Nghiên cứu đặc điểm sinh học sinh sản và thăm dò khả năng sản xuất giống trên ngao móng tay chúa Cultellus maximus Gmelin, 1791

Bài viết này trình bày những kết quả mới nhất về nghiên cứu đặc điểm sinh học sinh sản, thu thập, thuần dưỡng, đánh giá vùng phân bố, các biện pháp kích thích sinh sản và ương nuôi từ giai đoạn ấu trùng đến giống.

VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC SINH SẢN VÀ THĂM DÒ KHẢ NĂNG SẢN XUẤT GIỐNG TRÊN NGAO MÓNG TAY CHÚA Cultellus maximus GMELIN, 1791 Nguyễn Đức Minh1*, Đỗ Thị Phượng1 TÓM TẮT Nghiên cứu thành công sinh sản nhân tạo ngao móng tay chúa, Cultellus maximus (Gmelin, 1791), góp phần chủ động nguồn giống phục vụ nuôi thương phẩm đa dạng hóa đối tượng nhuyễn thể ni Bài báo trình bày kết nghiên cứu đặc điểm sinh học sinh sản, thu thập, dưỡng, đánh giá vùng phân bố, biện pháp kích thích sinh sản ương ni từ giai đoạn ấu trùng đến giống Ngao móng tay chúa lồi nhuyễn thể hai mảnh vỏ có kích thước thành thục sinh dục dài từ 12-15 cm, thích nghi với điều kiện nhiệt đới, tỷ lệ phần trăm thành thục sinh dục cao vào tháng Mẫu thu thập huyện Cái Nước huyện Đất Mũi thuộc tỉnh Cà Mau Trong q trình kích thích sinh sản, phương pháp sốc hạ nhiệt cho tỷ lệ phần trăm sống cao phương pháp cịn lại Ngao móng tay chúa có sức sinh sản trung bình 1.744.175 ấu trùng Trứng sau thụ tinh có đường kính 80 µm Ấu trùng ương bể phát triển qua giai đoạn bánh xe, chữ D, chân bò giống Ương ấu trùng đến giai đoạn giống đạt tỷ lệ sống 0,93% Từ khóa: Ngao móng tay chúa, kích thích sinh sản, sinh học sinh sản I ĐẶT VẤN ĐỀ Ngao móng tay chúa Cultellus maximus (Gmelin, 1791) lồi động vật thân mềm hai mảnh vỏ có giá trị dinh dưỡng kinh tế cao Việt Nam số nước Đông Nam Á Hiện nay, nguồn lợi ngao ngao móng tay chúa ngày suy giảm dẫn tới nguy tuyệt chủng khai thác mức để đáp ứng nhu cầu tiêu thụ nước Tuy nhiên, kỹ thuật sản xuất giống nhuyễn thể chưa giải đối tượng chưa nghiên cứu nhiều hoàn toàn Việt Nam Việc sinh sản nhân tạo thành cơng lồi góp phần vào việc tái tạo quần đàn tự nhiên cung cấp giống cho người ni Chính “Nghiên cứu đặc điểm sinh học sinh sản thăm dò khả sinh sản ngao móng tay chúa Cultellus maximus (Gmelin, 1791)” làm tiền đề cho việc chủ động sản xuất nguồn giống tạo điều kiện cho việc thúc đẩy nghề nuôi ngao móng tay chúa Việt Nam II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 2.1 Vật liệu nghiên cứu - Thực nghiên cứu đối tượng ngao móng tay chúa thu thập vùng ven biển Cà Mau - Thời gian nghiên cứu tiến hành từ tháng 7/2013 – 7/2015 - Hệ thống bể, kính hiển vi soi nổi, màng lọc, ni cấy tảo, hố chất thí nghiệm, dung dịch NH3, serotonine hydrochloride, formol, cồn, nước cất, dung dịch TMS, dung dịch vitamine, dung dịch nutrient, nước biển khử trùng… Phịng Sinh học Thực nghiệm, Viện Nghiên cứu Ni trồng Thủy sản II * Email: minhria2@yahoo.com 32 TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SƠNG CỬU LONG - SỐ - THÁNG 9/2016 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II 2.2 Nghiên cứu đặc điểm sinh học sinh sản ngao móng tay chúa Đặc điểm thành thục sinh dục đánh giá theo: Tính tỷ lệ thành thục giai đoạn khác qua tháng thu mẫu: Sức sinh sản tuyệt đối xác định theo công thức: Fa = n.V Sức sinh sản tuyệt đối (Fa): Là số lượng trứng phát triển sớm trước sinh sản Xác định cách đếm số lượng trứng cá thể giai đoạn thành thục buồng đếm động vật phù du Lấy tuyến sinh dục ngao móng tay chúa cho vào nước mặn 25‰ tách nhẹ toàn tế bào trứng khỏi tuyến sinh dục Sau chuyển qua ống chia độ xác định thể tích V (tính theo ml) Định lượng n số lượng tế bào trứng/1ml