Sàng lọc in vitro tác dụng ức chế α glucosidase của một số loài thuộc họ dâu tằm moraceae

KẾT LUẬN 213-225 CTP CP chiết xuất từ dứa dại với iiều Dhawan B.N (1997), Hepatoprotective activity o f íương đương 7,2 g dược liệu/kg 14,4g dược liệu/kg "có tác dụng bảo vệ gan mơ hình gây tổn thương gan cấp bang PAR tren chuột nhắt trắng C T P C P chiết xuẩt từ dứa dại với liều tương đương 7,2 g dược !iệu/kg có tác dụng làm tăng phục hồi tổn thương gan mo hình gây ton thương gan PAR chuột nhắt trắng natural products experimental evaluation International workshop on medicinal plants their bioactivity, screening and evaluation Lucknow, L15 Hewawasam R.P., Jayatilaka K.A., Pathirana c., TÀI LIỆU THAM KHẦO Mudduwa L.K (2003), Protective effects of Asteracantha longifolia extract in mouse liver injury induced by cacbon tetrachloride and paracetamol Pharm pharmacol 55(10), pp 14 13 -1 _ Phạm Hoàng Phiệt (2001), Tồng quan tình hình viêm gan siêu vi B việt N am ' Hội thảo khoa học điều trị viêm gan B ngày nay: Triển vọng cho bệnh nhân viêm gan B mạn tính, Hồ Chí Minh tháng Lin S c , Chung T.C., Un c.c (2000), Hepatoprotective effects o f Artium lappa on carbon tetrachlorid and acetaminophen- induced live damage Ngô Hữu Hà (2004), Nghiên cứu tình hình ngộ Am J Chin Med 28 (2), pp 163-173 Stephan u., Ruepp, Robert p Tonge and al (2002), Genomics and proteomics analysis of độc cấp thuốc thường gặp trung tâm chống độc acetaminophen toxicity in mouse liver Toxicological Bệnh viện Bạch M năm 2002 -2003, Luận science? vol 65, pp 135-150 văn tốt nghiệp Bác s ĩ chuyên khoa cấp II, Trường đại Đào Văn Phan (2004), Các thuốc giảm đau chống viêm Nhà xuất Y học tr 61 - 65 12 / 2001 học Y Hà Nội, tr46 Đỗ Tất Lợi (1999) Những thuốc vị thuốc Việt Nam, NXB Khoa học Ky thuật, Hà Nội, tr 792 - 794 Kathleen A.D (1998), Hepatic principles Tocxicoíogic emergencies, Jeanman M.Roche, pp 10 Londonkar R and Kamble A (2009), Evaluation of free radical scavenging activity of Pandanus odoratissimus International journal of pharmacology 5(6), pp 377-380 SÀNG LỌC I N V I T R O TÁC DỤNG ứ c CHÉ a - GLUCOSIDASE CỦA MỘT SỐ LOÀI THUỘC HỌ DÂU TẰWI (MORACEAE) CN Trịnh Túy An (Nghiên cứu viên, TT ĐT&NCPT Thuốc Có Nguồn Gốc Tự Nhiên, Đ H Y D ợ c TP HCM) DS Nguyễn Linh Nhâm (Học viên cao học, ĐạÍHọc Y Dược TP Hồ Chí Minh) Hướng dẫn: PGS TS Huỳnh Ngọc Thụy (Bộ Môn Dược Liệu, Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh) TĨM TẮT Nhằm góp phần tỉm kiểm loại dược liệu cho tác dụng trị đái tháo đường, đề tài thực với mục tiêu xác định câc loài thuộc họ Moraceae cho câc cao phân đoạn có tốc dụng ức chế enzym a-glucosidase Để iài tiến hành 21 mẫu thực vật thuộc chi Artòcarpus, Ficus Moms, thu hài từ thàng - 1 năm 2014 Khảo sát điều kiện tiến hành thử nghiệm, sàng lọc mẫu cao chiết cho tẩc dụng ức chế mạnh nhẩt, đảnh giá kết phần mềm Sigma Plot 10.0, phân lập vẩ tinh chế chất tinh khiết Từ 60 phận dùng 21 dược liệu, thu 180 cao chiết dạng cắn khô Sàng lọc 180 mẫu cao toàn phần, nồng độ 0,01 mg/ml, mẫu cao cồn thân vầ (Ficus aurìculata) thu hâi Bình Dương cho tác dụng ức chế mạnh nhẫỉ (91,95% ± 0,012) Phàn tốch và-xốc định ICõo cao phân đoạn từ mẫu cao toàn phần trên, cao phân đoạn ethyl acetat cho già trị ICso thấp (0,162 pig/mi) Từ phân đoạn ethyl acetat, phân lập hai chất tinh khiết Fa1 (1,2 mg) Fa2 (9,8 mg) với độ tinh khiễt 82,06% 95,70% Từ khóa: đắi thào đường SUMMARY SC R EEN IN G IN VITRO BIO ACTIVE a-GLU CO SID ASE INHIBITORY IN SOM E S P E C IE S O F MORACEAE FAMILY Trinh Tuy An Bachelor of Science in Biology (Research and Development of Natural based Medicines, University of Medicine and Pharmacy, HCMC.) Nguyen Linh Nham Pharmacist (University of Medicine and Pharmacy, HCMC.) instructor Huynh Ngoc Thuy Assoc Prof., Dr (Department of Pharmacognosy, University of Medicine and Pharmacy, HCMC.) By selecting plants which have great inhibition o f a-glucosidase, this research tend to find out some medical plants from Moraceae family that are the potential sources o f lead compounds to study for new medicaments for the treatment o f diabetes mellitus The samples o f 21 plants o f three genera Artocarpus, Ficus and Morus were collected in provinces o f southern part o f Vietnam in September, 2014 The inhibitory activity o f extracts against yeast a-glucosidase (Sigma) was