Nghiên cứu chiết xuất epigallocatechin gallate (agcg) từ trà xanh (camellia sinensis) bằng phương pháp sắc ký cột với hệ dung môi ethanol

CƠNG TRÌNH ĐƢỢC HỒN THÀNH TẠI TRƢỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA ĐẠI HỌC QUỐC GIA TP HỒ CHÍ MINH - Cán hướng dẫn khoa học: TS Phạm Thành Quân - Cán chấm nhận xét 1: TS Phạm S - Cán chấm nhận xét 2: TS Trần Thị Kiều Anh Luận văn thạc sĩ bảo vệ tại: Trường Đại Học Bách Khoa – Đại Học Quốc Gia TP Hồ Chí Minh, ngày 07 tháng 08 năm 2010 Thành phần Hội đồng đánh giá luận văn thạc sĩ gồm: PGS.TS Trần Thị Việt Hoa Chủ tịch PGS.TS Trần Lê Quan Ủy viên TS Phạm Thành Quân Ủy viên TS Phạm S Ủy viên TS Trần Thị Kiều Anh UV, Thư ký Xác nhận Chủ tịch hội đồng đánh giá luận văn Bộ môn quản lý chuyên ngành sau luận văn sữa chữa (nếu có) Chủ tịch Hội đồng đánh giá luận văn Bộ môn quản lý chuyên ngành TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA CƠNG HỊA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc PHỊNG ĐÀO TẠO SĐH  Tp Hồ Chí Minh, ngày … tháng … năm 2010 NHIỆM VỤ LUẬN VĂN THẠC SĨ - Họ tên học viên: Dƣơng Hoàng Long - Ngày tháng năm sinh: 01/04/1980 - Chuyên ngành: Công nghệ hóa học - Năm trúng tuyển: 2008 Phái: Nam Nơi sinh: Đồng Tháp MSHV: 00508399 A TÊN ĐỀ TÀI: Nghiên cứu chiết xuất Epigallocatechin gallate (EGCG) từ trà xanh (Camellia sinensis), dùng phương pháp sắc ký cột với hệ dung môi ethanol/nước B NHIỆM VỤ LUẬN VĂN: - Xây dựng qui trình chiết xuất EGCG từ trà xanh, dùng hệ dung môi ethanol/nước Hàm lượng EGCG sản phẩm khoảng 50% - Dùng phương pháp sắc ký cột trao đổi ion để phân tách EGCG Xây dựng qui trình loại nhựa trao đổi ion có tính chất khác (Amberlite IR120, IR122, Purolite C100H, A100, Wofatit AD41), qui trình nhựa hấp phụ Amberlite XAD 7HP C NGÀY GIAO NHIỆM VỤ: 05/11/2009 D NGÀY HOÀN THÀNH NHIỆM VỤ: 05/07/2010 E HỌ VÀ TÊN CÁN BỘ HƢỚNG DẪN: Ts Phạm Thành Quân Nội dung đề cương Luận văn thạc sĩ Hội Đồng Chuyên Ngành thông qua CÁN BỘ HƢỚNG DẪN Ts Phạm Thành Quân CHỦ NHIỆM BỘ MÔN QUẢN LÝ CHUYÊN NGÀNH KHOA QUẢN LÝ CHUYÊN NGÀNH LỜI CẢM ƠN Để hồn thành đề tài này, tơi nhận hướng dẫn, định hướng nghiên cứu Ts Phạm Thành Quân; giúp đỡ, bảo thầy cô mơn Hữu Cơ, Khoa Cơng Nghệ Hóa Học, Trường Đại Học Bách Khoa; hỗ trợ Công ty DOMESCO động viên, giúp đỡ gia đình, bè bạn Tơi xin gửi lời cảm ơn đến tất người tơi hồn thành luận văn TÓM TẮT LUẬN VĂN THẠC SĨ - Khoa học chứng minh phần lớn tác dụng có lợi cho sức khỏe mà trà xanh mang lại hoạt tính chống oxy hóa catechin có trà Đề tài xây dựng qui trình chiết xuất Epigallocatechin gallate (EGCG), catechin có hoạt tính chống oxyhóa cao nhất, từ trà xanh (Camellia sinensis) - để sử dụng sản xuất sản phẩm thực phẩm, dược phẩm, mỹ phẩm - Dung môi sử dụng qui trình hệ ethanol/nước Phương pháp chiết xuất đun hoàn lưu với dung dịch ethanol 60% (tỉ lệ 6:1) 30 phút, loại tạp phương pháp kết tủa tác dụng ethanol nồng độ cao EGCG phân tách phương pháp sắc ký cột, rửa giải gradient với hệ dung môi ethanol/nước, pha tĩnh loại nhựa trao đổi ion: Amberlite IR120, IR122, Wofatit AD41, Purolite C100H, Purolite A100 nhựa non-ion Amberlite XAD7HP