nghiên cứu tác dụng kháng viêm cấp của viên nang tk

BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC TP HỒ CHÍ MINH BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP TRƯỜNG NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG KHÁNG VIÊM CẤP CỦA VIÊN NANG TK Mã số: Chủ nhiệm đề tài: THS NGUYỄN THỊ PHƯƠNG THÙY Tp Hồ Chí Minh, tháng 04 năm 2018 BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC TP HỒ CHÍ MINH BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP TRƯỜNG NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG KHÁNG VIÊM CẤP CỦA VIÊN NANG TK Mã số: Chủ nhiệm đề tài Nguyễn Thị Phương Thùy Tp Hồ Chí Minh, tháng 04 năm 2018 THƠNG TIN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ĐỀ TÀI KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP TRƯỜNG Thông tin chung: - Tên đề tài: Nghiên cứu tác dụng hạ kháng viêm cấp viên nang TK (Thiên niên kiện, Nghệ, Đậu đen, Sâm đại hành, Cỏ xước) - Mã số: - Chủ nhiệm đề tài: ThS Nguyễn Thị Phương Thùy Điện thoại: 0987188759 Email: ntpthuy@ump.edu.vn - Đơn vị quản lý chuyên môn (Khoa, Tổ môn): Bộ môn Bào chế Đông dược – Khoa Y học cổ truyền - Thời gian thực hiện: 05/2017 – 04/2018 Mục tiêu: Mục tiêu chung: Đánh giá tác dụng hạ kháng viêm, giảm đau viên nang TK Mục tiêu cụ thể: Đánh giá tác dụng kháng viêm cấp viên nang TK thực nghiệm gây phù chân chuột carragenin Nội dung chính: Đánh giá tác dụng kháng viêm cấp viên nang TK thực nghiệm: - Gây phù chân chuột dung dịch carragenin 1% - Thử nghiệm lô xác định mức độ giảm viêm chân chuột lô thử nghiệm so với lô chứng Kết đạt (khoa học, đào tạo, kinh tế-xã hội, ứng dụng, ) Viên nang TK liều uống 0,9 g/kg 0,6 g/kg thể trọng chuột (tương đương liều sử dụng từ 2-3 viên/ngày/ người) có tác dụng kháng viêm cấp mơ hình gây viêm phù bàn chân chuột Carragenin Trong nghiên cứu trước chúng tôi, viên nang TK liều uống 0,9 g/kg 0,6 g/kg thể trọng chuột chứng minh có tác dụng hạ acid uric cấp, dự phịng tăng acid uric khơng thể độc tính cấp thực nghiệm Như vậy, viên thuốc TK có nhiều tác dụng điều trị Điều có lợi người bệnh, giúp họ sử dụng nhiều thuốc, khơng phải tn thủ q nhiều lịch trình uống thuốc giảm tác dụng phụ không mong muốn sử dụng lúc nhiều loại thuốc khác nhau, từ khả tuân thủ điều trị người bệnh cao hơn, giúp cho việc điều trị đạt kết tốt Thiên niên kiện, Sâm đại hành, Nghệ, Cỏ xước, Đậu đen vốn thuốc Nam sử dụng lâu đời, dễ trồng, dễ thu hái, thích hợp với khí hậu thổ nhưỡng nước ta, phát triển thành vùng chuyên canh loại thuốc Việc vừa giúp cung cấp thường xuyên nguồn dược liệu sạch, đảm bảo nhu cầu nước, vừa giải công ăn việc làm cho nhiều đối tượng lao động, lại phù hợp với sách phát triển vườn thuốc Nam nước ta, bảo vệ nguồn dược liệu quý MỤC LỤC MỤC LỤC i DANH MỤC CÁC BẢNG ii MỞ ĐẦU .1 Chương - TỔNG QUAN 1.1 GIỚI THIỆU DƯỢC LIỆU NGHIÊN CỨU 1.2 GIỚI THIỆU VIÊN NANG TK 1.3 MỘT SỐ MƠ HÌNH GÂY VIÊM CẤP TRÊN THỰC NGHIỆM 1.4 CÁC CƠNG TRÌNH NGHIÊN CỨU LIÊN QUAN ĐẾN ĐỀ TÀI 10 Chương - ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .12 