determined using modified procedure described by Wang et al (2013) 60 parts used o f 21 plants were extracted to give 180 extracts Modifying the procedure gave the results that the solvent -714- solube was DMSO 100% (Sigma); the concentration o f enzyme and PNPG were 0.1 u/ml and 0.1 mM, respectively; the absorbance was determined after 30 minutes when adding PNPG Among the 180 extracts tested, ranging to 0.01 mg/ml, the result showed that the most active extract was the extract from sterm o f Ficus auriculata which was collected at Binh Duong (91.95% ± 0.012) Fraction and determining the ICso o f fractions from this extract The ICso o f ethyl acetat fraction was lowest (0.162 ụg/ml) From the ethyl acetat fraction, isolation two pure compounds that were Fa1 (1.2 mg) and Fa2 (9.8 mg) with the purity tested on HPLC were 95.46% and 95.13%, respectively Keywords: Ficus auriculata ĐẶT VẤN ĐÈ VÀ MỤC TIỀU NGHIÊN cứu Theo số liệu ỉhống kê năm 2011, tồn gỉớí có khoảng 347 triệu người mắc bệnh đái tháo đường, với 3,'4 triệu người chết (2004)(17) Tại Việt Nam, số người mắc bệnh đái tháo đường 3,16 triệu người Mẫu chiết với dung mơi có độ phân cực tăng dần cloroform, ethanol % vẩ nước; sau loại dung mơi thu cao toàn phần tương ứng để tiến hành thử nghiệm sàng lọc in vitro mơ hình ỉhử íác dụng ức chế a- glucosidase (2012), tương tương ,2 % dân số trưởng thành 1.2 Dung mơi hóa chất Một ỉrong số phương pháp điều trị đái tháo Dùng cho thử nghiệm hoạỉ tính ức chế a- đường khống chế lượng đương huyết sau ăn cách ngăn cản hấp thu carbohydrate qua việc ức chể enzym thủy giải carbohydrat a-glucosidase Hiện thị trường lưu hành nhiều loại thuốc glucosidase: a-glucosidase íừ Sacchammyces cerevisiae, p-nitrophenyl a-D-glucoside (PNPG), điều trị đái tháo đường theo chế nêu acarbose, voglibose migliỉol lại gây tác dụng phụ dày ruột Chính mặt hạn che ỉhức đẩy việc tìm kiếm dược liệu có khả điều hoà đường huyết, hỗ trợ điều trị cho bệnh nhân đái ỉháo đường để hạn chế tác dụng phụ từ việc sử dụng thuốc tong hợp potassium monophosphat, potassium diphosphaí, dimethyl sulfoxide (DMSO) (Sigma); MeOH (Merck) nước cất hai lần Dùng cho chiết xuất phân lập chất tinh khiết định hướng ưc chế a-glucosidase: n-hèxan PA, chloroform PA, ethyl acetat PA, methanol PA acid formic (Chemsol Labscan); silica ge! F254 (Merck) dùng cho sắc ký lớp mỏng; silica gel (Trung Quốc) cỡ hạt mịn ( - ụm) dùng cho sắc ký cột Những thuộc họ Dâu tằm (Moraceae) từ lâu sử dụng rộng rãi dân gian với nhiều cơng dụng khác nhau, ỉrong số sake, mít, ngái, dâu tằm sử đụng với mục đích trị đái tháo đường Đây loài quan tâm nghiên cứu giới, theo kết công bổ, số chất phân lập từ thuộc họ Dâu íằm đa chứng minh tác dụng hạ đường huyết luteolin, oxyresveratroí, 1-deoxynojirimicin Những dược liệu khác thuộc họ Dâu tằm tương đồng íhành phần hóa học nên kỳ vọng có the cho íác dụng trị đái tháo đường họ đưực nghiên cửu Nhằm góp phần tìm kiếm loại dược liệu cho tác đụng trị đái tháo đường, đề íài "Sàng !ọc in vitro tác dụng ức chế enzym a-giucosidase cùa số loài thuộc họ Dâu tằm (Moraceae)” thực với mục tiêu tim kiếm xác định loài thuộc họ Moraceae cho cao phân đoạn có tác dụng ức chế enzym a-giucosidase dựa phương pháp nghiên cưu thích hợp chọn lọc từ cac tài liẹu tham khảo ĐÓI TƯỢNG, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN c ứ u ĐỐI tượng ng hiên cứu 1.1 Nguyên liệu ì.3.Dụng cụ thiết bị Máy Ẻlisa iMarkTM Microplate Absorbance Reader (BIO-RAD); hệ thống HPLC-PD A 2695 (Waters); máy đo pH eco Testr pH2; cân phân tích BP - 221 s (Satorius); cột sắc ký thủy tinh, dài 60 cm, đường kính cm, có Khóa; đĩa 96 giếng dụng cụ íhường quy khác phịng thí nghiệm 1.4 Nơi thực đề tà ĩ Khâu chuần bị mẫu chiết xuất tách phân đoạn thực Bộ môn Dược liệu, phần thử nghiệm in vitro sàng iọc tác dụng ức chế a-glucosidase Ổược tiến hành Bộ mơn Sinh hố, Khoa Dược, Đại học Y DượcTP.HCM Bảng Mẫu dùng cho thử nghiệm sàng lọc in vitro tác dụng ức chế a - giucosidase Tên khoa học Artocarpus altilis (Park.) Lá, thân, rề Fosb Artocarpus Lá, thân, rễ heterophyllus Lam Artocarpus integer Lá, thân (Thunb.) Merr Ficus aurículata Lour Lá, thân, rễ 21 mau thực vậí !