Lê thị hương giáo dục đào tạo trường đại học bách khoa hà nội - luận văn thạc sĩ khoa học ngành : hoá Hoá nghiên cứu thành phần hoá học cẩu tích (Cibotium barometz) Lê thị Hương 2007- 2009 Hà Nội 2009 Hà Nội 2009 giáo dục đào tạo trường đại học bách khoa hà nội - luận văn thạc sĩ khoa học nghiên cứu thành phần hoá học cẩu tích (Cibotium barometz) ngành : hoá Lê thị Hương Người hướng dẫn khoa học : PGS.TS Phan văn kiệm Hà Nội 2009 Lời cảm ơn Luận án hoàn thành Viện Hoá học Hợp chÊt thiªn nhiªn, Viện Khoa học Cơng nghệ Việt Nam Với lòng biết ơn sâu sắc em xin cảm ơn giúp đỡ quí báu TS Phan Văn Kiệm, giáo viên hướng dẫn khoa học đà giao ti v tn tỡnh giúp đ em hoàn thành luận văn Em xin bày tỏ lòng biết ơn tới GS TS Châu Văn Minh, Trng phũng Húa Hu cơ, Chủ tịch Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam anh chị đồng nghiệp Phòng Húa hữu đà tận tình giúp đỡ em trình hoàn thành luận án Em xin bày tỏ lòng biết ơn tới thầy giáo, cô giáo Khoa Cụng ngh Hoá học Trường Đại học Bỏch Khoa H Ni đà tận tình dạy dỗ bảo em suốt năm học Nhà trường Lun ỏn c hồn thành với giúp đỡ kinh phí ti KC10.20/06-10 Em xin bày tỏ lòng biết ơn tíi PGS TS Hồng Thanh Hương, Chủ tịch Hội đồng Khoa học Viện Hóa học Hợp chất thiên nhiên, Chủ nhiệm đề tài KC10.20/06-10 giúp đỡ em hoàn thnh ti Hà Nội, ngày 28 tháng năm 2009 Học viên Lê Thị Hương Mục lục Trang Mục lục Danh mục chữ viết tắt Danh mục hình Danh mục bảng MỞ ĐẦU 10 CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 12 1.1 Tổng quan chung Cẩu Tích ( Cibotium barometz ) 12 1.1.1 Thực vật học 12 1.1.2 Phân bố sinh thái 13 1.1.3 Công dụng 14 1.1.4 Thành phần hoá học 16 1.2 Tổng quan chung phương pháp xác định cấu trúc hợp chất hữu 18 1.2.1 Phổ hồng ngoại 18 1.2.2 Phổ khối lượng ( Mass spectroscopy ) 19 1.2.3 Phổ cộng hưởng từ hạt nhân ( Nuclear Magnetic Resonance spectroscopy – NMR) CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 24 2.1 Mẫu thực vật 24 2.2 Phương pháp xử lý mẫu thực vật 24 2.3 Phương pháp phân lập chất 25 2.3.1 Sắc kí lớp mỏng (TLC) 25 2.3.2 Sắc kí lớp mỏng điều chế 25 2.3.3 Sắc kí cột 25 2.4 Phương pháp xác định cấu trúc hoá học hợp chất 25 2.4.1 Điểm nóng chảy (Mp) 25 2.4.2 Độ quay cực [α]D 25 2.4.3 Phổ khối lượng (ESI-MS) 26 2.4.4 Phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) 26 CHƯƠNG 3: PHẦN THỰC NGHIỆM 27 3.1 Dụng cụ , thiết bị hoá chất 27 3.2 Chiết tách phân lập hợp chất 28 3.3 Hằng số vật lý kiện phổ hợp chất 32 3.3.1 Hợp chất 32 3.3.2 Hợp chất 33 3.3.3 Hợp chất 34 3.3.4 Hợp chất 35 3.3.5 Hợp chất 35 CHƯƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 37 4.1 Thu hái xác định tên khoa học Cibotium barometz 37 4.2 Điều chế phần chiết tinh chế hợp chất 38 4.3 Xác định cấu trúc hợp chất 38 4.3.1 Xác định cấu trúc hợp chất 38 4.3.2 