Cá bông lau không sinh sản tự nhiên trong điều kiện nuôi nhốt mà cần phải có sự tác dụng của kích dục tố. Đối với cá cái dùng phương pháp tiêm nhiều liều, bao gồm 4 liều dẫn là 500 UI HCG/kg hoặc não thùy tươi của cá chép (3 kg cá cho não dùng cho 8 kg cá nhận não), một liều sơ bộ 1.500 UIHCG/kg và một liều quyết định 6.000 UI HCG/kg.
VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN SO SÁNH HIỆU QUẢ SỬ DỤNG KÍCH THÍCH TỐ KHÁC NHAU KÍCH THÍCH SINH SẢN CÁ BƠNG LAU (Pangasius krempfi) TRONG ĐIỀU KIỆN NUÔI NHỐT Huỳnh Hữu Ngãi1, Trịnh Quốc Trọng1, Thi Thanh Vinh1, Đặng Văn Trường1, Nguyễn Thanh Nhân1, Hà Thị Ngọc Nga1, Lê Trung Đỉnh1, Lê Hiền Khả Tri1 Nguyễn Văn Hảo2 TĨM TẮT Cá bơng lau khơng sinh sản tự nhiên điều kiện nuôi nhốt mà cần phải có tác dụng kích dục tố Đối với cá dùng phương pháp tiêm nhiều liều, bao gồm liều dẫn 500 UI HCG/kg não thùy tươi cá chép (3 kg cá cho não dùng cho kg cá nhận não), liều sơ 1.500 UIHCG/kg liều định 6.000 UI HCG/kg Đối với cá đực dùng liều 2.000 UI HCG/kg, tiêm thời điểm với liều định cá Thời gian hiệu ứng kích thích tố dao động từ 30 đến 14 30 phút, tỷ lệ thụ tinh dao động từ 7,1 – 73,4% (trung bình 39,9 ± 24,9%) Cá nở sau thời gian từ 24 đến 36 nhiệt độ nước từ 27 – 29 0C, tỷ lệ nở dao động từ 57 – 91,5% (trung bình 66,4 ± 14,5%) Từ khóa: cá bơng lau, sinh sản nhân tạo, kích dục tố I GIỚI THIỆU Kích thích sinh sản nhân tạo đóng vai trị quan trọng sản xuất giống lồi cá ni Trong điều kiện ni nhốt, phát triển tuyến sinh dục tái thành thục thường xảy cách bình thường Nhưng cá khơng tự sinh sản điều kiện ni q trình sinh sản bị ức chế yếu tố môi trường ngăn cản chín rụng trứng (Nguyễn Tường Anh, 1997) Việc kích thích sinh sản dựa vào nguyên lý chung sinh học trình sinh sản tự nhiên cá Trong điều kiện ni nhốt, yếu tố sinh thái để cá sinh sản tự nhiên Việc tiêm chất kích dục tố nhằm thúc đẩy hoạt động nội tiết tuyến n, kích thích q trình chín, rụng trứng tạo tinh Cá lau không đẻ tự nhiên điều kiện nuôi vỗ nhân tạo Phạm Văn Khánh (1996) báo cáo HCG (Human Chorionic Gonadotropin, kích dục tố màng đệm) thay cho não thùy sinh sản nhân tạo cá tra, dùng phối hợp với não thùy liều tiêm định Nguyễn Tuần (2000) cho sử dụng HCG đơn kết hợp với não thùy thể để kích thích cho cá basa sinh sản cho kết Cá bơng lau thuộc giống Pangasius có đặc tính tương tự cá tra basa, có sở để tiến hành thử nghiệm sinh sản nhân tạo sử dụng HCG não thùy (đơn kết hợp) nhằm xác định thời gian hiệu ứng hai loại kích dục tố cá lau theo dõi tiêu sinh sản trình phát triển phôi II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu Đàn cá lau bố mẹ sử dụng cho nghiên cứu 224 con, 114 có nguồn gốc từ Trung tâm Quốc gia Giống Thủy sản Nước Nam Bộ, Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản E-mail: ngaicaibe@yahoo.com.vn Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - - THAÙNG 11/2013 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN tự nhiên, khối lượng từ đến kg 110 có nguồn gốc nhân tạo (thế hệ F1) sinh sản năm 2008, 2009 Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản 2, khối lượng từ 2,5 đến kg, đền tuổi Cá nuôi vỗ bè mật độ kg/m3 cho cá kg/m3 cho cá đực Bè cá đặt cụm bè Trại