Nghiên cứu nhằm mục tiêu xác định các biện pháp kỹ thuật kích thích sinh sản ngao móng tay chúa (Cultellus maximus) thích hợp nhằm bảo vệ nguồn lợi tự nhiên, chủ động nguồn giống và đa dạng đối tượng nuôi.
VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II KỸ THUẬT KÍCH THÍCH SINH SẢN NGAO MĨNG TAY CHÚA (Cultellus maximus GMELIN, 1791) Nguyễn Quốc Thể1*, Trần Ngọc Hiểu1 TÓM TẮT Nghiên cứu nhằm mục tiêu xác định biện pháp kỹ thuật kích thích sinh sản ngao móng tay chúa (Cultellus maximus) thích hợp nhằm bảo vệ nguồn lợi tự nhiên, chủ động nguồn giống đa dạng đối tượng nuôi Nghiên cứu thực với biện pháp kỹ thuật kích thích sinh sản bao gồm: Kích thích sinh sản tăng nhiệt độ, kích thích sinh sản cách tăng nhiệt độ kết hợp với dịng chảy, kích thích sinh sản tăng nhiệt độ NH4OH kết hợp với dịng chảy, kích thích sinh sản cách tiêm Serotonin, kích thích sinh sản phương pháp hạ nhiệt độ xuống 180C thời gian 45 phút kết hợp với dòng chảy 2m3/30 phút Kết cho thấy: kích thích sinh sản cách hạ nhiệt độ đến 180C 45 phút kết hợp tạo dịng chảy có tiêu sinh sản tối ưu với tỷ lệ sinh sản (38,33 ± 2,89%), tỷ lệ thụ tinh (85,81 ± 2,82%), tỷ lệ nở (81,75 ± 4,60%) ứng dụng để kích thích sinh sản cho ngao móng tay chúa (Cultellus maximus) Từ khóa: Kích thích sinh sản, ngao móng tay chúa I ĐẶT VẤN ĐỀ Việt Nam nước có sản lượng ni động vật thân mềm lớn, đến năm 2015, diện tích nuôi động vật thân mềm 34.730 ha, suất 7,7 tấn/ha, đạt sản lượng 269.161 tấn, đạt giá trị xuất 350 triệu USD tạo việc làm cho 15.000 người Động vật thân mềm xem đối tượng ưu chiến lược phát triển ni biển nước ta nay, năm gần nghiên cứu động vật thân mềm nhiều tác giả quan tâm Trong đó, nghiên cứu sản xuất giống nhân tạo phương pháp ương nuôi ấu trùng đặc biệt trọng (Nguyễn Quang Hùng ctv., 2009) Nghiên cứu sản xuất giống đối tượng động vật thân mềm có giá trị kinh tế điều kiện cần thiết để bổ sung thêm nguồn cung cấp giống cho người ni nguồn giống tự nhiên bị suy giảm khai thác (Nguyễn Thị Xuân Thu, 2005) Trên giới Việt Nam, nghiên cứu sản xuất giống nhân tạo đối tượng động vật thân mềm nhiều tác giả quan tâm đến xây dựng nhiều quy trình sản xuất giống cho đối tượng động vật thân mềm có giá trị kinh tế cao Trong nghiên cứu sản xuất giống nhân tạo, việc xác định phương pháp kích thích đẻ trứng, phóng tinh, ương ni phương pháp quản lý bể ương ấu trùng vấn đề mấu chốt (Ngô Anh Tuấn, 2012) Một số cơng trình nghiên cứu chun sâu đặc điểm sinh học sinh sản đối tượng động vật thân mềm công bố như: sị huyết (Hồng Bích Đào, 2001; 2003), tu hài (Lutraria philippinarum) (Đào Minh Đông, 2004; Hà Đức Thắng, 2004b), ngao dầu (Meretrix meretrix) (Dương Văn Hiệp, 2005), bào ngư (Haliotis spp.) (Lê Đức Minh, 2000) vẹm xanh (Perna viridis) (Hà Đức Thắng, 2004a), sò điệp quạt (Chlamys nobilis) (Nguyễn Thị Xuân Thu, 1998) sò Phân viện Nghiên cứu Thủy sản Nam sông Hậu, Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản II *Email: nguyenquocthecm@gmail.com TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - SỐ 10 - THÁNG 12/2017 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II điệp seo (Comptopallium radul) (Ngô Anh