Xác định cấu trúc hợp chất 46 4.3.3 Xác định cấu trúc hợp chất 52 4.3.4 Xác định cấu trúc hợp chất 58 4.3.5 Xác định cấu trúc hợp chất 62 4.3.6 Các hợp chất phân lập từ Cẩu tích 71 CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN 72 TÀI LIỆU THAM KHẢO 73 Nh÷ng ch÷ viÕt t¾t Br Réng (broad) BuOH Butanol 13 Phỉ céng hưởng từ hạt nhân carbon 13 (Carbon-13 Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy) CA Chemical abstracts CHCl3 Chloroform cs Céng sù D Doublet Dd Doublet of doublet DEPT Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer DMSO Dimethylsulfoxyd 2D-NMR Phổ cộng hưởng từ hạt nhân hai chiỊu (Two-Dimensional NMR) ESI-MS Phỉ khèi lỵng phun mï ®iƯn tư (Electron Spray Ionization Mass Spectrometry) EtOAc Ethyl acetat EtOH Ethanol GC-MS S¾c ký khÝ – Khèi phỉ Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton C-NMR H-NMR (Proton Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy) H-1H H-1H Chemical Shift Correlation Spectroscopy COSY HMBC Heteronuclear Multiple Bond Coherence HMQC Heteronuclear Multiple Quantum Coherence HPLC Sắc ký lỏng hiệu cao (High Performance Liquid Chromatography) HSQC Heteronuclear Single Quantum Coherence IR Phỉ hång ngo¹i (Infrared Spectroscopy) M Multiplet m/z Tû lƯ sè khèi/®iƯn tÝch ion MDA Malonyldialdehyd MeOH Methanol Q Quartet RP Pha đảo (Reversed phase) S Singlet SKC Sắc ký cét SKLM S¾c ký líp máng T Triplet UV Phổ tử ngoại (Ultraviolet Spectroscopy) DANH MụC CáC Hình hình 4.3.1.a Phổ 1H-NMR hợp chất 37 Hình 4.3.1.a Phổ 1H-NMR hợp chất 37 H×nh 4.3.1.c Phỉ 1H-NMR d·n réng cđa hỵp chÊt 38 Hình 4.3.1.d Phổ 13C-NMR hợp chất 41 H×nh 4.3.1.e Phỉ 13C-NMR d·n réng cđa hỵp chÊt 42 Hình 4.3.1.f 43 Phổ khối lượng ESI-MS hợp chÊt H×nh 4.3.2.a Phỉ 1H-NMR cđa hỵp chÊt 44 Hình 4.3.2.b Cấu trúc hoá học hợp chất 45 Hình 4.3.2.c Phổ 13C-NMR hợp chất 45 Hình 4.3.2.d Phổ 13C-NMR phổ DEPTcủa hợp chất 47 H×nh 4.3.2.e Phỉ HSQC cđa hỵp chÊt 47 Hình 4.3.2.f 48 Phổ HMBC hợp chất Hình 4.3.2.g Các tương tác HMBC chÝnh cña 49 Hình 4.3.2.h Phổ khối lượng ESI-MS hỵp chÊt 49 H×nh 4.3.3.a Phỉ 1H-NMR cđa hỵp chÊt 50 Hình 4.3.3.b Cấu trúc hoá học hợp chÊt 51 H×nh 4.3.3.c Phỉ 1H-NMR d·n réng cđa hỵp chÊt 51 Hình 4.3.3.d Phổ 13C-NMR hợp chất 54 H×nh 4.3.3.e Phỉ 13C-NMR d·n réng cđa hỵp chÊt 55 Hình 4.3.3.f Phổ khối lượng ESI-MS hợp chất 55 H×nh 4.3.4.a Phỉ 1H-NMR cđa hỵp chÊt 57 Hình 4.3.4.b Phổ 1H-NMR dÃn rộng hợp chất 57 H×nh 4.3.4.c Cấu trúc hoá học hợp chất 58 Hình 4.3.4.d Phổ 13C-NMR hợp chất 58 Hình 4.3.4.f Phổ khối lượng ESI-MS cđa hỵp chÊt 60 Hình 4.3.5.a Phổ 1H-NMR hợp chất 61 Hình 4.3.5.b Cấu trúc hoá học hợp chÊt 62 Hình 4.3.5.c Phổ 13C-NMR hợp chất 64 H×nh 4.3.5.d Phỉ 13C-NMR 13C-NMR dÃn rộng hợp chất 64 Hình 4.3.5.e Phổ HSQC hợp chất 65 H×nh 4.3.5.f Phỉ HMBC cđa hỵp chÊt 