PHẦN 1. MỞ ĐẦU 1.1. TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI Bệnh nấm gây chết côn trùng là một hiện tƣợng phổ biến trong tự nhiên. Cùng với các nhóm thiên địch khác, nấm ký sinh gây bệnh cho côn trùng có vai trò quan trọng trong việc điều hoà số lƣợng côn trùng trong tự nhiên ở khắp mọi nơi. Do đó, việc khai thác sử dụng nấm ký sinh gây bệnh cho côn trùng đƣợc xem là hƣớng đi triển vọng, thu hút sự chú ý của các nhà khoa học côn trùng học và bảo vệ thực vật. Chế phẩm sinh học trừ sâu hại từ nấm ký sinh côn trùng là một giải pháp quan trọng trong biện pháp sinh học. Tuy nhiên, hạn chế hiện nay đối với việc ứng dụng thuốc trừ sâu sinh học từ nấm ký sinh côn trùng là hiệu quả gây bệnh cũng nhƣ khả năng duy trì hiệu lực với sâu hại còn kém ổn định. Để khai thác tốt tiềm năng của giải pháp hữu ích này, cần có những kiến thức cơ bản và toàn diện về nấm gây bệnh trên côn trùng. Trong đó, những hiểu biết về đặc điểm gây bệnh của nấm trên côn trùng vật chủ liên quan đến cơ chế gây bệnh và mối liên quan với các yếu tố sinh thái là chìa khoá để nâng cao hiệu quả của thuốc trừ sâu sinh học từ nấm ký sinh côn trùng trong bảo vệ thực vật. Hiệu lực nấm gây bệnh cho côn trùng phụ thuộc vào nhiều yếu tố, trong đó quan trọng nhất là khả năng gây bệnh của mầm bệnh, đặc điểm của côn trùng vật chủ và điều kiện ngoại cảnh. Trong đó, cơ chế gây bệnh là yếu tố quyết định đến hiệu quả gây bệnh của nấm đối với côn trùng. Vận dụng các hiểu biết về cơ chế gây bệnh là để giải đáp các vấn đề liên quan đến sinh thái của quá trình gây bệnh làm cơ sở để lựa chọn các mẫu phân lập triển vọng và phƣơng pháp sử dụng hợp lý. Quá trình gây bệnh của nấm ký sinh côn trùng bao gồm con đƣờng lây nhiễm, quá trình tiếp xúc, xâm nhiễm, làm chết vật chủ đến khi nấm phát tán bào tử ra bên ngoài hoàn thành chu kỳ phát triển; cùng với đó là sự biến đổi về hình thái, sinh lý, sinh hóa của vật chủ trong quá trình nhiễm bệnh nấm (Alcides et al., 2002; Posada and Vega, 2005; Tian Zhi-lai, 2008; Vega et al., 2008). Trên thế giới, nghiên cứu về nấm gây bệnh côn trùng đã đạt đƣợc những thành tựu đáng kể. Các loài nấm ký sinh côn trùng đã đƣợc ứng dụng phòng trừ sâu hại nhƣ Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae, Hirsutela lecaniicola, Isaria fumosoroseus, Isaria javanica, Nomuraea rileyi (Lin et al., 2007; Thomas and Read, 2007; Toledo et al., 2010). Một số tác giả đã nghiên cứu về sự gây bệnh, cơ chế tác động của các loài nấm ký sinh trên côn trùng (Posada and Veg, 2005; Tian Zhi-lai, 2008; Vega et al., 2008). Ở Việt Nam cho đến nay chủ yếu là các nghiên cứu ứng dụng phòng trừ sâu hại của 2 loài nấm truyền thống là B. bassiana, M. anisopliae (Đàm Ngọc Hân và Phạm Thị Thuỳ, 2007; Phạm Thị Thuỳ và cs., 2004, 2005); các nghiên cứu cơ bản về sự gây bệnh của nấm trên côn trùng còn ít đƣợc quan tâm. Nghiên cứu ứng dụng nấm gây bệnh cho côn trùng chƣa đạt đƣợc kết quả nhƣ mong muốn, hiệu quả gây bệnh còn thấp và kém ổn định. Có nhiều nguyên nhân dẫn đến thực trạng này, trong đó vấn đề dễ nhận thấy là việc nghiên cứu nấm gây bệnh cho côn trùng thƣờng mới chỉ chú ý nhiều đến khâu sản xuất ứng dụng chế phẩm mà chƣa quan tâm thích đáng đến các nghiên cứu cơ bản, nhƣ cơ chế gây bệnh của các loài nấm ký sinh trên côn trùng, mối quan hệ giữa nấm ký sinh và côn trùng vật chủ trong mối quan hệ với các yếu tố liên quan. Đây là những hiểu biết không thể thiếu, làm cơ sở khoa học cho việc đánh giá, lựa chọn các mầm bệnh tiềm năng cũng nhƣ đề xuất các biện pháp tác động nhằm nâng cao hiệu quả sử dụng nấm gây bệnh cho côn trùng. Trên đồng ruộng, sâu khoang (Spodoptera litura Fabr.) là loài đa thực gây hại nghiêm trọng trên rất nhiều cây trồng với 290 loài thuộc 99 họ thực vật, nhất là các cây rau, lạc, đậu, cây công nghiệp, cây lƣơng thực. Ở Việt Nam, đây là đối tƣợng gây hại mạnh nhất trên cây lạc, có thể gây hại 70 - 81% diện tích lá, làm giảm tới 18% năng suất lạc và đã phát triển thành dịch ở nhiều nơi (Đặng Trần Phú và cs., 1997; Lê Văn Thuyết và cs., 1993; Phạm Thị Vƣợng, 1996). Đã có nhiều biện pháp phòng trừ sâu khoang đƣợc đƣa ra nhƣ biện pháp hóa học, sinh học (chi nấm Beauveria, Nomuraea, Isaria; vi khuẩn NPV), canh tác,… Hiện nay, phòng trừ sâu khoang chủ yếu bằng thuốc hoá học đã không đem lại hiệu quả và hƣớng sử dụng thuốc trừ sâu sinh học từ nấm ký sinh côn trùng là giải pháp hữu ích ngày càng đƣợc quan tâm (Lin et al., 2007; Vijayavani et al., 2009; Vimala et al., 2003). Loài Isaria javanica có tiềm năng trong phòng trừ sâu hại, trƣớc đây gọi là Paecilomyces javanicus (1957) và ban đầu đƣợc mô tả bởi Friederichs and Bally (1923) gọi là Spicaria javanica, đến năm 2005 sử dụng tên gọi chính thức là Isaria javanica. Trong những năm gần đây, một số tác giả đã phát hiện một hiện tƣợng khá thú vị và hữu ích là ở một số chi nấm, bên cạnh khai thác làm dƣợc liệu, chúng còn đƣợc sử dụng nhƣ một tác nhân phòng trừ sinh học, nhƣ chi nấm Isaria mà điển hình là loài I. javanica. Loài nấm này chỉ mới đƣợc quan tâm nghiên cứu trong những năm gần đây và các dẫn liệu nghiên cứu còn hạn chế, nhƣng đánh giá bƣớc đầu đều cho thấy nhiều mẫu phân lập có triển vọng trong phòng trừ sinh học (Scorsetti et al., 2008; Shimazu and Takatsuka, 2010). Ở Việt Nam, Vƣờn quốc gia Pù Mát đƣợc đánh giá là một trong những trung tâm có tính đa dạng sinh học cao, chứa đựng nguồn lợi lớn về