Sức sinh sản tương đối (Fr): Là tỷ số số lượng trứng trung bình cá thể trưởng thành khối lượng toàn thân (W) Fr = Fa/W Sức sinh sản thực tế: Xác định tổng số lượng trứng thu cá thể mẹ lần sinh sản Tiến hành cá thể ngao móng tay chúa thành thục sinh dục mùa sinh sản cho sinh sản nhân tạo xơ 20 lít, đếm số lượng trứng lần sinh sản cá thể theo phương pháp thể tích 2.3 Nghiên cứu biện pháp kích thích sinh sản Thời gian kích thích sinh sản nghiệm thức từ 45-60 phút Kích thích sốc nhiệt bao gồm tăng 100C hạ 100C so với nhiệt độ môi trường dưỡng Kích thích Serotonine μl điều kiện nhiệt độ thường, sau kiểm tra phân tích kết Kích thích NH4OH 1% điều kiện nhiệt độ thường, sau kiểm tra phân tích kết 2.4 Nghiên cứu kỹ thuật ương ni ấu trùng lên giống 2.4.1 Bố trí thí nghiệm ương ni ấu trùng Kích thích ngao móng tay chúa sinh sản sau lựa chọn trứng ấu trùng có chất lượng tốt bố trí thí nghiệm ương ni ấu trùng bể 0,5-1 m3 Thí nghiệm thực với lần lặp lại Thức ăn chủ yếu q trình ni dưỡng loại tảo như: Nannopchloris atomus, Isochripsis sp., Chaetoceros sp 2.4.2 Quản lý chăm sóc bể ương - Bể ương ni ấu trùng: Sử dụng bể 0,51 m , bố trí khí sục 24/24 giờ, đảm bảo nước xáo trộn đều, tránh tượng ấu trùng lắng đáy q trình ương ni, hàm lượng xy trì 4-6 mg/l - Chuẩn bị nước: Nước có độ mặn 22-24‰ xử lý qua ao lắng, lọc thơ, lọc tinh 1-5 µm - Chế độ thay nước: + Từ ngày 1-3 không cần thay nước bể ương nuôi + Từ ngày thứ 3-5 thay 50-60% thể tích nước bể ương ngày + Từ ngày thứ 5-8 thay 60-80% thể tích nước bể ương ngày chảy tràn Ngày thứ 9-10 tiến hành lọc ấu trùng chuyển qua bể ương nuôi ấu trùng xuống đáy - Mật độ ương ni + Giai đoạn trơi nổi: bố trí mật độ 2, ấu trùng/ml để đánh giá mật độ tốt + Giai đoạn chuyển giai đoạn xuống đáy ương với mật độ ấu trùng/ml + Giai đoạn giống ương với mật độ 1-2 con/cm2 đáy bể - Thức ăn sử dụng ương nuôi ấu trùng gồm loài tảo: Nannochloropsis oculata, Isochrysis galbana (khơ), Chaetoceros gracilis TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SƠNG CỬU LONG - SỐ - THÁNG 9/2016 33 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II III KẾT QUẢ 3.1 Nghiên cứu đặc điểm sinh học sinh sản ngao móng tay chúa 3.1.1 Một số đặc điểm hình thái ngao móng tay chúa Kết nghiên cứu đặc điểm hình thái cho thấy ngao móng tay chúa trưởng thành (thành thục sinh dục) có kích thước thơng thường chiều dài từ 12-15 cm, rộng khoảng 4-4,5 cm với chiều cao thân 1,7- 2,2 cm Cơ quan sinh dục ngao móng tay chúa nằm bao quanh tuyến tiêu hoá vùng đầu chân, sát với quan nội tạng, đầu chân phồng lên tuyến sinh dục phát triển Khi ngao móng tay chúa thị chân ngồi để di chuyển ta thấy tuyến sinh dục mắt thường Cơ quan sinh dục đực ngao móng tay chúa nhìn hình thái ngồi khơng có khác Nhưng thành thục sinh dục dựa vào hình thái màu sắc thấy đực có tuyến sinh dục màu trắng sữa, có tuyến sinh dục màu vàng nhạt, bề mặt thô hạt Giới tính đực/cái phân biệt thơng qua hình thái vỏ bên ngồi, đực có vân tăng trưởng trơn nhẵn, màu vỏ đồng nhất, ngược lại có vân tăng trưởng gồ ghề 3.1.2 Các giai đoạn phát triển tuyến sinh dục Việc phân chia giai đoạn phát triển tuyến sinh dục ngao móng tay chúa chủ yếu dựa vào việc quan sát tế bào sinh dục thông qua lát cắt mẫu mô tuyến sinh dục soi mẫu tươi tuyến sinh dục Qua trình quan sát lát cắt soi tươi mẫu mơ tuyến sinh dục ngao móng tay chúa thấy giai đoạn đầu phát triển tuyến sinh dục ngao móng tay chúa sau: Giai đoạn 0: giai đoạn gọi giai đoạn “không xác định” Cơ quan sinh dục chưa có diện nang follicule, tuyến sinh dục chưa rõ ràng chưa xác định giới tính giai đoạn Mơ mơ liên