sản xuất cá giống Hồng Mỹ, thị xã Hồng Ngự, tỉnh Đồng Tháp Các cơng việc ni vỗ, kiểm tra thành thục, kích thích sinh sản, vuốt trứng thụ tinh thực bè nuôi Các công việc ấp trứng dưỡng cá bột thực nhà sản xuất giống cá thuộc Trung Tâm Quốc Gia Giống Thủy Sản Nước Ngọt Nam Bộ (thuộc Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản 2), xã An Thái Trung, huyện Cái Bè, tỉnh Tiền Giang Thời gian thực thí nghiệm từ ngày 01 tháng 01 năm 2008 đến 31 tháng 12 năm 2012 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Chọn cá bố mẹ Đối với cá đực, chọn cá thể khỏe mạnh, vuốt nhẹ mặt bụng thấy có tinh màu trắng sữa chảy Đối với cá cái, chọn cá thể khỏe mạnh, bụng to, mềm Dùng que thăm trứng lấy mẫu (khoảng 100 trứng) từ buồng trứng Chọn cá có trứng màu vàng nhạt trắng, hạt trứng căng tròn, đồng tách rời Chọn cá có đường kính trứng đạt khoảng 1,3 mm cho sinh sản độ đồng đạt từ 70 – 80 % cố định không cho đường kính trứng thay đổi, số lượng mẫu trứng thu tối thiểu 30 tế bào trứng Đo đường kính trứng kính hiểm vi soi có thước đo có sẵn kính Điều chỉnh thước đo độ sáng tối kính cho phù hợp, cho mẫu trứng nước vào đĩa petri đặt lên kính hiển vi, quan sát trứng với độ phóng đại 2,5 điều chỉnh trứng cần đo đến vị trí thước đo vạch số Chọn trứng tròn đặn, điều chỉnh cho thước đo đặt trung tâm trứng, đếm số vạch thước đo ghi nhận kết Kế tiếp dùng vật cứng nhỏ, dài, nhọn di chuyền tế bào trứng khác đến vị trí cần đo Kích thước đường kính trứng tính theo cơng thức sau: đo độ phóng đại 2,5 mm = 24 vạch đường kính trứng (số vạch x mm)/24 Dung dịch cố định để đo đường kính trứng pha chế theo thứ tự cồn 60o 100 ml, HNO3 15 ml, acid acetic ml, HgCl2 20 ml, nước cất 80 ml 2.2.3 Kích thích sinh sản nhân tạo Trong tự nhiên, cá bơng lau có tập tính di cư sinh sản thời gian dài, sinh sản nhân tạo cá cần sử dụng phương pháp tiêm nhiều liều để kích thích cho tế bào trứng phát triển đồng đều, đạt đến giai đoạn chín rụng Đối với cá cái, chúng tơi bố trí hai thí nghiệm việc sử dụng hai loại kích thích tố khác Thí nghiệm dùng đơn loại kích thích tố HCG Thí nghiệm dùng não thùy thể cá chép liều 2.2.2 Phương pháp đo kích thước đường kính trứng dẫn, đến liều sơ định dùng HCG Trứng thu que thăm trứng giữ liều dẫn cuối với liều sơ 24 khô cho vào dung dịch đo đường kính trứng để (Bảng 1) Thời gian liều dẫn với Liều sơ cách liều định TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - - THÁNG 11/2013 VIỆN NGHIÊN CỨU NI TRỒNG THỦY SẢN Bảng Loại liều lượng kích thích tố sử dụng cho cá bơng lau Loại kích dục tố Số cá (con) Thí nghiệm 2: HCG (UI/kg) Thí nghiệm 1: HCG Liều dẫn 25 11 500 500 Liều sơ HCG (UI/kg) 500 500 1.000 Não thùy (kg cá cho/kg cá nhận) HCG (UI/kg) 0,37 1.500 0,37 0,37 0,37 Liều định HCG (UI/kg) 6.000 HCG (UI/kg) 6.000 IU = International Unit, đơn vị quốc tế Đối với cá đực, tiêm liều 2.000 IU HCG/kg thời điểm tiêm liều định cho cá Số lượng 12 cá đực cho thí nghiệm 10 cho thí nghiêm 2.2.4 Các tiêu sinh sản Thời gian hiệu ứng kích thích tố tính từ tiêm liều định cá rụng trứng Tỷ lệ cá đẻ (%) tính (số cá rụng trứng/số cá tiêm kích dục tố)×100 Sức sinh sản thực tế tính (số lượng trứng rụng/khối lượng cá cái) ×100 2.2.5 Gieo tinh ấp