nấm ký sinh côn trùng. Các nghiên cứu bƣớc đầu phát hiện một số loài nấm hữu ích trong phòng trừ sinh học và dƣợc liệu, trong đó có loài I. javanica (Trần Ngọc Lân, 2008; Trần Ngọc Lân và cs., 2008a, 2011a; Nguyễn Thị Thanh và cs., 2011a, 2011b; Phạm Quang Thu và cs., 2011). Các vấn đề đặt ra khi nghiên cứu ứng dụng loài nấm I. javanica trong phòng trừ sâu khoang nhƣ: Đặc điểm sinh vật học? Phƣơng pháp đánh giá tuyển chọn những mẫu phân lập có tiềm năng trong phòng trừ sinh học sâu khoang? Khả năng gây bệnh của nấm trên sâu khoang nhƣ thế nào? Mối liên quan giữa nấm và sâu khoang trong với các yếu tố sinh thái ra sao? Các mẫu phân lập I. javanica nghiên cứu đƣợc thu thập ở hệ sinh thái rừng của VQG Pù Mát liệu có thích ứng với điều kiện hệ sinh thái nông nghiệp? Đây là những nghiên cứu cơ bản cần thiết để làm cơ sở khoa học cho việc ứng dụng có hiệu quả nấm gây bệnh côn trùng. Ở Việt Nam, các nghiên cứu về đặc điểm gây bệnh của nấm ký sinh trên côn trùng vật chủ còn ít đƣợc quan tâm, nên hy vọng kết quả nghiên cứu của đề tài sẽ có những đóng góp cho vấn đề này ở Việt Nam. 1.2. MỤC TIÊU CỦA ĐỀ TÀI Trên cơ sở nghiên cứu về khả năng gây bệnh của nấm Isaria javanica trên vật chủ sâu khoang trong mối quan hệ với các yếu tố liên quan, từ đó đánh giá, lựa chọn các mẫu phân lập triển vọng cũng nhƣ đề xuất các biện pháp tác động nhằm nâng cao hiệu quả ứng dụng chế phẩm sinh học từ nấm ký sinh côn trùng trong bảo vệ thực vật.
HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM NGUYỄN THỊ THÚY NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM GÂY BỆNH CỦA NẤM Isaria javanica (Friederichs & Bally) Samson & Hywel-Jones KÝ SINH SÂU KHOANG Ở NGHỆ AN LUẬN ÁN TIẾN SĨ NHÀ XUẤT BẢN ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP - 2016 MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt vi Danh mục bảng vii Danh mục hình ix Trích yếu luận án xi Thesis abstract xiii PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Tính cấp thiết đề tài 1.2 Mục tiêu đề tài 1.3 Phạm vi nghiên cứu 1.4 Những đóng góp đề tài 1.5 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài PHẦN TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Cơ sở khoa học đề tài 2.2 Tình hình nghiên cứu giới 2.2.1 Nghiên cứu đặc điểm nấm ký sinh côn trùng chi Isaria 2.2.2 Nghiên cứu đặc điểm vòng đời chu kỳ phát triển nấm ký sinh côn trùng 13 2.2.3 Nghiên cứu tuyển chọn nấm ký sinh côn trùng để phòng trừ sâu hại 18 2.2.4 Nghiên cứu yếu tố ảnh hƣởng đến khả gây bệnh nấm côn trùng 20 2.2.5 Nghiên cứu ứng dụng nấm ký sinh côn trùng để phòng trừ sâu khoang 23 2.3 Tình hình nghiên cứu Việt Nam 24 2.3.1 Nghiên cứu nấm ký sinh côn trùng chi Isaria 24 2.3.2 Nghiên cứu tuyển chọn nấm ký sinh côn trùng để phòng trừ sâu hại 27 2.3.3 Nghiên cứu yếu tố ảnh hƣởng đến khả xâm nhiễm gây bệnh nấm côn trùng 28 iii 2.3.4 Nghiên cứu ứng dụng nấm ký sinh côn trùng để phòng trừ sâu khoang 28 2.4 Những vấn đề tồn vấn đề đề tài tập trung nghiên cứu 29 2.4.1 Những vấn đề tồn 29 2.4.2 Những vấn đề đề tài tập trung nghiên cứu 29 PHẦN VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 31 3.1 Địa điểm nghiên cứu 31 3.2 Thời gian nghiên cứu 31 3.3 Đối tƣợng vật liệu nghiên cứu 31 3.3.1 Đối tƣợng nghiên cứu 31 3.3.2 Vật liệu nghiên cứu 31 3.3.3 Thiết bị dụng cụ 31 3.4 Nội dung nghiên cứu 32 3.4.1 Thành phần loài nấm thuộc chi Isaria vật chủ chúng thu thập Vƣờn quốc gia Pù Mát, Nghệ An 3.4.2 32 Đặc điểm sinh vật học loài nấm I javanica thu thập Vƣờn quốc gia Pù Mát, Nghệ An 3.4.3 32 Tuyển chọn mẫu phân lập loài nấm I javanica triển vọng để phòng trừ sâu khoang 3.4.4 32 Đánh giá ảnh hƣởng số yếu tố đến khả gây bệnh nấm I javanica VN1487 sâu khoang phòng thí nghiệm 3.4.5 32 Đánh giá khả gây bệnh nấm I javanica VN1487 sâu khoang ô lƣới đồng ruộng 33 3.5 Phƣơng pháp nghiên cứu 33 3.5.1 Nghiên cứu thành phần loài nấm thuộc chi Isaria côn trùng vật chủ chúng Vƣờn quốc gia Pù Mát, Nghệ An 3.5.2 Nghiên cứu đặc điểm sinh học, sinh thái loài nấm Isaria javanica thu thập Vƣờn quốc gia Pù Mát, Nghệ An 3.5.3 35 Nghiên cứu tuyển chọn mẫu phân lập loài nấm Isaria javanica triển vọng để phòng trừ sâu khoang 3.5.4 33 40 Nghiên cứu ảnh hƣởng số yếu tố đến khả gây bệnh nấm Isaria javanica VN1487 sâu khoang phòng thí nghiệm iv 42 3.5.5 3.5.6 Nghiên cứu khả gây bệnh nấm Isaria javanica VN1487 sâu khoang ô lƣới đồng ruộng 48 Phƣơng pháp tính toán xử lý số liệu 51 PHẦN KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 53 4.1 Kết nghiên cứu 4.1.1 Thành phần loài nấm thuộc chi Isaria vật chủ chúng thu thập 53 Vƣờn quốc gia Pù Mát, Nghệ An 4.1.2 53 Đặc điểm sinh học, sinh thái loài nấm Isaria javanica thu thập Vƣờn quốc gia Pù Mát, Nghệ An 4.1.3 57 Tuyển chọn mẫu phân lập loài nấm Isaria javanica triển vọng để phòng trừ sâu khoang 4.1.4 77 Ảnh hƣởng số yếu tố đến khả gây bệnh nấm Isaria javanica VN1487 sâu khoang phòng thí nghiệm 4.1.5 84 Khả gây bệnh nấm Isaria javanica VN1487 sâu khoang S litura ô lƣới đồng ruộng 106 4.2 Thảo luận 113 4.2.1 Phân tích, đánh giá kết đạt đƣợc luận án 113 4.2.2 Một số điểm chƣa có điều kiện nghiên cứu luận án 129 PHẦN KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 130 5.1 Kết luận 130 5.2 Đề nghị 131 Danh mục công trình công bố 132 Tài liệu tham khảo 133 Phụ lục 147 v DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Từ viết tắt Nghĩa tiếng Việt B BN Bt C C