66 Hình 4.3.5.g Các tương tác HMBC cña 67 Hình 4.3.5.h Phổ khối lượng ESI-MS hỵp chÊt 67 H×nh 4.3.5.i 68 Phổ khối lượng phân giải cao HR-ESI-MS hợp chất Bảng 4.3.5 Số liệu phổ NMR chất tham khảo C C # δC δC a, b $ δHa, c d¹ng pic (J = Hz) Aglycon 176,7 175,43 - 129,7 131,54 - Noô153,7 150,93 7,63 q (1,5) 73,3 72,73 4,82 q (1,5) 1’ 63,3 64,13 4,49 dq (13,5, 1,5)/4,41* Glucose 1’’ 104,4 102,9 104,47 4,43 d (8,0) 2’’ 74,9 74,1 75,11 3,28 dd (9,0, 8,0) 3’’ 77,8 76,7 77,90 3,43* 4’’ 71,7 70,6 71,72 3,45* 5’’ 75,4 77,0 75,65 3,60 m 6’’ 64,7 61,7 64,73 4,58 dd (12,0, 2,0)/4,41* Protocatechuoyl a 1”’ 122,5 122,61 - 2”’ 117,5 117,16 7,45 d (2,0) 3”’ 146,1 146,30 - 4”’ 151,7 151,91 - 5”’ 115,8 116,07 6,81 d (8,0) 6”’ 123,8 123,90 7,44 dd (8,0, 2,0) 7”’ 168,1 168,26 - ®o CD3OD, b125 MHz, c500 MHz, #δC cña fuhsioside [7], $δC cña β-miroside [10] 64 H×nh 4.3.5.c Phỉ 13C-NMR cđa H×nh 4.3.5.d Phỉ 13C-NMR vµ 13C-NMR d·n réng cđa 65 Hình 4.3.5 e Phổ HMQC Để ghép nối mảnh cấu trúc lại với xác định cÊu tróc tỉng thĨ cđa hỵp chÊt , chóng đà tiến hành đo thêm phổ HMBC Sự chuyển dÞch vỊ phÝa trêng thÊp cđa tÝn hiƯu oximetilen C-6" ( 64,73) đơn vị đường glucose gợi ý vị trí este hóa nhóm protocatechuoyl cacbon Nhận định khẳng định tương tác HMBC proton H-6" ( 4,41 4,58) 66 cacbon cacbonyl C-7''' ( 168,26) Vị trí liên kết đơn vị đường C-1' xác định tương tác HMBC proton anome H-1" ( 4,43) cacbon C-1' (δ 64,13) H×nh 4.3.5.f Phỉ HMBC cđa 67 HO O O HO O O O O OH HO OH Hình 4.3.5.g Các tương tác HMBC Hình 4.3.5.h Phỉ khèi lỵng ESI-MS cđa 68 21A-CB-4B3_2 135 (1.381) Cm (130:135) 1: TOF MS ES2.49e4 399.1267 100 % 411.0910 453.1004 412.0962 398.6485 414.1075 380 390 400 454.1066 410 420 430 439.1270 440 450 460 485.1275 471.1466 486.1323 501.1723513.1212 470 480 490 500 510 m/z 520 H×nh 4.3.5.i Phổ khối lượng phân giải cao HR-ESI-MS Từ tất phân tích nêu trên, với kết phổ khối lượng ESI-MS với pic ion m/z 435 [M+Na]+, 411 [M-H]-, 447 [M+2H2O-H]- vµ phỉ khèi lượng phân giải cao HR-ESI-MS m/z 411,0910 [M H] (tính toán lý thuyết cho công thức C18H19O11, 411,0927) tương ứng với công thức phân tử C18H20O11, cho phép xác định cấu trúc hóa học 3-[(6-O-protocatechuoyl--D- glucopyranosyloxy)methyl]-2(5H)-furanone Đây hợp chất đặt tên cibotiumbaroside A 69 IV.3.6 Cỏc hp chất phân lập từ Cẩu tích 1-O-β-D-glucopyranosyl-(2S,3R,4E,8Z)-2[(2R-hydroxyoctadeca-noyl)amido]-4,8octadecadiene-1,3-diol Corchoionoside C 12 10 13 OH 4'' 1'' O O 4' 3' 6' 1' 11 18 8 OH 3'' OH HO NH O HO HO O 13 1' 6'' O 4' O HO OH OH (2S)-1-O-(9Z,12Z-octadecadienoyl)-3-O-β-Dgalactopyranosylglycerol (2S)-1-O-palmitoyl-3-O-β-Dgalactopyranosyl-glycerol OH OH OH OH H O OH 21A-CB-4B3: Cibotiumbaroside A (ChÊt míi) HO 6"' O 1"' 7"' O O OR R = 9Z,12Z-octadecadienoyl R = palmitoyl 2"' OH OH