làm đối chứng - Sản phẩm tốt thu phân lập với cột anionit Wofatit AD41, có hàm lượng EGCG 48.2%, lượng caffeine 2% Hiệu so với nhựa non-ion Amberlite XAD7HP tương đương Tuy nhiên, khả ứng dụng nhựa anionit vào sản xuất công nghiệp cao tiện lợi việc tái khơi phục khả hoạt động, giảm chi phí ABSTRACTS - The health benefits of green tea are brought by the antioxidant activity of the catechins in tea This project building processes that extract Epigallocatechin gallate (EGCG) from green tea (Camellia sinensis), for use in the manufacture of foods, pharmarceuticals, cosmetics - Solvent used in process is the ethanol / water Dried green tea leaves were extracted for 30 minutes with solvent (ratio 6:1) at 80oC Contaminants were precipitated by the effect of hight ethanol concentrations EGCG was separated by ion-exchange chromatography procedure; mobile phase is the ethanol/water with different concentration, station phase is ion-exchange resins: Amberlite IR120, IR122, Wofatit AD41, Purolite C100H, Purolite A100 and non-ionic resin Amberlite XAD7HP as confronting - The best product was obtained when isolated with anionit Wofatit AD41 column, containing by weight 48.2% EGCG, 2% caffeine, equal to nonionic Amberlite XAD7HP column However, the applicability of anionits is higher than non-ionic resins due to the convenience of regenaration and cost efficiency Mục lục Mục lục i Danh sách hình v Danh sách bảng vi Danh sách từ viết tắt vii PHẦN MỞ ĐẦU CHƢƠNG : TỔNG QUAN I.1 Các hợp chất hữu I.2 Sơ lược lý thuyết flavonoids I.2.1 Cấu trúc, phân loại I.2.2 Lý tính I.2.3 Hóa tính I.2.4 Chiết xuất: I.2.5 Phân lập: I.2.6 Một số phản ứng tạo phức màu với ion kim loại 10 I.3 Hợp chất hữu trà xanh 10 I.3.1 Các polyphenols 10 I.3.2 Các hợp chất hữu khác trà 13 I.3.3 Thành phần chất trà tươi 13 I.4 Nhựa trao đổi ion [1, 37, 47] 14 I.4.1 Phân loại, số tính chất 14 I.4.2 Cơ chế trao đổi ion 16 I.5 Sắc ký lỏng [19] 18 I.5.1 Phân loại 18 I.5.2 Các thông số đặc trưng sắc ký lỏng 21 I.6 Lược khảo cơng trình nghiên cứu 25 i I.6.1 Xử lý nguyên liệu 25 I.6.2 Chiết xuất catechins từ trà xanh 25 I.6.3 Phân tách catechins từ dịch chiết trà xanh 28 I.6.4 Các phương pháp phân tích catechins 30 CHƢƠNG : THỰC NGHIỆM 32 II.1 Mục tiêu nghiên cứu 32 II.2 Giả thiết nội dung nghiên cứu 32 II.2.1 Giả thiết 32 II.2.2 Nội dung nghiên cứu 33 II.3 Đối tượng phạm vi nghiên cứu 34 II.4 Qui trình thực nghiệm 34 II.4.1 Xử lý nguyên liệu 34 II.4.2 Chiết xuất 35 II.4.3 Loại tạp 35 II.4.4 Kiểm tra hàm lượng polyphenol tổng 36 II.4.5 Sản phẩm sau loại tạp 37 II.4.6 Chuẩn bị cột 37 II.4.7 Khảo sát thể tích dung mơi rửa giải 38 II.4.8 Ảnh hưởng nồng độ dung môi lên phân tách hợp chất 39 II.4.9 Sản phẩm sau tinh chế 40 II.5 Phương pháp phân tích xử lý số liệu 40 II.5.1 Phương pháp so màu UV-vis 40 II.5.2 Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) 41 II.5.3 Phương pháp xử lý số liệu thực nghiệm 42 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ - BÀN LUẬN 43 III.1 Đường chuẩn máy Helios Epsilon UV/VIS Spectrophotometer 43 III.2 Lượng polyphenol hấp thu tối đa nhựa 43 ii III.3 Hàm