Beauveria Bột gạo nếp Bào tử Các bon Cordyceps cs CT CV% DNA ĐTHT EPF I LC50 LSD0.05 LT50 Cộng Công thức Coefficient of variation - Hệ số biến thiên Deoxyribonucleic acid Đông trùng - Hạ thảo Entomology Pathogenic Fungi - Nấm ký sinh côn trùng Isaria Median Lethat Concentrate - Nồng độ gây chết trung bình Least Significant Difference - Phƣơng sai mẫu Median Lethat Time - Thời gian gây chết trung bình M MT N N NXB O RH% SD P PDA Metarhizium Môi trƣờng Ni tơ Nomuraea Nhà xuất Ophiocordyceps Độ ẩm tƣơng đối không khí (%) Standard deviation - Độ lệch chuẩn Paecilomyces Potato Dextrose Agar psi TB toC VSV VQG Pounds per square inch đơn vị đo áp suất inch vuông Trung bình Nhiệt độ không khí (oC) Vi sinh vật Vƣờn quốc gia vi DANH MỤC BẢNG Tên bảng STT Trang 2.1 Lịch sử tên gọi loài Isaria javanica 4.1 Thành phần loài nấm thuộc chi Isaria thu thập Vƣờn quốc gia Pù Mát từ năm 2011 đến 2013 4.2 53 Thành phần vật chủ loài nấm thuộc chi Isaria thu thập Vƣờn quốc gia Pù Mát từ năm 2011 đến 2013 4.3 57 Kết giám định tên mẫu phân lập loài nấm I javanica kỹ thuật DNA (tại BIOTEC, Thái Lan, 2012) 4.5 56 Sự đa dạng vị trí phân bố loài nấm thuộc chi Isaria thu thập Vƣờn quốc gia Pù Mát từ năm 2011 đến 2013 4.4 58 Thành phần vật chủ vị trí phân bố mẫu phân lập loài nấm I javanica thu thập Vƣờn quốc gia Pù Mát từ năm 2011 đến 2013 60 4.6 Sự sinh trƣởng phát triển nấm I javanica môi trƣờng PDA 64 4.7 Đặc điểm nhận dạng loài nấm gây bệnh cho côn trùng thu thập điều kiện tự nhiên 65 4.8 Thời gian phát triển nấm I javanica VN1487 sâu khoang S litura 67 4.9 Triệu chứng sâu khoang S litura bị bệnh nấm I javanica 72 4.10 Các tiêu chí đánh giá khả gây bệnh loài nấm I javanica sâu khoang S litura 4.11 78 Các tiêu chí đánh giá khả phát triển nấm I javanica sâu khoang S litura 82 4.12 Thời gian giai đoạn phát triển nấm I javanica sâu khoang S litura 83 4.13 Thời gian từ lây nhiễm nấm đến xuất giai đoạn phát triển nấm I javanica sâu khoang S litura 4.14 Tỷ lệ sâu khoang S litura chết nồng độ dung dịch bào tử nấm I javanica VN1487 4.15 85 Tỷ lệ sâu khoang S litura mọc nấm nồng độ dung dịch bào tử nấm I javanica VN1487 4.16 84 86 Thời gian phát triển nấm sâu khoang S litura nồng độ dung dịch bào tử nấm I javanica VN1487 vii 87 4.17 Tỷ lệ sâu khoang S litura chết tƣơng quan mật độ sâu nhiễm nấm I javanica VN1487 sâu khỏe 4.18 Tỷ lệ sâu khoang S litura mọc nấm tƣơng quan mật độ sâu nhiễm nấm I javanica VN1487 sâu khỏe 4.19 88 89 Thời gian phát triển nấm sâu khoang S litura tƣơng quan mật độ sâu nhiễm nấm I javanica VN1487 sâu khỏe 90 4.20 Khả gây bệnh nấm I javanica VN1487 cho số loài vật chủ 91 4.21 Tỷ lệ sâu chết mức mật độ sâu khoang S litura 93 4.22 Tỷ lệ sâu mọc nấm I javanica VN1487 mật độ sâu khoang S litura 94 4.23 Thời gian phát triển nấm I javanica VN1487 mật độ sâu khoang S litura 95 4.24 Tỷ lệ sâu chết tuổi sâu khoang S litura 95 4.25 Tỷ lệ sâu mọc nấm I javanica VN1487 tuổi sâu khoang S litura 96 4.26 Thời gian phát triển nấm I javanica VN1487 tuổi sâu khoang S litura 98 4.27 Tỷ lệ sâu khoang S litura chết nhiệt độ khác 4.28 Tỷ lệ sâu khoang S litura mọc nấm I javanica VN1487 nhiệt độ khác 4.29 100 101 Thời gian phát triển nấm I javanica VN1487 sâu khoang S litura nhiệt độ khác 102 4.30 Tỷ lệ sâu khoang S litura chết độ ẩm khác 103 4.31 Tỷ lệ sâu khoang S litura mọc nấm độ ẩm khác 104 4.32 Thời gian phát triển nấm I javanica VN1487 sâu khoang S litura độ ẩm khác 4.33 105 Hiệu lực gây bệnh sâu khoang S litura sau phun nấm I javanica VN1487 ô lƣới đồng ruộng 4.34 Hiệu lực gây bệnh thả sâu khoang S litura nhiễm nấm I javanica VN1487 ô lƣới đồng ruộng 4.35 109 Tỷ lệ sâu khoang S litura mọc nấm I javanica VN1487 ô lƣới đồng ruộng mùa vụ năm 2014 4.36 106 110 Mật độ bào tử nấm I javanica VN1487 lƣu tồn đất qua mùa vụ năm 2014 111 viii DANH MỤC HÌNH STT Tên hình Trang 1.1 Chu kỳ xâm nhiễm nấm ký sinh côn trùng 14 1.2 Cơ chế xâm nhiễm nấm ký sinh côn trùng 14 4.1 Mẫu vật loài nấm thuộc chi Isaria thu thập Vƣờn quốc gia Pù Mát từ năm 2011 đến 2013 4.2 54 Tỷ lệ thành phần vật chủ vị trí phân bố loài nấm I javanica thu thập Vƣờn quốc gia Pù Mát từ năm 2011 đến 2013 4.3 59 Mẫu vật loài nấm I javanica thu thập Vƣờn quốc gia Pù Mát từ năm 2011 đến 2013 61 4.4 Hình thái loài nấm I javanica 62 4.5 Mẫu vật tản nấm loài nấm sau 10 ngày nuôi cấy môi trƣờng PDA 66 4.6 Thời gian phát triển nấm I javanica VN1487 loài vật chủ 68 4.7 Vòng đời chu kỳ phát triển nấm I javanica VN1487 sâu khoang S litura 69 4.8 Vòng đời chu kỳ phát nấm I javanica VN1487 rệp B brassicae 69 4.9 Vòng đời chu kỳ phát triển nấm I javanica VN1487 mọt ngô S zeamais 4.10 70 Các giai đoạn phát triển xen gối nấm I javanica VN1487 sâu khoang S litura 71 4.11 Các vị trí nấm I javanica phát triển thể sâu khoang S litura 75 4.12 Tỷ lệ sâu khoang S litura chết mọc nấm nồng độ dung dịch bào tử nấm I javanica VN1487 4.13 86 Tỷ lệ sâu khoang S litura chết mọc nấm tƣơng quan mật độ sâu nhiễm nấm I javanica VN1487 sâu khỏe 89 4.14 Nấm I javanica VN1487 ký sinh số loài vật chủ 92 4.15 Tỷ lệ sâu chết mọc nấm I javanica VN1487 mật độ sâu khoang S litura 4.16 4.17 94 Tỷ lệ sâu chết mọc nấm I javanica VN1487 theo tuổi sâu khoang S litura 97 Nấm I javanica VN1487 ký sinh tuổi sâu khoang S litura 99 ix 4.18 Tỷ lệ sâu khoang S litura chết mọc nấm I javanica VN1487 nhiệt độ khác 4.19 102 Tỷ lệ sâu khoang S litura chết mọc