TKTD Thời kỳ tiềm dục 9 CTAB Cetryl Ammonium Bromide 10 ELISA Enzyme Linked Immunosorbent Assay 11 ICTV International Comittee on Taxonomy of Viruses 12 PCR Polymerase Chain Reaction 13 RNA Ribonucleic Acid 14 RT - PCR Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction 15 ToLCVV Tomato leaf curl Vietnam virus 16 TYLCVNV Tomato yellow leaf curl Vietnam virus Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ………. viii DANH MỤC CÁC BẢNG STT Tên bảng Trang 4.1. Tình hình bệnh virus hại cà chua vụ xuân hè 2010 tại Hà Nội và vùng phụ cận 34 4.2. Kết quả ñiều tra bệnh xoăn vàng ngọn cà chua tại Hà Nội và các vùng phụ cận năm 2010 36 4.3. Diễn biến bệnh xoăn vàng ngọn và mật ñộ bọ phấn trên giống cà chua XanhPie vụ xuân hè 2010 tại Cổ Bi - Gia Lâm - Hà Nội 38 4.4. Diễn biến bệnh xoăn vàng ngọn và mật ñộ bọ phấn trên giống cà chua Mec - 89 và VL-2000 vụ xuân hè 2010 tại Văn Lâm - Hưng Yên 40 4.5. Diễn biến bệnh xoăn vàng ngọn trên tập ñoàn giống cà chua trồng tại Viện Nghiên cứu Rau quả vụ xuân hè năm 2010 42 4.6. ðánh giá tính kháng, nhiễm bệnh xoăn vàng ngọn của các dòng/giống cà chua trồng tại Viện Nghiên cứu Rau quả vụ xuân hè năm 2010 43 4.7. Diễn biến bệnh xoăn vàng ngọn trên tập ñoàn giống cà chua trồng tại Khoa Nông học, trường ðHNN Hà Nội vụ xuân hè năm 2010 45 4.8. ðánh giá tính kháng, nhiễm bệnh xoăn vàng ngọn của các dòng/giống trồng tại Khoa Nông học, trường ðHNN Hà Nội vụ xuân hè năm 2010 47 4.9. Ảnh hưởng của bẫy dính màu vàng ñến bệnh xoăn vàng ngọn và mật ñộ bọ phấn trên giống cà chua Hồng Ngọc vụ xuân hè 2010 tại ða Tốn - Gia Lâm - Hà Nội 49 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ………. ix 4.10. Ảnh hưởng của biện pháp hóa học ñến bệnh xoăn vàng ngọn và mật ñộ bọ phấn trên giống cà chua 269 vụ xuân hè 2010 tại Tân Quang - Văn Lâm - Hưng Yên 52 4.11. So sánh ảnh hưởng của bệnh xoăn vàng ngọn cà chua ñến một số chỉ tiêu sinh trưởng phát triển của giống cà chua 269 53 4.12. Kết quả lây nhiễm nhân tạo xác ñịnh phổ ký chủ của virus gây bệnh xoăn vàng ngọn cà chua 54 4.13. Kết quả lây nhiễm bệnh nhân tạo bệnh xoăn vàng ngọn cà chua bằng phương pháp agroinoculation và truyền qua bọ phấn 56 4.14. Kết quả kiểm tra một số loại virus gây hại cà chua ngoài ñồng bằng phương pháp ELISA gián tiếp 58 4.15. Kết quả kiểm tra PCR mẫu virus gây hại cà chua bằng cặp mồi ñặc hiệu ToLCVV 62 4.16. Kết quả kiểm tra PCR mẫu virus gây hại cà chua bằng cặp mồi ñặc hiệu TYLCVNV 64 4.17. Kiểm tra sự có mặt của begomovirus trên cây cà chua bằng phương pháp PCR dùng cặp mồi chung BegoA-For1/BegoA-Rev1 67 [...]... ði u tra b nh virus h i cà chua m t s vùng thu c Hà N i và ph c n năm 2009 - 2010 - Giám ñ nh virus gây b nh b ng k thu t ELISA và PCR - ði u tra ñ c ñi m phát tri n c a b nh xoăn vàng ng n cà chua t i vùng Hà N i và ph c n - Th nghi m bi n pháp phòng tr môi gi i truy n b nh xoăn vàng ng n cà chua b ng bi n pháp hoá h c và b y dính màu vàng - Xác ñ nh ph ký ch c a virus gây b nh xoăn vàng ng n cà chua. .. ng phòng ch ng b nh virus h i cà chua ph c v s n xu t Xu t phát t v n ñ trên, chúng tôi ti n hành th c hi n ñ tài: “ði u tra nghiên c u b nh virus xoăn vàng ng n cà chua t i Hà N i và ph c n năm 2009 - 2010 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ nông nghi p ……… 2 1.2 M c ñích và yêu c u c a ñ tài 1.2.1 M c ñích ði u tra và nghiên c u