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 12 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 13 2.3 THỐNG KÊ VÀ ĐÁNH GIÁ KẾT QUẢ 14 Chương - KẾT QUẢ 15 Chương - BÀN LUẬN .18 Chương - KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ .21 5.1 Kết luận tác dụng hạ acid uric cấp 21 5.2 Đề nghị .21 TÀI LIỆU THAM KHẢO 22 DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng Mức độ viêm chân chuột lô thử nghiệm 15 Bảng Mức độ giảm viêm chân chuột lô thử nghiệm so với lô chứng 16 MỞ ĐẦU Các bệnh lý xương khớp bệnh lý thường gặp, chiếm tỷ lệ cao nước phát triển phát triển Tuy gây tử vong bệnh để lại di chứng nặng nề cho người bệnh, gây đau đớn kéo dài tàn phế cho bệnh nhân, với người trung niên cao tuổi Nhóm bệnh lý gắn liền với nghỉ việc, giảm suất lao động hạn chế hoạt động hàng ngày Tại Việt Nam, có đến 30% người 35 tuổi bị thối hoá khớp, tỷ lệ người 60 tuổi 60% 80 tuổi 85% [1] Các bệnh lý xương khớp không gây gánh nặng kinh tế - tinh thần cho thân người bệnh mà cịn cho gia đình, xã hội Đây thường bệnh mãn tính nên địi hỏi phải điều trị dài ngày Các nhóm thuốc điều trị NSAIDs, corticoid… thường gây biến chứng viêm loét dày, suy gan, thận… sử dụng lâu ngày [2][7] [16] Vì vậy, thuốc điều trị hiệu đau nhức xương khớp, viêm khớp lại sử dụng lâu dài với tác dụng phụ quan tâm Viên nang TK bào chế từ dược liệu Thiên niên kiện, Nghệ, Đậu đen, Sâm đại hành, Cỏ xước Các dược liệu thuốc có thành phần chủ yếu thuốc địa phương, nguồn dược liệu sẵn có, dễ khai thác sử dụng Viên nang TK lưu hành dạng thực phẩm chức năng, hỗ trợ điều trị đau xương khớp, viêm khớp, gout, hỗ trợ điều trị tăng acid uric huyết bệnh nhân đón nhận, cho phản hồi tốt, giúp bệnh nhân giảm sưng, giảm đau, hạ acid uric huyết Y học cổ truyền quan niệm tất bệnh có đau nhức khớp xương, có sưng nóng đỏ hay tê, nặng khớp nằm phạm trù chứng tý hay bệnh tý Chính khí hư suy mắc bệnh lâu ngày, hay chức hoạt động thể bị suy yếu, làm cho khí huyết giảm sút khơng ni dưỡng cân mạch làm cho tình trạng bệnh nặng them [13] Bài thuốc viên nang TK xây dựng dựa học thuyết Thủy Hỏa nghĩa tả Hỏa nhiệt tạng Tâm, tư bổ Thận thủy phía Trong thận khơng phải có thủy mà có hỏa mệnh mơn, thận khơng hư thủy đủ chế hỏa, thận hư thủy khơng chế hỏa mà sinh chứng nhiệt, nên sử dụng vị thuốc tư âm, nhiệt, tả hoả để thủy tưới vào hỏa, tư dưỡng chân âm thận [3] Viên nang TK gồm vị thuốc qui vào kinh can, thận tác dụng bổ can, thận phù hợp với nguyên nhân chế bệnh sinh theo YHCT tiên thiên bất túc, bệnh lâu ngày làm can thận hư suy Ngoài ra, loại dược liệu Thiên niên kiện, Nghệ, Đậu đen, Sâm đại hành, Cỏ xước có tác dụng kháng viêm chuột bị gây phù, chứng minh khoa học Bài thuốc kết hợp có tác dụng: khu phong, tán hàn, trừ thấp, hành khí, thống, thơng kinh lạc, hoạt huyết, hóa ứ, bổ can thận, giảm đau, kháng viêm, lợi tiểu, hạ acid uric huyết Các tác dụng điều trị chứng tý, bổ can thận, ni dưỡng khí huyết, làm mạnh gân xương Ngồi ra, nghiên cứu trước chúng tơi chứng