kết (Leydig) chiếm toàn tuyến sinh dục Giai đoạn I: giai đoạn gọi giai đoạn “tiền giao tử” Quá trình tạo giao tử bắt đầu với xuất nang follicule chen lẫn mô liên kết (Leydig) Tế bào sinh dục phát triển vách nang Giai đoạn II: nang follicule, nang bao tinh phình to chiếm gần hết khối nội tạng, mơ liên kết giảm nhanh, giao tử hình thành chưa chín Nỗn bào gia tăng kích thước đạt kích thước giai đoạn chín Ở giai đoạn này, tinh trùng xếp tỏa tròn với phần đuôi hướng trung tâm nang bao tinh Quan sát thấy tế bào trứng méo mó nang trứng, bắt đầu tách rời vách Giai đoạn III: giai đoạn gọi giai đoạn “sinh sản” Trong giai đoạn này, nang trứng nang tinh phồng lên, hầu hết chứa trứng tinh trùng, vách nang mỏng dần, tuyến sinh dục trạng thái chín Trứng sẵn sàng thụ tinh tinh trùng có khả hoạt động Giai đoạn chia làm giai đoạn phụ giai đoạn IIIA giai đoạn IIIB Trong giai đoạn IIIA, tuyến sinh dục căng Hình Hình thái ngồi ngao móng tay chúa 34 TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SƠNG CỬU LONG - SỐ - THÁNG 9/2016 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II phồng chiếm tồn khơng gian tuyến tiêu hóa mở rộng xuống phần chân Nang trứng nang tinh chứa phần lớn giao tử trưởng thành Khi giải phẫu tuyến sinh dục thấy có xuất giao tử, tế bào trứng hình đa giác chứa nang trứng tinh trùng chảy tạo thành vệt Trong giai đoạn IIIB, ngao móng tay chúa bắt đầu sinh sản Quan sát lát cắt mô tuyến sinh dục thấy dấu hiệu giải phóng tinh trùng tuyến sinh dục đực xuất khoảng trống nang trứng mật độ trứng chín nang giảm Qua kiểm tra tuyến sinh dục tháng phát có khoảng 30% cá thể có tuyến sinh dục giai đoạn IIIB khoảng 60% giai đoạn IIIA Quan sát thấy trứng tinh trùng xuất vách nang lát cắt mơ Tuy nhiên, cịn gần 10% số cá thể giai đoạn II Khi sang tháng khơng cịn cá thể thành thục sinh dục, có 50% số cá thể ngao móng tay chúa có tuyến sinh dục giai đoạn I 35% giai đoạn II Hình 2: Các giai đoạn phát triển tuyến sinh dục đực Thành thục sinh dục Qua biểu đồ bên ta thấy, tỷ lệ phần trăm số cá thể thành thục sinh dục giai đoạn III-IV giảm dần từ tháng đến tháng 5, tới tháng khơng cịn cá thể thành thục sinh dục Điều chứng tỏ ngao móng tay chúa sinh sản theo mùa vụ, chúng tập trung sinh sản vào khoảng cuối năm cũ đầu năm Ngun nhân điều kiện khí hậu vào tháng 12 đến tháng 1, năm sau thuận lợi cho ngao móng tay chúa sinh sản Hình Tỷ lệ ngao móng tay chúa thành thục sinh dục giai đoạn III-IV TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - SỐ - THÁNG 9/2016 35 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II 3.2 Thăm dị kích thích sinh sản cho ngao móng tay chúa Để tiến hành thăm dị kích thích ngao móng tay chúa sinh sản, chúng tơi theo dõi mô học tuyến sinh dục phát triển giai đoạn III để đánh giá khả thành thục sinh dục ngao móng tay chúa Đồng thời, chọn lọc ngao móng tay chúa bố mẹ khoẻ mạnh để kích thích sinh sản thực thí nghiệm sau 06 vận chuyển Độ mặn nước điều chỉnh 24‰ Chúng tơi tiến hành kích thích sinh sản vào tháng 10/2015 Bảng Thời gian (giờ) hiệu ứng với phương pháp kích thích sinh sản Thời gian hiệu ứng (giờ) Phương pháp kích thích 1,45-2 Serotonine μl/cá thể 3-4 Ngâm NH4OH 1% 2-4 Sốc hạ nhiệt 6-8 Sốc tăng nhiệt TT Q trình thăm dị khả sinh sản tiến hành qua đợt thu mẫu, thực vào lúc 19 30 phút ngày tiến hành tương ứng với phương pháp kích thích sinh sản với tỷ lệ đực tương đương với (1:1) 3.3 Nghiên cứu kỹ thuật ương ni ấu trùng lên giống 3.3.1 Kích cỡ tham gia sinh sản sức sinh sản Để đánh giá khả sinh sản ngao móng tay chúa, chúng tơi tiến hành xác định kích cỡ sinh sản cá thể có buồng