R = 9Z,12Z-octadecadienoyl 4"' O HO OR OH HO H O O HO 6'' 4'' O HOHO 3'' OH O 1'' O 1' 70 OH OH chương kết luận Đà thu thập mẫu cẩu tích tên khoa học mẫu xác định Cibotimum barometz (L).J.Sm (Dicksoniaceae) Bằng phương pháp sắc ký kết hợp, hợp chất đà phân lập từ dịch chiết metanol thân cẩu tích (C barometz) Các hợp chất là: ã 1-O-β-D-glucopyranosyl-(2S,3R,4E,8Z)-2-[(2Rhydroxyhexadecanoyl)-amido]-4,8-octadecadiene-1,3-diol (1) • Corchoionoside C (2) • (2S)-1-O-(9Z,12Z-octadecadienoyl)-3-O-β-Dgalactopyranosylglycerol (3) • (2S)-1-O-palmitoyl-3-O--D-galactopyranosyl-glycerol (4) ã Cibotiumbaroside B (5) Các hợp chất lần phân lập từ loài C barometz Trong đó hợp chất Cibotiumbaroside B (5) chất lần phân lập từ thiên nhiên Cấu trúc hợp chất xác định nhờ vào phương pháp phổ đại phổ cộng hưởng từ hạt nhân chiều (1H-NMR, 13C-NMR, DEPT 135 vµ DEPT 90), hai chiỊu (HSQC vµ HMBC), Phỉ khối lượng phun mù điện tử (ESI-MS) 71 Tài liệu tham khảo Tiếng việt [1] Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung, Bùi Xuân Chương, Nguyễn Thượng Dong, Đỗ Trung Đàm, Phạm Văn Hiển, Vũ Ngọc Lộ, Phạm Duy Mai, Phạm Kim MÃn, Đoàn Thị Nhu, Nguyễn Tập Trần Toàn Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật Hà Nội, tập I, trang 366-368 (2004) [2] Nguyễn Hữu Đính, Đỗ Đình RÃng, Hóa hữu 1, Nhà xuất Giáo dôc (2003) TiÕng anh [3] Francesca Cateni, Gioacchino Falsone, Jelena Zilic, Paolo Bonivento, Marina Zacchignaa, Dušan Žigonb, Silvio Sosac, and Gianmario Altinier Glyceroglycolipids from Euphorbia nicaeensis All with antiinflamatory activity ARKIVOC, 2004 (v), 54-65 [4] Jung J H., Lee C O., Kim Y C., Kang S S New bioactive constituents from Arisaema amurense Journal of Natural Products, 59, 319-322 (1996) [5] Kim S T., Han Y N., Son Y K., Jang H S., Kim S J., Shin J S Isolation of bioactive constituent for neuronal regeneration from Cibotium barometz Yakhak Hoechi (2002), 46(6), 398-404 [6] Kwon HC, Zee OP, Lee KR Two new monogalactosylacyl-glycerol from Hydrocotyle ramiflora Planta Med 64, 477-479 (1998) [7] Meltem Ozipek, Iclal Saracoglu, Keisuke Kojima, Yukio Ogihara, and Ihsan Calis Fuhsioside, a new phenylethanoid glucoside from Veronica fuhsii Chem Pharm Bull 47(4), 561-562 (1999) 72 [8] Murakami T., Satake T., Ninomiya K., Lida H., Yamauchi K., Tanaka N., Saiki Y., and Chen C M Pterosin-derivate aus der familie Pteridaceae Phytochemistry, 19, 1743-1746 (1980) [9] Mun-Chual Rho, Kimihiro Matsunaga, Koubun Yasuda, and Yasushi Ohizumi A Novel Monogalactosylacylglycerol with inhibitory effect on platelet aggregation from the cyanophyceae Oscillatoria rosea J Nat Prod 59, 308-309 (1996) [10] Stephen D Lorimer, Simon D Mawson, Nigel B Perry, and Rex T Weavers Isolation and synthesis of β-miroside, an atifungal furanone