nấm I javanica VN1487 độ ẩm khác 4.20 104 Diễn biến tỷ lệ sâu khoang S litura chết mọc nấm hàng ngày sau phun nấm I javanica VN1487 ô lƣới đồng ruộng 4.21 Diễn biến tỷ lệ sâu khoang S litura chết mọc nấm hàng ngày sau phun nấm I javanica VN1487 phòng thí nghiệm 4.22 107 Diễn biến tỷ lệ sâu khoang S litura chết mọc nấm hàng ngày sau thả sâu nhiễm nấm I javanica VN1487 ô lƣới đồng ruộng 4.23 107 109 Sâu khoang S litura bị nấm I javanica VN1487 ký sinh ô lƣới đồng ruộng 112 x TRÍCH YẾU LUẬN ÁN Tên tác giả: Nguyễn Thị Thúy Tên luận án: Nghiên cứu đặc điểm gây bệnh nấm Isaria javanica (Friederichs & Bally) Samson & Hywel-Jones ký sinh sâu khoang Nghệ An Chuyên ngành: Bảo vệ thực vật Mã số: 62.62.01.12 Tên sở đào tạo: Học viện Nông nghiệp Việt Nam Mục đích nghiên cứu Trên sở nghiên cứu khả gây bệnh nấm Isaria javanica vật chủ sâu khoang mối quan hệ với yếu tố liên quan, từ đánh giá, lựa chọn mẫu phân lập triển vọng nhƣ đề xuất biện pháp tác động nhằm nâng cao hiệu ứng dụng chế phẩm sinh học từ nấm ký sinh côn trùng bảo vệ thực vật Phƣơng pháp nghiên cứu * Nội dung nghiên cứu: - Nghiên cứu thành phần loài nấm thuộc chi Isaria vật chủ chúng thu thập Vƣờn quốc gia Pù Mát, Nghệ An; - Nghiên cứu đặc điểm sinh học, sinh thái loài nấm Isaria javanica thu thập Vƣờn quốc gia Pù Mát, Nghệ An; - Tuyển chọn mẫu phân lập loài nấm Isaria javanica triển vọng để phòng trừ sâu khoang; - Đánh giá ảnh hƣởng số yếu tố đến khả gây bệnh nấm Isaria javanica VN1487 sâu khoang phòng thí nghiệm; - Đánh giá khả gây bệnh nấm Isaria javanica VN1487 sâu khoang ô lƣới đồng ruộng * Vật liệu nghiên cứu: - Chi Isaria, loài Isaria javanica (Friederichs & Bally) Samson & Hywel-Jones (Hypocreales: Cordycipitaceae) thu thập Vƣờn quốc gia Pù Mát, Nghệ An - Vật chủ sâu non sâu khoang Spodoptera litura Fabricius (Lepidoptera: Noctuidae) thu bắt ruộng lạc huyện Nghi Lộc, Nghệ An * Phương pháp nghiên cứu: - Thu thập, phân lập, định loại, nhân nuôi nấm thuộc chi Isaria - Nghiên cứu đặc điểm sinh học, sinh thái loài nấm Isaria javanica thu thập Vƣờn quốc gia Pù Mát, Nghệ An; - Tuyển chọn mẫu phân lập triển vọng loài nấm Isaria javanica để phòng xi Số liệu khí tƣợng trạm Vinh năm 2014 Bảng Nhiệt độ, độ ẩm trung bình tổng lƣợng mƣa trạm Vinh, năm 2014 Tháng Nhiệt độ trung bình (oC) Độ ẩm trung bình (%) Lƣợng mƣa Tổng số (mm) 17,4 85 17,1 95 47 20,3 93 31 25,7 90 16 30,0 75 19 32,2 74 105 31,0 73 273 30,5 75 111 28,4 84 192 10 25,6 87 473 11 23,7 89 64 12 17,5 88 65 Một số bẳng số liệu nghiên cứu Bảng Tỷ lệ sâu khoang chết mọc nấm hàng ngày phòng thí nghiệm Thời gian sau lây nhiễm nấm Tỷ lệ sâu khoang chết (%) Tỷ lệ sâu khoang mọc nấm (%) ngày 6,67 0,00 ngày 13,77 3,33 ngày 15,54 7,53 ngày 16,02 9,70 ngày 11,85 12,11 ngày 5,15 12,06 ngày 4,80 7,00 ngày 3,65 3,61 ngày 1,55 3,33 10 ngày 0,00 0,00 11 ngày 0,00 0,00 151 Bảng Tỷ lệ sâu khoang chết mọc nấm hàng ô lƣới đồng ruộng phun dịch bào tử nấm Thời gian sau lây nhiễm nấm Tỷ lệ sâu khoang chết (%) Tỷ lệ sâu khoang mọc nấm %) ngày 0,00 0,00 ngày 3,33 0,00 ngày 7,16 0,00 ngày 9,93 3,57 ngày 15,50 4,20 ngày 13,70 6,63 ngày 7,51 8,92 ngày 9,82 6,67 ngày 3,92 7,52 10 ngày 1,48 4,17 11 ngày 2,16 1,05 12 ngày 0,00 1,85 13 ngày 0,00 0,00 14 ngày 0,00 0,00 15 ngày 0,00 0,00 Bảng Tỷ lệ sâu khoang chết mọc nấm hàng ô lƣới đồng ruộng thả sâu nhiễm nấm Thời gian sau lây nhiễm nấm ngày ngày ngày 10 ngày 11 ngày 12 ngày 13 ngày 14 ngày 15 ngày Tỷ lệ sâu khoang chết (%) 0,00 0,00 4,60 5,69 9,50 8,84 10,14 8,00 3,12 4,37 3,58 4,51 2,27 0,00 0,00 Tỷ lệ sâu khoang mọc nấm (%) 0,00 0,00 0,00 0,00 3,33 6,13 4,34 6,00 9,07 8,20 5,24 6,8 3,01 1,24 0,00 152 Số liệu xử lý thống kê 5.1 Thí nghiệm ảnh hƣởng mật độ sâu khoang đến khả gây bệnh nấm I javanica VN1487 * Tỷ lệ sâu khoang chết BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLC.2 FILE MDO_SK 19/10/14 0: :PAGE TN Mat Sau khoang_Nam I javanica: Ty le che VARIATE V003 TLC.2 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN =========================================================================== CT$ 184.877 61.6255 3.96 0.072 LLAI 74.7428 37.3714 2.40 0.171 * RESIDUAL 93.3642 15.5607 * TOTAL (CORRECTED) 11 352.984 32.0894 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLC.4 FILE MDO_SK 19/10/14 0: :PAGE TN Mat Sau khoang_Nam I javanica: Ty le che VARIATE V004 TLC.4 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN =========================================================================== CT$ 1639.81 546.605 19.46 0.002 LLAI 12.9630 6.48148 0.23 0.802 * RESIDUAL 168.519 28.0864 * TOTAL (CORRECTED) 11 1821.30 165.572 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLC.6 FILE MDO_SK 19/10/14 0: :PAGE TN Mat Sau khoang_Nam I javanica: Ty le che VARIATE V005 TLC.6 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN =========================================================================== CT$ 2191.48 730.493 11.92 0.007 LLAI 82.9082 41.4541 0.68 0.546 * RESIDUAL 367.772 61.2954 * TOTAL (CORRECTED) 11 2642.16 240.196 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLC.8 FILE MDO_SK 19/10/14 0: :PAGE TN Mat Sau khoang_Nam I javanica: Ty le che 153 VARIATE V006 TLC.8 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN =========================================================================== CT$ 1552.61 517.537 10.79 0.009 LLAI 135.436 67.7178 1.41 0.315 * RESIDUAL 