trứng giai đoạn III thuộc nhóm kích cỡ 50-75g/con, 85-100g/con, 120-150g/con 36 Trong q trình thực đề tài, chúng tơi tiến hành kiểm tra giai đoạn phát triển tuyến sinh dục theo nhóm kích cỡ trên, cá thể thời gian kiểm tra từ tháng 10-12/2015 Từ kết Bảng xác định kích cỡ thành thục tham gia sinh sản ngao ngao móng tay chúa 120-150g/con Bảng Tỷ lệ thành thục nhóm theo kích cỡ Nhóm kích cỡ (g/con) Tổng số cá Số thành thể (con) thục (giai đoạn IV) Tỷ lệ thành thục (%) 50-75 113 - - 85-100 84 - - 120-150 35 24 68,6 Từ Bảng nhận thấy rằng, nhóm ngao móng tay chúa có kích cỡ 5075 g/con, 85-100 g/con, kích thích sinh sản nhóm khơng tham gia sinh sản Ở nhóm có kích cỡ 120-150 g/con có sức sinh sản tuyệt đối khoảng 5,59 triệu/cá thể Sức sinh sản tương đối 46,58 trứng/g khối lượng toàn thân Sức sinh sản tuyệt đối ngao móng tay chúa tương đối cao so với loài động vật thân mềm khác chúng có kích thước lớn, tỷ lệ % tuyến sinh dục lớn, kích thước trứng nhỏ Bảng Sức sinh sản nhóm theo kích cỡ Nhóm kích cỡ (g/con) Sức sinh sản tuyệt đối (triệu trứng/ cá thể) Sức sinh sản tương đối (nghìn trứng/ g-cả vỏ) 50-75 - - 85-100 - - 120-150 5,59± 0,65 46,58 ± TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SƠNG CỬU LONG - SỐ - THÁNG 9/2016 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II 3.3.2 Sức sinh sản thực tế Để xác định sức sinh sản thực tế ngao móng tay chúa, tiến hành cho sinh sản riêng số thể ngao móng tay chúa mẹ chín muồi sinh dục sau định lượng trứng cá thể Số lượng trứng định lượng ngao móng tay chúa có kích cỡ từ 145-165g/con cho kết Bảng Bảng Kết đợt cho ngao móng tay chúa sinh sản Kích cỡ Số sinh (g/con) sản (con) Trung bình (trứng/con cái/lần ) Tổng trứng thu (trứng) Số lượng ấu trùng chữ D khỏe mạnh (con) Tỷ lệ (%) 145-165 1.857.600 9.288.000 2.507.760 27% 145-165 1.758.700 14.069.600 3.517.400 25% 145-165 1.724.500 10.347.000 3.724.920 36% 145-165 1.635.900 8.179.500 2.781.030 34% 24 1.744.175 ±79.352 41.884.100 12.531.110 30,5% STT Tổng cộng/TB 3.3.3 Thụ tinh phân cắt Sau trứng tinh trùng phóng ra, trình thụ tinh xảy nước Lấy mẫu trứng sau phóng thích quan sát kính hiển vi thấy bề mặt trứng có khoảng 5-10 tinh trùng bám vào Trứng thụ tinh phân biệt nhờ màng thụ tinh bao bọc bên trứng Đường kính trứng 80-100 µm sau 30-40 phút xuất cực cầu, sau bắt đầu phân chia 2, 4, tế bào vịng 2-3 Hình Các giai đoạn phân chia trứng TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - SỐ - THÁNG 9/2016 37 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II Giai đoạn phôi nang xuất sau sau thụ tinh, phơi có dạng hình trịn bầu dục, có tiêm mao bao phủ tồn thân Các tiêm mao quanh thân hoạt động liên tục, nhờ giúp cho phơi vận động xoay trịn Kích thước phơi 100 µm Sau từ 6-7 có xuất phôi vị 3.3.4 Các giai đoạn phát triển ấu trùng Ấu trùng bánh xe (Trochophore), giai đoạn ấu trùng bắt đầu cho vòng đời ngao móng tay chúa Hình dạng ấu trùng có thay đổi so với giai đoạn phát triển phôi Các tiêm mao khơng cịn bao phủ tồn thân mà tập trung thành vành quanh miệng Cơ thể hình thoi, vận động xoay vòng xoắn ốc nhanh liên tục Nội tạng chưa hình thành, chưa có quan tiêu hóa nên ấu trùng dinh dưỡng nhờ nỗn hồng Kích thước đạt 110-130 µm Hình Giai đoạn ấu trùng bánh xe đến chân bị Ấu trùng chuyển từ hình thoi sang dạng chữ D có nắp vỏ vành tiêm mao nằm hai nắp vỏ, nằm bờ hình cong chữ D, chiều dài 6-8 µm Vành tiêm mao rung động liên tục tạo động lực giúp ấu trùng vận động thu lấy thức ăn Nội tạng bắt đầu hình thành có màu nâu nhạt Giai đoạn ấu trùng bắt đầu dinh dưỡng nhờ thức ăn từ mơi trường ngồi Kích thước ấu