Nghiên cứu đặc điểm sinh học của nấm bột nomuraea rileyi ký sinh trên sâu hại rau

====== VŨ THỊ HƯƠNG NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA NẤM BỘT NOMURAEA RILEYI KÝ SINH TRÊN SÂU HẠI RAU KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành: Vi sinh vật học Người hướng dẫn k

======

VŨ THỊ HƯƠNG

NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC

CỦA NẤM BỘT NOMURAEA RILEYI

KÝ SINH TRÊN SÂU HẠI RAU

KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC

Chuyên ngành: Vi sinh vật học

Người hướng dẫn khoa học

GS TS PHẠM THỊ THÙY

HÀ NỘI, 2014

Sinh viên: Vũ Thị Hương K36B - CN Sinh

LỜI CẢM ƠN

T ế ệ Nghiên cứu

đặc điểm sinh học của nấm bột Nomuraea rileyi ký sinh trên sâu hại rau”

ầ

ị

V ế

:

GS TS P T ị T ế ộ

ế ệ

ó ệ

PGS TS Đ T ị K N ệ ệ ệ

Đ ử ầ

ổ ộ C ệ – V S Đ S

H Nộ ệ ở ấ ữ ế ứ

ụ ụ ụ ứ C ế è

ộ ệ ệ

Mộ ầ ữ ữ ó trên!

Hà Nội, tháng 5 năm 2014

Sinh viên

Vũ Thị Hương

Sinh viên: Vũ Thị Hương K36B - CN Sinh

LỜI CAM ĐOAN

Kế ứ ó ệ tên : “Nghiên

cứu đặc điểm sinh học của nấm bột Nomuraea rileyi ký sinh trên sâu hại rau”

ế ứ ấ ỳ khác

Tôi xin hoàn t ị ệ ế Hộ

ệ

Hà Nội, tháng 05 năm 2014

Sinh viên

Vũ Thị Hương

Sinh viên: Vũ Thị Hương K36B - CN Sinh

NHỮNG TỪ VIẾT TẮT TRONG KHÓA LUẬN

Ttb (0C) : N ệ ộ (0

C)

Sinh viên: Vũ Thị Hương K36B - CN Sinh

MỤC LỤC

LỜI CẢM ƠN

LỜI CAM ĐOAN

DANH MỤC BẢNG

DANH MỤC HÌNH

MỞ ĐẦU 1

NỘI DUNG 4

CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4

1 1 S ị ử ứ ấ ế 4

1.2 Mộ ứ ấ ộ Nomuraea rileyi (Nr) 6

1 2 1 P 6

1 2 2 Đặ 6

1 2 3 T ệ ứ ị ễ ấ ộ 6

1 2 4 C ệ ế ệ ấ Nomuraea rileyi 8

1 3 Mộ ế ă ễ ấ N ừ

ế V ệ N 10

1 3 1 T ế 10

1 3 2 Ở V ệ N 11

1 4 K ệ ệ 13

1 4 1 S (Pieris rapae) 13

1.4.2 Sâu khoang (Spodoptera litura) 14

CHƯƠNG 2 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18

2 1 T ị ứ 18

2 1 1 T ứ 18

2 1 2 Đị ứ 18

2 2 V ệ ứ 18

Sinh viên: Vũ Thị Hương K36B - CN Sinh

2 2 1 N ấ Nomuraea rileyi ấ N 18

2 2 2 S ệ ở 18

2 3 Hó ấ ụ ụ ệ 18

2 3 1 Hó ấ 18

2 3 2 Dụ ụ ế ị ệ 19

2 4 P ứ 19

2 4 1 Đ ễ ế ấ Nomuraea rileyi kí sinh

ấ ộ 19

2 4 2 P ấ ộ Nomuraea rileyi 20

2 4 2 1 T ầ ấ 20

2 4 2 2 P ấ 22

2 4 3 N ứ ặ ấ N P ( ấ N ) 22

2 4 3 1 X ị ă ẩ ấ ộ Nomuraea rileyi ấ 22

2 4 3 2 X ị ă ử ấ ộ Nomuraea rileyi ấ 23

2 4 3 3 N ứ ộ ặ ấ Nomuraea rileyi 24

2 4 4 P ử ệ ệ ấ N.rileyi 24 CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 27