minh viên nang TK độc tính cấp chuột, khơng làm chết chuột liều tối đa uống Dmax = 30 g/kg chứng minh viên nang TK thể tác dụng hạ acid uric cấp chuột liều uống 0,6 g/kg thể trọng chuột 0,9 g/kg thể trọng chuột [8] Vì vậy, nghiên cứu này, tiến hành nghiên cứu tác dụng kháng viêm viên nang TK với liều uống 0,6 g/kg thể trọng chuột 0,9 g/kg thể trọng chuột Nếu chứng minh viên nang có tác dụng kháng viêm ngồi việc viên nang TK có tác dụng điều trị viêm khớp, người bị bệnh gout điều trị hạ acid uric cấp điều trị triệu chứng viêm chế phẩm Nhằm khai thác mạnh y học cổ truyền, đưa mặt hàng thuốc Y học cổ truyền vào phục vụ công tác điều trị, đồng thời chứng minh tác dụng dược lý viên nang TK, tiến hành thực đề tài "Nghiên cứu tác dụng kháng viêm cấp viên nang TK (Thiên niên kiện, Nghệ, Đậu đen, Sâm đại hành, Cỏ xước)” góp phần làm sở cho nghiên cứu ứng dụng viên nang TK điều MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU Mục tiêu tổng quát Nghiên cứu tác dụng kháng viêm viên nang TK Mục tiêu cụ thể: Đánh giá tác dụng kháng viêm cấp viên nang TK thực nghiệm gây phù chân chuột carragenin Chương - TỔNG QUAN 1.1 GIỚI THIỆU DƯỢC LIỆU NGHIÊN CỨU 1.1.1 Thiên niên kiện (Rhizoma Homalomene occulta(Lour) Schott) ❖ Bộ phận dùng: thân, rễ ❖ Thành phần hóa học: tinh dầu màu vàng nhạt, mùi thơm dễ chịu, có chứa 40% I Linalol, Terpineol, 2% ester tính theo Linalyl acetat Ngoài cịn có Sabimen, Limonen, α- Terpinen, Acetaldehyde Aldehyde Propionic [18] ❖ Tính vị: vị đắng, cay, mùi thơm, tính ấm Qui kinh: Can, Thận ❖ Tác dụng dược lý theo YHCT: khu phong, trừ thấp, thống, hoạt huyết, tiêu ứ, tiêu thủng, bổ gân cốt ❖ Tác dụng dược lý theo YHHĐ [18]: - Giảm đau, chống viêm: thân rễ Thiên niên kiện có tác dụng ức chế phù bàn chân chuột cống trắng (gây phù kaolin) - Tác dụng ức chế co thắt trơn ruột chuột lang cô lập gây nên Histamine Acetylcholine Gây giãn mạch ngoại biên có tác dụng (yếu) ổn định màng hồng cầu in vitro - Tác dụng ức chế xanthine oxidase [9] 1.1.2 Sâm đại hành (Eleutherine subaphylla) ❖ Thành phần hóa học: Có chất kháng sinh eleutherin, isoeleutherin eleuthenol (Năm 1973, Lê Văn Hồng Nguyễn Văn Đàn xác định chất eleutherin, isoeleutherin, eleutherol) điểm chảy, phổ UV, IR (Thông báo Dược liệu 1973, 18, Revue médicale (Hanoi) 1975, 157 - 69 Tạp chí Hóa học 1978, 16 (1), 29 - 33 ❖ Tính vị: ngọt, nhạt, tính bình Qui kinh: Can, tỳ, phế ❖ Tác dụng dược lý theo YHCT: tư âm, dưỡng huyết, huyết, sinh cơ, khái, tiêu độc ❖ Tác dụng dược lý theo YHHĐ: dịch chiết tồn phần có tác dụng ức chế rõ rệt invitro phế cầu khuẩn, liên cầu tan máu, tụ cầu vàng, tác dụng yếu với Shigella flexneri, S dysenteriae, Bacillus anthracis, B.mycoides, có tác dụng chống viêm cấp tính mạn tính, khơng gây biểu độc tính, khơng ảnh hưởng đến thành phần máu chức gan thận thử nghiệm độc tính cấp [17] 1.1.3 Nghệ (Curcuma longa L hay Curuma domestica Lour) ❖ Bộ phận dùng: thân rễ nghệ gọi Khương hoàng (Rhizoma Curcumae longae) rễ củ gọi Uất kim (Radix Curcumae longae) ❖ Thành phần hóa học: củ nghệ có chứa 3,5-4 % hỗn hợp chất màu, thành phần chủ yếu curcumin, tinh thể nâu đỏ ánh tím, khơng tan nước, tan rượu, ete, cloroform, dung dịch có huỳnh quang màu xanh lục ❖ Tính vị: thân có vị cay đắng, tính ấm Rễ củ có vị cay đắng, ngọt, tính mát Qui kinh: can, tỳ ❖ Tác dụng dược lý YHCT: hành khí, tán ứ huyết, giảm đau, giải phong ❖ Tác dụng dược lý YHHĐ: tác dụng điều hòa miễn dịch, lợi mật, kháng viêm, kháng khuẩn, hạ acid uric máu [17] 1.1.4 Cỏ xước (Achyranthes aspera) ❖ Bộ phận dùng: rễ, tồn ❖ Thành phần hóa học: 81.9 % nước, 3.7% protid, 9.2% glucid, 2.9% chất xơ, 2.3% tro, 2.6% carotene, 2.0% vitamin C ❖ Tính vị: vị đắng, chua, tính mát Qui kinh: can, thận ❖ Cơng dụng: lợi tiểu, chống viêm giai đoạn cấp mạn, kích thích co bóp tử cung, chữa thấp khớp tình trạng tương tự lâm sàng thể bị chấn thương bong gân, ngã, va đập… ❖ Mơ hình gây tăng tính thấm thành mạch phenethylamine [2] hay acid acetic [20]: chất gây viêm kích thích giải phóng chất trung gian histamin, prostaglandin, leucotrien làm giãn tiểu động mạch tiểu tĩnh mạch, gây tăng tính thấm thành mạch Kết dịch protein huyết tương bị thoát gây phù Các thuốc có khả ức chế tăng tính thấm thành mạch có tác dụng giảm phù, chống viêm ❖ Mơ hình gây ban đỏ tia UV (Wilhelmi, 1949) [2] hay tia X (Hirabayashi Graham, 1969) [15]: chuột đặt túi da đục lỗ (kích thước 1,5 x 2,5 cm) cho phép tia chiếu vào vùng Chiếu tia phút cho chuột uống thuốc Ban đỏ ghi nhận lại thời điểm sau chiếu tia Lý chọn mơ hình gây viêm phù chân chuột carragenin: Trong trình gây viêm carragenin, mức độ viêm tối đa khoảng thời gian 3-4 giờ, aerosil kaolin thời gian gây viêm kéo dài đến 24 hay ngày Do cần lựa chọn tác nhân gây viêm phù hợp với mục đích nghiên cứu, khơng theo tác dụng chống viêm mạnh hay yếu mà cịn phụ thuộc vào thời gian thuốc có tác dụng Được sử dụng nhiều nhà nghiên cứu chứng minh phù hợp với mục đích sàng lọc đánh giá tác dụng chống viêm thuốc kháng viêm không steroid, thuốc kháng histamine, kháng serotonin, mơ hình gây phù bàn chân chuột mơ hình đơn giản, dễ tiến hành viêm cấp đáp ứng vài giờ, thời gian tiến hành ngắn 1.4 CÁC CƠNG TRÌNH NGHIÊN CỨU LIÊN QUAN ĐẾN ĐỀ TÀI Nghiên cứu trước chứng minh viên nang TK độc tính cấp chuột, khơng làm chết chuột liều tối đa uống Dmax = 30 g/kg chứng minh viên nang TK thể tác dụng hạ acid uric cấp 0,9 g/kg thể trọng chuột [8] Điều phù hợp với số nghiên cứu tác dụng hạ acid uric số dược liệu hay số phối hợp dược liệu như: - Theo Noro, đánh giá tác dụng ức chế xanthin oxidase in vitro thông qua việc định lưọng acid uric đo quang bước sóng 290 nm phương pháp khả thi, thường dùng để sàng lọc dược liệu có tác dụng hạ acid uric Nồng độ ức chể 50% hoạt độ xanthin oxidase Thiên niên kiện 58,1, làm giảm hình thành acid uric giảm viêm Điều xanthine oxidase enzyme quan trọng đóng vai trị tăng acid uric máu, xúc tác cho trình oxy hóa hypoxanthine [9] - Theo tác giả Nguyễn Phương Dung tác dụng hạ acid uric cao chiết cồn Diệp hạ châu, Nghệ chuột