trùng khoảng 130-140 µm trùng ít, ấu trùng chuyển dần xuống bò đáy, chân hoạt động linh hoạt giúp ấu trùng bị lê đáy tìm nơi cư trú Vành tiêm mao điểm mắt thối hóa dần Ấu trùng đỉnh vỏ (Umbo), đỉnh vỏ hình thành vân sinh trưởng quan sát rõ kính hiển vi Đỉnh vỏ bắt đầu lồi lên dày lên Vành tiêm mao có khả thu vào, thò linh hoạt tạo lên khả lọc thức ăn vận động ấu trùng Giai đoạn đặc trưng giai đoạn nhỏ với hình thành số quan Ấu trùng chân bò (Spat): Sau 8-10 ngày từ thụ tinh, hoạt động bơi ấu 38 Hình Giai đoạn ấu trùng chân bị-giống TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SƠNG CỬU LONG - SỐ - THÁNG 9/2016 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II Giai đoạn đặc trưng hình thành chân đào, mang, màng áo, khép vỏ phát triển vòi xi phơng Kích thước ấu trùng tăng trưởng nhanh Phân chia giai đoạn thành giai đoạn nhỏ với đặc điểm sau Spat đầu kỳ: Từ hậu kỳ đỉnh vỏ chuyển sang hình thành chân thấy rõ vịi hút, nước Đa số nằm n đáy có số di động đáy, kích thước ấu trùng 260350 µm Ngao móng tay chúa giống (Juvenile) xuất sau 15 ngày với kích thước 850-950 µm Sau khoảng 15 ngày ấu trùng juvenile sống ổn định đáy Hình dạng giống hệt ngao móng tay chúa trưởng thành, tỷ lệ chiều cao chiều rộng xấp xỉ 0,5 Bảng Tỷ lệ sống ấu trùng ngao móng tay chúa giai đoạn trôi nổi-xuống đáy Đợt Ấu trùng thụ tinh (con) Ấu trùng chữ D Đỉnh vỏ Con Tỷ lệ sống (%) Con Tỷ lệ sống (%) 9.288.000 2.507.760 27% 107.834 4,3 14.069.600 3.517.400 25% 232.148 6,6 10.347.000 3.724.920 36% 234.670 6,3 8.179.500 2.781.030 34% 255.855 9,2 Qua bảng trên, nhận thấy đợt sinh sản tháng 10-12, năm 2015, tỷ lệ sống giai đoạn hình chữ D đến đỉnh vỏ thấp từ 4,3-9,2% Nguyên đợt sản xuất chưa chuẩn bị ương nuôi sinh khối tảo ngồi trời gặp khó khăn, khơng đảm bảo chất lượng số lượng Chúng tơi có bổ sung thêm tảo khơ men bánh mì làm thức ăn cho ấu trùng giai đoạn này, vấn đề gây ô nhiểm môi trường ương làm ảnh hưởng đến chất lượng ấu trùng 3.3.5 Kết tỉ lệ sống ngao móng tay chúa giai đoạn giống Bảng Tỷ lệ sống (%) ấu trùng ngao móng tay giai đoạn xuống đáy - giống (2mm) Số lượng (1.000 con) 100% bùn 70% bùn+30% cát mịn 100% cát mịn Đáy lưới (không cát, bùn) 1mm 2mm 1mm 2mm 1mm 2mm 1mm 2mm 232 0,7% (1,62) 0 3% (6,96) 0,1% (0,23) 4% (9,2) 0,9% (2,08) 234 0,8% (1,87) 0 5% (11,73) 0,3% (0,70) 6% (14) 1,1% (2,5) 255 0,6% (1,27) 0 4% (10,23) 0,2% (0,51) 4,5% (11) 0,8% (2,04) Tổng cộng 4,7 0 28,92 1,43 34,79 6,62 Trung bình 0,6% 0 4% 0,2% 4,8% 0,93% TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - SỐ - THÁNG 9/2016 39 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II Kết đợt thí nghiệm cho thấy tỷ lệ sống phụ thuộc vào đáy khác nhau, tỉ lệ sống giống ngao móng tay chúa đạt tỷ lệ sống đáy 100% bùn kích cỡ 1mm với tỉ lệ sống 0,6% (tổng số lượng giống có kích cỡ 1mm thu bốn nghiệm thức 68.500 con) chết dần ương ni đến kích cỡ 2mm Ở đáy có bố trí 70% bùn+30% cát mịn không thu giống Ở đáy có bố trí cát mịn lưới cho kết tỷ lệ sống kích cỡ 1mm 4% 4,8% Sau 7-10 ngày ương giai đoạn lên 2mm chúng có hình dáng ngao móng tay chúa trưởng tỷ lệ sống sống đạt 0,93% (tổng số lượng giống có kích cỡ 2mm thu bốn nghiệm thức 8.050 con) IV THẢO LUẬN Hiện nay, Việt Nam, nghiên cứu ngao móng tay chúa chưa thực nhiều nên nguồn tài liệu tham khảo chưa phong phú Dựa vào khóa phân loại Cosel, R.Von (1990) Habe, T.,1964, Hylleberg Kilburn, 2003 Ngao móng tay chúa bên vỏ vân tăng trưởng phát triển song song từ đỉnh vỏ đến mép vỏ Vỏ mềm mỏng, lề yếu ớt, với cưa Bản lề vỏ rõ rệt điểm nối lưng mép vỏ Tỷ lệ chiều dài lề vỏ đến mép vỏ chân đào lề vỏ đến