trứng Tiến hành thu sẹ cá đực trước cá rụng trứng Sẹ pha loãng với nước muối sinh lý (1 tinh: 100 – 200 nước muối sinh lý theo thể tích) bảo quản nhiệt độ 4°C Trứng sau vuốt gieo tinh phương pháp nửa khô Trước tiên trộn trứng sẹ, thêm nước khuấy 30 giây, rửa Trứng khử dính dung dịch tanin (6 g pha 10 lít nước) 30 giây Sau rửa ấp bình phễu có nước chảy ngược Trong q trình ấp trứng thường xuyên theo dõi thay đổi nhiệt độ để có biện pháp xử lý kịp thời Đồng thời trình ấp trứng thường xuyên theo dõi phát triển phơi, để tính tỷ lệ thụ tinh tỷ lệ nở Tỷ lệ thụ tinh (%) tính (số trứng thụ tinh/tổng số trứng)×100, vào thời điểm 10 đến 12 sau thụ tinh Tỷ lệ nở tính (số lượng cá nở/ số trứng thụ tinh)×100 Cá bột sau nở chuyển qua bể nhựa m3 có sục khí 24 trước chuyển bể ương III KẾT QUẢ 3.1 Hiệu việc sử dụng kích dục tố 3.1.1 Hiệu việc tiêm dẫn HCG Sử dụng HCG tiêm dẫn cho kết không ổn định: có trường hợp sau tiêm kích thước bào trứng tăng lên (cá số 10 tự nhiên, từ 1,41 lên 1,53 mm, cá số 14 tự nhiên từ 1,29 lên 1,39 mm), có trường hợp khơng tăng tăng (cá số 11 tự nhiên có đường kính trứng trước tiêm tiêm kích thích tố = 1,15 mm, cá số 10 tự nhiên tăng từ 1,23 lên 1,25 mm) Nguyên nhân đường kính trứng khơng tăng tăng thời gian tiêm dẫn tế bào trứng đạt đến mức cực đại nên khơng tăng kích thước nửa, chất kích thích khơng đủ liều để tác động lên tề bào trứng Theo Phạm Văn Khánh, 1996 việc sử dụng HCG liều sơ thấy dịch chuyển nhân trứng cực động vật rõ ràng trường hợp tiêm sơ não thùy, mà HCG thường dùng phối hợp với chất kích thích khác dùng đơn độc liều tiêm định để kích thích cá rụng trứng TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - - THÁNG 11/2013 VIỆN NGHIÊN CỨU NI TRỒNG THỦY SẢN Bảng Hiệu việc sử dụng HCG lên phát triển tế bào trứng cá lau Số hiệu cá Đường kính trứng trước tiêm kích thích tố (mm) Đường kính trứng sau liều tiêm (mm) Rụng trứng tự nhiên Không rụng tự nhiên Rụng tự nhiên Không rụng tự nhiên Không rụng tự nhiên Không rụng tự nhiên Rụng tự nhiên Không rụng tự nhiên Không rụng tự nhiên Không rụng 10 tự nhiên 1,41 ± 0,20 1,53 ± 0,22 Rụng 11 tự nhiên 1,15 ± 0,16 1,15 ± 0,16 Không rụng 1,26 ± 0,14 1,30 ± 0,21 14 tự nhiên 1,29 ± 0,15 1,39 ± 0,20 Rụng 15 tự nhiên 1,33 ± 0,08 1,19 ± 0,19 Không rụng 16 tự nhiên 1,33 ± 0,02 1,34 ± 0,15 Rụng 17 tự nhiên 1,26 ± 0,13 1,24 ± 0,24 Không rụng 18 tự nhiên 1,23 ± 0,10 1,25 ± 0,15 Không rụng 19 tự nhiên 1,20 ± 0,17 1,12 ± 0,09 Không rụng 1F1 1,39 ± 0,28 1,40 ± 0,12 Không rụng F1 1,33 ± 0,13 1,29 ± 0,12 Không rụng F1 1,22 ± 0,07 1,22 ± 0,09 Không rụng F1 1,18 ± 0,22 1,28 ± 0,17 Không rụng F1 1,33 ± 0,15 1,29 ± 0,12 Rụng F1 1,36 ± 0,28 1,33 ± 0,14 Không rụng 12 tự nhiên 13 tự nhiên 3.1.2 Hiệu việc tiêm dẫn não thùy thể Sử dụng não thùy cá chép để tiêm dẫn đạt hiệu tốt Phần lớn cá sau tiêm liều dẫn não thùy kích thước tế bào trứng tăng lên rõ rệt (cá số F1 đường kính trứng tăng từ 1,36 lên 1,67 mm, cá số tự nhiên tăng từ 1,35 lên 1,53 mm) Tuy nhiên, Không rụng Rụng có vài trường hợp đường kính tế bào trứng khơng tăng, ví dụ cá số F1 trước sau tiêm đường kính trứng 1,42 ± 0,15 mm, sau tiêm mức độ đồng trứng cao (độ lệch chuẩn = 0,06 mm), đường kính trứng đạt đến