3.1 Đ ị ấ Nomuraea rileyi kí sinh

ộ 27

3 2 P ấ ộ Nomuraea rileyi N ầ 29

3 2 1 P ấ N ầ 29

3 2 2 T ấ ộ 31

3 3 N ứ ộ ặ ấ ộ Nomuraea rileyi 32

Sinh viên: Vũ Thị Hương K36B - CN Sinh

3.3.1 N ứ ă ẩ ấ N

ấ 32

3 3 2 N ứ ă ử ấ N

ấ 33

3 3 3 N ứ ặ ấ ộ Nomuraea rileyi trên MYAR 35

3.4 Đ ệ ấ ộ Nomuraea rileyi 36

3 4 1 T ệ ă ễ ( ) ấ ộ

(Pieris rapae) ệ

ệ 36

3 4 2 T ệ ă ễ ( ) ấ ộ N (Spodoptera litura)

ệ ệ 38

KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 41

TÀI LIỆU THAM KHẢO 43 PHỤ LỤC

Sinh viên: Vũ Thị Hương K36B - CN Sinh

DANH MỤC BẢNG

B 3 1 D ễ ế ấ ộ Nomuraea rileyi

ụ 2014 ở M K H Đứ H Nộ (20/2/2014 – 25/4/2014) 27

Sinh viên: Vũ Thị Hương K36B - CN Sinh

DANH MỤC HÌNH

H 1 1 Q ễ ấ Nomurae rileyi lên sâu khoang

Spodoptera litura 7

H 1 2 B ở H Đứ H Nộ 14

Hình 1.2 T ứ ở H Đứ H Nộ 14

H 1 2 S ở H Đứ H Nộ 14

H 1 2 N ộ ở H Đứ H Nộ 14

H 1 3 B ở H Đứ H Nộ 15

H 1 3 Ổ ộ ở H Đứ H Nộ 15

Hình 1.3 c Sâu non sâu khoang ở H Đứ H Nộ 15

H 1 3 N ộ ở H Đứ H Nộ 15

H 3 1 D ễ ế ấ Nomuraea rileyi ộ

rau M K H Đứ H Nộ ừ 20/2/2014 - 25/4/2014 28

H 3 2 Nấ Nomuraea rileyi 29

H 3 2 Nấ Nomuraea rileyi ký sinh trên sâu khoang 29

H 3 3 : C ấ N P ầ ấ MYAR 30

H 3 3 : C ấ N S ầ ấ MYAR 30

H 3 4 : C ử ấ ộ N

: B ử ấ ộ N 31

H 3 5 K ẩ ấ N 7 ấ MDPA 33 H 3 5 K ẩ ấ N 7 ấ PDA 33

H 3 5 K ẩ ấ Nr sau 7 ấ MYAR 33 H 3 5 K ẩ ấ N 7 ấ MPAR 33 Hình 3.6 K ẩ ấ Nomuraea rileyi

MYAR 20 ấ 35

H 3 7 C ử ấ ộ N ở ộ ó 400 36

Sinh viên: Vũ Thị Hương K36B - CN Sinh

Hình 3.8 B ử ấ ộ N ở ộ ó 400 36

H 3 9 H ử ấ ộ Nomuraea riley

ệ

ệ 37

H 3 10 M ử ệ ừ 38

ngày 24/3/2014 38

H 3 11 S ế ễ ấ N 7-10 ngày thí ệ 38

Hình 3.12 H ử ấ ộ Nomuraea rileyi

ệ ệ 39

H 3 13 M ử ệ ừ

3/4/2014 40

Hình 3.14 Sâu kh ế ấ N 7- 10 ệ 40

ệ ứ ấ Nomuraea rileyi ế

C ế ệ :