mép vỏ ống siphon thường 1/3 Ngao móng tay chúa trưởng thành trung bình có chiều dài từ 1315cm, rộng khoảng 4-4,5 cm với độ dày thân khoảng 1,7-2,2 cm trọng lượng khoảng 140-160g/con Về hình thái cấu tạo bên ngồi quan sát thấy ngao móng tay chúa có thể dẹp phần thân đối xứng Phần dẹt giúp chúng lẩn trốn xuống bùn cát dễ dàng Chân chúng hình lưỡi rìu, di chuyển chân thị ngồi 40 Phía ngồi vỏ ngao móng tay chúa có lớp bì màu vàng nâu, từ đỉnh vỏ xuống có nhiều vành màu nâu đậm, màu sắc vỏ thẫm hay nhạt tuỳ thuộc vào nhiều yếu tố mơi trường tác động Ngao móng tay chúa sống tầng đáy bùn cát nơi có thủy triều lên xuống tìm thấy vùng nước nơng Ngao móng tay chúa phân bố tự nhiên dọc theo vùng bãi triều nơng có độ sâu 1-6m, có đáy bùn mịn bùn cát giàu chất hữu cơ, phân bố từ Bà Rịa – Vũng Tàu đến Cà Mau Ngao móng tay chúa có tập tính sống hang di chuyển theo chiều dọc lớp bề mặt phía nhờ vào co rút chân Khi di chuyển, chân đào bùn cát, sau phình to móc vào đất kéo phần lại thể Chỉ cần vài lần co chúng vùi thể sâu xuống bùn cát Độ sâu đường kính hang phụ thuộc vào kích cỡ ngao móng tay chúa, chất mùa Độ sâu hang thường 30-50cm Qua bảng 1, việc kích thích sinh sản phương pháp khác nhau, số kết ghi lại Các đợt thí nghiệm phương pháp, kết kiểm tra cho thấy có phóng trứng tinh tử diễn Thời gian hiệu ứng phương pháp (Serotonine sốc hạ nhiệt) phương pháp kích thích ngao móng tay chúa sinh sản nhanh với khoảng thời gian 45 phút đến Còn phương pháp ngâm NH4OH 1% 3-4 sốc tăng nhiệt 6-8 Tỷ lệ cá thể tham gia sinh sản phụ thuộc vào nhiều yếu tố môi trường, mùa vụ, mức độ thành thục tuyến sinh dục, phương pháp kích thích số lần lặp lại chu kỳ kích thích Kết (Bảng 1) cho thấy dù số kích cỡ đem kích thích cá thể tham gia sinh sản nghiệm thức TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SƠNG CỬU LONG - SỐ - THÁNG 9/2016 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II khác Với phương pháp kích thích khác cho kết thời hiệu ứng tham gia sinh sản khác Điều chứng tỏ nhuyễn thể nói chung ngao móng tay chúa nói riêng, q trình thành thục tham gia sinh sản phụ thuộc vào mùa vụ kích cỡ thành thục Qua phương pháp kích thích sinh sản, xét hiệu kinh tế, phương pháp sốc hạ nhiệt nên ưu tiên chọn làm phương pháp kích thích chủ yếu Sức sinh sản thực tế xác định số lượng trứng cá thể đợt Sự thành thục noãn bào trứng ngao móng tay chúa với nhiều lồi hai mảnh vỏ khác khơng đồng Trên buồng trứng ln có nỗn bào trứng nhiều giai đoạn phát triển Trong mùa vụ sinh sản, số lượng nỗn bào thành thục ln chiếm tỷ lệ lớn Bên cạnh nỗn bào non, nhiên phần lớn giai đoạn chuẩn bị thành thục Do mà mùa sinh sản ngao móng tay chúa thường sinh sản thành nhiều đợt Tùy theo mức độ thành thục, số lượng nỗn bào chín buồng trứng mà số trứng phóng thích khác Từ bảng cho thấy sức sinh sản thực tế nhóm ngao móng tay chúa dao động từ 1,6-1,8 triệu trứng/con/lần sinh sản (TB 1,74 triệu trứng/con/lần) Sự khác kết nghiên cứu chất lượng thành thục bố mẹ hiệu ứng kích thích sinh sản khối lượng bố mẹ Kích thước khối lượng ngao móng tay chúa bố mẹ, mức độ thành thục, chín muồi tuyến sinh dục yếu tố định đến sức sinh sản thực tế Ngoài ra, kích thích sinh sản yếu tố quan trọng, cá thể mẹ phản ứng với kích thích sinh sản nỗn bào chín muồi khơng thể hết mà chúng cịn sót lại sinh sản vào đợt sau bị thối hóa Theo dõi số đợt sinh sản ngao móng tay chúa, thấy số lượng trứng phát triển đến giai đoạn ấu trùng chữ D khỏe mạnh đạt 25-36% tổng lượng trứng phóng thích (trung bình đạt 30,5%) Tùy theo chất lượng ngao móng tay chúa bố mẹ, điều kiện môi trường, mật độ ương, ấp