mức tối đa nên không tăng nửa tăng TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - - THÁNG 11/2013 VIỆN NGHIÊN CỨU NI TRỒNG THỦY SẢN Bảng Hiệu việc sử dụng não thùy thể cá chép lên tế bào trứng cá bơng lau Số hiệu cá Đường kính trứng trước Đường kính trứng tiêm kích thích tố (mm) sau liều tiêm (mm) Rụng trứng tự nhiên 1,43 ± 0,17 1,50 ± 0,21 Rụng tự nhiên 1,35 ± 0,18 1,53 ± 0,16 Rụng tự nhiên 1,32 ± 0,16 1,36 ± 0,18 Rụng tự nhiên 1,23 ± 0,14 Không thu trứng Rụng tự nhiên 1,32 ± 0,14 1,36 ± 0,17 Rụng F1 1,36 ± 0,14 1,67 ± 0,13 Rụng F1 1,33 ± 0,21 1,58 ± 0,13 Không rụng F1 1,37 ± 0,20 1,38 ± 0,15 Rụng F1 1,36 ± 0,08 1,37 ± 0,14 Không rụng F1 1,36 ± 0,11 1,37 ± 0,10 Không rụng F1 1,42 ± 0,15 1,42 ± 0,06 Rụng Kết sinh sản dùng não thùy (tiêm dẫn) HCG (tiêm sơ định) trình bày Bảng Sử dụng kết hợp não thùy HCG cho kết tốt so với sử dụng đơn HCG Tỷ lệ cá rụng sử dụng đơn HCG dao động từ 11,1% đến 66,7%, sử dụng kích thích não thùy HCG tỷ lệ cá rụng trứng tăng lên rõ rệt dao động từ 71,4% đến 75%, sức sinh sản thực tế thấp điều cần nghiên cứu thời gian tới Bảng Hiệu kích thích sinh sản hoạt chất kích thích sinh sản khác Kích dục tố HCG Não thùy thể HCG Số Số lượng cá rụng Tỷ lệ cá rụng tiêm (con) lượng cá trứng (con) trứng (%) 25 28,0 11 72,7 3.2 Thời gian hiệu ứng Thời gian hiệu ứng kích thích tố cá bơng lau có dao động lớn từ 30 đến 14 30, trung bình 13 3.3 Ấp trứng Kết tỷ lệ thụ tinh, tỷ lệ nở số lượng Sức sinh sản thực tế (trứng/kg) 9.491 – 33.140 Trung bình 19.304 ± 8.860 8.590 – 28.331 Trung bình 19.100 ± 7.029 cá bột thể Bảng Tỷ lệ thụ tinh trường hợp dùng não thùy HCG cao trường hợp dùng loại HCG đơn Tỷ lệ nở trứng trường hợp sử dụng kết hợp não thùy HCG cao trường hợp sử dụng đơn HCG TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - - THÁNG 11/2013 VIỆN NGHIÊN CỨU NI TRỒNG THỦY SẢN Bảng Kết ấp trứng cá lau Loại kích thích tố HCG Số hiệu cá Thời gian hiệu ứng Tỷ lệ thụ tinh (%) Tỷ lệ nở (%) Số tự nhiên 13:25 phút 26,0 57,0 Số tự nhiên 12:00 phút 45,9 57,1 Số 10 tự nhiên 13:00 phút 47,0 66,8 Số 13 tự nhiên 10:00 phút Số 14 tự nhiên 11:00 phút Thấp Số 16 tự nhiên 09:30 phút 7,14 91,5 Số F1 12:45 phút 73,3 56,4 Số lượng cá bột (con) 1.149 1.500 7,480 5,480 Não thùy thể HCG Số tự nhiên 14:00 phút 56,9 54,1 Số tự nhiên 14:00 phút 62,0 53,9 Số tự nhiên 12:45 phút 96,4 80,4 Số tự nhiên 12:45 phút 94,4 93,0 Số tự nhiên 14:30 phút 35,8 74,9 Số F1 14:00 phút 71,3 50.5 Số F1 12:45 phút 90,1 91,1 Số F1 14:30 phút 35,8 74,9 IV THẢO LUẬN 17,778 222.220 lũy cho việc phát triển tuyến sinh dục, để Ở cá lau cá sử dụng phép tiêm nhiều liều để thúc đẩy mức độ thành thục buồng trứng cá lên bước làm tăng mức độ cảm ứng buồng trứng tác dụng chất kích thích sinh sản tiến tới rụng trứng Phép tiêm nhiều lần nhiều nhà khoa học áp dụng Ching Ming Kon et al 1974 tiêm nhiều liều thấp não thùy để thúc đẩy buồng trứng giai đoạn III cá đối (Mugil cephalus) đạt thành thục tiến hành sinh sản đạt kết Với lồi cá ni, sinh trưởng lâu dài điều kiện ni nhốt trước kích thích sinh sản khơng đến bãi đẻ sản phẩm sinh dục chín muồi xử lý thích đáng nói chung trạng thái sinh chúng sẵn sàng tham gia sinh sản Do đó, lý chúng khơng chuẩn bị