à lồi thuộc chi lớn Ficus aurìculata Lour Ficus aurículata Lour Artocarpus, Ficus Morus họ Moraceae íhu hái nhiều tỉnh thành khác Kiên Giang, Đồng Tháp, thành phố Hồ Chí Minh, Binh Dương, Binh Phươc, Lâm Đồng, Bình Định Phú Thọ Thơi gian thu mẫu kéo dài íừ tháng đến hết tháng 11 năm 2014 Mẫu thu hái xác định lồi, xử íý sơ bộ, mã hóa lưu mẫu Bộ mơn Dưực liệu, Đại học Y Dược TP.HCM Bộ phận dùng Ficus benjamina L Ficus elastica Roxb ex Horn Ficus heterophyllus L -715- Tên Việt Nam Sake Vùng thu hái TP Hô Chí Minh Mít TP Hồ Chí Minh Mít tổ TP Hị Chí nữ Minh Vả Tĩnh Binh Phước Lá, thân Vả TP Huế Lá, thân, rẽ Vả • Tĩnh Binh rừng Dương Lá, thân, Si TP Hồ Chí Minh rễ, rễ phụ Lá, thân, Đa búp TP Hồ Chí Minh rễ, rễ phụ đỏ Lá, thân, rề Vú bò Tĩnh Bình Phước Ficus hirta Vahl Ficus hispida L.f Ficus hispida L.f Lá, thân, thân rễ Lá, thân, rễ Lá, thân Ficus microcarpa L.f Lá, rể phụ Ficus pumila L Lá,thân Ficus racemosa L Lá, thân, rê Ficus regliosa L Lá, thân, rê Morus alba L Lá, thân, rế Morus alba L Lá, thân, rễ Morus alba L Lá, thân, rễ Morus alba L Lá, thân, rễ Morus alba L Lá, thân, rễ Vú bị Tỉnh Binh Phước Ngái Tỉnh Bình Phước Ngái TP Hồ Chí Minh Gừa Tỉnh Đồng TUA* ỉ 1\aụ Sung TP, Hồ Chí thằn lằn Minh Sung TP Hơ Chí Minh BỊ ổề TP Hơ Chí Minh Dâu Tỉnh Bình tằm Định Dâu TP HỒ Chí tằm Minh Dâu Tình Kiên tằm Giang Dâu Tỉnh Lâm tằm Đồng Dâu Tình Phú tằm Thọ Phương pháp nghiên cứu 2.1 Sàng lọc in vitro tác dụng ức chế glucosidase Dược liệu xay nhỏ thành bột, rây qua rây mm 20 g dược liệu chiết kiệt phương pháp đun hòi lưu 95 ° c lấn lượt với ba dung mơi có độ phân cực tăng dần: chloroform, ethanoi nước Loại dung môi thu cao toàn phần Cao toàn phần mẫu thử hịa tan dung mơi DMSO (tỷ iệ DMSO sử dụng khảo sát) Nồng độ dung dịch mẹ mau thử iẩ mg/ml Pha dung dịch đẹm kaii phosphat 50 mM (pH ,8 ), dung dịch a-glucosidase 0.1 u/mi PNPG 0.1 mM dung dịch đệm phosphat Nồng độ chất mẫu thử ià nồng độ cuổi giếng Đề tài tham khảo 146 tài liệu báo cáo thử nạhiệm tác dụng ức chế a-glucosidase từ năm 1992 đen năm 2014, đáng lưu ý số lượng nghiên cứu vấn đề tăng đột biến từ năm 2005 đến 2014 số đó, 23 tài liệu tham khảo có đối tượng nghiên cứu dược liệu thuộc họ Moraceae Sau tham khảo đối chiểu quy trình, quy trinh nghiên cứu Wang Z.W cộng (2013)(19) chọn đề tham khảo xây dựng quy trinh sàng lọc in vitro tác dụng ức chế a-glucosidase quy trình thử nghiệm tiến hành thời gian ngắn (90 phút), lượng enzym PNPG sử dụng vừa đủ cho phản ứng xảy hoàn toàn, quy trinh có tính lập lại điều kiện tiến hành thử nghiệm phù hợp với khả phịng thí nghiệm chơ Quỳ trình bao gồm năm bước chính: (1) thêm vào giếng 150 \xị đệm phosphate (50 mM, pH ), 10 ịil mẫu thử (1 mg/ml) 10 \xì enzym (0.1 u/m!) —> (2) ủ 37 ° c 60 phút - * (3) them 30 PNPG (0.1 mM) — (4) ủ tiếp 37 ° c trịng 30 phút ’->• (5) đo độ hấp thu bứớc song 415 nm Tiến hanh đồng thời mẫu trắng, mẫu chứng, mẫu chứng trắng mẫu thử đĩa 96 giếng; loại mẫu gồm cốc thành phan phản ứng khác nhau: Bảng So sánh thành phần íham gia phản ứng cảo loại mẫu Mầu thử I/ỉẫu trắng Mấu chuấn Mâu chứng trắng Mâu thứ Enzym + PNPG + + + Đêm + + + + + + + + Dưới xúc tác enzym a-giucosỉdase, phản ứng phân giải PNPG cho hai sản phầm ià a-Dglucose p-nitrophenol (P N P ) PNP chát màu vàng, có cực đại hấp thu 415 nm, PNP sinh định lượng cách đo độ hấp thu quang bước sóng 15 nm Khi ỉhêm vào hỗn hợp phản ứng mẫu cao chiết dược liệu có tác dụng ức che a-glucosidase, dẫn đến giảm hàm lượng PNP sinh ra, màu vàng nhạt hẳn So sánh hàm lượng PNP sinh mẫu thử (có diện tác nhân gây ức chế a-glucosidase) mẫu chuẩn (a-glucosidase hồn tồn khơng bị ức chế) để xác định phần trăm ức chế aglucosidase mẫu cao chiết dược ííệu Quá trinh sàng lọc in vitro íác dụng ửc chế aglucosidase tiến hành đĩa 96 giếng, bao ơgồm năm thiết kế thỉ nghiệm chính: (1 ) khảo sát tỷ lệ DMSO hịa tan mẫu tốt nhẩt (khảo sát tỷ lệ 10, 25, 50, 75 100%), (2) khảo sốt ảnh hưởng dung mơi hịa tan mẫu lên íhành phần tham gia phản ứng (khảo sát nhiều đung môi khác DMSO, methanol hỗn hợp DMSO - methanol (1:1)), (3) khảo sáí động học phản ứng aglucosidase PN FG (theo dõi ổn định độ hấp ỉhu quang sau thời gian phản ứng để lựa chọn thời điểm đo), (4) dò liều toi thiếu ức che a-giucosidase írên 0% cao chiết (giảm dần từ nồng độ ban đầu mẫu thử ià mg/ml) (5) xác định IC 50 phân đoạn íừ mẫu cao chó tác dụng ức chế a-glucosidase mạnh Tùy theo thiết kế thí nghiệm có sơ đồ bố ỉrí thí nghiệm tương ứng đĩa 96 giếng Trên đĩa 96 giếng bố trí đầy đủ mẫu trắng, mẫư chứng, mẫu