mà tỷ lệ ấu trùng chữ D khỏe mạnh khác Trong điều kiện phịng thí nghiệm, giai đoạn ngao móng tay chúa xuống đáy đến đạt kích thước 1mm có tỉ lệ sống cao với chất đáy cát lưới với bề mặt mềm, mịn, phẳng không gây ô nhiễm môi trường nước Bảng cho thấy ngao móng tay chúa sống khơng sống nơi có chất đáy nhiều bùn, điều kiện bố trí ương chưa chuẩn làm đáy bùn bị nhiễm mơi trường đáy làm cho ngao móng tay chúa chết Ngao móng tay chúa thường vùi bùn oxy, thức ăn cung cấp cho ngao móng tay chúa thiếu hụt dẫn đến giảm tỉ lệ sống Ngồi ra, ngao móng tay chúa có chế hấp thu thức ăn thụ động điều kiểm chứng cách tiến hành kiểm tra dày thấy tảo mà có hạt bùn, nguyên làm cho ngao móng tay chúa giống khơng ăn tảo tươi chúng nằm đáy nhiều bùn Ở giai đoạn từ đỉnh vỏ đến giống sử dụng hỗn hợp tảo làm thức ăn tươi sống cho ấu trùng Kết đợt thử nghiệm ương ngao móng tay chúa cho thấy tỷ lệ sống từ ấu trùng trôi đến giai đoạn xuống đáy chưa ổn định Qua đợt sản xuất, bước hồn thiện quy trình sản xuất giống nhân tạo, đề tài thử nghiệm đợt sản xuất với tỷ lệ sống từ giai đoạn xuống đáy đến giai đoạn giống 1-2 mm sau 15-17 ngày ương ≤1% Tuy nhiên, kết bước TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SƠNG CỬU LONG - SỐ - THÁNG 9/2016 41 VIỆN NGHIÊN CỨU NI TRỒNG THỦY SẢN II đầu thăm dị sinh sản ngao móng tay chúa – đối tượng hồn tồn nên cần có thêm nhiều nghiên cứu hồn thiện thêm nhằm nâng cao tỷ lên giống V KẾT LUẬN Ngao móng tay chúa lồi phân tính rõ rệt Con đực khó phân biệt phân biệt mắt thường mùa sinh sản thành thục sinh dục Mùa vụ sinh sản ngao móng tay chúa đỉnh cao tháng 11 đến tháng 02 năm sau Kích thích sinh sản cho ngao móng tay chúa phương pháp sốc hạ nhiệt phương 42 pháp phù hợp với thời gian hiệu ứng 60 phút Ở nhóm ngao móng tay chúa có kích cỡ 120-150 g/con có tỷ lệ thành thục: 68,6%, tỷ lệ tham gia sinh sản 100% Có sức sinh sản tuyệt đối trung bình 5,59 triệu/các thể Khi ngao móng tay chúa sinh sản trứng trình biến thái từ trứng thụ tinh đến giống từ 9-15 ngày Ấu trùng trải qua giai đoạn phát triển từ trứng thụ tinh đến phôi vị, ấu trùng bánh xe, ấu trùng chữ D, ấu trùng đỉnh vỏ, ấu trùng chân bò giai đoạn giống Giai đoạn sống đáy đạt kích cỡ 1mm 4-4,8% kích cỡ 2mm 0,93% TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SƠNG CỬU LONG - SỐ - THÁNG 9/2016 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Dương Văn Hiệp, 2005 Nghiên cứu số đặc điểm sinh học sinh sản ngao dầu Meretrix meretrix (Lineus, 1758) vùng biển Cát Hải– Hải Phịng Luận văn thạc sĩ nơng nghiệp Hà Đức Thắng, 2004 Nghiên cứu xây dựng quy trình cơng nghệ sản xuất giống thử nghiệm mơ hình ni tu hài (Lutraliaphilippinarum) thương phẩm Đề tài nghiên cứu khoa học Lê Đức Minh,2000 Nghiên cứu đặc điểm sinh học sinh sản bào ngư (Haiotis) vùng biển Nha Trang, Khánh Hòa Luận án tiến sĩ khoa học sinh học 127 trang Lê Trung Kỳ ctv., 2005 Thức ăn thích hợp cho sị huyết sản xuất giống Hội thảo động vật thân mềm toàn quốc lần thứ 5-6 /9/2005 Nhà Xuất Nông nghiệp Tp Hồ Chí Minh 263-269 Nguyễn Chính, 1999 Nghiên cứu kỹ thuật sản xuất giống nhân tạo nuôi cấy trai ngọc loài Pinctadamaxima, Jameson,1901 Đề tài nghiên cứu khoa học Nguyễn Thị Xuân Thu, 2005 Kỹ thuật sản xuất giống ni động vật thân mềm Giáo trình cao học.193 trang Trang 28 Tạ Văn Phương Trương Quốc Phú, 2003 Thử nghiệm ni sị huyết ao nước tĩnh Hội thảo động vật thân mềm toàn quốc lần thứ 11-12/9/2003 Nhà xuất Nông nghiệp Tp Hồ Chí Minh Trang 131-138 Trần Hồng Phúc, 2007 Tiềm năng-thực trạng giải pháp ni nghêu, sị huyết xuất Trà Vinh Báo cáo khoa học hội thảo động vật thân mềm