đầy đủ để chuyển sinh sản nhân tạo cần phải có thời gian, với sang giai đoạn đẻ trứng Vì sử dụng kích dục tố để kích thích tuyến sinh cá bị xem chưa chuẩn bị tốt mặt sinh lý dục phát triển đến giai đoạn chín muồi sinh dục để chuyển sang đẻ trứng, dùng phương cá có khả rụng trứng pháp tiêm lần tồn lượng thuốc nói 4.1 Hiệu sử dụng kích dục tố Kích thích sinh sản nhân tạo đóng vai trị quan trọng thực tiễn sản xuất lồi cá ni Trong điều kiện nuôi, phát triển tuyến sinh dục tái thành thục thường xảy cách bình thường Tuy nhiên, nhiều lồi cá khơng sinh sản tự nhiên điều kiện nhân tạo yếu tố sinh thái khơng đầy đủ Trong tự nhiên, cá lau di cư sinh sản xa thời gian dài Trong thời gian này, cá tích TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - - THÁNG 11/2013 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN chung định có ảnh hưởng khơng tốt, tạo nên phản ứng sinh lý vội gấp, ảnh hưởng đến rụng trứng (Phạm Văn Khánh, 1996) Khi sử dụng đơn HCG, tế bào trứng tăng khơng tăng kích thước tế bào khơng hấp thu kích dục tố hấp thu (Bảng 2) Điều cho thấy tế bào trứng hấp thu kích thích tố để chuyển hóa đến giai đoạn chín Chỉ trừ có trường hợp ngoại lệ sau tiêm liều dẫn tế bào trứng không tăng, nguyên nhân tế bào trứng cá thể đạt đến giai đoạn chín mùi sinh dục khơng cịn khả tăng thêm kích thước (Bảng 3) Khi sử dụng não thùy hầu hết tế bào trứng cá tiêm tăng kích thước Tiêm dẫn não thùy tế bào hấp thu tốt hơn, sau tiêm kích thích tố dẫn não thùy thể cá kích thước tế bào trứng to hơn, căng tròn đạt đến giai đoạn chín muồi sinh dục, cần tiêm thêm liều sơ liều định (đủ lượng thuốc) trứng đạt đến giai đoạn chín rụng, hiệu việc sử dụng kích thích tố não thùy HCG cho tỷ lệ cá rụng trứng cao 72,7%, kết cá rụng trứng sử dụng đơn HCG đạt 28% (Bảng 4) Theo Nguyễn Tuần, 2000 cho tỷ lệ rụng trứng cá basa 71,4%, cá tra (Phạm Văn Khánh, 1996) 70% tương đương với tỷ lệ rụng trứng cá lau sử dụng chất kích thích kết hợp, thấp cá lăng vàng (Ngô Thị Ngọc Loan, 2008) tỷ lệ cá rụng trứng từ 76 – 80%, thấp nhiều so với cá hú tỷ lệ cá rụng trứng đạt từ 88,9 – 100% (Đỗ Minh Trí, 2008) Trong bảng bảng cho thấy đường kính trứng cá lau giai đoạn IV đạt cực sinh sản dao động từ 1,23 ± 0,14 mm đến 1,43 ± 0,17, kích thước lớn đường kính trứng lồi cá da trơn khác cá hú thành thục (giai đoạn IV) có đường kính trứng cực đại 0,9 – 1,07 mm (Đỗ Minh Trí, 2008), đường kính trứng cá tra từ – 1,1 mm (Phạm Văn Khánh, 1996), đường kính trứng cá leo nhỏ nhiều so với trứng cá lau dao động từ 0,88 ± 0,09 đến 0,92 ± 0,07 mm (Ngơ Vương Hiếu Tính, 2008) Theo Nguyễn Tuần (2000) đường kính trứng cá basa từ 1,8 đến 2.0 mm lớn nhiều so với cá lau Sức sinh sản thực tế cá sử dụng kích thích não thùy HCG thấp so với việc sử dụng HCG đơn thuần, điều phần có liên quan đến hệ số thành thục cá Do chế độ dinh dưỡng điều kiện mơi trường ni vỗ cá bố mẹ chưa thích hợp chưa ổn định vấn đề cần tiếp tục nghiên cứu nhiều 4.2 Thời gian hiệu ứng Khi điều kiện sinh thái, sinh lý thích hợp đáp ứng cho trình đẻ trứng, nỗn bào chuyển sang giai đoạn chín muồi sinh dục chuẩn bị cho q trình chín rụng trứng Thời gian hiệu ứng kích thích tố khoảng thời gian từ lúc tiêm liều định đến cá bắt