Tuấn, 2001) Tuy nhiên, chưa có cơng trình nghiên cứu đặc điểm sinh học sinh sản ngao móng tay chúa biện pháp kích thích sinh sản ngao móng tay chúa cơng bố Việt Nam Chính vậy, nghiên cứu tiến hành nhằm xác định biện pháp kỹ thuật kích thích sinh sản ngao móng tay chúa (Cultellus maximus) Đây nội dung đề tài: “Nghiên cứu đặc điểm sinh học thử nghiệm cho sinh sản giống ngao móng tay chúa (Sinonovacula sp.) tỉnh Cà Mau” II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 2.1 Vật liệu Ngao móng tay chúa, tên khoa học Cultellus maximus (Gmelin, 1791): ngao móng tay chúa có tuyến sinh dục phát triển tốt, khỏe mạnh không xây xát, vỏ nguyên vẹn, màu sắc tự nhiên, chiều dài vỏ từ 70mm trở lên, trọng lượng – 10con/kg, cắt mô tuyến sinh dục phân tích tiêu để xác định tuyến sinh dục giai đoạn III, IV Dung dịch kích thích sinh sản: NH4OH, Serotonin Nước biển, bể thí nghiệm: Nước biển dùng thí nghiệm có độ mặn 30‰ xử lý chlorine 30ppm, sục khí 12 giờ, sau để lắng tự nhiên đến hết dư lượng chlorine, tiến hành xử lý kim loại nặng EDTA, liều lượng 10ppm, để 12 giờ, nước cấp vào bể thí nghiệm qua hệ thống lọc ống lọc tinh, kích thước – – µm Bể composite được gắn sục khí đáy và bề mặt Vợt, khay nhựa, máy bơm, buồng đếm nguyên sinh động vật Fuchs – Rosenthal, kính hiển vi 2.2 Phương pháp nghiên cứu Ni dưỡng ngao móng tay chúa bố mẹ Ngao móng tay chúa vận chuyển trại sản xuất phương pháp hở có sục khí, sau chúng vệ sinh lưu giữ bể composite chứa nước biển có độ mặn 25 – 30‰, nhiệt độ 28 – 30oC, pH 7,5 – 8,5 Bể ni dưỡng sục khí 24/24; thay nước hàng ngày 100%; cung cấp đầy đủ thức ăn tảo đơn bào: Nannochloropsis oculata, Chaetoceros calcitrans, Isochrysis galbana Lưu giữ – ngày để giúp ngao móng tay chúa phục hồi sức sau q trình vận chuyển Phân biệt ngao móng tay chúa đực Ngao móng tay chúa lồi phân tính, phân biệt đực - ngao móng tay chúa thành thục sinh dục, có kích thước thông thường chiều dài từ 12cm trở lên, chiều cao khoảng – 4,5cm với độ dày thân 1,7 – 2,2cm, trọng lượng thể từ 120g trở lên Dựa vào màu sắc tuyến sinh dục để phân biệt đực - cái: đực có tuyến sinh dục màu trắng sữa, có tuyến sinh dục màu vàng nhạt với bề mặt thô hạt Cơ quan sinh dục ngao móng tay chúa nằm bao quanh tuyến tiêu hoá vùng đầu chân, sát với quan nội tạng, đầu chân phồng lên tuyến sinh dục phát triển Khi ngao móng tay chúa thị chân ngồi để di chuyển thấy tuyến sinh dục mắt thường Chỉ tiêu môi trường nước bố trí cho thí nghiệm kích thích sinh sản ngao móng tay chúa: Nhiệt độ: 28 – 300C; pH: 7,5 – 8,5; độ mặn 30‰ 2.2.1 Kích thích sinh sản tăng nhiệt độ Ngao móng tay chúa đặt khay nhựa phơi nắng nhẹ với thời gian khác (30; 60; 90 phút), sau cho vào bóng mát (nhiệt độ thường) 30 phút trước cho vào bể để kích thích phóng tinh đẻ trứng - Nghiệm thức 1: Đối chứng (để nhiệt độ bình thường, khơng phơi) - Nghiệm thức 2: Thời gian phơi nắng 30 phút - Nghiệm thức 3: Thời gian phơi nắng 60 phút - Nghiệm thức 4: Thời gian phơi nắng 90 phút Mỗi nghiệm thức lặp lại lần Mỗi lần lặp 10 đực 10 TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SƠNG CỬU LONG - SỐ 10 - THÁNG 12/2017 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II 