chưng trắng va mẫu thử với số mẫu thử đảm bảo có tính ỉhống kê Thử nghiệm lặp lại lần láy giá trị trung binh xác ổịnh độ lệch chuẩn tương đối Ầp dụng phần mềm Sigrria Plot 10.0 dựng đường phi tuyến để tư xác định IC 50 Kết phần trăm tác dụng ức chế a-giucosidase rnẫu thử tính tốn theo công thức: % ứ c che a-glucosidase = X 100 2.2 Phân lạp chất tinh khiết theo định hướng cho tác dụng ức chế a-glucosidase Chọn mẫu có tác dụng ức chế a-giucosỉdase mạnh đề tiến hành thu mâu lượng lớn, khảo sát đặc điểm hình thái thực vật, cấu tạo vi học dược liệu tươi bột dược liệu định tính sơ thành phần hóa íhực vật Chiết nóng dược liệu 95 ° c với cồn % 12 giờ, lọc dịch chiết loại dung mơi thu cao tồn phần Phân tách phân đoạn tư cao toàn phần kỹ thuật lắc phân bố lỏng - lòng với dung mơi có độ phân cực khác nhau: chloroform, ethyl acetat methanol Sàng lọc in vitro tác dụng ức chế a-glucosicfase phân đoạn -716- nảy, từ phân đoạn cho tác dụng ức chế a-glucosidase mạnh nhất, phận lập phân đoạn nho phương pháp sắc ký cột cổ điển với hệ dung môi khai triển CHCI3 - EtOAc, tăng dần độ phân cực theo tỷ íệ từ (100:0) đến (85:5) Kiểm tra phân đoạn sắc ký lớp mỏng với hệ dung môi phân tfch CHCI3 - MeOH - Acid formic (8,5:1,5:0,5) Tinh chế chất thu phương pháp kết tinh phân đoan K E T Q U A NGHIÊN c ứ u Từ 60 phận dùng dược liệu, thu 180 mẫu cao chiết dạng cắn khô Các mẫu bảo quản 12 - 15 c lọ nâu tránh ánh sáng Kết khảo sát tỷ lệ DMSO hòa tan mẫu cho thấy mẫu ían hồn tồn DMSO 10 0% Kếỉ khảo sát ảnh hưởng dung mơi hịa tan mẫu chứng minh dung môi không ảnh hưởng đáng ke đến íhành phan tham gia phản ứng (DMSO cho tác dụng ức chế a-glucosidase 8,23%) Kếỉ khảo sát động học phản ứng aglucosidase PNPG đến kết iuạn chọn thơi điểm đo độ hấp thu phút ihứ 30 sau thêm PNPG Sàng lọc in vitro tốc dụng ức chế a-c|lucosidase 180 mâu cao chiết nồng độ mau thử 1; 0,5 0,25 mg/mi nồng độ 0,25 mg/ml 75 mẫu cho kết phan trăm ức chế a-glucosidase 60%, 45 mẫu % , 24 mẫu % 16 mẫu 90% Tiểp tục sàng lọc in vitro tác dụng ức chế aglucosidase 16 mẫu trên, nồng đọ 0,125 mg/mi có mẫu cho kết phần trăm ức chế 80% Bảng 16 mâu ức chế a - glucosidase 90 % nồng độ 0,25 mg/ml STT 10 11 12 13 14 15 16 Mâu thử FaLH2 FaTH3 FaRB2 FaRB3 FaTBD1 FaTBD2 FheT1 FraL3 MaRH1 MaTK2 MaLB2 MaLB3 AaR3 AhT1 AhT2 AÌL3 % ứ c chế a-Gỉucosidase 90.68% ± 0.008 91.64% ±0.003 96.56% ± 0.020 97.87% ± 0.004 98.42% ± 0.006 96.32% ± 0.009 94.19% ±0.049 94.46% ± 0.001 97.00% ± 0.045 90.20% ±0.017 96.50% ± 0.045 93.20% ±0.010 92.20% ± 0.006 94.00% ± 0.031 91.40% ±0.014 97.94% ±0.013 Bảng mẫu ức chế a - gỉucosidase 90 % nồng đọ 0,25 0.125 mg/ml Mầu thử FaLH2 FaTBD2 MaLB2 MaLB3 AhT2 AÌL3 % c chê a-Glucosidase 0.25 mg/mi 0.125 mq/ml 90.68 ±0.008 85.90 ±0.016 96.32 ± 0.009 91.69 ±0.006 96.50± 0.045 86.67 ± 0.008 93.20 ± 0.010 88.52 ±0.010 91.40 ± 0 14 91.07 ±0.007 97.94 ± 0 13 98.72 ± 0.003 Bảng IC50 cao phân đoạn từ mẫu cao thân Và (Ficus auriculata) thu hái Bình Dương Cao phân đoan CHCb EtOAc MeOH ỈC50 2.365 0.162 4.200 Từ mẫu có tác dụng mạnh này, dị liều tối thiểu ức chế a-glucosidase % cao chiết Kết cho thấy nồng độ 0,01 mg/mi mẫu cao thân Vâ (Ficus aurícúlata) thu hài Bỉnh Dương cho íác dụng ức chế a-glucosidase mạnh nhấí (91,95% ± 0,012) Sau phân ìách cao phân đoạn chloroform, ethyl aceíat methanol íừ mẫu cao toàn phần ỉrên, xác định ịCso cao phân đoạn Cao phân đoạn ethyl acetaí cho giá trị IC 50 ìhấp (0,162 ỉ-tg/mỉ), thấp nhiều lần so vởi IC50 chứng dương genisíein (10,21 |ig/ml) oxyresveratrol (10 ,11 ng/mi), chứng minh cao phân đoạn ethyl acetaí cho tác dụng ức chế a-glucosidase mạnh Tiếp tục tiến hành sàng lọc phân đoạn nhỏ cao phân đoạn ethyi acetat Kỹ thuật sắc ký cộí dùng để íách phân đoạn ethyi acetaí với hệ dung mơi khai triển CHCÍ3 - EtOẢc, tăng dần độ phan cực theo tỷ iệ từ (100:0) đến (85:5); kiềm tra phân đoạn thu đứợc sắc ký lớp mỏng với hệ dung mơi phẩn tích CHCI3 - MeOH - Acid formic (8,5:1,5:0,5); gộp phân đoạn tương tự thu 15 phân đoạn nhỏ Trong phân đoạn E 15 tách chấỉ Kết tủa Fa1 (1,2 mg) Fa2 (9,8 mg) Tinh chế kiểm tra độ tinh khiết cua Fa1 va Fa2 sắc ký lỏng cao áp (HPLC-PDA) Độ tinh khiết peak Fa1 đạt 82,06% Fa2 95>0% BÀN LUẬN So với nghiên cứu trước đó, đề tài khảo sát sàng lọc, bồ sung liệu ioài chưa báo cáo tài liệu tham khảo Ficus benjamina, Ficus elasỉica, Ficus hirta, Ficus heterophyllus & Artocarpus interger Đề tài bỗ sung kết sàng lọc phận dùng chưa nghiên cứu loài Morus alba (rễ), Artocarpus alitis (rễ), Ficus racemosa (lá & rễ); đồng thời ỉập lại kết nghiên cứu loài Morus alba (iá), Artocarpus àlitis (íá), Ficus pumela, Ficus hispida, Ficus religiosa, Ficus racemosa (vỏ thân), Artocarpus heterophyllus (lá, vỏ thân) cho thấy liệu cho tác dụng ức chế aglucosidase mạnh Đã có nghiên cứu in vivo Ahiam EI-Fishawy cộng sự(3) cho thấy dịch chiết Ficus auriculata (Vả) giúp giảm đường huyết thấp 8,2% so với nhóm chứng liều 500 mg/kg trùng hợp với kết đề tài, mâu cao thân Và (Ficus auriculata) íhu hái Bỉnh Dương mẫu cho tác dụng ức chế aglucosidase mạnh (91,95% ± 0,012) Đề tài khảo sát lại điều kiện tiến hành thư nghiệm, xác định phần trăm ức chế mẫu thăm dò nhiều nồng độ, tim IC50 mẫu cao phân, đoạn góp phần hình thành sơ khoa học minh chứng cho cong dụng số liệu dùng dân gian với tác dụng ổn định đường huyết KẾT LUẬN V À KIẾN NGHỊ Hiện naỹ tỷ lệ mắc bệnh đái tháo đường íên đến mức báo đọng vằ đối tượng bệnh lan rộng khắp vùng miền, iứa tuổi Việc phất điếu trị bệnh trề nên gây nhiều biến chứng nghỉêm trọng Đề tài có tính cấp thiết việc tim kiêm nghiên cứu nguồn dữợc liệu phòng hỗ trợ điều trị bệnh đái tháo đường bổi cảnh chưa có nghiên cứu thống kê so sánh tác dụng trị đái tháo đường dược liệu mơ hình thử nghiệm Nghiên cứu sử dụng phương pháp sàng iọc in vitro trước khỉ thử in VIVO, cho phép sàng lọc số iượng lớn mẫu thử, có khả nang lặp lại, có tinh thống kê với íhời gian thử ngắn chi phí khơng q tốn Đề ỉài mang tính ứng dụng việc phat huy đại hoá việc sừ dụng thuốc có nguồn gốc từ dược liệu nước phát triển vùng trồng dược liệu Đề tài mở hướng nghiên cứu in vivo mẫu cho tác đụng ức chế ò-glucosidase mạnh để tiến hành phân lập chẩị tinh khiết theo định hướng từ kết sàng lọc, thừ hoạt tính, xác định cấu trúc định iượng nhắm xem xét khả ứng dụng làm chát đánh dầu dùng cho công tác kiểm nghiệm sau TÀI ŨỆU THAM KHẢO Bộ môn Dược Liệu (2009), Giảo trình phương pháp nghiên cứu dược liệu, Khoa Dược - Đại học Y Dược TP hỉo Chí Minh Bộ Y Tế (2009), Dược Điển Việt Nam IV, Hà Nội Ahlam El-Fishawy1, Rawia Zayed, Sherif Afifi, (2011), “Phytochemical and pharmacological studies of Ficus auriculata Lour”, Journal o f Natural Products, 4, 184-195 _ Chan H.-H , Tian-Shung Wua cs., (2010), "Potent a-glucosidase inhibitors from the roots of Panax japonicus c A Meyer var major”, Phytochemistry, 71, 1360-1364 Chandrasekar Uma, Duraisamy Gomathi, Manokaran Kalaiselvi, (2012), "In vitro Ơ- amylase and a - glucosidase inhibitory effects of ethanolic extract of Evoivulus alsinoides(L.y, International research journal of Pharmacy, 3(3), 226-229 Elya, Eva Kurnia Septiana CS-, (2012), “Screening of a-Glucosidase Inhibitory Activity from Some Plants of Apocynaceae, Clusiaceae, Euphorbiaceae, and Rubiaceae”, Journal o f Biomedicine and Biotechnology, 2012,1-6 Feng J-, Xiu-Wei Yang, Ru-Feng Wang, (2011), glucosidase inhibitors from the leaves of Aquilaria sinensis’1, Phytochemistry, 72, 242-247 Ferreres F., Paula B Andrade cs , (2013), “In vitro studies of a-gfucosidase inhibitors and antiradical constituents of Glandora diffusa (Lag.) D.c Thomas infusion”, Food Chemistry, 136,1390-1398 Jabeen B., Abdul Jabbar cs., (2013), "Isolation of n o fn r iil n c u u ic ti O A ÍV IẠ A Ị b v ji I i p v u i D l ? / a m i r» O Ỉ O S 11 w i l l I iu V /iiio o tc fW c i/u V OI lU W iiiy 448 10 Kim JS, Kwon c s , Son KH, (2000), “Inhibition of a - glucosidase and amylase by luteolin, a flavonoid.”, Biosci Biotechnol Biochem 64, 2458-2461 11 Kim S.D, (2013), “a-Glucosidase inhibitor from Buthus martensi Karsch”, Food Chemistry, 136, 297-300 12 Li Y., Wenyi Kang cs„ (2012), “Antioxidant, aglucosidase inhibitory activities in vitro and ailoxaninduced diabetic rats protective effect of Indigofera stachyodes Lindl Root”, Journal o f Medicinal Plants Research, 6(9), 1524-1531 13 Lordan s., R Paul Ross cs.,(2013), ‘The a- amylase and a-giucosidase inhibitory effects of Irish seaweed extracts”, Food Chemistry, 141, 2170-2176 14 Liu G., Zheng-Tao Wang cs., (2014), “Diterpenoids and phenylethanoid glycosides from the roots of Clerodendrum bungei and their inhibitory effects against angiotensin converting enzym and a-giucosidase", Phytochemistry 15 Phạm Hoàng Hộ (1999), Cây