đầu rụng trứng hàng loạt Thời gian hiệu ứng phụ thuộc vào mức độ chín muồi sinh dục, tình trạng sinh lý cá thể, tác nhân gây đẻ yếu tố mơi trường dịng chảy, nhiệt độ nước, giới tính, giá thể (Nguyễn Tuần, 2000) Việc xác định thời gian hiệu ứng nhằm theo dõi xác thời điểm rụng trứng để tiến hành sinh sản nhân tạo vuốt khô kịp thời Những trường hợp trứng rụng mà nằm lâu buồng trứng làm giảm tỷ lệ thụ tinh (Phạm Văn Khánh, 1996) Thời gian hiệu ứng kích thích tố cá bơng lau có dao động lớn, từ 30 đến 14 30 tập trung khoảng 12 đến 14 giờ, nhiên so sánh với thời gian hiệu ứng cá basa (Nguyễn Tuần, 2000) dao động từ đến 16 khoảng thời gian hiệu ứng kích tố cá bơng lau dao động ngắn Ở cá tra theo Phạm Văn Khánh (1996) thời gian hiệu TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - - THAÙNG 11/2013 VIỆN NGHIÊN CỨU NI TRỒNG THỦY SẢN ứng kích tố ngăn trung bình dao động ngắn từ đến 10 giờ, cá lăng vàng thời gian hiệu ứng có dao động ngắn từ 23 25 phút đến 23 50 phút (Ngơ Thị Ngọc Loan, 2008), theo Đỗ Minh Trí (2008), thời gian hiệu kích thích tố cá hú có dao động ngắn từ 15 phút – 10 45 phút so với cá lau, cá leo thời hiệu ứng kích tố 10 05 phút (Ngơ Vương Hiếu Tính, 2008) Một số nguyên nhân làm thay đổi thời gian hiệu ứng như: nhiệt độ nước, liều lượng hoạt tính tác nhân gây rụng trứng, chủ yếu mức độ thành thục cá (Nguyễn Tuần, 2000) Thực tế cho thấy, sinh sản nhân tạo cá bơng lau cá thể có sản phẩm sinh dục chín muồi, tế bào trứng đạt mức độ đồng thời gian hiệu ứng ngắn cá thể khác, trường hợp bảng có cá số tự nhiên có thời gian hiệu ứng 9:30 phút ngắn nhiều so với cá thể khác, với đường kính trứng trước tiêm chất kích thích 1,33 ± 0,02 mm 4.3 Thụ tinh ấp trứng Nguyễn Văn Kiểm (2005) cho trình thụ tinh trứng xảy vào thời kỳ giảm phân II Sau tinh trùng chui vào trứng qua nỗn khổng, trứng hình thành màng thụ tinh để ngăn cản không cho tinh trùng thứ hai xâm nhập vào Sau phút tinh trùng hình thành ánh 10 phút sau trứng hoàn thành phân cắt lần Sau 20 phút nhân tinh trùng trứng kết hợp với thành hợp tử hồn thành q trình thụ tinh Ngay rơi vào nước bắt đầu hoạt hóa trứng Trước tiên tách màng thụ tinh tạo xoang quanh nỗn khơng bào vỏ (các hạt vỏ) trương nước vỡ Quá trình vỡ hạt vỏ làm cho lớp vỏ tách làm đôi Bên 10 chứa đầy chất dịch xuất khe quanh nỗn Phần ngồi lớp vỏ, với phần chất chứa hạt vỏ, gắn với màng nỗn hồng màng phóng xạ tạo nên màng thụ tinh Phần lớp vỏ đơng đặc lại hình thành lớp vỏ trứng thụ tinh Một phần chất hạt vỏ tiếp tục hấp thụ nước làm cho xoang quanh noãn tiếp tục lớn lên Màng thụ tinh xoang quanh nỗn có vai trị ngăn cản khơng cho tinh trùng khác xâm nhập Đến chưa có cơng trình nghiên cứu đề cập đến tập tính sinh sản tự nhiên kích thích cho cá đẻ tự nhiên cho loài họ cá tra Pangasiidae Các tác giả đưa phương pháp thụ tinh khô cá tra (Phạm Văn Khánh, 1996) Tỷ lệ trứng thụ tinh phụ thuộc vào nhiều yếu tố chất lượng sản phẩm sinh dục trứng tinh trùng, thao tác cho cá sinh sản nhân tạo đòi hỏi phải nhanh, giờ, tỉ mỉ khâu trứng tinh trùng khỏi thể cá chúng sống thời gian ngắn trình thụ tinh xảy nhanh Quá trình thụ tinh nở trứng phụ thuộc vào chất lượng tế bào trứng chất lượng tinh trùng, ngồi cịn phụ thuộc vào điều kiện ngoại cảnh chất lượng nước, yếu tố môi trường nhiệt độ, ôxy, pH Đối với trứng cá lau ấp nhiệt từ 27 – 30°C thời gian nở kéo dài từ 24 đến 36 Kết Bảng cho thấy tỷ lệ nở trứng trường hợp sử dụng não thùy HCG dao động từ 50,5 – 93% (trung bình 74,1 ± 16,6%) cao với trường hợp sử dụng loại kích thích tố HCG đơn dao động từ 54,1 – 91,5% (trung bình 66,4 ± 14,5%) Tỷ lệ thụ tinh trường hợp sử dụng não thùy HCG dao động từ 35,8 – 96,4% cao nhiều so với trường hợp sử dụng loại HCG đơn dao động từ 7,14 – 73,3% sử dụng não thùy tươi cá chép để tiêm dẫn TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - - THÁNG 11/2013 VIỆN NGHIÊN CỨU NI TRỒNG THỦY SẢN cho cá thời gian dài (4 ngày) tạo điều kiện cho trứng hấp thu kích thích phát triển đồng đều, căng trịn đạt đến giai đoạn chín muồi sinh dục sẵn sàng rụng có tác động kích thích tố HCG làm cho q trình rụng trứng xảy Một nguyên nhân làm cho tỷ lệ thụ tinh thấp trường hợp sử dùng đơn loại HCG có vài trường hợp cá cá đực thành thục chưa tốt, có trường hợp cá đực thành thục tốt cá không tốt ngược lại vấn đề cần nghiên cứu nhiều Ngoài nở trứng phụ thuộc vào yếu tố môi trường nước, nhiệt độ nước xuống 27oC tỷ lệ nở đạt thấp tỷ lệ cá dị hình nhiều, vượt ngưỡng cho phép trứng khơng nở Theo Nguyễn Tuần (2000) tỷ lệ thụ tinh nở cá basa đạt mức trung bình, khoảng dao động khơng lớn 52,0 ± 3,9% 48,0 ± 4,0% Ở cá tra tỷ lệ thụ tinh nở đạt tương đương với cá lau 70% 70% (Phạm Văn Khánh, 1996) Ở cá hú tỷ lệ thụ tinh nở đạt cao cá lau ổn định dao động từ 77 – 84,4% 74 -83,9% (Đỗ Minh Trí, 2008) Tỷ lệ thụ tinh nở cá leo tương đương với cá lau 59,3% 54,0% (Ngơ Vương Hiếu Tính, 2008) V KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT Kết luận nở trường hợp sử dụng HCG đơn dao động từ 7,1% đến 73,4% (trung bình 39,9 ± 24,9%) từ 57,0% đến 91,5% (trung bình 66,4 ± 14,5%) thấp sử dụng kết hợp não thùy thể HCG dao động từ 35,8 – 96,4% (trung bình 69,4 ± 26,2%), từ 50,5 – 93% (trung bình 74,1 ± 16,6%) Đề xuất Cần hoàn thiện khâu kỹ thuật nuôi vỗ thành thục cá bố mẹ để nâng cao chất lượng sản phẩm sinh dục, làm cho trình thụ tinh nở trứng tốt ổn định Tiếp tục bố trí thí nghiệm kích thích sinh sản sử dụng kết hợp não thùy với HCG sử dụng HCG đơn để có thêm nhiều kết tốt TÀI LIỆU THAM KHẢO Nguyễn Tường Anh, 1997 Một số vấn đề nội tiết học sinh sản cá, Nhà xuất Nông nghiệp, 68 trang Phạm Văn Khánh, 1996 Sinh sản nhân tạo nuôi cá tra Đồng sông Cửu Long Luận án Phó tiến sĩ Nơng nghiệp, Đại học Thủy sản Nha Trang, 168 trang Nguyễn Văn Kiểm, 2005 Kỹ thuật sản xuất cá giống, tủ sách Đại học Cần Thơ, 95 trang Ngô Thị Ngọc Loan, 2008 Hiệu gây chín Cho cá bơng lau sinh sản nhân tạo điều kiện nuôi nhốt cá dùng phương pháp tiêm nhiều lần sử dụng não thùy thể kết hợp với HCG đạt hiệu tốt so với trường hợp sử dụng loại HCG đơn rụng trứng 17, 20 P (17α, 20β-Dihydroxy4-Pregnen-3-One) cá Tra (Pangasius hypophthalmus, Sauvage, 1878) cá Lăng Vàng (Hemibagrus Nemurus, Valenciennes, 1839) Luận văn thạc sỹ sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên- TP- Hồ Chí Minh, 77 trang Tỷ lệ cá rụng trứng trường hợp sử dụng đơn loại kích thích tố HCG đạt 35,4%, trường hợp sử dụng kết