Nghiên cứu đặc điểm sinh học của nấm Trichoderma sp. gây bệnh mốc xanh trên nấm sò

Bài viết tiến hành nghiên cứu khả năng phát triển của nấm mốc xanh Trichoderma sp. trên các loại môi trường nuôi cấy khác nhau; phát triển của nấm mốc xanh Trichoderma sp. ở các mức nhiệt độ nuôi cấy khác nhau; nấm mốc xanh Trichoderma sp. ở các mức pH nuôi cấy khác nhau.

HOẠT ĐỘNG KH-CN NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA NẤM TRICHodeRMA SP GÂY BỆNH MỐC XANH TRÊN NẤM SÒ n Hồ thị nhung, nguyễn Linh trang, nguyễn thị vui Trường Đại học Vinh i Đặt vấn Đề Nấm sò (Pleurotus spp.) công nhận chi quan trọng mặt kinh tế loài nấm lớn tồn giới, có khả thích ứng rộng với điều kiện sinh thái khác thích hợp với nhiều điều kiện dinh dưỡng (Hassan et al., 2010) Nấm sị (Pleurotus spp.) có nhiều giá trị dinh dưỡng như: hàm lượng vitamin B (vitamin B1 vitamin B2) nấm sị cao lồi nấm khác từ 3-6 lần, hàm lượng nguyên tố khoáng 100g thể: Ca (25,1-35,3mg), P (448-602 mg), K (2146-2350mg), Na (139-229mg), Mg (153-224mg), Fe (9,74-20,75mg), Mn (2,5-4,0mg) Zn (2,2-3,1mg) (Mkhatshwa, 2002) Bên cạnh đó, nấm sị cịn có nhiều giá trị dược học: thể sợi nấm sị chứa số chất có đặc tính trị liệu kháng viêm, kích thích điều hòa hệ miễn dịch, hoạt động kháng ung thư (Wasser, 2002), hoạt hóa ribonuclease (Wang et al., 2000) cịn nhiều chức khác Năm 2012, Thủ tướng Chính phủ Quyết định số 439/QĐ-TTg ngày 16/4/2012 phê duyệt Danh mục sản phẩm Quốc gia thực từ năm 2012 SỐ 1/2019 thuộc Chương trình Phát triển sản phẩm Quốc gia đến năm 2020, sản phẩm nấm ăn nấm dược liệu chín sản phẩm ưu tiên phát triển Ở Việt Nam, nấm sò năm loại nấm phát triển hàng hóa lớn với sản lượng 60.000 tấn/năm (Báo cáo Cục Trồng trọt Hội nghị Phát triển nấm tỉnh phía Bắc, Đồ Sơn - Hải Phịng 22/9/2011) Khoảng 15 năm trở lại đây, trồng nấm coi nghề mang lại hiệu kinh tế cao nước ta Nấm nuôi trồng khắp tỉnh, thành phố Trong đó, giống nấm sị trắng (Pleurotus ostreatus) trồng nhiều nước Ở Nghệ An, phong trào trồng nấm sò ngày phát triển năm gần Các loại giống nấm sò, phổ biến giống nấm sò trắng (Pleuro- Nấm sị Tạp chí KH-CN Nghệ An [26] HOẠT ĐỘNG KH-CN tus ostreatus) trồng nhiều xã Yên Thành, Nghi Lộc, Tân Kỳ, Diễn Châu, trang trại thành phố Vinh lân cận với quy mơ từ nghìn đến vạn bịch nấm vụ trồng Vụ trồng nấm sị trắng Nghệ An thường bắt đầu vào tháng đến tháng năm sau Thành phần bệnh gây hại phổ biến nấm sò trắng trang trại gồm có bệnh: mốc xanh, mốc đen mốc cam Trong đó, bệnh mốc xanh nấm Trichoderma sp xuất phổ biến điểm điều tra Điển điểm điều tra trang trại nấm Nghi Liên, Nghi Lộc, bệnh mốc xanh gây hại nửa tổng số 1,5 vạn bịch phôi trồng Nấm mốc xanh (Trichoderma sp.) gây hại nặng vào giai đoạn cấy giống nấm sò trắng làm tơ nấm phát triển dần; giai đoạn tơ nấm sị trắng phủ kín nửa bịch phơi kín hồn tồn bịch phơi làm giảm nhiều đến suất; giai đoạn bịch phơi nấm sị thể, nấm mốc xanh ảnh hưởng (Hồ Thị Nhung cs., 2018) Xuất phát từ thực tiễn trên, tiến hành đề tài “Nghiên cứu đặc điểm sinh học nấm Trichoderma sp gây bệnh mốc xanh nấm sò” làm sở xây dựng biện pháp phịng