cỏ Việt Nam, NXB Trẻ, 288 16 Ryu H.W., Ki Hun Park cs„ (2011), “a- Glucosidase inhibition and antihyperglycemic activity of prenylated xaníhones from Garcinia mangostana", Phytochemistry, 72, 2148-2154 17 Shaw JE, Sicree RA, Zimmet PZ, (2010), “Global estimates of the prevalence of diabetes for 2010 and 2030”, Diabetes Res Clin Pract, 87(1), 4-14 18 Tao.Y., Yi Wang cs., (2012), “Rapid screening and identification of a-glucosidase inhibitors from mulberry leaves using enzym-immobilized magnetic beads coupled with HPLC/MS and NMR", Biomedical Chromatography 19 Wang z w , Ling-Yi Kong cs., (2013), “a- Glucosidase inhibitory triterpenoids from the stem barks of Uncaria laevigata", Fitoterapia, 90, 30-37 20 Yang z., Yufeng Zhang cs., (2012), "Bioassay- guided screening and isolation of a-glucosidase and tyrosinase inhibitors from leaves of M alba”, Food Chemistry, 131, 617-625 “Bio-assay guided isolation and identification of aPhụ lục ■ Két chiẻt xuắt cao thừ nghiệm TEN KHOA HỌC CHCIs Artocarpus alitis Artocarpus heterophyìus Artocarpus interger Ficus auriculata Huế Ký hìêu A.a.L.1 A.a.T.1 A.a.R.1 A.h.L.1 A.h.T.1 A.h.R.1 A.i.L.1 A.i.T.1 F.a.Lh.1 F.a.Th.1 KL cao 1,84 0,4 0,97 1,03 0,32 0,4 1,3 0,23 0,61 1,54 «“ *_ U " glucosidase inhibitory activity”, Phytochemistry, 96, 443- KET QUA CHIÊT XUẢT (q) EtOH Ký hiệu KL cao A.a.L.2 1,83 0,54 A.a.T.2 A.a.R.2 0,75 A.h.L.2 1,42 A.h.T.2 0,31 A.h.R.2 0,39 A.i.L.2 2,41 0,42 A.i.T.2 F.a.Lh.2 0,86 F.a.ĩh.2 0,71 h 20 Ký hiêu A.a.L.3 A.a.T.3 A.a.R.3 A.h.L.3 A.h.T.3 A.h.R.3 A.i.L.3 A.i.T.3 F.a.Lh.3 F.a.Th.3 KL cao 2,96 • 1,32 2,48 4,69 0,7 1,19 5,44 1,00 4,43 1,56 Ficus auriculata Bình Phước Ficus aurículata Bình Dương Ficus benjamina Ficus elastic Ficus heterophylus Ficus hispida Bình Phước Ficus hispida TP HCM Ficus hirta Ficus racemosa Ficus regiiosa Ficus microcapa Ficus pumiia Morus alba TP HCM Morus alba Phú Thọ Morus aịba Kiên Giang Morus alba Lâm Đồng Morus alba Bình Định F.a.LB.1 F.a.TB.1 F.a.RB.1 F.C.L.1 F.C.T.1 F.C.R.1 F.b.L.1 F.b.T.1 F.b.Rf.1 F.b.R.1 F.e.L.1 F.e.Rf.1 F.e.T.1 F.e.R.1 F.he.L.1 F.he.T.1 F.he.R.1 F.hi.L.1 F.hi.T.1 F.hi.R.1 F.hi.LH.1 F.hi.TH.1 0,47 0,29 0,31 0,24 0,36 1,49 1,54 0,24 0,93 0,36 1,26 0,78 0,72 0,87 0,7 0,29 1,34 0,67 0,26 0,37 0,81 0,17 F.a.LB.2 F.a.TB.2 F.a.RB.2 F.C.L.2 F.C.T.2 F.C.R.2 F.b.L.2 F.b.T.2 F.b.Rf.2 F.b.R.2 F.e.L.2 F.e.Rf.2 F.e.T.2 F.e.R.2 F.he.L.2 F.he.T.2 F.he.R.2 F.hi.L.2 F.hi.T.2 F.hi.R.2 F.hi.LH.2 F.hi.TH.2 F.hir.T.1 F.hir.L1 F.hir.Tr.1 F.ra.L.1 F.ra.T.1 F.ra.T.1 F.re.L.1 F.re.T.1 F.re.R.1 F.m.L.1 F.m.Rf.1 F.p.L.1 F.p.T.1 M.a.LH.1 M.a.TH.1 M.a.RH.1 M.a.LP.1 M.a.TP.1 M.a.RP.1 M.a.LK.1 M.a.TK.1 M.a.RK.1 M.a.LL.1 M.a.TL.1 M.a.RL.1 M.a.LB.1 M.a.TB.1 M.a.RB.1 0,28 0,96 0,52 1,41 0,15 0,23 0,92 0,19 0,34 1,34 0,80 0,92 0,32 1,71 0,35 0,74 2,99 0,38 1,04 1,98 0,62 1,24 1,37 0,40 0,77 5,03 0,28 1,35 F.hir.T.2 F.hir.L.2 F.hir.Tr.2 F.ra.L.2 F.ra.T.1 F.ra.T.1 F.re.L.2 F.re.T.2 F.re.R.2 F.m.L.2 F.m.Rf.2 F.p.L.2 F.p.T.2 M.a.LH.2 M.a.TH.2 M.a.RH-2 M.a.LP.2 M.a.TP.2 M.a.RP.2 M.a.LK.2 M.a.TK.2 M.a.RK.2 M.a.LL.2 M.a.TL.2 M.a.RL.2 M.a.LB.2 M.a.TB.2 M.a.RB.2 0,96 0,85 1,79 0,56 1,01 0,78 0,57 0,31 0,73 0,29 1,16 0,3 0,67 2,8 1,31 0,28 0,46 0,9 0,33 0,74 0,98 0,38 0,43 0,63 0,61 1,48 0,61 0,54 0,88 0,32 0,61 2,98 0,45 2,12 0,28 1,45 0,57 1,74 2,81 0,95 1,73 1,72 1,04 1,74 2,49 1,10 1,59 6,01 0,85 3,24 F.a.LB.3 F.a.TB.3 F.a.RB.3 F.C.L.3 F.C.T.3 F.C.R.3 F.b.L.3 F.b.T.3 F.b.Rf.3 F.b.R.3 F.e.L.3 F.e.Rf.3 F.e.T.3 F.e.R.3 F.he.L.3 F.he.T.3 F.he.R.3 F.hi.L.3 F.hi.T.3 F.hi.R.3 F.hi.LH.3 F.hi.TH.3 3,61 1,11 1,66 1,31 1,83 2,25 2,39 0,79 1,72 1,18 4,21 3,27 2,38 1,89 2,28 0,86 0,99 4,71 0,68 1,77 3,78 0,62 F.hir.T.3 F.hir.L.3 F.hir.Tr.3 F.ra.L.3 F.ra.T.1 F.ra.T.1 F.re.L.3 F.re.T.3 F.re.R.3 F.m.L.3 F.m.Rf.3 F.p.L.3 F.p.T.3 M.a.LH.3 M.a.TH.3 M.a.RH.3 M.a.LP.3 M.a.TP.3 M.a.RP.3 M.a.LK.3 M.a.TK.3 M.a.RK.3 M.a.LL.3 M.a.TL.3 M.a.RL.3 M.a.LB.3 M.a.TB.3 M.a.RB.3 1,4 4,23 5,20 3,63 1,29 1,75 3,03 0,51 0,85 4,66 1,9 3,66 1,2 5,79 1,59 3,79 6,56 1,28 4,48 3,34 1,12 1,8 6,87 1,84 2,63 6,4 1,07 3,95 Phụ lục Kết sàng lọc ỉá c dụng ức chế a-giucosidase 180 mẫu cao chiết Mẫu mg/ml AaL1 AaL2 AaL3 AaT1 AaT2 AaT3 AaR1 AaR2 - 70,45±0,012 0,5 mg/ml 42,02 ± 0,007 88,52 ± 0,004 - 56,23 ±0,070 98,03 ±0,101 94,18 ± 0,141 72,13 ±0,031 88,53 ±0,104 67,83 ±0,018 % ức chế a ' Glucosidase 0,25 