hợp não thùy thể kết hợp với HCG tỷ lệ cá rụng trứng đạt cao tới 72,7% Tỷ lệ thụ tinh Ngơ Vương Hiếu Tính, 2008 Nghiên cứu kích thích sinh sản nhân tạo ương cá Leo (Wallago attu Schneider, 1801) Luận văn tốt nghiệp cao học ngành thủy sản Đại học Thủy sản Cần Thơ, 79 trang TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - - THAÙNG 11/2013 11 VIỆN NGHIÊN CỨU NI TRỒNG THỦY SẢN Đỗ Minh Trí, 2008 Thử nghiệm sản xuất giống cá Hú (Pangasius conchophilus) Luận văn tốt nghiệp cao học, ngành Nuôi trồng thủy sản Đại học Cần Thơ 94 trang Nguyễn Tuần, 2000 Cơ sở sinh học, sinh sản nhân tạo cá basa (Pangasius bocourti Sauvage, 1880) tỉnh Nam Bộ Luận án Tiến sỹ Ngư loại học, Đại học Thủy sản Nha Trang, 127 trang Cacot, Philippe, 1999 Descrition of the sexual cycle related to the environment and set up of the artificial propagation in floating cages and in ponds in the Mekong Delta Proceeding of the mid-term Workshop of the “Catfish Asia Project” Can Tho Viet Nam 11 – 15 May 1998, 71 – 89 COMPARISION OF THE EFFICENCY OF USING DIFFERENT INDUCING AGENTS TO STIMULATE Pangasius krempfi SPAWNED IN CAPTIVITY CONDITION Huynh Huu Ngai1, Trinh Quoc Trong1, Thi Thanh Vinh1, Đang Van Truong1, Nguyen Thanh Nhan1, Ha Thi Ngoc Nga1, Le Trung Dinh1, Lê Hien Kha Tri1, Nguyen Van Hao2 ABSTRACT Pangasius krempfi does not reproduce naturally in captivity Therefore the use of hypophysation is required For females, several injections were used, including the first four injections with 500 IU of HCG (Human Chorionic Gonadotropin) per kg or pituitary gland extract of common carp (3 kg donor fish used for kg receiver), preliminary one injection of 1,500 IU of HCG per kg, followed by a final injection of 6,000 IU of HCG per kg For males, only one injection of 2,000 IU of HCG per kg was applied at the time of final injection for female The females were stripped for eggs from 9.5 to 14.5 hours after the final injection Fertilization rate varied from 7.1 to 73.4% (an average of 39.9±24.9%) Hatching took approximately 24 to 36 hours at water temperatures of 27 – 29°C Hatching rate was found to be at 57.0 – 91.5% (an average of 66.4 ± 14.5%) Keywords: Pangasius krempfi, induced spawning, inducing agent Người phản biện: TS Nguyễn Văn Sáng Ngày nhận bài: 18/9/2013 Ngày thông qua phản biện: 30/9/2013 Ngày duyệt đăng: 15/10/2013 National Breeding Center for Southern Freshwater Aquaculture, Research Institute for Aquaculture No.2 E-mail: ngaicaibe@yahoo.com.vn Research Institute for Aquaculture No.2 12 TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - - THAÙNG 11/2013 ... 80 ml 2.2.3 Kích thích sinh sản nhân tạo Trong tự nhiên, cá bơng lau có tập tính di cư sinh sản thời gian dài, sinh sản nhân tạo cá cần sử dụng phương pháp tiêm nhiều liều để kích thích cho tế... cá basa từ 1,8 đến 2.0 mm lớn nhiều so với cá lau Sức sinh sản thực tế cá sử dụng kích thích não thùy HCG thấp so với việc sử dụng HCG đơn thuần, điều phần có liên quan đến hệ số thành thục cá. .. tiễn sản xuất lồi cá ni Trong điều kiện nuôi, phát triển tuyến sinh dục tái thành thục thường xảy cách bình thường Tuy nhiên, nhiều lồi cá khơng sinh sản tự nhiên điều kiện nhân tạo yếu tố sinh