glucoside from Prumnopitys ferruginea Tetrahedron, 51(26), 7278-7300 (1995) [11] Tanaka N., Yamauchi K., Murakami T., Saiki Y., and Chen C M., Chemische und chemotaxonoische untersuchungen von Filices XXXVIII Chemische untersuchungen der inhaltsstoffe von Diplazium subsinuatum (Wall.) Tagawa Chemical and Pharmaceutical Bulletin, 30(10), 3632-3639 (1982) [12] Wu Q., Yang X., Yang S H., Zou L., and Yan J Chemical constituents of Cibotium barometz Tianran Chanwu Yanjiu Yu Kaifa, 19(2), 240-243, 302 (2007) [13] Yoshikawa M., Shimada H., Saka M., Yoshizumi S., Yamahara J., and Matsuda H Medicinal foodstoffs V Moroheiya (1): Absolute stereostructures of corchoionosides A, B, and C, histamine release inhibitors from the leaves of Vietnamese Corchorus olitorius L (Tiliaceae) Chemical and Pharmaceutical Bulletin, 45(3), 464-469 (1997) 73 [14] Yuan Z., Su, S Jiang, Z., Wang Y., Study on chemical constituents of TCM drug Gouzhi, Cibotium barometz (L.) J Sm Zhongcaoyao, 27(2), 76 (1996) [15] Zhang C and Wang Z Studies on constituents of Cibotium barometz (L.) rhizomes., Zhongguo Yaowu Huaxue Zazhi , 11(5), 279-280 (2001) 74 TÓM TẮT LUẬN VĂN Vài nét sơ lược Cẩu tích C©y Cẩu tích có tên khoa học Cibotimum barometz (L).J.Sm Thuộc họ Lông cu ly (Dicksoniaceae) Ngoài dân gian Cẩu tích có tên Xương sống chó hình thù giống xương sống chó Do có lớp lông vàng bọc nên gọi Kim mao Cẩu tích, lông khỉ, lông cu ly Cây có thân thường yếu, cịng cã thĨ cao 2,5- 3m L¸ lín cã cng dài 1- 2m, màu nâu nâu, phía gốc có vẩy hình dải dài màu vàng bang phủ dày đặc Phiến dài tới 3m, rộng đến 60 -80cm Các lông chim phía hình trái xoan - giáo dài 30 - 60 cm Lá lông chim bậc hai hình dải - giáo, nhọn lại chia thành nhiều đoạn thuôn, hẹp; Mặt màu lục sẫm, mặt màu lục lơ; trục không lông; gân chét bậc hai có lông len túi bào tử hay 2, có hay bên gân bậc 3; túi màu nâu nâu, có hai môi không nhau; hình cầu, hẹp thuôn Cõy Cu tớch cú rt nhiều cơng dụng cơng trình nghiên cứu liên quan khơng nhiều Vì vậy, để góp phần tạo sở cho việc sử dụng Cẩu tích việc làm thuốc có hiệu an tồn, đáp ứng nhu cầu chữa bệnh nhân dân, thực số nghiên cưú ban đầu thành phần hóa học Cẩu tích Đã thu mẫu Cẩu tích Vên Qc gia B¹ch M·, Huế Mẫu TS Ninh Khắc Bản, Viện Sinh thái Tài nguyên Sinh vật, Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam giám định Tờn khoa hc l Cibotium barometz, thuéc hä L«ng cu ly (Dicksoniaceae) 75 Bằng phương pháp sắc kí kết hợp, phân lập hợp chất từ Cẩu tích là: • 1-O-β-D-glucopyranosyl-(2S,3R,4E,8Z)-2-[(2Rhydroxyhexadecanoyl)-amido]-4,8-octadecadiene-1,3-diol (1) • Corchoionoside C (2) • (2S)-1-O-(9Z,12Z-octadecadienoyl)-3-O-β-Dgalactopyranosylglycerol (3) ã (2S)-1-O-palmitoyl-3-O--D-galactopyranosyl-sn-glycerol (4) ã Cibotiumbaroside B (5) Các hợp chất