"Nghiên cứu đặc điểm sinh học của nấm bột Nomuraea rileyi ký

sinh trên sâu hại rau"

2 Mục tiêu

Đ ấ Nomuraea rileyi

ộ ở ấ Nr ứ ặ

ấ Nomuraea rileyi

3 Nội dung nghiên cứu

3 1 Đ ị ấ Nomuraea rileyi kí sinh

NỘI DUNG CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU

1.1 Sơ lược lịch sử nghiên cứu của nấm ký sinh côn trùng trên thế giới

Muscardin ó Beauveria gliobuliera ừ

Bliscus lencoptera Say ệ C

ă ệ ộ chi : Beauveria bassiana,

Metarhizium anisopliae, Metarhizium flavoviride, Nomuraea rileyi, Paecilomyces, Sorosporella, Hirsutella, Verticillium… [14]

Nă 1944 E w S ầ

ệ ứ ệ [14] Từ ó

ế ấ ệ ữ ứ ệ

Hình1.1 Quá trình lây nhiễm của nấm Nomurae rileyi

lên sâu khoang Spodoptera litura

Ghi chú

A: Ấ B: Ấ ế ị ễ ấ N

C: Ấ ở ữ ử D: Ấ ở ử ấ N ặ

1.2.4 Con đường truyền bệnh và cơ chế gây bệnh của nấm Nomuraea rileyi lên côn trùng hại cây trồng

a Con đường lan truyền của nấm Nomuraea rileyi

ở ệ ấ 1 - 2

ế ử C ỳ

Nomuraea rileyi trên Spodoptera litura é 8 - 9 ngày

1.3 Một số kết quả về khả năng lây nhiễm của nấm Nr trong phòng trừ sâu hại cây trồng trên thế giới và Việt Nam

1.3.1 Trên thế giới

N ứ ử ụ ấ Nomuraea rileyi

ừ ế

C ử ụ ấ Nomuraea rileyi ừ sâu Anticarsia gemmatalis ế 70% 10 ệ

T I ff (1981) [24] ấ Nomuraea rileyi ó ă

ễ ấ ộ Noctuidae ộ

Lepidoptera K ệ ấ ệ ỉ ằ ấ ó ệ ổ ấ ệ ẽ

ổ 3 ệ ấ ở ổ

T Mỹ N Mỹ M (1984) [26] ế ấ Nomuraea rileyi ử ụ ộ ệ ừ ộ ộ

Lepidoptera T ệ ở N Mỹ ấ ó ế 90 % ộ Lepidoptera 1.3.2 Ở Việt Nam V ệ ứ ấ Nomuraea rileyi ó ấ ứ ỉ ă ở V ệ B ệ T V ệ C ệ

ầ ở ấ ó

ở ộ ỉ ộ ằ S H

T T K T ầ ộ (1996) ấ Nomuraea rileyi ó ầ ấ ặ ầ ừ 2

ế 7 ă ở ộ ỉ H Nộ H T H D [8]

T T K T ầ Vũ Q C [9] ấ Nomuraea rileyi ó ặ ầ ở ộ ẩ Lepidoptera ó ặ ở ộ ử Hemiptera Nấ Nomuraea rileyi

ụ

… ế

L ấ ấ ệ ụ

ụ ă

C T K T ầ Vũ Q C 2001 [10] P T ị

Thùy, 2004 [14] ế ấ Nomuraea rileyi ó ă

ệ ấ

ừ 2 ế 5

ỗ V ệ ứ ấ ấ ẻ ở

V ệ N ấ ầ ứ ó thích h ử ụ ấ ế ẩ ụ ụ ừ

Theo P T ị T ỳ (2012) [15] ở ộ 3 108 bt/ml

12 ỷ ệ ế 74 2% ỷ ệ ế

ấ 15% Tỷ ệ ế 69 5% ỷ ệ ế

ấ 10%

1.4 Khái niệm về hai loại sâu dùng trong thí nghiệm

1.4.1 Sâu xanh bướm trắng (Pieris rapae)

Hình 1.2 a Bướm sâu xanh bướm trắng

ệ ữ V C bóng có ánh tím

T ứ ẻ ổ ó ứ

ầ ụ ó 36 – 39 ừ ỉ ứ ( ứ ữ

ứ ữ ứ )