mq/ml 0,125 mq/ml 0,05 mq/m! _ 77,33 ± 0,036 _ 68,49 ±0.015 2,38 ± 0,026 _ 66,31 ± 0,062 81,81 ±0,012 0,025 mq/ml 0,01 mq/mi - _ _ _ - - - - - - - - - 33,42 ± 0,062 68,82 ± 0,023 46,30 ± 0,045 86,65 ± 0,058 - - - _ - - - - ** AaR3 AhL1 AhL2 AhL3 AhT1 AhT2 AhT3 AhR1 AhR2 AhR3 AÍL1 AÍL2 AÍL3 AĨT1 AÍT2 AÍT3 FaLH1 FaLH2 FaLH3 FaTH1 FaTH2 FaTH3 FaLB1 FaLB2 FaLB3 FaTB1 FaTB2 FaTB3 FaRB1 FaRB2 FaRB3 FaLBDI FaLBD2 FaLBD3 FaTBDI FaTBD2 FaTBD3 FaRBDI FaRBD2 FaRBD3 FbL1 FbL2 FbL3 FbTl FbT2 FbT3 FbR1 FbR2 FbR3 FbRfl FbRf2 FbRf3 FeL1 FeL2 FeL3 FeT1 FeT2 FeT3 FeR1 FeR2 FeR3 FeRfl FeRf2 86,74 ± 0,030 78,94 ± 0,031 74,10 ±0,013 17,65 ±0,133 82,17 ±0,035 50^36 ± 0,036 89,96 ± 0,059 8,60 ± 0,026 25,27 ± 0,095 75,09 ±0,018 65,23 ± 0,029 24,28 ±0,071 76,43 ± 0,022 29,30 ±0,139 94,80 ± 0,007 77,69 ±0.,30 47,85 ±0,019 32,35 ± 0,023 62,49 ± 0,049 93,36 ± 0,011 78,84 ±0,012 86,10 ±0,020 62,98 ±0,019 85,73 ±0,007 92,25 ±0,004 79,12 ±0,015 7,53 ± 0,057 79,12 ±0,018 78,85 ±0,019 50,36 ±0,109 72,85 ± 0,030 75,00 ±0.016 35,30 ± 0,048 64,87 ± 0,050 15,86 ±0,024 57,26 ± 0,054 69,18 ±0,016 73,03 ± 0,023 56,45 ± 0,042 77,33 + 0,015 49,01 ± 0,057 99,28 ± 0,004 85,84 ± 0,006 59,53 ±0,032 85,61 ± 0,006 85,98 ±0,002 93,36 ± 0,046 87,95 ± 0,024 86,35 ± 0,009 81,92 ±0,060 85,61 ±0,016 73,19 ±0,017 62,98 ± 0,020 79,21 ± 0,043 84,01± 0,009 49,08 ± 0,047 57,64 ±0,016 37,12 ±0,050 31,88 ±0,021 44,83 ± 0,029 12,08 ±0,042 6,99 ± 0,024 56,77 ± 0,011 _ 58,06 ±0,031 93,24 ± 0,004 88,68 ± 0,047 13,53 ±0,066 50,80 ± 0,025 49,94 ± 0,069 14,88 ±0,068 47,11 ±0,024 59,04 ± 0,070 77,74 ±0,031 99,75 ± 0,004 37,52 ± 0,059 19,07 ±0,033 14,56 ±0,040 10,34 ±0,034 35,23 ± 0,027 75,55 ± 0,075 46,87± 0,020 70,23 ± 0,020 80,69 ±0,017 63,35 ± 0,050 63,35 ± 0,022 74,42 ±0,015 10,82 ±0,091 71,22 ±0,020 48,09 ± 0,080 57,57 ± 0,020 48,59 ± 0,027 - - 24,02 ± 0,022 25,62 ± 0,029 44,11 ±0,022 30,28 ± 0,026 54,51 ±0,114 54,00 ± 0,049 3,64 ± 0,033 46,58 ± 0,024 83,12 ±0,010 _ 54,29 ± 0,046 98,40 ± 0,005 59,10 ±0,017 49,35 ± 0,029 45,56 ± 0,022 4,95 ± 0,060 42,50 ±0,028 44,11 ±0,024 92,20 ± 0,006 58,34 ± 0,043 84,68 ± 0,011 82,17 ±0,011 94,00 ± 0,031 91,40 ±0,014 84.23 ± 0.004 85,93 ± 0,039 77,60 ±0,015 59,32 ± 0,036 85,75 ± 0,005 97,94 ±0,013 76,43 ± 0,043 87,90 ± 0,009 63,35 ±0,019 90,68 ± 0,008 82,53 ±0,026 25,46 ± 0,032 65,68 ±0,016 91,64 ±0,003 78,72± 0,048 54,24 ±0,032 61,38 ±0,024 65,31 ± 0,027 55,84 ± 0,042 56,70 ± 0,025 68,02 ±0,015 96,56 ± 0,020 97,87 ± 0,004 59,78 ± 0,059 60,52 ± 0,024 66,52 ±0,010 98,42 ± 0,006 96,32 ±0,009 70,16 ±0,011 23,87 ± 0,031 5,2 ±0,031 28,97 ±0,027 72,08 ± 0,056 50,92 ±0,019 32,59 ± 0,055 43,17 ±0,026 55,54 ±0,019 75,06 ±0,014 77,37 ± 0,009 73,31 ±0,019 88,81± 0,011 89,29 ± 0,032 59,90 ±0,026 53,38 ±0,019 61,03 ±0,019 72,65 ± 0,009 91,07 ±0,007 88,57 ±0,014 87,62 ± 0,021 85,71 ±0,019 98,72 ± 0,003 88,74 ± 0,044 89,87 ± 0,007 87,66 ± 0,009 ~ 85,90 ±0,016 87,03 ± 0,004 90,39 ± 0,009 92,29 ± 0,008 60,61 ±0,021 ~ 52,11 ±0,030 45,59 ± 0.06D 77,90 ± 0,008 91,69 ±0,006 83,12 ±0,019 86,15 ±0,015 91,95 ±0,012 - - 35,08 ± 0,028 61,28 ±0,014 67,54 ± 0,035 53,64 ±0,038 65,21 ±0,013 70,92 ±0,012 36,10 ±0,022 55,31 ± 0,024 41,34 ±0,096 78,46 ±0,014 -720- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - FeRf3 FheL1 FheL2 FheL3 FheT1 FheT2 FheT3 Fhe R1 FheR2 FheR3 FhiL1 FhiL2 FhiL3 FhiT1 FhiT2 FhiT3 FhiR1 FhiR2 FhiR3 FhiLHI FhtLH2 FhiLH3 FhiTHI FhiTH2 FhiTH3 FhirLI FhirL2 FhirL3 FhirH FhirT2 FhirT3 FhirTrl FhirTr2 FhirTr3 FraH FraL2 FraL3 FraT1 FraT2 FraT3 FraR1 FraR2 FraR3 FreL1 FreL2 FreL3 FreT1 FreT2 FreTS FreR1 FreR2 FreR3 FmL1 FmL2 FmL3 FmRfl FmRf2 FmRf3 FpL1 FpL2 FpL3 FpT1 FpT2 19,94 ±0,037 - 16,89 + 0,052 89,49 ±0,033 24,72 ± 0,039 89,66 ±0,091 3,70 ±0,072 - 71,92 + 0,041 85,87 ± 0,006 0,95 ±0,066 44,88 ± 0,039 6,460 ±0,017 - 6,12 ±0,041 89,84 ±0,010 44,36 ±0,039 82,08 ±0,013 79,16 ±0,015 - 66,06 ±0,018 - 34,20 ±0,029 94,66 ± 0,005 55,38 ±0,040 60,72 ± 0,010 46,94 ±0,018 54,00 ± 0,027 54,62 ± 0,023 44,00 ± 0,065 66,46 ±0,014 81,38 ±0,007 75,69 ±0,011 74,92 ±0,010 - 25,69 ±0,031 66,77 ±0,011 77,23 ±0,083 75,08 ±0,016 90,46 ±0,014 80,77 + 0,075 23,85 ±0,050 46,00 ± 0,020 - 37,54 ±0,018 62,46 ± 0,030 - 81,69 ±0,036 98,92 ± 0,008 - 75,38 ±0,046 68,15 ± 0,017 - 6,25 ±0,057 ~ 43,96 ±0,020 88,65 ±0,006 76,42 ± 0,072 66,38 ± 0,044 77,584 ±0,013 44,250 ± 0,021 75,55 ±0,018 