CÁC PHƯƠNG PHÁP CHẨN đoán VI SINH TRONG PHÒNG xét NGHIỆM (VI SINH)

CÁC PHƯƠNG PHÁP CHẨN ĐỐN VI SINH TRONG PHỊNG XÉT NGHIỆM MỤC TIÊU Trình bày khái niệm phương pháp chẩn đoán vi sinh vật bệnh nhiễm khuẩn Trình bày bước thường áp dụng phương pháp chẩn đoán trực tiếp; nêu yêu cầu ý nghĩa bước Nêu nguyên tắc kể tên bước tiến hành phương pháp chẩn đoán gián tiếp CÁC PHƯƠNG PHÁP CHẨN ĐOÁN CHẨN ĐOÁN TRỰC TIẾP LẤY BỆNH PHẨM NHUỘM SOI NUÔI CẤY ĐỊNH DANH KHÁNG SINH ĐỒ SINH HỌC PHÂN TỬ CHẨN ĐOÁN GIÁN TIẾP LẤY MÁU TÁCH HUYẾT THANH LÀM PHẢN ỨNG CHẨN ĐỐN TRỰC TIẾP - Tìm VI KHUẨN GÂY BỆNH thể người bệnh - Có phương pháp: Ni cấy xác định (4 bước) Chẩn đoán nhanh (số bước tùy pp) CHẨN ĐOÁN TRỰC TIẾP Lấy bệnh phẩm - BP = Những vật phẩm chứa VKGB - Đảm bảo nguyên tắc: + Đúng chỗ + Đúng lúc + Trước dùng kháng sinh + Đảm bảo kỹ thuật vơ trùng + Chuyển nhanh tới phịng xét nghiệm CHẨN ĐOÁN TRỰC TIẾP Nhuộm soi sơ - Soi tươi: di động, nấm, KST khác - Nhuộm đơn: Đánh giá tế bào - Nhuộm Gram: Đánh giá hình thái, cách xếp, bắt màu vi khuẩn - Các phương pháp khác: Nhuộm ZiehlNeelsen, nhuộm nhiễm sắc… - Giá trị: Định hướng cho bước CHẨN ĐOÁN TRỰC TIẾP Nuôi cấy phân lập - Tách biệt vi khuẩn gây bệnh từ bệnh phẩm - Sử dụng loại mơi trường ni cấy: có chất ức chế khơng có chất ức chế - Tùy bệnh phẩm kết nhuộm soi mà chọn môi trường nuôi cấy phù hợp - Đánh giá tính chất khuẩn lạc: kích thước, màu sắc, hình thái để định hướng cho định danh - Nhuộm soi lại khuẩn lạc nghi ngờ - Tăng sinh (nếu cần) CHẨN ĐOÁN TRỰC TIẾP CHẨN ĐOÁN TRỰC TIẾP CHẨN ĐOÁN TRỰC TIẾP Xác định Tính chất SVHH Tính chất KN (KHT đặc hiệu) cách Tính chất ly giải phage Khả gây bệnh thực nghiệm CÁC TÍNH CHẤT SVHH         Thử nghiệm Catalase Thử nghiệm Oxidase Thử nghiệm đông huyết tương Thử nghiệm Indol Thử nghiệm Urease Thử nghiệm sinh H2S Thử nghiệm lên men đường Kn di động, kn làm tan máu… CHẨN ĐOÁN TRỰC TIẾP CHẨN ĐỐN TRỰC TIẾP Chẩn đốn nhanh - Nhiều phương pháp - PCR (polimerase chain reaction), realtimePCR - ELISA (Enzym Linked Immunosorbent Asay) - Quan trọng: nhiễm virus số vi khuẩn khó ni cấy CHẨN ĐỐN GIÁN TIẾP - Là tìm KHÁNG THỂ huyết người bệnh - Nguyên tắc: Dựa vào KN mẫu (đã biết trước) phản ứng KN-KT để tìm KT Thơng qua có mặt KT để khẳng định có mặt KN - Ý nghĩa: Chẩn đoán nhanh, độ nhạy độ đặc hiệu cao, quan trọng nhiễm virus số vi khuẩn khó ni cấy CHẨN ĐỐN GIÁN TIẾP Lấy bệnh phẩm – Tách huyết - Lấy máu tĩnh mạch, ly tâm lấy huyết - Máu lấy lần, bảo quản điều kiện, làm phản ứng lần Làm phản ứng - Pha loãng huyết - Tìm hiệu giá kháng thể (HGKT) động lực kháng thể (ĐLKT) CHẨN ĐOÁN VIRUS    Chẩn đoán huyết thanh: ELISA, phản ứng kết hợp bổ thể, ngăn ngưng kết HC, trung hịa, MDHQ, MDPX… Chẩn đốn trực tiếp: ELISA, PCR, Probes, kính hiển vi điện tử… Phân lập xác định virus tế bào cảm thụ, bào thai gà, động vật thí nghiệm… ... niệm phương pháp chẩn đoán vi sinh vật bệnh nhiễm khuẩn Trình bày bước thường áp dụng phương pháp chẩn đoán trực tiếp; nêu yêu cầu ý nghĩa bước Nêu nguyên tắc kể tên bước tiến hành phương pháp chẩn. .. tiến hành phương pháp chẩn đoán gián tiếp CÁC PHƯƠNG PHÁP CHẨN ĐOÁN CHẨN ĐOÁN TRỰC TIẾP LẤY BỆNH PHẨM NHUỘM SOI NUÔI CẤY ĐỊNH DANH KHÁNG SINH ĐỒ SINH HỌC PHÂN TỬ CHẨN ĐOÁN GIÁN TIẾP LẤY MÁU TÁCH...   Thử nghiệm Catalase Thử nghiệm Oxidase Thử nghiệm đông huyết tương Thử nghiệm Indol Thử nghiệm Urease Thử nghiệm sinh H2S Thử nghiệm lên men đường Kn di động, kn làm tan máu… CHẨN ĐOÁN TRỰC