S ở ế ó 3 ệ ( ệ ữ 2 ệ ụ ) ừ ầ ế ụ T ụ ỗ ấ ệ 1

CHƯƠNG 2 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.1 Thời gian, địa điểm nghiên cứu

2.1.1 Thời gian nghiên cứu

2.2 Vật liệu nghiên cứu

2.2.1 Nguồn nấm Nomuraea rileyi và chủng nấm Nr

- N ấ ộ Nomuraea rileyi ộ

ở H Đứ H Nộ

- C ấ N ừ ễ ấ

2.2.2 Sâu hại làm thí nghiệm ở trong phòng

- Sâu khoang (Spodoptera litura) (Pieris rapae)

+ Đ M z G z + C

2.4 Phương pháp nghiên cứu

2.4.1 Điều tra diễn biến và thu mẫu nấm Nomuraea rileyi kí sinh tự nhiên trên sâu hại rau và bảo quản nguồn nấm bột

- Đị : T M H ệ 2 M K H Đứ H Nộ

- T : ị ứ 4 ầ

- P : T V ệ B ệ (2001) [15]

2.4.2 Phân lập nấm bột Nomuraea rileyi

2.4.2.1 Thành phần và phương pháp nấu môi trường

2.4.3 Nghiên cứu đặc điểm sinh học của chủng nấm Nr.Pr (chủng nấm Nr

ký sinh trên sâu xanh bướm trắng)

2.4.3.1 Xác định khả năng phát triển đường kính khuẩn lạc nấm bột Nomuraea rileyi trên các môi trường nuôi cấy

- Sử ụ ấ ĩ P

CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

3.1 Điều tra thực địa, thu thập các nguồn nấm Nomuraea rileyi kí sinh

sâu hại rau ngoài đồng ruộng

Bảng 3.1 Diễn biến của nấm bột Nomuraea rileyi ký sinh trên sâu hại bắp

cải vụ xuân 2014 ở Minh Khai, Hoài Đức, Hà Nội (20/2/2014 – 25/4/2014)

STT Ngày

điều tra

Tổng số sâu thu được

Trong đó

Số sâu sống

Số sâu bị nhiễm nấm

Nr

Tỷ lệ sâu bị nấm Nr ký sinh (%)

Hình 3.1 Diễn biến của nấm Nomuraea rileyi ký sinh trên một số sâu hại rau

tại Minh Khai, Hoài Đức, Hà Nội từ 20/2/2014 - 25/4/2014

Q 3 1 3 1 ấ ấ ộ Nomuraea rileyi ấ

ệ ụ ừ 1/3/2014 – 25/4/2014 ỷ ệ N 1/3/2014 ỷ ệ ấ ấ 1 1% ỷ ệ ấ

51.2 47.6

thời gian (ngày)

3.2 Phân lập và tuyển chọn nấm bột Nomuraea rileyi để tạo chủng Nr

N y, 2 ấ ầ Nr.Pr ký sinh trên sâu

N S 2 ấ tri MYAR

3.3 Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học của nấm bột Nomuraea rileyi

3.3.1 Nghiên cứu khả năng phát triển về đường kính khuẩn lạc nấm Nr sau thời gian nuôi cấy trên môi trường khác nhau

N ầ ứ ă

ấ 5 PDA MYAR MPAR SMYA MDPA

Kế õ ẩ ấ ộ 5

ấ ở 3 3

Bảng 3.3 Khả năng phát triển về đường kính của khuẩn lạc nấm N.rileyi

sau thời gian nuôi cấy trên các môi trường khác nhau

(thí nghiệm từ ngày 31/3/2014 - 20/4/1014) S

( 0 C)