nhắt, cho thấy Cao chiết ethanol Nghệ liều 20 g/kg thể trọng làm giảm 52,29% acid uric máu (P [9] Nguyễn Thi Thu Hồi, Trần Thị Bích Ngọc, Hồng Thị Thanh Thảo, Phạm Đức Vịnh (2013), “Sàng lọc thuốc Việt nam cóa tác dụng ức chế xanthin oxydase in vitro”, Khóa luận tốt nghiệp dược sĩ, Đại học Dược Hà Nội [10] Nguyễn Thị Thu Hương, Dương Thị Mộng Ngọc, “Khảo sát độc tính bán trường diễn tác dụng kháng viêm giảm đau cao phối hợp thiên niên kiện bách bệnh thực nghiệm”, Tạp chí Y học TPHCM, tập 18, phụ số 1, tr.156- [11] Nguyên Thị Thu Hương, Trần Công Luận, Lã Văn Kính,“Khảo sát tác dụng kháng khuẩn kháng viêm cấp công thức phối hợp dược liệu xạ can, bọ mắm dâu tằm”, Tạp chí Y học TPHCM, tập 18, phụ số 1, tr.150 – 155 [12] Nguyễn Thị Thu Hương, Trần Mỹ Tiên, Nguyễn Lê Việt Hùng 2014), “Khảo sát số tác dụng dược lý thực nghiệm viên xương khớp Sutong”, Tạp chí Y học TP Hồ Chí Minh, tập 18, Phụ số 1, tr 136 - 144 [13] Nguyễn Tử Siêu (2009) dịch, Hoàng Đế nội kinh tố vấn, “Tý luận thiên”, NXB Lao động, trung tâm văn hóa ngơn ngữ Đơng Tây, tr 259- 262 [14] Povi Lawson, Kodjo Aklikokou, Kwashie Eklu- Gadegbeku, Amegnona Agbonon (2008), “ Toxicological assessment on extracts of Phyllanthus amarus Schum and Thonn”, Scientific Research and Essay Vol.3(9), pp.410-415 [15] Robert A Scherrer, Michael W Whitehouse (1974), Antiinflammatory agents chemistry and pharmacology, ACADEMIC PRESS, volume II, pp.33-122 [16] TurnerA.Screeningmethodsinpharmacology Academic Press New York and London 1965, pp.60-68 [17] Viện Dược liệu (2003),” Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam”, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội, tập 1, tr 159- 161, 698-701, 722- 724, 870, 518-519, 757-758 [18] Viện dược liệu (2004) Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam tập II NXB khoa học kĩ thuật, tr 159- 161, 698-701, 870 [19] Viện dược liệu (2006), Phương pháp nghiên cứu tác dụng dược lý thuốc từ thảo dược, NXB Khoa học kỹ thuật Hà Nội, tr 139 - 143, 313 - 320, 355 - 368, 385 - 386, 377 -387 [20] Vũ Mạnh Hùng (1996), “Nghiên cứu tác dụng kháng khuẩn chống viêm Bạch hoa xà tác dụng số tiêu chống viêm động vật [21] Winter CA, Risley EA, Nuss GW (1962), “Carragenin-induced edema in hind paw of the rat as an assay for anti-inflammatory drugs” Proceedings Society of Experimental Biological Medicine, 111, pp 544 - 547 ... sở cho nghiên cứu ứng dụng viên nang TK điều MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU Mục tiêu tổng quát Nghiên cứu tác dụng kháng viêm viên nang TK Mục tiêu cụ thể: Đánh giá tác dụng kháng viêm cấp viên nang TK thực... giá tác dụng hạ kháng viêm, giảm đau viên nang TK Mục tiêu cụ thể: Đánh giá tác dụng kháng viêm cấp viên nang TK thực nghiệm gây phù chân chuột carragenin Nội dung chính: Đánh giá tác dụng kháng. .. đen] Các tác dụng hỗ trợ cho việc điều trị kháng viêm Kết nghiên cứu chứng minh, viên nang TK liều 0,9 /kg chuột có tác dụng kháng viêm sau gây viêm chân chuột carrageenan tác dụng kháng viêm kéo