trừ lồi nấm gây hại ii vật Liệu PHƯƠng PHÁP ngHiÊn cỨu 2.1 vật liệu nghiên cứu - Nấm mốc xanh Trichoderma sp phân lập từ bịch phơi nấm sị trắng - Mơi trường: PDA, CDA 2.2 Phương pháp nghiên cứu * thí nghiệm 1: Khả phát triển nấm mốc xanh môi trường Potato Dextro Agar (PDA) Czapek- Dox Agar (CDA) Thí nghiệm gồm công thức ứng với loại môi trường khác Czapek- Dox Agar PDA Mỗi công thức lặp lại lần Nấm mốc xanh cấy đĩa môi trường nuôi điều kiện nhiệt độ tủ định ôn 300C SỐ 1/2019 Bố trí cơng thức thí nghiệm: CT1.1: Trên mơi trường PDA CT1.2: Trên môi trường Czapek- Dox Agar Chỉ tiêu theo dõi: Đường kính nấm mốc xanh loại môi trường sau ngày nuôi cấy * thí nghiệm 2: Ảnh hưởng nhiệt độ đến sinh trưởng phát triển nấm mốc xanh Thí nghiệm gồm công thức với mức nhiệt độ khác nhau, công thức lặp lại lần Bố trí cơng thức thí nghiệm: CT2.1: 200C; CT2.2: 250C; CT2.3: 300C; CT2.4: 350C Chỉ tiêu theo dõi: Đường kính tản nấm mốc xanh sau ngày nuôi cấy mức nhiệt độ khác * thí nghiệm 3: Ảnh hưởng số ngưỡng pH khác đến sinh trưởng phát triển nấm mốc xanh Thí nghiệm gồm có cơng thức ứng với mức pH (pH= 5, 6, 7, 8) Mỗi công thức lặp lại lần, nuôi mức nhiệt độ 300C tủ định ơn Bố trí cơng thức thí nghiệm: CT3.1: pH = 5; CT3.2: pH = 6; CT3.3: pH = 7; CT3.4: pH = Chỉ tiêu theo dõi: Đường kính tản nấm mốc xanh sau ngày theo dõi mức pH khác iii Kết ngHiÊn cỨu 3.1 Khả phát triển nấm mốc xanh Trichoderma sp loại môi trường nuôi cấy khác Hai loại môi trường nuôi cấy chọn Potato Dextrose Agar (PDA): loại môi trường thường dùng phổ biến nghiên cứu vi sinh Czapek - Dox Agar (CDA) môi trường tiêu chuẩn ni cấy lồi nấm mốc Nghiên cứu phát triển nấm mốc xanh Trichoderma sp hai loại môi trường đĩa petri, điều kiện 300C, thu kết theo bảng 3.1 Tạp chí KH-CN Nghệ An [27] HOẠT ĐỘNG KH-CN Bảng 3.1 Sự phát triển nấm mốc xanh Trichoderma sp loại môi trường khác sau ngày ni cấy cơng thức CT1.1 Đường kính tản nấm ngày xuất sau ngày (cm) bào tử CT1.2 CV (%) LSD0,05 8,60a 8,08b 1,80 0,27 Ghi chú: Các giá trị trung bình cột mang chữ khác khác có ý nghĩa mức α=0,05 CT 1.1: Trên môi trường PDA CT 1.2: Trên môi trường Czapek - Dox Agar Số liệu bảng 3.1 cho thấy, nấm mốc xanh Trichoderma sp phát triển tốt hai loại mơi trường thí nghiệm khơng có chênh lệch q lớn sau ngày theo dõi Đường kính tản nấm mốc xanh Trichoderma sp môi trường CDA sau ngày nuôi cấy 8,08cm Trên mơi trường PDA, đường kính tản nấm Trichoderma phát triển nhanh đạt 8,60cm Sự xuất bào tử nấm Trichoderma sp môi trường nuôi cấy đánh dấu tản nấm chuyển từ màu trắng sang màu xanh Trên môi trường PDA, bào tử nấm mốc xanh xuất sớm (sau ngày nuôi cấy) so với môi trường CDA (sau ngày nuôi cấy) Trồng nấm sò huyện Yên Thành SỐ 1/2019 Như vậy, nấm mốc xanh Trichoderma sp phát triển tốt hai loại mơi trường thí nghiệm Trên môi trường PDA, nấm mốc xanh phát triển nhanh hình thành bào tử nấm sớm Mơi trường PDA môi trường nuôi cấy vi sinh thông dụng môi trường để nhân nuôi giống nấm sò trắng cấp 1, cấp để lưu giống gốc nhân giống gốc nấm sò trắng môi trường rắn làm giống cấy vào bịch phôi Bởi vậy, q trình ni tơ nấm sị trắng môi trường PDA đĩa petri cần ý tạp nhiễm loài nấm mốc xanh để loại bỏ kịp thời từ giai đoạn nuôi cấy 3.2 Khả phát triển nấm mốc xanh Trichoderma sp mức nhiệt độ nuôi cấy khác Nhiệt độ yếu tố ảnh hưởng lớn đến tốc độ phát triển lồi vi sinh vật nói chung, có nấm mốc xanh Trichoderma sp Bố trí thí nghiệm dải nhiệt độ từ 20-350C để đánh giá nấm mốc xanh Trichoderma sp phát triển mạnh mức nhiệt độ nào, kết thu theo bảng 3.2 Bảng 3.2 Sự phát triển nấm mốc xanh Trichoderma sp mức nhiệt độ nuôi cấy khác cơng thức Đường kính tản nấm sau ngày cấy (cm) CT2.2 8,36b CT2.4 CV (%) LSD0,05 2,86d 1,30 0,12 CT2.1 CT2.3 7,30c 8,80a Ghi chú: Các giá trị trung bình cột mang chữ khác khác có ý nghĩa mức α=0,05 CT2.1: Nấm mốc xanh Trichoderma sp nuôi cấy mức 200C CT2.2: Nấm mốc xanh Trichoderma sp nuôi cấy mức 250C Tạp chí KH-CN Nghệ An [28] HOẠT ĐỘNG KH-CN CT2.3: Nấm mốc xanh Trichoderma sp nuôi cấy mức 300C CT2.4: Nấm mốc xanh Trichoderma sp nuôi cấy mức 350C Bảng 3.2 cho thấy, nấm mốc xanh Trichoderma sp phát triển phạm vi nhiệt độ từ 20350C Tuy nhiên có khác biệt rõ ràng mức nhiệt độ Nấm mốc xanh Trichoderma sp phát triển nhanh mức nhiệt độ 300C, đạt đường kính tản nấm lớn sau ngày nuôi cấy 8,8cm Tiếp đến mức nhiệt độ 250C, nấm mốc xanh đạt đường kính 8,36cm Ở mức nhiệt độ 200C, mấm mốc xanh phát triển hơn, đường kính đạt 7,3cm Nấm mốc xanh phát triển mức nhiệt độ 350C Như vậy, phạm vi nhiệt độ thích hợp cho phát triển gây hại nấm mốc xanh Trichoderma sp từ 25300C Đây mức nhiệt độ thích hợp q trình nhân ni nấm sò trắng vụ trồng Do vậy, cần theo dõi thường xun q trình ni trồng nấm sị trắng vào thời điểm có mức nhiệt độ thích hợp cho nấm mốc xanh gây hại phát triển để kịp thời cách ly xử lý bịch phôi bị nhiễm bệnh, tránh bệnh lây lan điều kiện thuận lợi 3.3 Khả phát triển nấm mốc xanh Trichoderma sp mức pH nuôi cấy khác Bên cạnh nhiệt độ, pH yếu tố môi trường ảnh hưởng lớn đến phát triển nấm mốc xanh Trichoderma sp Đánh giá mức pH mơi trường thích hợp cho nấm mốc xanh phát triển theo bảng 3.3 SỐ 1/2019 Bảng 3.3 Sự phát triển nấm mốc xanh Trichoderma sp mức pH nuôi cấy khác công thức Đường kính tản nấm sau ngày cấy (cm) CT3.2 8,52a CT3.1 7,70c CT3.3 8,44b CV (%) 0,90 CT3.4 LSD0,05 4,64d 0,09 Ghi chú: Các giá trị trung bình cột mang chữ khác khác có ý nghĩa mức α=0,05 CT3.1: Nấm mốc xanh Trichoderma sp cấy mức pH = CT3.2: Nấm mốc xanh Trichoderma sp cấy mức pH = CT3.3: Nấm mốc xanh Trichoderma sp cấy mức pH = CT3.4: Nấm mốc xanh Trichoderma sp cấy mức pH = Qua bảng 3.3 hình 3.1 cho thấy, nấm mốc xanh Trichoderma sp phát triển tốt ngưỡng pH khác từ pH=5 đến pH=8 Trong đó, mức pH =6 pH = hai mức pH thuận lợi cho phát triển nấm mốc xanh, đạt đường kính tản nấm cao từ 8,52cm 8,44cm sau ngày nuôi cấy Mức pH = 5, nấm mốc xanh Trichoderma sp đạt đường kính 7,70cm sau ngày nuôi cấy Nấm mốc xanh Trichoderma sp phát triển mức pH = Như vậy, kết sở để giải thích cho phương pháp xử lý nguyên liệu trồng nấm như: bông, mùn cưa rơm… vôi trước đóng bịch, góp phần ức chế phát triển lồi vi sinh vật gây hại, có loài nấm mốc xanh Trichoderma