2.2.2 Kích thích sinh sản tăng nhiệt độ kết hợp với dòng chảy Sau có kết từ thí nghiệm kích thích sinh sản tăng nhiệt độ, nhiệt độ thích hợp xác định Nhiệt độ thí nghiệm với tốc độ dòng chảy khác nhau: - Nghiệm thức 1: Đối chứng (khơng có dịng chảy) - Nghiệm thức 2: Dòng chảy 2m3/60 phút - Nghiệm thức 3: Dòng chảy 2m3/30 phút - Nghiệm thức 4: Dòng chảy 2m3/20 phút Mỗi nghiệm thức lặp lại lần Mỗi lần lặp 10 đực 10 Dùng máy bơm có cơng suất nhỏ (bơm 10m3/60phút) điều chỉnh cho phù hợp với nghiệm thức 2.2.3 Kích thích sinh sản tăng nhiệt độ NH4OH kết hợp với dòng chảy Sau có kết từ thí nghiệm kích thích sinh sản tăng nhiệt độ kết hợp với dịng chảy, dịng chảy thích hợp xác định Dịng chảy thí nghiệm với nồng độ NH4OH khác nhau: − Nghiệm thức 1: Phơi nắng 60 phút + dòng chảy 2m3/30 phút (đối chứng) − Nghiệm thức 2: Phơi nắng 60 phút + NH4OH 1%+ dòng chảy 2m3/30 phút − Nghiệm thức 3: Phơi nắng 60 phút + NH4OH 2%+ dòng chảy 2m3/30 phút − Nghiệm thức 4: Phơi nắng 60 phút + NH4OH 3%+ dòng chảy 2m3/30 phút Thí nghiệm lặp lại lần, lần 10 đực 10 2.2.4 Kích thích sinh sản cách tiêm Serotonin Kích thích tiêm Serotonin 2μl/cá thể, tiêm vào phần sinh dục ngao móng tay chúa điều kiện nhiệt độ thường, sau kiểm tra phân tích kết (Theo Nguyễn Đức Minh ctv., 2015) Thí nghiệm lặp lại lần, lần 10 đực 10 2.2.5 Kích thích sinh sản phương pháp hạ nhiệt độ xuống 180C thời gian 45 phút kết hợp với dịng chảy 2m3/30 phút Cho ngao móng tay chúa vào khay nhựa (có lỗ thống) ngâm vào thau (bể) chuẩn bị nước có nhiệt độ 180C, sục khí liên tục sau thời gian 45 phút, vớt ngao móng tay chúa qua bể đẻ, cấp nước với lưu lượng 2m3/30 phút Mỗi nghiệm thức lặp lại lần, lần lặp 10 đực 10 Các số theo dõi thí nghiệm kích thích sinh sản Tỷ lệ sinh sản Tỷ lệ thụ tinh Tỷ lệ nở • Tỷ lệ sinh sản = Số cá thể ngao móng tay chúa đẻ trứng Tổng số ngao móng tay chúa bố trí thí nghiệm • Tỷ lệ thụ tinh xác định trứng đạt đến giai đoạn phôi vị: Trứng đẻ thu mẫu (mỗi mẫu 30 trứng) ấp mơi trường thích hợp, trứng đến giai đoạn phôi vị đếm tổng số trứng thụ tinh chia cho tổng số trứng mẫu thu • Tỷ lệ nở xác định trứng thụ tinh nở thành ấu trùng: Trứng đẻ thu mẫu (mỗi mẫu 30 trứng) ấp môi trường thích hợp, trứng nở thành ấu trùng đếm tổng số ấu trùng nở chia cho tổng số trứng mẫu thu 2.3 Phương pháp xử lý số liệu Số liệu xử lý phân tích phần mềm Excel 2003 SPSS 16.0, dùng trắc nghiệm ANOVA yếu tố để so sánh tỷ lệ sinh sản, tỷ lệ thụ tinh, tỷ lệ nở ngao móng tay chúa nghiệm thức với mức ý nghĩa P = 95% Trắc nghiệm LSD sử dụng có khác tỷ lệ sinh sản, tỷ lệ thụ tinh, tỷ lệ nở cặp nghiệm thức TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SƠNG CỬU LONG - SỐ 10 - THÁNG 12/2017 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II III KẾT QUẢ 3.1 Kích thích sinh sản cách tăng nhiệt độ Với phương pháp kích thích sinh sản biện pháp tăng nhiệt độ, qua phân tích ANOVA nhân tố nhận thấy tỷ lệ sinh sản tỷ lệ thụ tinh nghiệm thức NT2, NT3, NT4 khơng có khác có ý nghĩa mặt thống kê; tỷ lệ sinh sản tỷ lệ thụ tinh đạt thấp nghiệm thức NT1 (lần lượt 28,33% 46,93%) khác biệt có ý nghĩa so với nghiệm thức lại (p