287.688 47.9480 * TOTAL (CORRECTED) 11 1975.73 179.612 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLC.10 FILE MDO_SK 19/10/14 0: :PAGE TN Mat Sau khoang_Nam I javanica: Ty le che VARIATE V007 TLC.10 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN =========================================================================== CT$ 1336.60 445.535 3.55 0.088 LLAI 170.509 85.2547 0.68 0.545 * RESIDUAL 753.807 125.635 * TOTAL (CORRECTED) 11 2260.92 205.538 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE MDO_SK 19/10/14 0: :PAGE TN Mat Sau khoang_Nam I javanica: Ty le che MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS CT1(5) CT2(10) CT3(15) CT4(20) TLC.2 21.6667 24.0741 28.8889 31.6667 TLC.4 TLC.6 TLC.8 23.3333 33.3333 41.6667 34.4444 44.4444 55.5556 47.7778 59.5238 63.3700 53.3333 68.4211 72.7096 SE(N= 3) 2.27748 3.05976 4.52015 3.99783 5%LSD 6DF 7.87816 10.5842 15.6359 13.8291 CT$ NOS CT1(5) CT2(10) CT3(15) CT4(20) TLC.10 47.2222 57.8704 69.9634 74.1257 SE(N= 3) 6.47134 5%LSD 6DF 12.3854 MEANS FOR EFFECT LLAI - 154 LLAI NOS TLC.2 TLC.4 TLC.6 TLC.8 26.6667 40.0000 50.5378 60.5159 23.4722 40.8333 48.7521 53.5791 29.5833 38.3333 55.0021 60.8814 SE(N= 4) 1.97235 2.64983 3.91457 3.46222 5%LSD 6DF 6.82268 9.16619 13.5411 11.9764 LLAI NOS TLC.10 63.3637 57.2383 66.2843 SE(N= 4) 5.60434 5%LSD 6DF 19.3863 Tỷ lệ sâu khoang mọc nấm BALANCED ANOVA FOR VARIATE NN2 FILE MDO_NN 19/10/14 1:32 :PAGE TN Sau khoang_Nam I javanica: TL nhiem nam VARIATE V003 NN2 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ========================================================================== CT$ 69.4444 23.1481 0.71 0.584 LLAI 117.027 58.5134 1.78 0.246 * RESIDUAL 196.759 32.7932 * TOTAL (CORRECTED) 11 383.230 34.8391 BALANCED ANOVA FOR VARIATE NN4 FILE MDO_NN 19/10/14 1:32 :PAGE TN Sau khoang_Nam I javanica: TL nhiem nam VARIATE V004 NN4 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN =========================================================================== CT$ 492.593 164.198 6.57 0.026 LLAI 179.218 89.6091 3.58 0.094 * RESIDUAL 150.000 25.0000 * TOTAL (CORRECTED) 11 821.811 74.7101 BALANCED ANOVA FOR VARIATE NN6 FILE MDO_NN 19/10/14 1:32 :PAGE TN Sau khoang_Nam I javanica: TL nhiem nam VARIATE V005 NN6 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN =========================================================================== 155 CT$ 872.299 290.766 2.26 0.181 LLAI 27.2119 13.6060 0.11 0.901 * RESIDUAL 770.525 128.421 * TOTAL (CORRECTED) 11 1670.04 151.821 BALANCED ANOVA FOR VARIATE NN8 FILE MDO_NN 19/10/14 1:32 :PAGE TN Sau khoang_Nam I javanica: TL nhiem nam VARIATE V006 NN8 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN =========================================================================== CT$ 1278.47 426.157 4.86 0.048 LLAI 119.907 59.9537 0.68 0.543 * RESIDUAL 526.389 87.7315 * TOTAL (CORRECTED) 11 1924.77 174.979 BALANCED ANOVA FOR VARIATE NN10 FILE MDO_NN 19/10/14 1:32 :PAGE TN Sau khoang_Nam I javanica: TL nhiem nam VARIATE V007 NN10 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN =========================================================================== CT$ 902.469 300.823 2.11 0.199 LLAI 117.027 58.5134 0.41 0.683 * RESIDUAL 853.549 142.258 * TOTAL (CORRECTED) 11 1873.05 170.277 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE MDO_NN 19/10/14 1:32 :PAGE TN Sau khoang_Nam I javanica: TL nhiem nam MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS CT1(5) CT2(10) CT3(15) CT4(20) NN2 NN4 NN6 NN8 13.3333 20.0000 26.6667 33.3333 10.3704 24.0741 40.7407 47.7778 15.5556 31.1111 46.6667 53.3333 16.6667 36.6667 48.3333 61.6667 SE(N= 3) 3.30622 2.88675 6.54270 5.40776 5%LSD 6DF 11.4367 9.98573 22.6322 18.7063 CT$ NOS NN10 CT1(5) 40.0000 CT2(10) 51.4815 CT3(15) 57.7778 156 CT4(20) 63.3333 SE(N= 3) 6.88618 5%LSD 6DF 23.8204 MEANS FOR EFFECT LLAI LLAI NOS NN2 NN4 NN6 NN8 15.8333 28.3333 41.6667 45.8333 16.5278 23.0556 38.4722 47.9167 9.58333 32.5000 41.6667 53.3333 SE(N= 4) 2.86327 2.50000 5.66614 4.68325 5%LSD 6DF 9.90450 8.64790 19.6001 16.2001 LLAI NOS NN10 48.7500 55.6944 55.0000 SE(N= 4) 5.96360 5%LSD 6DF 20.6291 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE MDO_NN 19/10/14 1:32 :PAGE TN Sau khoang_Nam I javanica: TL nhiem nam F-PROBABLIITL VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ |LLAI | (N= 12) SD/MEAN | | | NO BASED ON BASED ON % | | | OBS TOTAL SS RESID SS | | | NN2 12 13.981 5.9025 5.7265 14.0 0.5844 0.2464 NN4 12 27.963 8.6435 5.0000 17.9 0.0260 0.0943 NN6 12 40.602 12.322 11.332 18.9 0.1810 0.9006 NN8 12 49.028 13.228 9.3665 19.1 0.0484 0.5433 NN10 12 53.148 13.049 11.927 12.4 0.1994 0.6831 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE MDO_SK 19/10/14 0: :PAGE TN Mat Sau khoang_Nam I javanica: Ty le che F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ |LLAI | (N= 12) SD/MEAN | | | NO BASED ON BASED ON % | | | OBS TOTAL SS RESID SS | | | TLC.2 12 26.574 5.6648 3.9447 14.8 0.0717 0.1708 TLC.4 12 39.722 12.867 5.2997 13.3 0.0022 0.8017 TLC.6 12 51.431 15.498 7.8291 15.2 0.0069 0.5465 TLC.8 12 58.325 13.402 6.9244 11.9 0.0086 0.3148 TLC.10 12 62.295 14.337 11.209 16.0 0.0876 0.5455 157 * Thời gian phát triển nấm sâu khoang SINGLE EFFECT ANOVA FOR UNBALANCED DATA FILE BD1487 9/ 5/141:12 :PAGE vong doi mat 1487 ANOVA FOR SINGLE EFFECT - CT$ -VARIATE TREATMENT MS - DF RESIDUAL MS - DF F-RATIO F-PROB CHET 0.15961 0.38646 0.41 0.852 MOC 0.84278 0.59146 0.14 0.984 HTBT 0.63628 0.16396 3.88 0.041 BPCT 0.32378 0.86667 0.37 0.877 NPT 0.16389 0.26375 0.62 0.711 TTG 2.4676 3.2915 0.75 0.628 NÐBT 1.0722 0.14583 7.35 0.007 ANOVA FOR SINGLE EFFECT - SLÐT -VARIATE TREATMENT MS - DF RESIDUAL MS - DF F-RATIO F-PROB CHET 0.32467 0.28333 12 1.15 0.352 MOC 0.78867 0.30500 12 2.59 0.115 HTBT 0.60667 0.41733 12 0.15 0.866 BPCT 0.54600 0.64867 12 0.84 0.458 NPT 0.39267 0.19233 12 2.04 0.171 TTG 3.0587 2.9183 12 1.05 0.382 NÐBT 0.24556E-11 0.63333 12 0.00 1.000 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BD1487 9/ 5/14 1:12 :PAGE vong doi mat 1487 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS CHET MOC HTBT BPCT CT 2.15000 2.35500 3.31000 2.40000 CT 2.39330 2.10000 3.30833 2.13667 CT 3 3.10000 2.50667 3.49000 2.33333 CT 3.20000 2.41000 3.13000 2.80000 SE(N= 2) 0.439578 0.543810 0.286320 0.658281 5%LSD 8DF 1.10342 1.01331 0.533660 0.314659 CT$ CT CT CT CT NOS NPT 2.95000 3.60000 3.40000 3.42000 TTG NÐBT 12.3500 8.50000 12.4533 8.00000 14.8300 8.00000 14.3000 6.66667 SE(N= 3) 0.363146 1.28286 0.270031 5%LSD 8DF 1.01418 5.03327 0.880542 MEANS FOR EFFECT SLÐT SLÐT NOS CHET MOC HTBT BPCT 158 4 2.20000 2.60000 2.56000 2.78000 2.66000 3.36000 2.78000 2.72000 2.62000 2.78000 2.68000 3.32000 SE(N= 5) 0.238048 0.246982 0.288906 0.360185 5%LSD 12DF 0.733506 0.761035 0.890218 1.10985 SLÐT NOS NPT TTG NÐBT 3.38000 13.5200 7.60000 3.08000 14.6000 7.60000 3.64000 15.0400 7.60000 SE(N= 4) 0.196129 0.763981 0.355903 5%LSD 12DF 0.604341 2.35408 1.09666 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BD1487 9/ 5/141:12 :PAGE vong doi mat 1487 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ |SLÐT | SD/MEAN | | | NO BASED ON BASED ON % | | | OBS TOTAL SS RESID SS | | | CHET 15 2.4933 0.53781 0.53229 14.5 0.8516 0.3515 MOC 15 2.9133 0.61163 0.55227 10.4 0.9844 0.1152 HTBT 15 2.6733 0.60529 0.64601 10.2.2 0.041 0.8663 BPCT 15 2.9400 0.79624 0.80540 10.1 0.8767 0.4579 NPT 15 3.3667 0.47006 0.43856 10.8 0.7113 0.1713 5.2 Thí nghiệm ảnh hƣởng tuổi sâu khoang đến khả gây bệnh nấm I javanica VN1487 * Tỷ lệ sâu khoang chết: BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLC.2 FILE TUOI_TLC 19/10/14 9:31 :PAGE TN Tuoi sau khoang_Nam I javanica: Ty le che VARIATE V003 TLC.2 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN =========================================================================== CT$ 1647.26 329.451 8.42 0.003 LLAI 92.7297 46.3649 1.19 0.346 * RESIDUAL 10 391.221 39.1221 * TOTAL (CORRECTED) 17 2131.21 125.365 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLC.4 FILE TUOI_TLC 19/10/14 9:31 :PAGE TN Tuoi sau khoang_Nam I javanica: Ty le che 159 VARIATE V004 TLC.4 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN =========================================================================== CT$ 4088.89 817.778 9.86 0.001 LLAI 459.259 229.630 2.77 0.109 * RESIDUAL 10 829.630 82.9630 * TOTAL (CORRECTED) 17 5377.78 316.340 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLC.6 FILE TUOI_TLC 19/10/14 9:31 :PAGE TN Tuoi sau khoang_Nam I javanica: Ty le che VARIATE V005 TLC.6 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN =========================================================================== CT$ 5674.58 1134.92 13.78 0.000 LLAI 792.927 396.463 4.81 0.034 * RESIDUAL 10 823.894 82.3894 * TOTAL (CORRECTED) 17 7291.40 428.906 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLC.8 FILE TUOI_TLC 19/10/14 9:31 :PAGE TN Tuoi sau khoang_Nam I javanica: Ty le che VARIATE V006 TLC.8 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN =========================================================================== == CT$ 6789.38 1357.88 22.87 0.000 LLAI 243.888 121.944 2.05 0.178 * RESIDUAL 10 593.826 59.3826 * TOTAL (CORRECTED) 17 7627.10 448.653 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLC.10 FILE TUOI_TLC 19/10/14 9:31 :PAGE TN Tuoi sau khoang_Nam I javanica: Ty le che VARIATE V007 TLC.10 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN =========================================================================== == CT$ 7463.54 1492.71 14.87 0.000 LLAI 180.842 90.4212 0.90 0.439 160 * RESIDUAL 10 1003.59 100.359 * TOTAL (CORRECTED) 17 8647.97 508.704 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TUOI_TLC 19/10/14 9:31 :PAGE TN Tuoi sau khoang_Nam I javanica: Ty le che MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS TLC.2 TLC.4 TLC.6 TLC.8 CT1(T1) 42.9630 61.1111 68.0555 78.4392 CT2(T2) 40.0000 55.1852 68.5185 72.6852 CT3(T3) 26.6667 41.1111 55.1852 60.7407 CT4(T4) 30.7407 34.0741 49.6296 53.3333 CT5(T5) 20.3704 24.0741 27.7778 31.1111 CT6(T6) 16.6667 20.0000 23.3333 26.6667 SE(N= 3) 3.61119 5.25874 5.24053 4.44907 5%LSD 10DF 11.3790 16.5705 16.5131 14.0192 CT$ NOS TLC.10 CT1(T1) 82.1429 CT2(T2) 76.3889 CT3(T3) 64.0741 CT4(T4) 55.5556 CT5(T5) 34.4444 CT6(T6) 26.6667 SE(N= 3) 5.78387 5%LSD 10DF 18.2252 MEANS FOR EFFECT LLAI LLAI NOS TLC.2 TLC.4 TLC.6 TLC.8 26.8519 45.9259 57.8704 58.9815 32.4074 38.1481 46.1111 51.8981 29.4444 33.7037 42.2685 50.6085 SE(N= 6) 2.55350 3.71849 3.70561 3.14596 5%LSD 10DF 8.04616 11.7171 11.6765 9.91305 LLAI 6 NOS TLC.10 59.8611 57.5000 52.2751 SE(N= 6) 4.08981 5%LSD 10DF 12.8872 