H tb (%)

3 ngày 5 ngày 7 ngày 10 ngày 15 ngày 20 ngày

D ẩ ấ ộ Nomuraea rileyi trên các môi

(MYAR MPAR PDA MDPA) 7 ấ

ệ ệ trên hình 3.5 a, b, c, d

Bảng 3.4 Khả năng hình thành của bào tử nấm bột Nomuraea rileyi trên

các môi trường nuôi cấy khác nhau (TN từ ngày 31/3/2014 đến 20/4/2014)

H tb (%)

5 ngày 7 ngày 10 ngày 15 ngày 20 ngày

ử ấ ộ Cụ :

S 7 ở 3 MYAR MPAR SMYA ử ấ

ă ầ ế S ử

ứ 15 ấ T 5 MYAR ó ử ấ 3 7 109 / ế ế MPAR SMYA ử ầ 3 109

bt/ml và 2,5x109

/ ấ ấ PDA 1 5 109 / S 20

ử ấ ộ ầ 5 ế ữ

t 15 ấ ấ ữ ấ

N ấ ộ N ấ MYAR sau 15 ấ ở ệ ộ 26 7oC ẩ ộ trung

75 2% ử là 3,7x109

bt/ml.V ử ụ MYAR ữ N

3.3.3 Nghiên cứu về đặc điểm hình thái của nấm bột Nomuraea rileyi trên môi trường MYAR

 V ẩ ấ ộ Nomuraea rileyi trong quá

3.4 Đánh giá hiệu lực của nấm bột Nomuraea rileyi đối với sâu hại rau

3.4.1 Thí nghiệm về khả năng lây nhiễm (hoạt tính) của nấm bột trên sâu xanh bướm trắng (Pieris rapae) hại bắp cải trong điều kiện phòng thí nghiệm

T ệ ă ễ ( ) ấ N sâu

(Pieris rapae) ừ 24/3/2014 – 3/4/2014

ộ ế ở 3 5

Bảng 3.5 Hoạt tính sinh học của bào tử nấm bột N.rileyi đối với sâu xanh bướm trắng (Pieris rapae) hại bắp cải trong điều kiện phòng thí

nghiệm Công

Hình 3.9 Hoạt tính sinh học của bào tử nấm bột Nomuraea rileyi đối với

sâu xanh bướm trắng hại bắp cải trong điều kiện phòng thí nghiệm

S 10 ệ ở ộ 6 108 / ấ ộ Nomuraea

rileyi ó ệ ừ ấ 89 4 % Ở ộ

ộ ấ 2 - 4 x108

/ ệ ừ ấ ứ 68,4 – 84,2% Cũ ệ ế ễ ấ N ẩ ấ

ỷ ệ ấ 3 33%

D ử ệ ừ 24/3/2014 ấ

Hình 3.10 Mô hình thử hiệu lực trừ sâu

xanh bướm trắng trên rau bắp cải

ngày 24/3/2014

Hình 3.11 Sâu xanh bướm trắng chết

do nhiễm nấm Nr sau 7-10 ngày thí

nghiệm

Như vậy, ở nồng độ cao nhất (6 x 10 8

bt/ml) thì hoạt tính sinh học của nấm bột Nr.Pr trừ sâu xanh bướm trắng đạt cao nhất là 89,4% sau 10 ngày thí nghiệm và tỷ lệ sâu xanh bướm trắng chết mọc lại nấm là 3,33%

3.4.2 Thí nghiệm về khả năng lây nhiễm (hoạt tính) của nấm bột Nomuraea rileyi đối với sâu khoang (Spodoptera litura) hại bắp cải trong điều kiện phòng thí nghiệm

T ệ ă ễ ( ) ấ ộ Nomuraea

rileyi khoang (Spodoptera litura) ệ