sp Đây sở biện pháp phòng trừ nấm mốc xanh xuất gây hại trình phát triển nấm sị bịch phơi cách xử lý vơi Tạp chí KH-CN Nghệ An [29] HOẠT ĐỘNG KH-CN Hình 3.1 Sự phát triển nấm mốc xanh môi trường PDA cDA (hình a); với mức nhiệt độ 30; 25; 20; 300c từ trái qua phải (hình b); mức pH 6; 7; 5; (hình c) từ trái qua phải vi Kết Luận Nấm mốc xanh Trichoderma sp phát triển nhanh hình thành bào tử nấm sớm môi trường PDA Mặt khác môi trường PDA mơi trường để nhân ni giống nấm sị trắng cấp 1, cấp để lưu nhân giống gốc nấm sị trắng Do vậy, q trình ni tơ nấm sị trắng mơi trường PDA cần ý tạp nhiễm loài nấm mốc xanh để loại bỏ kịp thời Mức nhiệt độ thích hợp cho phát triển nấm mốc xanh Trichoderma sp từ 25-300C Đây phạm vi nhiệt độ ưa thích nấm tài liệu tham khảo: sò trắng Cần theo dõi sát q trình ni trồng nấm sò trắng để kịp thời cách ly xử lý bịch phôi bị nhiễm nấm mốc xanh, tránh bệnh lây lan điều kiện nhiệt độ thuận lợi Nấm mốc xanh Trichoderma sp phát triển mức pH=8 (so với mức pH thí nghiệm 5; 6; 7) Kết sở cho thử nghiệm biện pháp phòng trừ nấm mốc xanh Trichoderma sp xử lý vôi không áp dụng cho giai đoạn xử lý nguyên liệu mà q trình phát triển nấm sị trắng bịch phôi./ Quyết định số 439/QĐ-TTg ngày 16/4/2012 Thủ tướng phủ phê duyệt Danh mục sản phẩm quốc gia thực từ năm 2012 thuộc Chương trình Phát triển sản phẩm quốc gia đến năm 2020 Báo cáo cục trồng trọt Hội nghị phát triển nấm tỉnh phía Bắc, Đồ Sơn - Hải Phòng 22/9/2011 Hồ Thị Nhung, Nguyễn Linh Trang, Hồ Thị Phương Thảo, Hà Văn Ngát, Phạm Thị Chung, Lô Thị Hồi (2018), Nghiên cứu phịng trừ bệnh mốc xanh nấm Trichoderma sp hại nấm sò trắng (Pleurotus ostreatus) nước vôi, Hội thảo quốc gia bệnh hại thực vật Việt Nam lần thứ 16 Hassan, F.R.H., Medany, G.M and Hussein, S.D., (2010), Cultivation of the king oyster mushroom (Pleurotus eryngii) in Egypt Australian Journal of Basic and Applied Sciences, 4(1), pp 99-105 Mkhatshwa (2002), Nutrient content and yield in three flushes of oyster mushrooms (Pleurotus sajor caju and Pleurotus Hk-35) Wang, H.X and Ng, T.B., (2000), Quinqueginsin, a novelprotein with anti-human immunodeficiency virus antifungal, ribonuclease and cell-free translation inhibitory activities from American ginsengroots Biochem Biophys Res.Commun., 269: 155-159 Wasser, S.P., (2002), Medicinal mushrooms as a source of antitumor and immuno modulating polysaccharides (minireview) Appl Microbiol Biotechnol., 60: 258-274 SỐ 1/2019 Tạp chí KH-CN Nghệ An [30] ... bịch phơi nấm sị thể, nấm mốc xanh ảnh hưởng (Hồ Thị Nhung cs., 2018) Xuất phát từ thực tiễn trên, tiến hành đề tài ? ?Nghiên cứu đặc điểm sinh học nấm Trichoderma sp gây bệnh mốc xanh nấm sò? ?? làm... đó, bệnh mốc xanh nấm Trichoderma sp xuất phổ biến điểm điều tra Điển điểm điều tra trang trại nấm Nghi Liên, Nghi Lộc, bệnh mốc xanh gây hại nửa tổng số 1,5 vạn bịch phôi trồng Nấm mốc xanh (Trichoderma. .. lồi nấm gây hại ii vật Liệu PHƯƠng PHÁP ngHiÊn cỨu 2.1 vật liệu nghiên cứu - Nấm mốc xanh Trichoderma sp phân lập từ bịch phơi nấm sị trắng - Mơi trường: PDA, CDA 2.2 Phương pháp nghiên cứu *