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TUOI_TLC 19/10/14 9:31 :PAGE TN Tuoi sau khoang_Nam I javanica: Ty le che F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ |LLAI | 161 (N= 18) SD/MEAN | | | NO BASED ON BASED ON % | | | OBS TOTAL SS RESID SS | | | TLC.2 18 29.568 11.197 6.2548 12.2 0.0026 0.3462 TLC.4 18 39.259 17.786 9.1084 11.2 0.0014 0.1094 TLC.6 18 48.750 20.710 9.0769 9.6 0.0004 0.0341 TLC.8 18 53.829 21.181 7.7060 14.3 0.0001 0.1780 TLC.10 18 56.545 22.554 10.018 11.7 0.0003 0.4393 * Tỷ lệ sâu khoang mọc nấm BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLNN2 FILE TUOI_NN 19/10/14 9:42 :PAGE TN Tuoi sau khoang_Nam I javanica: TL nhiem nam VARIATE V003 TLNN2 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN =========================================================================== CT$ 2474.85 494.969 7.71 0.004 LLAI 4.01235 2.00618 0.03 0.970 * RESIDUAL 10 642.284 64.2284 * TOTAL (CORRECTED) 17 3121.14 183.597 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLNN.4 FILE TUOI_NN 19/10/14 9:42 :PAGE TN Tuoi sau khoang_Nam I javanica: TL nhiem nam VARIATE V004 TLNN.4 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN =========================================================================== CT$ 4388.10 877.620 11.32 0.001 LLAI 71.9222 35.9611 0.46 0.646 * RESIDUAL 10 775.095 77.5095 * TOTAL (CORRECTED) 17 5235.12 307.948 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLNN6 FILE TUOI_NN 19/10/14 9:42 :PAGE TN Tuoi sau khoang_Nam I javanica: TL nhiem nam VARIATE V005 TLNN6 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN =========================================================================== CT$ 3295.16 659.033 11.49 0.001 LLAI 310.262 155.131 2.70 0.114 * RESIDUAL 10 573.585 57.3585 * TOTAL (CORRECTED) 17 4179.01 245.824 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLNN.8 FILE TUOI_NN 19/10/14 9:42 :PAGE 162 TN Tuoi sau khoang_Nam I javanica: TL nhiem nam VARIATE V006 TLNN.8 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN =========================================================================== CT$ 4544.88 908.976 11.49 0.001 LLAI 37.2582 18.6291 0.24 0.796 * RESIDUAL 10 791.347 79.1347 * TOTAL (CORRECTED) 17 5373.48 316.087 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLNN10 FILE TUOI_NN 19/10/14 9:42 :PAGE TN Tuoi sau khoang_Nam I javanica: TL nhiem nam VARIATE V007 TLNN10 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ========================================================================== CT$ 5798.88 1159.78 27.82 0.000 LLAI 65.6496 32.8248 0.79 0.485 * RESIDUAL 10 416.931 41.6931 * TOTAL (CORRECTED) 17 6281.46 369.498 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TUOI_NN 19/10/14 9:42 :PAGE TN Tuoi sau khoang_Nam I javanica: TL nhiem nam MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS TLNN2 TLNN.4 TLNN6 TLNN.8 CT1(T1) 35.5556 49.5370 47.6852 53.1746 CT2(T2) 28.3333 51.0185 49.5370 61.1111 CT3(T3) 13.3333 27.4074 44.4444 53.3333 CT4(T4) 10.0000 20.3704 24.8148 31.8519 CT5(T5) 6.66667 13.7037 20.7407 24.0741 CT6(T6) 3.33333 13.3333 16.6667 20.0000 SE(N= 3) 4.62704 5.08296 4.37259 5.13597 5%LSD 10DF 14.5800 16.0166 13.7782 16.1836 CT$ NOS TLNN10 CT1(T1) 57.9365 CT2(T2) 68.0555 CT3(T3) 60.3704 CT4(T4) 37.0370 CT5(T5) 27.4074 CT6(T6) 20.0000 SE(N= 3) 3.72796 5%LSD 10DF 11.7469 MEANS FOR EFFECT LLAI LLAI NOS TLNN2 TLNN.4 TLNN6 TLNN.8 16.6667 32.0370 39.6296 42.4074 163 6 16.3889 27.5463 29.7685 38.8889 15.5556 28.1019 32.5463 40.4762 SE(N= 6) 3.27181 3.59420 3.09189 3.63168 5%LSD 10DF 10.3096 11.3254 9.74264 11.4436 LLAI NOS TLNN10 42.4537 46.7593 46.1905 SE(N= 6) 2.63607 5%LSD 10DF 8.30634 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TUOI_NN 19/10/14 9:42 :PAGE TN Tuoi sau khoang_Nam I javanica: TL nhiem nam F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ |LLAI | (N= 18) SD/MEAN | | | NO BASED ON BASED ON % | | | OBS TOTAL SS RESID SS | | | TLNN2 18 16.204 13.550 8.0143 9.5 0.0035 0.9699 TLNN.4 18 29.228 17.548 8.8039 10.1 0.0009 0.6458 TLNN6 18 33.981 15.679 7.5735 12.3 0.0008 0.1140 TLNN.8 18 40.591 17.779 8.8958 11.9 0.0008 0.7963 TLNN10 18 45.134 19.222 6.4570 10.3 0.0000 0.4845 * Thời gian phát triển nấm sâu khoang SINGLE EFFECT ANOVA FOR UNBALANCED DATA FILE BD1487 9/ 5/141:42 :PAGE vong doi tuoi 1487 ANOVA FOR SINGLE EFFECT - CT$ -VARIATE TREATMENT MS - DF RESIDUAL MS - DF F-RATIO F-PROB CHET 0.13628 0.77292 1.76 0.224 MOC 0.38983 0.31229 1.25 0.375 HTBT 0.86889 0.58333 14.90 0.001 BPCT 0.33067 0.18167 1.82 0.212 NPT 0.58056 0.20312 0.29 0.927 TTG 0.75072 0.47813 1.57 0.270 NÐBT 1.2222 1.7500 0.70 0.660 ANOVA FOR SINGLE EFFECT - SLÐT -VARIATE TREATMENT MS - DF RESIDUAL MS - DF F-RATIO F-PROB CHET 0.22200 0.82667 12 2.69 0.107 MOC 0.88467 0.25567 12 3.46 0.064 HTBT 0.60000 0.47233 12 0.01 0.988 BPCT 0.60667 0.27633 12 0.22 0.808 NPT 0.18067 0.13433 12 1.34 0.297 TTG 1.2607 0.48400 12 2.60 0.114 NÐBT 0.86667 1.6333 12 0.53 0.606 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BD1487 9/ 5/141:42 :PAGE vong doi tuoi 1487 MEANS FOR EFFECT CT$ 164 CT$ NOS CHET MOC HTBT BPCT CT 2.55000 2.58000 3.19000 2.61000 CT 2.37000 3.03333 2.43000 2.35667 CT 3 2.53333 3.40000 2.14000 2.72000 CT 2.20333 2.66667 3.13333 2.46667 CT 2.33000 2.83000 2.90000 3.50000 CT 2.91000 3.17000 3.72000 2.24000 SE(N= 2) 0.196585 0.395153 