lượng polyphenol tổng sau giai đoạn loại tạp 45 III.4 Lượng dung môi rửa giải 45 III.5 Phương pháp rửa giải gradient 49 III.5.1 Amberlite XAD HP 49 III.5.2 Amberlite IR120, IR122 51 III.5.3 Purolite C100H 53 III.5.4 Wofatit AD41 54 III.5.5 Purolite A100 55 III.5.6 Sản phẩm đầu phân đoạn dung môi khác 56 III.5.7 Tóm tắt qui trình phân lập catechin cho trường hợp 57 III.6 Kết phân tích HPLC 58 III.6.1 Amberlite XAD 7HP 58 III.6.2 Amberlite IR120 59 III.6.3 Amberlite IR122 60 III.6.4 Wofatit AD41 61 III.6.5 Purolite A100 62 III.6.6 Nhận xét 63 CHƢƠNG : KẾT LUẬN – ĐỀ NGHỊ 66 IV.1 Kết luận 66 IV.2 Đề nghị 67 Tài liệu tham khảo I Phụ lục V Đƣờng chuẩn phƣơng pháp so màu máy Jenway 6505 UV/VIS Spectrophotometer [2] V Đặc tính kỹ thuật loại nhựa V Phƣơng pháp hồi phục loại nhựa VII Phổ HPLC sản phẩm VIII iii Bảng thành phần hóa học trà: XXI iv Danh sách hình Hình I-1: Phân loại hợp chất Hình I-2 : Cơ chế trình trao đổi ion 17 Hình I-3 : Sơ đồ trình sắc ký rây phân tử (SEC) 20 Hình II-1: Phổ chuẩn phương pháp so màu 36 Hình III-1 : Đường chuẩn phương pháp so màu 43 Hình III-2: Đồ thị khảo sát lượng dung môi rửa giải XAD 7HP 46 Hình III-3 : Đồ thị khảo sát lượng dung môi rửa giải IR120, IR122 46 Hình III-4 : Đồ thị khảo sát lượng dung môi rửa giải Purolite C100H 47 Hình III-5 : Lượng dung môi rửa giải với Purolite A100 Wofatit AD41 47 Hình III-6 : Đồ thị rửa giải gradient, trường hợp nhựa Amberlite XAD 7HP 49 Hình III-7 : Đồ thị rửa giải gradient, trường hợp nhựa Amberlite IR120, IR122 51 Hình III-8 : Đồ thị rửa giải gradient, trường hợp Purolite C100H 53 Hình III-9 : Đồ thị rửa giải gradient, trường hợp Wofatit AD41 54 Hình III-10 : Đồ thị rửa giải gradient, trường hợp Purolite A100 55 Hình III-11 : HPLC trường hợp Amberlite XAD7HP 58 Hình III-12 : HPLC trường hợp Amberlite IR120 59 Hình III-13 : HPLC trường hợp Amberlite IR122 60 Hình III-14 : HPLC trường hợp Wofatit AD41 61 Hình III-15 : HPLC trường hợp Purolite A100 62 Hình IV-1 : Sơ đồ qui trình chiết xuất, phân lập EGCG 66 v XII XIII XIV XV XVI XVII XVIII XIX XX Bảng thành phần hóa học trà: Nguồn: Ivan A Ross Medicinal plants of the world : chemical constituents, traditional, and modern medicinal uses, vol 3, Humana Press, Totowa, N.J., 2005 [32] (Lf : leaf , Pl : plant, EO : essential oil, Sd : seed, Sh : shoot, Call tiss : callus tissue, Pt : part, Fl : flower Đơn vị chính: ppm) Acetaldehyde, phenyl: Sh 1.52–1.78% Acetaldehyde: Lf Acetamide, N-ethyl: Lf Acetic acid: Lf Acetoin: Lf Acetone: Lf Acetophenone, 2-4-dimethyl: Lf Acetophenone, 3-4-dimethoxy: Lf Acetophenone, para-ethyl: Lf Acetophenone: Headspace volatile Actinidiolide, dihydro: Lf EO Afzelechin, epi, (–): Lf 350 Afzelechin, epi, 3-O-gallate (–): Lf 37 Afzelechin, epi, 3-O-gallate (4-b-6)-epi, gallocatechin-3-O-gallate: Lf 5.6 Allantoic acid: Pl Allantoin: Pl Aluminium inorganic: Lf Amyrin, α : Sd oil Amyrin, β : Sd oil 76 Aniline, N-ethyl: Lf Aniline, N-methyl: Lf Aniline: Lf Apigenin: Lf Apigenin-6-8-di-C-β-D-arabinopyranosyl: Lf20 Apigenin-6-8-di-C-glucoside: Sh Arbutin: Lf 0.2 Aromadenrin: Sh Ascorbic acid: Sh, Lf 0.257% Assamicain