62,27 ±0,052 94,19± 0,049 76,20 ±0,018 49,64 ±0,019 8,73 ± 0,022 46,29 ±0,011 26,70 ±0,015 24,75 ± 0,029 45,50 ±0,031 63,31 ±0,012 41,95 ±0,023 71,92 ±0,007 74,68 ±0,010 77,43 ± 0,084 5,25 ± 0,048 41,60 + 0,026 ~ 65,20 ± 0,005 42,46 ± 0,029 55,38 ±0,023 3,36± 0,040 70,37 ±0,016 44,36 ±0,019 58,06 ±0,017 70,20 ±0,029 60,89 ±0,010 78,12 ± 0,010 75,02 ±0,015 16,97 ±0,071 06,63 ± 0,005 44,36 ± 0,027 56,59 ± 0,024 58,66 ± 0,039 77,26 ±0,014 34,02 ± 0,026 17,48 ±0,083 40,91 ±0,090 58,66 ±0,019 74,68 ± 0,007 53,32 ±0,015 82,95 ±0,017 ~ 64,69 ±0,010 47,63 ±0,021 67,27 ±0,012 22,83 ±0,021 7,67 ± 0,038 38,67 ±0,012 25,58 ±0,024 35,57 ±0,025 36,95 ± 0,024 82,77 ± 0,006 70,95± 0,027 88,00 ± 0,005 75,54 ± 0,007 88,15 ±0,004 94,46 ±0,001 46,58 + 0,023 74,92 ± 0,020 69,54 ± 0,02 98,92 ±0,009 76,92 ±0,009 84,62 ± 0,003 63,54 ±0,011 46,00 ± 0,042 22,00 ± 0,024 86,15 ±0,005 58,62 ±0,018 84,62 ± 0,004 67,23 ±0,011 36,31 ±0,095 64,00 ± 0,060 58,77 ±0,010 78,46 ±0,011 92,31± 0,001 63,23 ± 0,026 74,15 ±0,036 22,46 ± 0,038 80,62 ±0,016 57,38 ±0,019 84,92 ±0,003 19,85 ±0,044 54,77 ±0,035 77,23 ± 0,059 54,92 ±0,036 91,23 ±0,002 73,23 ±0,010 73,54 ± 0,057 93,54 ± 0,004 85,85 ±0,010 86,77 ±0,011 78,31 ±0,030 58,31+0,056 54,62 ± 0,045 64,31± 0,019 57,69 ±0,016 61,54± 0,011 48,46 ± 0,020 23,85 ± 0,023 58,15 ±0,018 55,69 ±0,011 67,19 ±0,021 46,75 ± 0,030 5,65 ± 0,044 38,46 ± 0,068 67,55 ±0,016 -721 - - ~ - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - ~ - - - - - - - - ~ ~ - - - - - - - - - - - - - - - - ~ - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - ~ - - - - - - - - - ~ - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - ~ - - - - FpT3 MaLH1 MaLH2 MaLH3 MaTH1 MaTH2 MaTH3 MaRH1 MaRH2 MaRH3 MaLP1 MaLP2 MaLP3 MaTP1 MaTP2 MaTP3 MaRP1 MaRP2 MaRP3 MaLK1 MaLK2 MaLK3 MaTK1 MaTK2 MaTK3 MaRK1 MaRK2 MaRK3 MaLL1 MaLL2 MaLL3 M a in MaTL2 MaTL3 MaRH MaRL2 MaRL3 MaLB1 MaLB2 MaLB3 MaTB1 MaTB2 MaTB3 MaRB1 MaRB2 MaRB3 77,16 ±0,027 74,28 ±0,018 83,17 ±0.008 88,70 ± 0,005 94,35 ±0,019 83,53 ± 0,007 69,23 ±0,012 72,84 ± 0,009 83,28 ±0,011 49,52 ± 0,031 48,68 ± 0,024 - - ~ 70,79 ± 0,025 21,27 ±0,026 95,19 ±0,020 63,94 ±0,011 97,36 ± 0,041 95,91 ±0,011 83,29 ± 0,003 - 8,05 ± 0,061 29,33 ± 0,026 - - 68,15 ±0,031 96,63 ± 0,022 46,39 ± 0,040 46,51 ±0,015 50,84 ± 0,058 93,75 ± 0,022 86,78 ± 0,007 73,32 ± 0,028 63,82 ±0,019 2,88 ± 0,056 62,74 ±0,020 34,38 ±0,019 56,61 ±0,028 96,51 ±0,005 59,74 ±0,023 - 56,13 ±0,010 - 32,77 ±0,032 - 59,10 ±0,015 73,81 ±0,026 - 36,42 ± 0,046 55,17 ±0,029 60,58 ± 0,068 47,62 ±0,031 53,22 ± 0,020 32,49 ± 0,072 68,35 ±0,012 91,88 ±0,007 - - 43,84 ± 0,025 75,35 ±0,018 69,89 ±0,011 65,83 ±0,014 25,07 ±0,018 21,85 ±0,027 77,59 ± 0,024 50,70 ± 0,026 78,43 ± 0,041 92,86 ±0,007 9,38 ±0,027 73,95 ±0,073 23,11 ±0,039 31,65 ±0,028 59,52 ±0,100 41,74 ±0,025 40,06 + 0,015 87,39 ± 0,097 90,76 ± 0,005 72,27 ± 0,005 - 39,50 ± 0,038 43,28 ±0,018 82,91 ±0,021 52,66 ±0,016 1,40 ±0,050 16,67 ±0,035 28,29 ± 0,024 - 65,55 ± 0,026 82,49 ± 0,008 ~ - _ _ - - - - - - - _ - - - - - - - - 46,75 ± 0,025 53,13 ±0,018 97,00 ±0,045 64,35 ±0,019 69,35 ± 0,009 50,12 ±0,030 15,75 ±0,038 48,80 ± 0,022 ~ 57,33 ± 0,036 84,01 ± 0,031 75,12 ± 0,011 55,29 ± 0,007 _ 41,35 ±0,040 60,82 + 0,018 42,55 ± 0,022 61,46 ±0,022 39,06 ± 0,025 25,00 ± 0,032 48,80 ± 0,026 ~ 90,20 ±0,017 69,68 ± 0,022 75,49 ± 0,002 74,79 ±0,017 80,81 ± 0,021 66,53 ±0,011 33,55 ±0,064 55,32 ±0,013 61,9010,010 63,45 ± 0,047 88,24 ± 0,020 71,85 ±0,003 44,40± 0,050 64,43 ±0,016 32,35 ±0,019 59,90 ±0,017 96,50 ± 0,045 86,67 ± 0,008 71,52 ±0,028 82,25 ±0,019 82,86 ±0,019 93,20 ±0,010 88,52 ±0,010 64,94 ± 0,027 73,77 ±0,019 62,16±0,018 81,09 ±0,015 75,77 ±0,026 46,64 ±0,010 11,48 ±0,077 69,05 ±0,019 34,31 ±0,018 -722- ... tằm Định Dâu TP HỒ Chí tằm Minh Dâu Tình Kiên tằm Giang Dâu Tỉnh Lâm tằm Đồng Dâu Tình Phú tằm Thọ Phương pháp nghiên cứu 2.1 Sàng lọc in vitro tác dụng ức chế glucosidase Dược liệu xay nhỏ thành... dược liệu thuộc họ Moraceae Sau tham khảo đối chiểu quy trình, quy trinh nghiên cứu Wang Z.W cộng (2013)(19) chọn đề tham khảo xây dựng quy trinh sàng lọc in vitro tác dụng ức chế a -glucosidase. .. bổ, số chất phân lập từ thuộc họ Dâu íằm đa chứng minh tác dụng hạ đường huyết luteolin, oxyresveratroí, 1-deoxynojirimicin Những dược liệu khác thuộc họ Dâu tằm tương đồng íhành phần hóa học