0.170782 0.301386 5%LSD 8DF 0.641045 1.28855 0.556904 0.982788 CT$ NOS NPT TTG CT 1.15000 12.9500 CT 2.26667 13.1367 CT 3 2.43333 13.1667 CT 3.13333 13.7333 CT 3.01000 14.2800 CT 3.58000 15.2900 SE(N= 3) 0.318689 0.488940 5%LSD 8DF 1.03921 1.59438 MEANS FOR EFFECT SLÐT SLÐT NOS CHET MOC HTBT BPCT 2.24000 2.52000 2.78000 2.82000 2.66000 3.36000 2.78000 2.72000 2.42000 2.98000 2.84000 2.60000 SE(N= 5) 0.128582 0.226127 0.307354 0.235089 5%LSD 12DF 0.396205 0.696774 0.947063 0.724388 SLÐT NOS NPT TTG NÐBT 3.26000 13.6200 6.80000 3.08000 14.6000 6.00000 3.46000 14.3000 6.20000 SE(N= 5) 0.163911 0.311127 0.571548 5%LSD 12DF 0.505064 0.958688 1.76113 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BD1487 9/ 5/141:42 :PAGE vong doi tuoi 1487 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ |SLÐT | (N= 15) SD/MEAN | | | NO BASED ON BASED ON % | | | OBS TOTAL SS RESID SS | | | CHET 15 2.4400 0.32027 0.28752 11.8 0.2238 0.1074 MOC 15 2.9533 0.58781 0.50563 7.1 0.3750 0.0642 HTBT 15 2.8000 0.63696 0.68727 14.5 0.0008 0.9883 BPCT 15 2.7133 0.49550 0.52567 11.2 0.2118 0.8077 NPT 15 3.2667 0.37544 0.36652 4.9 0.9273 0.2974 TTG 15 14.173 0.77133 0.69570 10.2.9 0.2704 0.1137 165 [...]... chế phẩm sinh học từ nấm ký sinh côn trùng trong bảo vệ thực vật 1.3 PHẠM VI NGHIÊN CỨU - Điều tra xác định về thành phần loài nấm thuộc chi Isaria và vật chủ của chúng đƣợc thu thập tại VQG Pù Mát, Nghệ An - Đi sâu nghiên cứu đặc điểm sinh học, sinh thái của loài nấm Isaria javanica đƣợc thu thập tại VQG Pù Mát, Nghệ An - Nghiên cứu khả năng gây bệnh của nấm I javanica VN1487 trên sâu khoang 3 1.4...trừ sâu khoang - Nghiên cứu ảnh hƣởng nấm, vật chủ, nhiệt độ, độ ẩm đến khả năng gây bệnh nấm Isaria javanica VN1487 trên sâu khoang ở phòng thí nghiệm; - Nghiên cứu khả năng gây bệnh của nấm Isaria javanica VN1487 trên sâu khoang ở ô lƣới ngoài đồng ruộng Kết quả chính và kết luận - Kết quả điều tra từ năm 2011 đến 2013 tại Vƣờn Quốc gia Pù Mát, Nghệ An đã thu thập đƣợc 146 mẫu vật của 10 loài nấm. .. bệnh côn trùng Ở Việt Nam, các nghiên cứu về đặc điểm gây bệnh của nấm ký sinh trên côn trùng vật chủ còn ít đƣợc quan tâm, nên hy vọng kết quả nghiên cứu của đề tài sẽ có những đóng góp cho vấn đề này ở Việt Nam 1.2 MỤC TIÊU CỦA ĐỀ TÀI Trên cơ sở nghiên cứu về khả năng gây bệnh của nấm Isaria javanica trên vật chủ sâu khoang trong mối quan hệ với các yếu tố liên quan, từ đó đánh giá, lựa chọn các mẫu... gây bệnh của nấm trên sâu khoang nhƣ thế nào? Mối liên quan giữa nấm và sâu khoang trong với các yếu tố sinh thái ra sao? Các mẫu phân lập I javanica nghiên cứu đƣợc thu thập ở hệ sinh thái rừng của VQG Pù Mát liệu có thích ứng với điều kiện hệ sinh thái nông nghiệp? Đây là những nghiên cứu cơ bản cần thiết để làm cơ sở khoa học cho việc ứng dụng có hiệu quả nấm gây bệnh côn trùng Ở Việt Nam, các nghiên. .. (4) Bào tử hình thành đến nấm bao phủ cơ thể sâu khoang 2,63±0,14 ngày, (5) Nấm bao phủ cơ thể sâu khoang đến bào tử phát tán từ xác chết sâu khoang; Vòng đời phát triển của nấm trên sâu khoang 7,82±0,23 ngày; Chu kỳ phát triển của nấm trên sâu khoang 12,79±0,36 ngày - Đã tuyển chọn đƣợc 4 trong 18 mẫu phân lập của loài nấm Isaria javanica có triển vọng để phòng trừ sâu khoang gồm VN1472, VN1487, VN1801... cho nấm Isaria javanica VN1487 gây bệnh trên sâu khoang gồm nồng độ dung dịch bào tử phun 2,6x107 - 2,6x108 bào tử/ml hoặc thả 4 - 5 sâu nhiễm nấm cùng với 10 sâu khỏe; mật độ sâu khoang 20 sâu/ hộp nhựa (25x15x12 cm), sâu khoang tuổi tuổi 1 - 3, nhiệt độ 25oC và độ ẩm 70 80% RH - Ngoài đồng ruộng, điều kiện thích hợp cho nấm Isaria javanica VN1487 gây bệnh trên sâu khoang là phun dung dịch bào tử nấm. .. vật của 10 loài nấm thuộc chi Isaria, phổ biến là Isaria tenuipes (89 mẫu) và Isaria javanica (18 mẫu) - Chu kỳ phát triển của nấm Isaria javanica VN1487 trên sâu khoang gồm pha gây bệnh và pha hoại sinh với 5 giai đoạn Thời gian mỗi giai đoạn (1) Lây nhiễm nấm đến sâu khoang chết 2,08±0,09 ngày, (2) Sâu khoang chết đến sợi nấm mọc ra ngoài cơ thể 2,92±0,19 ngày, (3) Sợi nấm mọc ra ngoài đến hình thành... phòng trừ sâu hại 2.2.5 Nghiên cứu ứng dụng nấm ký sinh côn trùng để phòng trừ sâu khoang Sâu khoang là đối tƣợng dịch hại nguy hiểm trên nhiều loài cây trồng, nhất là cây lạc ở nhiều nƣớc trên thế giới Các biện pháp phòng trừ sâu khoang bằng thuốc hóa học không đem lại hiệu quả Cho nên, việc nghiên cứu ứng dụng nấm ký sinh côn trùng để phòng trừ sâu khoang là giải pháp triển vọng và đang đƣợc quan tâm... NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI CỦA ĐỀ TÀI - Bổ sung dẫn liệu về thành phần loài nấm thuộc chi Isaria gồm 10 loài và vật chủ của chúng; các đặc điểm sinh học, sinh thái của loài I javanica thu thập tại VQG Pù Mát, Nghệ An - Đã mô tả đƣợc đặc điểm về chu kỳ xâm nhiễm, gây bệnh và phát triển bên ngoài của nấm I javanica trên sâu khoang, gồm 5 giai đoạn chính và mỗi giai đoạn thể hiện những triệu chứng đặc trƣng cho loài... quả bƣớc đầu cho thấy các loài nấm chi Isaria điển hình nhƣ I fumosorosea, I javanica, I fariosa có nhiều triển vọng trong phòng trừ nhiều loài sâu hại cây trồng 2.2.2 Nghiên cứu đặc điểm vòng đời và chu kỳ phát triển của nấm ký sinh trên côn trùng Trong công trình nghiên cứu về sự gây bệnh của nấm ký sinh côn trùng, Charnley (1989) cho rằng, chu kỳ phát triển của nấm gây bệnh trên cơ thể côn trùng gồm