A: Lf 58.2 Assamicain B: Lf 76.6 Assamicain C: Lf 33.6 Assamsaponin A: Sd 0.01% Assamsaponin B: Sd 28.3 Assamsaponin C: Sd 36.5 Assamsaponin D: Sd 26.1 Assamsaponin E: Sd 11.1 Assamsaponin F: Sd 14.1 Assamsaponin G: Sd 79.1 Assamsaponin H: Sd 13.4 Assamsaponin I: Sd 98.5 Astragalin: Lf Avicularin: Lf Caffeine: Lf 0.381–9.9%, Sh, Pl, Call Tiss, Sd, Sd Ct, Peduncle, Pc, Fl bud, Stamen, Pistil, Fl, An 0.05–6.77ppt, Stem call 0.64 ppt, Petal, Fr Barrigenol, A-1: Pl Barringtogenol C, 3-O-β-D-galactopyranosyl( 1-2)β-D-xylopyranosyl (1-2)α-l-arabinopyranosyl(13)β-D- glucuronopyranosyl- 21-O-cinnamoyl16-22-di-O-acetyl: Lf Benzene, 1-2-3-trimethoxy: Lf Benzene, 1-2-3-trimethoxy-5-ethyl: Lf Benzene, 1-2-3-trimethoxy-5-methyl: Lf Benzene, 1-2-4-trihydroxy: Lf Benzene, 1-2-5-trihydroxy: Lf Benzene, 1-2-dimethoxy: Lf Benzene, 1-2-dimethoxy-4-ethyl: Lf Benzene, 1-2-dimethoxy-4-methyl: Lf Benzene, 1-3-diacetyl: Lf Benzene, 1-4-diacetyl: Lf Benzoic acid: Headspace volatile Benzothiazole, 2-methyl: Lf Benzothiazole: Lf Benzoxazole: Lf Benzyl alcohol: Lf EO 1.01–1.6% Headspace volatile, Lf Sh 0.09–0.14% Benzyl butyrate: Lf Benzyl ethyl ketone: Lf Benzylaldehyde, 2-methyl: Lf Benzylaldehyde, 4-methoxy: Lf Benzylaldehyde: Headspace volatile Lf, Sh 0.21–0.23% Benzylamine: N-N-dimethyl: Lf Bicyclo(4.3.0)non-8-en-7-one, 1-5-5-9tetramethyl: Lf Brassicasterol: Sd oil Brassinolide, 28-homo, 6-keto: Lf Brassinolide, 28-nor, 6-keto: Lf Brassinolide, 28-nor: Lf Brassinolide, 6-keto: Lf Brassinolide: Lf 0.0046 ppb Brassinone, 24(S)-ethyl: Lf 30 ng/65 kg Brassinone, 24-ethyl: Lf Brassinone: Lf 130 ng/65 kg Butan-2-ol: Lf Butyrate, ethyl-3-hydroxy: Lf Butyroin: Lf Butyrospermol: Sd oil Catechin, epi-gallo, gallate(–): St call 0.02 ppt, Lf Catechin, epi-gallo: Lf Catechin-3-O-(3'-O-methyl)-gallate, XXI Camellia galactoglucan: Lf Camellia polysaccharide: Lf Camellia saponin B, deacyl: Lf Camellia sinensis polysaccharide TSA: Lf Camellianin A: Lf Camellianin B: Lf Camelliaside A: Sd 656–2733.3 Camelliaside B: Sd 291–3026.6 Camelliaside C: Sd 2.5 Campesterol: Sd oil Carvacrol: Lf Castasterone: Lf 7.2 mg/65 kg Catechin-(4-α-8)-epi-gallocatechin: Lf 45.4 Catechin-(4-α-8)-epi-gallocatechin-3gallate: Lf 45.4 Catechin-(4-β-8)-epi-gallocatechin-3gallate, epi: Lf 20.8 Catechin, (+): Lf 0.0017–2.9% Call Tiss St call, Sh, An, St Catechin, epi (–): Lf 0.004–6.8%, Call Tiss, Sh, St call 0.07 ppt Catechin, epi, 3-O-para-hydroxy-benzoate (–): Lf 3.6 Catechin, epi, epi-gallo-catechin(4-β-8)3-O-galloyl: Lf 50 Catechin, epi-gallo (–), 3-O-paracoumaroate: Lf 83.3 Catechin, epi-gallo (–): Lf 3269 Catechin, epi-gallo, 3-3'-di-O-gallate(–):Lf Catechin, epi-gallo, 3-4'-di-O-gallate(–):Lf Catechin, epi-gallo, 3-O-gallate (–):Lf 0.8718% Damascenone, β : Lf Damascone, α : Lf Damascone, β : Lf Dammaridienol: Sd oil 30 Deca-trans-2-cis-4-dien-1-al: Lf Deca-trans-2-en-1-al: Lf Dehydrogenase, NADP-dependent-alcohol: Sd Demmarenol, 24-methylene: Sd oil Diphenylamine: Lf 0.013–1.17% Dodeca-trans-2-trans-6-10-trien-1-al, 4-ethyl-7-11-dimethyl: Lf Gadoleic acid: Sd oil Gallic acid: Lf Gallocatechin