b nh virus xoăn vàng ng n cà chua t i vùng ð ng b... Thí nghi m dùng b y dính màu vàng trong phòng ch ng b nh xoăn vàng ng n cà chua t i vùng Gia Lâm, Hà N i năm 2010 4.8 48 nh hư ng c a b y dính màu vàng ñ n b nh xoăn vàng ng n và m t ñ b ph n trên gi ng cà chua H ng Ng c v xuân hè 2010 t i ða T n - Gia Lâm - Hà N i 4.9 49 nh hư ng c a bi n pháp hóa h c ñ n b nh xoăn vàng ng n và m t ñ b ph n trên gi ng cà chua 269 v xuân hè 2010 t i Tân Quang - Văn Lâm... tình hình b nh virus xoăn vàng ng n cà chua trên t p ñoàn gi ng cà chua t i Gia Lâm, Hà N i 5 Lây nhi m nhân t o b ng côn trùng môi gi i nh m xác ñ nh ph ký ch c a virus gây b nh xoăn vàng ng n cà chua (Tomato yellow leaf curl virus) 6 Th nghi m m t s bi n pháp phòng tr môi gi i lan truy n b nh virus xoăn vàng ng n cà chua b ng b y dính m u vàng và b ng bi n pháp hóa h c 3.4 Phương pháp nghiên c u 3.4.1... begomovirus gây ra như b nh xoăn vàng lá cà chua - m t b nh ñư c xem là nguy hi m nh t trên cà chua kh p th gi i B nh xoăn vàng lá cà chua do Begomovirus thu c h Geminiviridae gây h i, b nh lan truy n trên ñ ng ru ng tr ng cà chua qua côn trùng môi gi i là loài b ph n Bemisia tabaci theo ki u b n v ng tu n hoàn Vi c phòng tr b nh xoăn vàng lá cà chua và các b nh do begomovirus khác nhìn chung là khó vì virus. .. 52 4.10 Lây nhi m b nh xoăn vàng ng n cà chua b ng b ph n Bemisia 55 tabaci 4.11 K t qu ki m tra ELISA m u b nh h i cà chua thu th p ngoài ñ ng ru ng năm 2010 60 4.12 K t qu ki m tra PCR m u virus gây h i cà chua b ng c p m i ñ c hi u ToLCVV 63 4.13 K t qu ki m tra PCR m u virus gây h i cà chua b ng c p m i ñ c hi u TYLCVNV 4.14 Ki m tra s 65 có m t c a begomovirus trên cây cà chua b ng phương pháp... chính, là tr ng i l n nh t gây c n tr s n xu t cà chua B nh xoăn vàng lá cà chua là m t trong các b nh h i chính trên cây cà chua, gây t n th t l n v năng su t và ph m ch t cà chua B nh làm cho lá cà chua xoăn nh l i, cây g n như không có qu Thi t h i năng su t t 60 90%, th m chí th t thu hoàn toàn B nh xoăn vàng ng n cà chua thư ng phát sinh và gây h i n ng vào mùa khô, m t s vùng ñôi khi v n th y b... HÌNH STT Tên hình Trang 4.1 Tri u ch ng kh m vàng 33 4.2 Tri u ch ng xoăn vàng ng n 33 4.3 Tri u ch ng kh m lá dương x 33 4.4 Tri u ch ng cu n lá, cây th p lùn 33 4.5 Di n bi n b nh xoăn vàng ng n và m t ñ b ph n trên gi ng cà chua XanhPie v xuân hè 2010 t i C Bi - Gia Lâm - Hà N i 4.6 38 Di n bi n b nh xoăn vàng ng n và m t ñ b ph n trên gi ng cà chua Mec - 89 và VL-2000 v xuân hè 2010 t i Văn Lâm... ngoài b nh xoăn vàng lá cà chua (TYLCV) còn có các b nh virus khác thư ng g p là virus Y (Potato virus Y), virus X (Potato virus X), TMV (Tobacco mosaic virus) , CMV (Cucumber mosaic virus) Nguy n Thơ (1984) [11] cho bi t b nh xoăn vàng ng n cà chua gây thi t h i ñ n 80 - 90% năng su t Cũng theo tác gi , khi m t ñ b ph n (Besmisia tabaci) t 56 - 58 con/cây cà chua thì t l b nh xoăn vàng lên t i 99,44% Khi... u trong nư c B nh virus xoăn vàng ng n cà chua ñư c phát hi n và b t ñ u nghiên c u Vi t Nam vào nh ng năm 60, cùng kho ng th i gian v i nhi u nư c trên th gi i Nguy n Thơ (1984) [11] ñã xác ñ nh ñư c b nh xoăn vàng ng n cà chua (TYLCV) Vi t Nam là khá ph bi n và gây thi t h i l n nh t trên cây cà chua B nh lan truy n qua b ph n (Bemisia tabaci), t 3 ñ n 4 b ph n ti p xúc cây b nh và truy n trên cây