toàn quốc lần thứ Tài liệu tiếng Anh Baroon, L.E., Real, N F., Ciocco, M.E.R , 2004 Morphometry, growth and reproduction of an Atlantic population of the razor clam Ensismacha (Molina, 1782) Sci Mar 68 (2) p 211-217 Quayle, D B., Newkirk, G F , 1989 Farming Bivalve Molluscs: Methods for Study and Development Advances in World Aquaculture Series World Aquaculture Society, Baton Rouge, LA 294p Yan, H W., 1991 Studies on Reproductive Physiology of Sinonovacula constricta and Cyclinasinensis Training manual on breeding and culture of scallop and seacucumber in China.Yellow Sea Fisheries Research Institute in Qingdao Hylleberg , J., Kilburn, R N., 2003 Marine molluscs of Vietnam - Polyplacophora, Gastropoda, Cephalopoda, Bivalvia, Scaphopoda Phuket Marine Biological Center Special Publication 300p: p.196 Nguyen Duc Minh, Saran Petpiroon, Shettapong Meksumpun, Suriyan Tunkijjanukij and Padermsak Jarayabhand 2009 Early juvenile rearing of the donkey’s ear abalone (Haliotis asinina Linnaeus, 1758) in Sichang Island, Thailand Journal of Chulalongkorn University p.109 – 123 Pathansali, D., 1963 On the effect of sanility changes on the activity of the cockle Anadara granosa L Malaysia Agri J 44: 18-25 TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SƠNG CỬU LONG - SỐ - THÁNG 9/2016 43 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II STUDY ON REPRODUCTIVE BIOLOGY AND ARTIFICIAL BREEDING IN RAZOR CLAM (Cultellus maximus GMELIN, 1791) Nguyen Duc Minh1*, Do Thi Phuong1 ABSTRACT Study on artificial breeding in Razor clams (Cultellus maximus, Gmelin 1791) will help to provide artificial seed for grow-out as well as to diversify culture species This paper presents the results of the latest research on the characteristics of reproductive biology; collection, acclimation and assessment of distribution of razor clam; as well as on the methods for induced spawning and rearing from larval stage to juveniles The razor clam is a bivalve mollusc species, with adult size from 12-15 cm This species has been adapted to tropical conditions, with highest percentage of sexual maturity in January The sample was collected in Cai Nuoc and Dat Mui, Ca Mau province Temperature shock was shown to be the most effective method for inducing spawning, that gave the highest survival of clam larvae One female razor clam can spawn 1,744,175 larvae in average Fertilized egg measured 80 µm in diameter Razor clam larval stages included trochophore, straight-hinge, creeping and spat stages A survival rate of 0.93 % was obtained during rearing from larvae to juveniles Keywords: Razor clam, artificial brreding, reproductive biology Người phản biện: ThS Nguyễn Đinh Hùng Ngày nhận bài: 05/8/2016 Ngày thông qua phản biện: 11/8/2016 Ngày duyệt đăng: 05/9/2016 Department of Experimental Biology, Research Institute for Aquaculture No.2 *Email: minhria2@yahoo.com 44 TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SƠNG CỬU LONG - SỐ - THÁNG 9/2016 ... 33 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II III KẾT QUẢ 3.1 Nghiên cứu đặc điểm sinh học sinh sản ngao móng tay chúa 3.1.1 Một số đặc điểm hình thái ngao móng tay chúa Kết nghiên cứu đặc điểm hình... sinh sản cho ngao móng tay chúa Để tiến hành thăm dị kích thích ngao móng tay chúa sinh sản, theo dõi mô học tuyến sinh dục phát triển giai đoạn III để đánh giá khả thành thục sinh dục ngao móng. ..VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II 2.2 Nghiên cứu đặc điểm sinh học sinh sản ngao móng tay chúa Đặc điểm thành thục sinh dục đánh giá theo: Tính tỷ lệ thành