gallate, (–): Lf 0.188% Gallocatechin gallate, (+): Lf Gallocatechin gallate, epi(–): Lf Gallocatechin gallate, epi(+): Lf Gallocatechin-(4-�-8)-epi-catechin: Lf 36.6 Gallocatechin, (–): Lf Gallocatechin, (+): Lf 0.01–12.8% Gallocatechin, epi(+): Lf 1.1% Gallocatechin, epi, (–): Lf 0.08816.8%, Sh Gallocatechin, epi, (4-α-8)-epi-catechin- epi(–): Lf 0.08% Catechin-3-O-(3-O-methyl)-gallate, epi(–): Lf 70.6-96.2 Catechin-3-O-(4-O-methyl)-gallate,epi(–): Lf16 Catechin-3-O-gallate-(4-�-6)-epigallocatechin-3-Ogallate, epi:Lf 5.8 Catechin-3- O-gallate-(4-β-8)-epigallocatechin3-O-gallate, epi: Lf 3.6 Catechin-3-O-gallate, (+): Lf 0.011% Catechin-3-O-gallate, epi(–): Lf 0.0086– 6.6% Catechin-gallate, (+): Lf Catechin-gallate: Lf Catechol, (+): Pl Catechol, epi(–): Sh, Pl Catechol, epi, gallate(–): Sh Catechol, epi-gallo(–): Sh Catechol, epi-gallo, gallate(–): Sh Catechol, gallo, (+): Sh Chasaponin: Pl Chlorogenic acid: Call Tiss, Lf Chondrillasterol: Sd oil Citric acid: Lf Cresol, meta: Lf Cresol, ortho: Lf Cresol, para: Lf Cyclocitral, �: Sh 0.08–0.1%, Lf Cyclohex-2-en-1-4-dione, 2-6-6-trimethyl: Lf Cyclohex-2-en-1-one, 2-6-6-trimethyl: Lf Erucid acid: Sd oil Lf Ethyl acetate: Lf Ethyl lactate: Lf Eugenol: Fr EO Euphol: Sd oil Farnesene, α , trans-trans: Lf EO Farnesol: Lf Fluoride inorganic: Lf 188 Fluorine, inorganic: Lf Furan, 2-acetyl: Lf Furan-3-one, tetrahydro, 2-methyl: Lf Furocoumarin, angular, 4-hydroxy-2'methoxy: Lf Galloyl-β-D-glucose, 1-4-6-tri-O:Lf 0.01% Galloylcatechin, epi (–): Lf Geranic acid, trans: Lf Geraniol β-D-glucopyranoside: Sh Geraniol: Sh, Lf EO 3.16-25.46%,Lf Geranyl-�-primeveroside, 8-hydroxy:Lf 2.08 Germanicol: Sd oil 25 Germanicum inorganic: Lf Gibberellin A-1: Endosperm Gibberellin A-19: Endosperm Gibberellin A-20: Endosperm Gibberellin A-3, iso: Endosperm Gibberellin A-3: Endosperm Gibberellin A-38: Endosperm XXII 3-)-gallate: Lf 27.6 Gallocatechin, epi, 3-O-cinnamate(–):Lf 13.2 Gallocatechin, epi, 3-3'-di-O-gallate(–):Lf Gallocatechin, epi, 3-4'-di-O-gallate(–):Lf Gallocatechin, epi, 3-O-gallate(–):Lf 0.714% Gallocatechin, epi, 3-O-gallate-(4-β-6)epi-catechin-3-O-gallate: Lf 4.2 Gallocatechin, epi, 3-O-gallate-(4-β-8)epi-catechin-3-O-gallate: Lf 44 Gallocatechin, epi, 3-O-paracoumaroate(–): Lf38.4 Gallocatechin, epi, 8-C-ascorbyl-3-Ogallate: Lf 11.2 Gallocatechin, epi: Lf 1.0867% Gallocatechin-3-5'-di-O-gallate, epi(–):Lf 0.06% Gallocatechin-3-O-(3'-O-methyl)-gallate, epi(–):Lf 38 Gallocatechin-3-O-gallate (–): Lf Gallocatechin-3-O-gallate (+): Lf Gallocatechin-3-O-gallate (4-�-8) epicatechingallate, epi: Lf 0.06% Gallocatechin-3-O-gallate, epi(–):Lf 0.0328–21.3%, Sh Gallocatechin-3-O-para-coumaroate, epi (–): Lf Gallocatechin-gallate, (–): Lf Gallocateuchin-3-O-gallate, epi (–):Lf 5.33% Gibberellin A-44: Endosperm Gibberellin A-8: Endosperm Gibberellin A-S: Endosperm Glucogallin,β: Lf 28.4 Glucose, β-D, 1-0-galloyl-4-6-(–)hexahyroxy-diphenoyl: Lf 30 Glucose, β-D, 1-4-6-tri-O-galloyl: Lf Glutamic acid: N-para-coumaryl: Lf Heptan-1-al: Sh 0.02–0.03% Heptan-2-ol: Lf Heptan-2-one, 5-iso-propyl: Lf Heptan-2-one: Lf Heptan-3-ol: Lf Hepta-trans-2-trans-4-dien-1-al: Sh 0.06–0.1% Hept-trans-2-en-1-al: Lf Hex-1-en-3-ol: Lf Hex-2-en-1-al, 5-methyl-2-phenyl: Lf Hex-5-en-4-olide, 4-methyl: Lf Hexadecane, N: Lf Hexan-1-al: ChloroplastCS129, Sh 0.55–1.03% Hexan-1-ol, 2-ethyl: Lf Hexan-2-ol: Lf Hexa-trans-2-cis-4-dien-1-al: Lf Hex-cis-3-en-1-al: Lf 370 Hex-cis-3-en-1-ol acetate: Lf Hex-cis-3-en-1-ol butyrate: Lf Hex-cis-3-en-1-ol caproate: Lf Hex-cis-3-en-1-ol formate: Lf Hex-cis-3-en-1-ol hexanoate:Sh 0.02–0.03% Hex-cis-3-en-1-ol hex-trans-2-enoate:Lf Hex-cis-3-en-1-ol propionate: Lf Hex-cis-3-en-1-ol, �-D-glucoside: Lf Hex-cis-3-en-1-ol: Lf, Lf EO 2.15– 15%, Sh 0.09–0.13% Hex-trans-2-en-1-al: Lf, Lf EO 1.13– 25.48%, Sh 2.09–3.1% Hex-trans-2-en-1-ol: Sh 0.04–0.06% Hex-trans-2-enyl acetate: Lf Hex-trans-2-enyl butyrate: Lf Hex-trans-2-enyl formate: Lf Hex-trans-2-enyl hexanoate: Lf Hex-trans-2-enyl propionate: Lf Hex-trans-3-enyl butyrate: Lf Hex-trans-3-enyl hex-cis-3-enoate: Lf Hex-trans-3-enyl propionate: Lf Hex-trans-3-enyl-2-methyl butyrate: Lf Hexyl butyrate: Lf Hexyl formate: Lf Hyperoside: Lf Indole: Lf Indole-3-methyl-ethanolate: Lf Inositol, myo, 2-O-�-L-arabinopyranosyl: Lf 0.4% Inositol, myo, 2-O-�-L-arabinopyranoside: Lf 0.4% Inositol, myo, 2-O-�-L-arabinoside: Lf Ionone, �: Sh 0.03–0.05% , Lf Kaempferitin: Lf Kaempferol: Lf, Sh Kaempferol-3-O-galactosyl-rhamnosylglucoside: Lf Kaempferol-3-O-glucosyl(1-3)rhamnosyl (1-6)galactoside: Lf Kaempferol-3-O-glucosyl-rhamnoside:Lf Kaempferol-3-O-glucosyl-rhamnosyl-galactoside: Lf Lauric acid: Sd oil Ligustrazine: Lf Limonene: Lf Linalool �-D-glucopyranoside: Sh Linalool oxide A: Lf Linalool oxide B: Lf Linalool oxide C: Lf Linalool oxide I: Lf Linalool oxide II: Lf Linalool oxide III: LfLinalool oxide IV: Lf Linalool oxide: Headspace volatile Linalool, (R): Lf Linalool, cis, oxide (furanoid): Lf Linalool, cis, oxide (pyranoid): Lf Linalool, cis, oxide: Sh 0.06–0.16% Linalool, trans, oxide (furanoid): Lf Linalool, trans, oxide (pyranoid): Lf Linalool, trans, oxide: Lf EO 3.18– 4.23% , Sh 0.15–0.43% Linalool: Lf , Headspace volatile , Sh , Lf EO 8.2–19.84 Linoleic acid: Sd oil , Lf Linolenic acid: Lf Loliolide: Lf EO XXIII Ionone, �, 1'-2'-dihydro, 1'-2'-epoxy: Lf EO Ionone, �, 1'-2'-dihydroxy, 1'-2'-threo: Lf EO Ionone, �, 3'-oxo: Lf EO Ionone, �: Lf EO 0.02–0.31% , Sh 0.17–0.29% Jasmonate, dihydro, methyl-trans: Lf Jasmone, cis: Lf EO 0.05–0.2% Jasmone: Lf Jasmonic acid, (1R, 2R), (–): Lf Jasmonic acid, (1R, 2S), (+): Lf Jasmonic acid: Pollen , An , Lf Neral: Lf Nerolidol: Lf , Sh 0.08–0.12% NH3 inorganic: Lf 400 Nicotiflorin: Lf Nicotine: Lf 15.5 ng/g Nonal-1-al: Sh 0.04–0.06% Nonal-2-ol: Lf Nonan-2-one: Lf Nona- trans-2-cis-4-dien-1-al: Lf Nona- trans-2-cis-6-dien-1-al: Lf Nona-trans-2-en-1-al: Lf Nona-trans-2-trans-4-dien-1-al: Lf Oct-1-en-3-ol: Lf Octa-1-5-7-trien-3-ol, 3(S)-7-dimethyl: Lf EO Octa-1-5-diene-3-7-diol, 3(S)-7-dimethyl, (+): Lf EO Octan-2-one: Lf Octan-3-ol: Lf Octanoate, ethyl: Lf Octanoate, methyl: Lf Octa-trans-2-cis-4-dien-1-al: Lf Octa-trans-2-trans-4-dien-1-al: Lf Octa-trans-3-cis-5-dien-2-one: Lf Oct-trans-2-enoic acid: Lf Oleic acid: Sd oil , Lf Oolonghomobisflavan A: Lf 10.6 Oolonghomobisflavan B: Lf 7.2 Oolongtheanin: Lf 1.8 Oxalic acid: Lf 1.0% Palmitic acid: Sd oil , Lf Pedunculagin: Lf Pent-1-en-3-ol: Lf , Sh 0.21–0.23% Pent-2-en-1-al, 4-methyl-2-phenyl: Lf Pentadecane, 2-6-10-14-tetramethyl: Lf Pentan-1-ol: Sh 0.06–0.11% Pentan-2-ol, methyl: Lf Pentan-3-ol, methyl: Lf Pentanoic acid: 2-amino-5-(N-ethylcarboxamido): Lf 120 Pent-cis-2-en-1-ol: Sh 0.1-0.14% Pent-cis-3-en-1-al: Lf Phenol: Lf Phenyl, acetate, ethyl: Lf Phenyl, acetate, hexyl: Lf Phenylacetic acid: Lf Pyridine, 2-6-dimethyl: Lf Lupeol: Sd oil Malic acid: Lf Malonic acid: Lf Menthol: Lf Methionine, S-methyl: Lf 7–24.5 mg% Methylamine: Lf 50 Morine: Lf Myrcene: Lf Myricetin: Lf Myristic acid: Sd oil , Lf Naringenin: Sh Naringenin-fructosyl-glucoside: Lf Phenylethanol, 2: Lf Phenylethyl alcohol, 2: Sh 0.1–0.13% Phenylethyl alcohol: Headspace volatile Pheophytin A: Lf Pheophytin B: Lf Pinene, a: Lf Pipecolic acid, L: Fr Pipecolic acid: Lf , Fr Polysaccharide T-B: Lf Procyanidin B-2 3'-O-gallate: Lf 166.7 Procyanidin B-2, 3-3'-di-O-gallate: Lf 0.00084–0.13% , Procyanidin B-2: Lf 5.8 Procyanidin B-3, 3-O-gallate: Lf Procyanidin B-3: Lf 0.21% Procyanidin B-4, 3'-O-gallate: Lf 141 Procyanidin B-4: Lf 46.6 Procyanidin B-5, 3-3'-di- O-gallate: Lf 2.6 Procyanidin C-1: Lf Prodelphinidin A-2, 3'-O-gallate: Lf 4.4 Prodelphinidin B-2, 3'-O-gallate: Lf 238 Prodelphinidin B-2, 3-3'-di-O-gallate: Lf 18.4 Prodelphinidin B-2,3'-O-gallate: Lf 147.4 Prodelphinidin B-4, 3'-O-gallate: Lf 63.8–1200 , Prodelphinidin B-4: Lf 56.8–800 , Prodelphinidin B-5, 3-3'-di-O-gallate: Lf 29.8 Proline, hydroxy: Lf , Fr Propionamide, N-ethyl: Lf Propiophenone, 2-4-dimethyl: Lf Propiophenone, para-ethyl: Lf Prunasin: Lf Pyrazine, 2-3-dimethyl: Lf Pyrazine, 2-5-dimethyl: Lf Pyrazine, 2-6-dimethyl: Lf Pyrazine, 2-ethyl-3-5-dimethyl: Lf Pyrazine, 2-ethyl-3-6-dimethyl: Lf Pyrazine, 2-ethyl-5-methyl: Lf Pyrazine, 2-ethyl-6-methyl: Lf Pyrazine, ethyl: Lf Pyrazine, methyl: Lf Pyrazine, trimethyl: Lf Pyridine, 2-5-dimethyl: Lf Tannic acid: Lf XXIV Pyridine, 2-acetyl: Lf Pyridine, 2-ethyl: Lf Pyridine, 2-ethyl-5-methyl: Lf Pyridine, 2-ethyl-6-methyl: Lf Pyridine, 2-methyl: Lf Pyridine, 2-phenyl: Lf Pyridine, 3-ethyl: Lf Pyridine, 3-methoxy: Lf Pyridine, 3-methyl: Lf Pyridine, 3-N-butyl: Lf Pyridine, 3-phenyl: Lf Pyridine, 4-methyl: Lf Pyridine, 4-vinyl: Lf Pyridine: Lf Quercetin: Lf , Sh Quercetin-3-glucosyl(1-3)rhamnosyl (1-6)galactoside: Lf Quercetin-fructosyl-glucoside: Lf Quercimeritrin: Lf Quercitrin, iso: Lf Quercitrin: Lf Quinic acid, (–): Lf Quinoline, 2-4-dimethyl: Lf Quinoline, 2-6-dimethyl: Lf Quinoline, 2-methyl: Lf Quinoline, 3-N-butyl: Lf Quinoline, 3-N-propyl: Lf Quinoline, 4-8-dimethyl: Lf Quinoline, 6-methyl: Lf Rutin: Lf Safranal: Lf Safrole: Lf Salicylic acid: Headspace volatile Sesquiphelandrene, b: Lf Sitosterol, �: Sd oil Spinasterol, 22-23-dihydro: Sd oil Spinasterol, �, �-D-glucoside: Rt Spinasterol, �: Rt Spinasterol: Sd oil Spinasterone, 22-23-dihydro: Sd oil Spinasterone: Sd oil