lần phân lập từ loài C barometz Trong đó hợp chất Cibotiumbaroside B (5) chất lần phân lập từ thiên nhiên Cấu trúc hợp chất xác định nhờ vào phương pháp phổ đại phổ cộng hưởng từ hạt nhân chiều (1H-NMR, 13C-NMR, DEPT 135 vµ DEPT 90), hai chiỊu (HSQC vµ HMBC), Phổ khối lượng phun mù điện tử (ESI-MS) 76 SUMMARIZATION Desciptions about Cibotium barometz (L.) J Sm Name – Cibotium barometz (L.) J.Sm Family – Dicksoniaceae Local name: Cẩu tích, cu ly, kim mao, cút báng ( Tày), co cút pá (Thái), nhài cù vi ăng (Dao) English name: Golden moss Description: Arborescent fern, Rhizome stout and short, clothed with long brownish-yellow silky hair Leaves are fronds, tripinnate, over m-long, beaning many sori beneath, spores minute, pale-brown Dítribution: Grow wild in wet and shady ravines in mountain region Parts used: Rhizones are harvested at the end of year After all the radicles and the yellow hairs covering them have been removed, the rhizomes should be chipped into slices and the dried in the sun Chemical compositon: The rhizomes contain 30% starch The yellow fuzz yieds tannin and pigments Spore-bearing period: October-January By various chromatographic method, five compounds were isolated from the methanol extract of the whole plant of Cibotium barometz (L.) J.Sm The structure of these compounds were respectively elucidated as • 1-O-β-D-glucopyranosyl-(2S,3R,4E,8Z)-2-[(2Rhydroxyhexadecanoyl)-amido]-4,8-octadecadiene-1,3-diol (1) • Corchoionoside C (2) 77 • (2S)-1-O-(9Z,12Z-octadecadienoyl)-3-O-β-Dgalactopyranosylglycerol (3) • (2S)-1-O-palmitoyl-3-O-β-D-galactopyranosyl-sn-glycerol (4) • Cibotiumbaroside B (5) The compounds (1), (3), (4) were, it is the first time, isolated from Cibotium barometz growing in Viet Nam Expencial The compound (5) is new The structure of the compounds were determined by modern spectroscopic methods such as: Proton Magnetic Resonance Spectroscopy (1H-NMR), Carbon13 Nuclear Magnetic Resonance Spectrocopy (13C-NMR), Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer (DEPT), Heteronuclear Multiple Bond Connectivity (HMBC), Heteronuclear Multiple Quantum Coherence (HMQC) and Electron Spray Ionization Mass Spectrum (ESI-MS) 78 ... trường đại học bách khoa hµ néi - luận văn thạc sĩ khoa học nghiên cứu thành phần hoá học cẩu tích (Cibotium barometz) ngành : hoá Lê thị Hương Người hướng dẫn khoa học : PGS.TS... nên lựa chọn đề tài Nghiên cứu thành phn hoá hc ca Cẩu tích Với nội dung sau: Thu hái xác nh tên khoa hc Cẩu tích Phân lập số hợp chất từ Cẩu tích Xác định cấu trúc hóa học hợp chất phân lập... rượu 1.1.4 Thành phần hóa học Cẩu tích thuốc q, nhiªn, trªn thÕ giíi hiƯn vÉn cha cã nhiều công trình nghiên cứu thành phần hóa học loài công bố Năm 1980, nhóm nghiên cứu tác giả Murakami T [8]