Stearic acid: Sd oil Stigmasterol: Sd oil Strictinin: Lf 0.01% Succinic acid: Lf Theasapogenol A, 22-O-angeloyl: Sd Theasapogenol B, 22-O-angeloyl: Sd Theasapogenol E, 22-O-angeloyl: Sd Theasaponin B-1: Lf Theasaponin E-1: Sd 75 Theasaponin E-2: Sd 10 Theasaponin, gluco: Sd Theasaponin: Sd , Lf Theasinensin A: Lf 0.01866–4.8718% , Theasinensin B: Lf 128.2–600 , Theasinensin C: Lf 70.2 Theasinensin D: Lf 17.6 Theasinensin E: Lf 14.4 Theasinensin F: Lf 19.6 Theasinensin G: Lf Tannin: Lf Taraxasterol, Pseudo: Sd oil Taraxerol: Sd oil 20 Tartaric acid: Lf Tea polysaccharides: Lf Teasaponin B-1: Lf Teasaponin B-2: Lf Teasaponin B-3: Lf Teasaponin B-4: Lf Teasterone: Lf Tectoquinone: Rt Terpineol, 4: Lf Terpineol, �: Sh 0.07–0.1% , Lf Theacitrin A: Lf 0.08% Theaflagallin, epi, 3-O-gallate: Lf 17 Theaflagallin-3-O-gallate, epi: Lf 0.02% Theaflavate B: Lf Theaflavic acid, epi, gallate: Lf Theaflavic acid, epi: Lf Theaflavin, digallate: Lf Theaflavin, iso: 3'-O-gallate: Lf 25 Theaflavin, monogallate A: Lf Theaflavin, monogallate B: Lf Theaflavin, monogallate: Lf Theaflavin, neo: 3-O-gallate: Lf 30 Theaflavin: Lf , Sh 1.12–1.40% , Fl Theaflavin-3'-gallate: Lf Theaflavin-3'-O-gallate: Fl , Lf 18.6–800 , Theaflavin-3-3'- digallate: Fl Theaflavin-3-3'-di-O-gallate: Lf 18.2–300 , Theaflavin-3-gallate: Lf Theaflavin-3-O-gallate: Fl , Lf 6-700 , Theaflavin-monogallate A: Lf Theaflavin-monogallate B: Lf Theaflavonin, degalloyl: Lf 17.5 Theaflavonin: Lf 11.5 Theanaphthoquinone: Lf Theanine: Lf , Call Tiss , Seedling Rt 109, Sh 63, Cy 577 mg% , St Call 0.37 ppt, An 1.6-2.9%, St 34.9 ppt Thearubigin: Sh 13.56–15.74% , Lf Thiazole, 2-4-dimethyl-4-ethyl: Lf Thiazole, 2-5-dimethyl: Lf Thiazole, 5-methyl: Lf Thymol: Lf Tirucalla-7-24-dien-3-�-ol, 5-�: Sd oil 12 Tirucalla-7-24-dien-3-�-ol: Sd oil Tirucallol: Sd oil Toluidine, ortho: Lf Triacontan-1-ol: Lf Tricetin: Sh Tricetinidin: Lf Trifolin: Lf Tr-saponin A: Rt 2.2 XXV Theaspirane, dihydro, 6-7-epoxy: Lf Theaspirane, dihydro, 6-hydroxy: Lf Theaspirane: Lf Theaspirone: Lf EO Theobromine: Lf , Call Tiss , Sd, Pc, Fl Bd, Fl, Petal, Pistil, Stamen, An, St, St Call , Pl , Seedcoat Theogallin: Lf 6-55.5 , Theophylline: Sd Thiazole, 2-4-5-trimethyl: Lf Thiazole, 2-4-dimethyl: Lf Tr-saponin B: Rt 5.9 Tr-saponin C: Rt 2.8 Typhasterol: Lf Umbelliferone: Lf Undeca-2-one, 6-10-dimethyl: Lf Undeca-trans-2-en-1-al: Lf Urea: Pl Vitamin K-1: Lf 3.1-16.5 , Vitexin, iso, 2''-O-glucoside: Lf Vitexin: Sh Vomifeliol, dehydro: Lf EO XXVI ... phương pháp sắc ký cột với hệ dung môi ethanol/ nước B NHIỆM VỤ LUẬN VĂN: - Xây dựng qui trình chiết xuất EGCG từ trà xanh, dùng hệ dung môi ethanol/ nước Hàm lượng EGCG sản phẩm khoảng 50% - Dùng phương. .. chiết xuất, tinh chế EGCG từ trà xanh, sử dụng phương pháp sắc ký cột với hệ dung môi ethanol/ nước để phân tách EGCG - Mục tiêu cụ thể: o Khảo sát ảnh hưởng yếu tố: nồng độ dung môi, tốc độ dung. .. tương đương với phương pháp dùng nước I.6.2 - Chiết xuất catechins từ trà xanh Phương pháp ứng dụng thực tế nhiều việc chiết xuất hợp chất thiên nhiên phương pháp gia nhiệt hồn lưu với dung mơi